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上海鹿森生物工程有限公司
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抗體特異性都有哪些斷定2020/03/20
抗體的特異性斷定抗體的特異性是指與相應(yīng)抗原或近似抗原物質(zhì)的辨認(rèn)才干。抗體的特異性高,它的辨認(rèn)才干就強(qiáng)。衡量特異性一般以交叉反應(yīng)率來標(biāo)明。交叉反應(yīng)率可用競賽克制試驗(yàn)測(cè)定。以不同濃度抗原和近似抗原別離做競賽克制曲線,核算各自的結(jié)合率,求出各安閑IC50時(shí)的濃度,并按公式核算交叉反應(yīng)率。假如所用抗原濃度IC50濃度為pg/管,而一些近似抗原物質(zhì)的IC50濃度幾乎是無窮大時(shí),標(biāo)明這一抗血清與其他抗原物質(zhì)的交叉反應(yīng)率近似為0,即該血清的特異性較好。拓展延伸:1.抗體的效價(jià)斷定不管是用于確診仍是用于醫(yī)治,制
血清中常見的幾個(gè)問題2020/03/16
保存血清的方法?血清應(yīng)保存在-5°C至-2°C。然而,若存放于4°C時(shí),請(qǐng)勿超過一個(gè)月。若您一次無法用完一瓶,建議將無菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi),再放回冷凍。如何解凍血清才不會(huì)使產(chǎn)品質(zhì)量受損?將血清從冷凍箱取出后,先置于2-8C冰箱使之溶解,然后在室溫下使之全溶。但必須注意的是,溶解過程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。如何避免沉淀物的產(chǎn)生?1、解凍血清時(shí),請(qǐng)按照所建議的逐步解凍法(-20°C至4°C至室溫),若血清解凍時(shí)改變的溫度太大(如-20°C至37°C),實(shí)驗(yàn)顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物。2、解凍血清時(shí)
血清保存的六點(diǎn)注意事項(xiàng)2020/03/13
1.需要長期保存的血清有必要儲(chǔ)存于-20℃-70℃低溫冰箱中。4℃冰箱中保存時(shí)刻切勿超過1個(gè)月。由于血清結(jié)冰時(shí)體積會(huì)增加約10%,因而,血清在凍入低溫冰箱前,有必要預(yù)留一定體積空間,不然易發(fā)作污染或玻璃瓶凍裂。2.一般廠商供給的血清為無菌,無需再過濾除菌。如發(fā)現(xiàn)血清有懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)液內(nèi)一起過濾,切勿直接過濾血清。3.瓶裝血清凍結(jié)需采用逐漸凍結(jié)法:-20℃至-70℃低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天。然后移入室溫,待全部溶解后再分裝。在溶解過程中需不斷悄悄搖晃均勻(小心勿形成氣泡)
酶聯(lián)免疫吸附法2020/03/11
原理:可用于測(cè)定抗體,也可用于檢測(cè)杭原。其基本原理是采用抗原與抗體的特異反響將待測(cè)物與酶連接,然后通過酶與底物發(fā)生顏色反響,用于定量測(cè)定。酶聯(lián)免疫吸附法測(cè)定的對(duì)象可所以抗體也可所以抗原。3種必要的試劑:①固相的抗原或抗體(免疫吸附劑);②酶符號(hào)的抗原或抗體(符號(hào)物);③酶效果的底物(顯色劑)。ELISA進(jìn)程包括:抗原吸附在固相載體上,這個(gè)進(jìn)程稱為包被,加待測(cè)抗體,再加相應(yīng)酶符號(hào)抗體,生成抗原--待測(cè)抗體--酶符號(hào)抗體的復(fù)合物,再與該酶的底物反響生成有色產(chǎn)品。借助分光光度計(jì)的光吸收核算抗體的量。依
