實(shí)驗(yàn)原理：

本試劑盒采用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中貓白細(xì)胞介素-2的水平。用純化的貓白細(xì)胞介素-2抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入貓白細(xì)胞介素-2，再與貓白細(xì)胞介素-2抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的貓白細(xì)胞介素-2呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中貓白細(xì)胞介素-2濃度。

前沿簡(jiǎn)介：

白細(xì)胞介素-2（IL-2）是屬于白介素家族，在免疫應(yīng)答過程中起著關(guān)鍵作用，通常是T淋巴細(xì)胞受到抗原刺激時(shí)產(chǎn)生的。IL-2與其受體IL-2R的反應(yīng)能夠刺激抗原T細(xì)胞的生長(zhǎng)、變異和存活，此外IL-2在免疫調(diào)節(jié)細(xì)胞的發(fā)育和存活、誘導(dǎo)細(xì)胞死亡過程中起著重要作用。

名稱：貓白細(xì)胞介素-2（IL-2）  （Feline IL-2 ELISA Kit） ELISA 試劑盒
樣品用途：此試劑盒只用于貓白細(xì)胞介素-2的檢測(cè)
樣品類型：血漿、血清、細(xì)胞培養(yǎng)上清液
靈敏度：7.5pg/mL  
檢測(cè)范圍：156.25-10000 pg/ml 
分析時(shí)間：4h
規(guī)格：96T
試劑盒保存溫度：2-8℃

實(shí)驗(yàn)操作步驟：
實(shí)驗(yàn)開始前，各試劑均應(yīng)平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試 劑或樣品稀釋時(shí)，均需混勻，混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量，如樣品濃度過高時(shí)，應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍，計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1. 加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔?？瞻卓准訕悠废♂屢?/span> 100μl，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加 檢測(cè)溶液A工作液 100μl（在使用前一小時(shí)內(nèi)配制），酶標(biāo)板加上覆膜，37℃反應(yīng)60分鐘。
3. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板 3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。
4. 每孔加檢測(cè)溶液B工作液（同檢測(cè)A工作液） 100μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。
6. 依序每孔加底物溶液90μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。
7. 依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)，此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度（OD值）。 在加終止液后立即進(jìn)行檢測(cè)。