常用化學(xué)試劑保存注意事項(xiàng)2020/03/03
化學(xué)試劑在貯存時(shí)常因保管不當(dāng)而蛻變。有些試劑簡單吸濕而潮解或水解;有的簡單跟空氣里的氧氣、二氧化碳或分散在其間的其他氣體發(fā)作反響,還有一些試劑受光照和環(huán)境溫度的影響會(huì)蛻變。一、防蒸發(fā):1.油封2.水封3.臘封二、防潮:1.過氧化鈉應(yīng)該進(jìn)行臘封,防止吸水分解或吸水爆炸。氫氧化鈉易吸水潮解,應(yīng)該進(jìn)行臘封;硫酸鈉易吸水結(jié)狀,倒不出來,以至導(dǎo)致試劑瓶決裂,也應(yīng)緊密臘封。2.碳化鈣、無水硫酸銅、五氧化二磷、硅膠極易吸水蛻變,易被氧化,然后吸水生成偏磷酸,以上各物均應(yīng)寄存在干燥器中。3.濃硫酸雖應(yīng)密閉,防止
研域課堂:胎牛血清入冬的貯存方式2020/01/14
胎牛血清入冬貯存怎么辦?根據(jù)我司的經(jīng)歷分析,胎牛血清由于其產(chǎn)品的特性,在貯存的時(shí)分需求多加留意,過錯(cuò)的操作會(huì)使胎牛血清失掉活性,在實(shí)際應(yīng)用的時(shí)分應(yīng)留意以下幾點(diǎn):1、首先在解凍和貯存的時(shí)分應(yīng)該將血清從冷凍箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室溫下使之全融。2、因此,推薦在-20℃以下貯存血清,并防止重復(fù)凍融。我們建議血清應(yīng)保存在-2O℃。若存放于4℃時(shí),請(qǐng)勿超過一個(gè)月。3、長時(shí)間貯存在2-8℃時(shí),血清中的各種蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)或許聚集而形成沉淀或可見的混濁
試劑盒試驗(yàn)環(huán)境的重要性2020/01/08
1.為推遲光學(xué)部件的老化,應(yīng)避免陽光直射。2.操作環(huán)境溫度應(yīng)在15℃至40℃之間,環(huán)境濕度在15%~85%之間。3.儀器應(yīng)放置在噪音低于40分貝的環(huán)境下。4.操作時(shí)電壓應(yīng)堅(jiān)持穩(wěn)定。5.操作環(huán)境空氣清洗,避免水汽、煙塵。6.堅(jiān)持枯燥、潔凈、水平的作業(yè)臺(tái)面,以及滿足的操作空間。7.儀器應(yīng)放置在無強(qiáng)磁場和煩擾電壓的方位。ELISA試劑盒運(yùn)用留心:1.不相同廠家出產(chǎn)的試劑盒因出產(chǎn)工藝和操作方法略有不相同,有必要依照所用試劑盒嚴(yán)格操作,否則簡略發(fā)生查看效果的不確定性.2.若不相同批號(hào)試劑的不相同組分(A液
制備培養(yǎng)基的基本辦法2019/12/30
1、培養(yǎng)基配方的選定:同一種培養(yǎng)基的配方在不同作品中常會(huì)有某些不同。因而,除所用的是規(guī)范辦法,應(yīng)嚴(yán)格按其規(guī)則進(jìn)行配制外,一般均應(yīng)盡量搜集有關(guān)材料,加以比較核對(duì),再依據(jù)自己的運(yùn)用意圖,加以選用,記載其來歷。2、培養(yǎng)基的制備記載:每次制備培養(yǎng)基均應(yīng)有記載,包含培養(yǎng)基稱號(hào),配方及其來歷,和各種成份的牌號(hào),終pH值、消毒的溫度和時(shí)間制備的日期和制備者等,記載應(yīng)仿制一份,原記載保存?zhèn)洳椋轮朴涊d隨制好的培養(yǎng)基一同寄存、以防發(fā)作混亂。?3、培養(yǎng)基成分的稱?。号囵B(yǎng)基的各種成分有必要稱取并要注意防止紊亂,一次完
常見ELISA試劑盒試驗(yàn)技能要點(diǎn)2019/12/26
1.準(zhǔn)備好所有試驗(yàn)額定所需物品,如試管、吸頭、移液器、離心機(jī)等;2.依據(jù)檢測(cè)標(biāo)本數(shù)量確認(rèn)所需試劑的量;3.按闡明書將所用試劑平衡至室溫,制造所需試劑;4.標(biāo)本制備要規(guī)范,每份標(biāo)本體積要按2-3個(gè)復(fù)孔以上的量制備,盡量分裝做備份。短期內(nèi)無法試驗(yàn)者,留意低溫保存。試驗(yàn)中為了確認(rèn)信號(hào)和背景應(yīng)將捕獲抗體(0.5-4μg/ml)和檢測(cè)抗體(0.25-2μg/ml)在預(yù)試驗(yàn)中進(jìn)行彼此相抗的滴定。同時(shí),應(yīng)包括在適當(dāng)范圍內(nèi)的規(guī)范品的系列稀釋。按試劑闡明書慣例供給的范圍進(jìn)行操作。規(guī)范品的制造:對(duì)于每種細(xì)胞因子應(yīng)仔
細(xì)胞呈現(xiàn)黑點(diǎn)怎么處理?2019/12/23
一旦您在細(xì)胞培育的過程中發(fā)現(xiàn)有黑點(diǎn)生成,首先,要肉眼觀察培育基是否混濁,然后,在鏡下觀察培育細(xì)胞生長的狀態(tài),黑點(diǎn)是否游動(dòng)。假如細(xì)胞被污染,微生物則會(huì)大量繁衍,培育基就會(huì)迅速變黃、變混濁。污染包含細(xì)菌污染、支原體污染等。假如在鏡下觀察細(xì)胞,生長狀態(tài)良好,與黑點(diǎn)呈現(xiàn)前相比。沒有任何變化,那么,黑點(diǎn)的呈現(xiàn)可能與以下幾種狀況有關(guān):1、細(xì)胞生長過老,破碎的細(xì)胞殘骸;2、血清質(zhì)量不好,反復(fù)凍融的成果;3、制造培育基的pH值偏高,不宜細(xì)胞生長;4、制造培育基的水質(zhì)、容器不合格??蓱?yīng)用離心、過濾的方法去除這些黑
聯(lián)碩講堂:血清的一些主要作用2019/12/19
●提供基本營養(yǎng)物質(zhì):氨基酸、維生素、無機(jī)物、脂類物質(zhì)、核酸衍生物等,是細(xì)胞生長必須的物質(zhì)?!裉峁┘に睾透鞣N生長因子:胰島素、腎上腺皮質(zhì)激素(地塞米松)、類固醇激素(雌二醇、睪酮、孕酮)等。生長因子如成纖維細(xì)胞生長因子、表皮生長因子、血小板生長因子等。●提供結(jié)合蛋白:結(jié)合蛋白作用是攜帶重要的低分子量物質(zhì),如白蛋白攜帶維生素、脂肪、以及激素等,轉(zhuǎn)鐵蛋白攜帶鐵。結(jié)合蛋白在細(xì)胞代謝過程中起重要作用?!裉峁┐俳佑|和伸展因子使細(xì)胞貼壁免受機(jī)械損傷?!駥?duì)培養(yǎng)中的細(xì)胞起到某些保護(hù)作用:有一些細(xì)胞,如內(nèi)皮細(xì)胞、骨
ELISA試驗(yàn)操作失敗的主要原因2019/12/16
我們知道,ELISA測(cè)定中影響要素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在查驗(yàn)中除正常反響外,有時(shí)??梢姷揭恍┻^錯(cuò)結(jié)果(即假陽性或假陰性),那么致使試驗(yàn)不成功的主要原因有哪些咧?一:標(biāo)本的影響:溶血標(biāo)本及混有紅細(xì)胞的血清采用ELISA法檢測(cè)易發(fā)生假陽性?;蛟S是溶血血清中含有過氧化酶物質(zhì)(紅細(xì)胞或血紅蛋白中的亞鐵血紅素),在洗刷過程中往往難以*洗脫,它可使H2O2釋放出原生態(tài)氧(O),從而催化底物四甲基聯(lián)苯胺生成可溶性的有色物質(zhì),即顯藍(lán)色,發(fā)生假陽性。所以嚴(yán)峻溶血標(biāo)本禁用。二、標(biāo)本受細(xì)菌污染:因菌體
Elisa試劑盒的使用說明2019/12/09
由于elisa辦法的操作簡單,現(xiàn)在越來越的科研工作者在做試驗(yàn)時(shí)都會(huì)挑選elisa辦法,一些剛觸摸的elisa辦法的朋友們估量對(duì)elisa試劑盒不怎么了解,今日聯(lián)碩來說明elisa試劑盒的使用說明:1.在貯存及孵育過程中防止將試劑暴露在強(qiáng)光中。一切試劑瓶蓋須蓋緊以防止蒸騰和污染,試劑防止遭到微生物的污染,由于蛋白水解酶的干擾將導(dǎo)致出現(xiàn)錯(cuò)誤的成果。2.小心汲取試劑并嚴(yán)格遵守給定的孵育時(shí)間和溫度。請(qǐng)注意在汲取標(biāo)本/規(guī)范品,酶結(jié)合物或底物時(shí),個(gè)孔與后一個(gè)孔加樣之間的時(shí)間距離如果太大,將會(huì)導(dǎo)致不同的“預(yù)孵
聯(lián)碩淺談:血清熱滅活的問題2019/12/02
血清的熱滅活是很多培養(yǎng)者感興趣的話題,價(jià)格不菲的血清中含有諸如生長因子,維生素,氨基酸等珍貴物質(zhì),而將它們置于50℃以上的溫度長達(dá)30分鐘是*沒有必要的。盡管如此,在大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室之中血清的熱滅活還是作為常規(guī)來執(zhí)行,多數(shù)實(shí)驗(yàn)者并沒有考慮熱處理對(duì)血清中的生長因子,氨基酸等成分帶來的負(fù)面影響,在我們的技術(shù)熱線中常被提到的就是否該對(duì)血清進(jìn)行熱滅活,下面我們就對(duì)胎牛血清的熱滅活進(jìn)行一些探討和解釋。熱滅活目的是為了去除血清中補(bǔ)體等對(duì)熱敏感的物質(zhì),但是在胎牛血清中對(duì)補(bǔ)體的滅活則明顯沒有必要。Triglia和L
聯(lián)碩淺談:血清的首要效果以及鑒別方法有哪些?2019/11/25
我們大家都知道血清,指血液凝結(jié)后,在血漿中除掉纖維蛋白原別離出的淡黃色通明液體或指纖維蛋白原已被除掉的血漿。那么,我們提取血清的首要目的有哪些呢?又應(yīng)該來如何鑒別血清呢?聯(lián)碩為您具體解說:血清的首要效果:1、供給基本營養(yǎng)物質(zhì):氨基酸、維生素、無機(jī)物、脂類物質(zhì)、核酸衍生物等,是細(xì)胞成長有必要的物質(zhì)。2、供給激素和各種成長因子:胰島素、腎上腺皮質(zhì)激素(氫化ke的松、地塞米松)、類固醇激素(雌二醇、睪酮、孕酮)等。成長因子如成纖維細(xì)胞成長因子、表皮成長因子、血小板成長因子等。3、供給結(jié)合蛋白:結(jié)合蛋白
胎牛血清的保存和使用2019/11/20
胎牛血清的保存方法:需要長期保存的胎牛血清必須儲(chǔ)存于-20℃-70℃低溫冰箱中。4℃冰箱中保存時(shí)間切勿超過1個(gè)月。切勿將血清在37℃放置太久,否則血清會(huì)變得渾濁,同時(shí)血清中的有效成分會(huì)被破壞,而影響血清質(zhì)量。如果一次無法用完一瓶,可將40~45ml分裝于無菌50ml離心管中。由于血清結(jié)冰時(shí)體積會(huì)增加約10%,因此,血清在凍入低溫冰箱前,必須預(yù)留一定體積空間,否則易發(fā)生污染或玻璃瓶凍裂。胎牛血清的使用方法:1、瓶裝胎牛血清解凍需采用逐步解凍法:-20℃至-70℃低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1
聯(lián)碩淺談:怎么防止血清中發(fā)作沉積?2019/09/20
您不樂意種花,您說,我不愿看見它一點(diǎn)點(diǎn)凋落。是的,為了防止結(jié)束,您防止了全部開始,明顯這不是咱們想看到的結(jié)果。在咱們科研小伙伴血清試驗(yàn)過程中,怎樣防止血清中發(fā)作沉積也是一大問題!上海研域不想讓您錯(cuò)失,特邀和您一起共享怎樣防止血清中發(fā)作沉積。血清,指血液凝固后,在血漿中除掉纖維蛋白分離出的淡黃色通明液體或指纖維蛋白已被除掉的血漿。其主要效果是供給根本營養(yǎng)物質(zhì)、供給激素和各種生長因子、供給結(jié)合蛋白、供給促接觸和擴(kuò)展因子使細(xì)胞貼壁免受機(jī)械損傷、對(duì)培育中的細(xì)胞起到某些維護(hù)效果。如何防止血清中發(fā)作沉積按如
聯(lián)碩詳細(xì)跟你講述細(xì)胞割裂的生理效果2019/09/12
細(xì)胞割裂是指活細(xì)胞增殖其數(shù)量由一個(gè)細(xì)胞分類為兩個(gè)細(xì)胞的過程。割裂前的細(xì)胞稱母細(xì)胞,割裂后形成懂得新細(xì)胞稱子細(xì)胞。一般包含細(xì)胞核割裂和細(xì)胞質(zhì)割裂兩部。細(xì)胞割裂的效果:主要是引發(fā)細(xì)胞割裂誘導(dǎo)芽的形成和促進(jìn)芽的生長。對(duì)組織培養(yǎng)的煙草髓或莖切段,細(xì)胞割裂素可使已不具有割裂才能的髓細(xì)胞從頭割裂。這種現(xiàn)象曾被用于細(xì)胞割裂素的生物測(cè)定。莖切段的分化常受細(xì)胞割裂素及生長素比例的調(diào)理。當(dāng)細(xì)胞割裂素對(duì)生長素的濃度比值高時(shí),可誘導(dǎo)芽的形成;反之則有促進(jìn)生根的趨勢(shì)。如對(duì)按捺的腋芽部分施用細(xì)胞割裂素或在側(cè)芽上涂改必定濃度
區(qū)別真假血清請(qǐng)認(rèn)準(zhǔn)國內(nèi)血清的質(zhì)量規(guī)范目標(biāo)2019/08/29
購買血清,您首要觀察什么?外觀仍是色彩?答案是色彩.對(duì)吧!外觀拿到血清,先觸摸的是血清外觀,關(guān)于短少細(xì)胞培養(yǎng)經(jīng)歷的人來說,外觀的判別尤為重要:色彩:根據(jù)血紅蛋白含量的不同,胎牛血清可表現(xiàn)出黃色或赤色,我國的細(xì)胞培養(yǎng)用血清規(guī)范是不高于20mg/dl,實(shí)際上,血紅蛋白含量的凹凸對(duì)血清并無直接影響,這個(gè)目標(biāo)的意義在于能體現(xiàn)出采血過程的嚴(yán)謹(jǐn)規(guī)范程度,杰出的操作能下降血清的溶血。國產(chǎn)血清的采血點(diǎn)很分散,大多是由屠戶采血后馬上離心收集,所以很少會(huì)有溶血,表現(xiàn)出明亮的蠟黃色,當(dāng)然,國產(chǎn)血清也很少有規(guī)范意義上的
保存血清時(shí)遇突發(fā)問題如何隨機(jī)應(yīng)變?2019/08/26
產(chǎn)品的保存方法與質(zhì)量有著莫大的關(guān)系,有不少老師反映出在保存血清的時(shí)候會(huì)遇見“什么溫度zui合適”“怎樣避免沉淀物出現(xiàn)”等等問題。而實(shí)驗(yàn)新手們?cè)诒4嫜鍟r(shí)也難免會(huì)遇見一些突發(fā)問題,那么我們要如何隨機(jī)應(yīng)變呢?1.問:保存血清的方法是怎樣的呢?答:我們建議血清應(yīng)保存在-5℃至-2O℃。然而,若存放于4℃時(shí),請(qǐng)勿超過一個(gè)月。若您一次無法用完一瓶,建議您無菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi),再放回冷凍。2.問:如何解凍血清才不會(huì)使產(chǎn)品品質(zhì)受損?答:我們建議您將血清從冷凍箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后
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