BY-1248 Y3-Ag 1.2.3大鼠骨髓瘤細(xì)胞系
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- 公司名稱 上海乾思生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號 BY-1248
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時(shí)間 2025/7/23 15:42:06
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細(xì)胞株和菌株、胎牛血清、標(biāo)準(zhǔn)品和對照品、生化試劑、ELISA試劑盒、抗體和抗原、細(xì)胞因子、技術(shù)服務(wù)、實(shí)驗(yàn)耗材和消耗品、儀器設(shè)備。
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Y3-Ag 1.2.3大鼠骨髓瘤細(xì)胞系
Y3-Ag 1.2.3大鼠骨髓瘤細(xì)胞系作為大鼠 B 淋巴細(xì)胞起源的惡性漿細(xì)胞模型，因具有次黃piao呤 - 鳥piao呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶（HGPRT）缺陷型表型且無內(nèi)源性抗體分泌能力，在單克隆抗體制備、免疫調(diào)控機(jī)制及漿細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化研究中具有核心價(jià)值，成為雜交瘤技術(shù)中的關(guān)鍵實(shí)驗(yàn)工具。
細(xì)胞特性與來源背景：該細(xì)胞系源自大鼠自發(fā)性骨髓瘤，經(jīng)克隆化篩選獲得。細(xì)胞形態(tài)呈圓形或橢圓形，直徑約 12-18μm，胞體飽滿，胞質(zhì)豐富且呈嗜堿性，細(xì)胞核呈圓形居中，核染色質(zhì)致密，可見 1-2 個(gè)核仁。生長方式為懸浮生長，呈單個(gè)或小簇狀分布，無貼壁特性，傳代后 48 小時(shí)存活率達(dá) 92%。核心參數(shù)表現(xiàn)出骨髓瘤細(xì)胞特征：倍增時(shí)間約 24 小時(shí)，連續(xù)傳代 60 次后仍保持穩(wěn)定的增殖能力；染色體核型為亞二倍體（染色體數(shù) 38-40 條），存在明顯的染色體易位現(xiàn)象；免疫表型du特，表達(dá) B 細(xì)胞標(biāo)志物 CD19（陽性率 91%）、CD20（陽性率 88%），不表達(dá)膜表面免疫球蛋白（sIg-）；HGPRT 活性缺失，在 HAT 選擇培養(yǎng)基中無法存活，這一特性使其成為理想的雜交瘤融合伴侶；無支原體、病毒污染，細(xì)胞純度達(dá) 98%，保障實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性。
科研應(yīng)用價(jià)值：在單克隆抗體制備領(lǐng)域，Y3-Ag 1.2.3 細(xì)胞是雜交瘤技術(shù)的核心工具。將其與免疫后的大鼠脾細(xì)胞融合，融合率可達(dá) 3.2×10??，雜交瘤細(xì)胞在 HAT 培養(yǎng)基中存活率達(dá) 85%，且能穩(wěn)定分泌特異性抗體。例如，在抗大鼠 IL-6 單克隆抗體制備中，該細(xì)胞融合獲得的雜交瘤克隆陽性率達(dá) 28%，抗體效價(jià)可達(dá) 1:10?，為獲得高特異性單克隆抗體提供可靠保障。
免疫調(diào)控研究方面，該細(xì)胞在脂多糖（LPS）刺激下，腫瘤壞死因子 -α（TNF-α）分泌量增加 3.8 倍，白細(xì)胞介素 - 6（IL-6）釋放量上升 4.2 倍，可模擬活化漿細(xì)胞的細(xì)胞因子分泌特征，用于探究 B 細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化過程中的免疫功能異常。在藥物篩選中，該細(xì)胞對蛋白酶體抑制劑反應(yīng)敏感，經(jīng)硼ti佐米處理后，24 小時(shí)凋亡率達(dá) 52%， caspase-3 活性增強(qiáng) 6.5 倍，適用于多發(fā)性骨髓瘤治療藥物的活性評估。
此外，通過構(gòu)建 Y3-Ag 1.2.3 細(xì)胞與骨髓基質(zhì)細(xì)胞的共培養(yǎng)體系，可模擬骨髓瘤骨髓微環(huán)境，研究細(xì)胞黏附介導(dǎo)的藥物耐藥機(jī)制，為克服骨髓瘤治療抵抗提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
培養(yǎng)與保存規(guī)范：推薦使用含 15% 胎牛血清的 RPMI-1640 培養(yǎng)基，添加 2mM 谷an酰胺、1mM 丙酮酸鈉及 1% 抗生素混合液，培養(yǎng)環(huán)境為 37℃、5% CO?飽和濕度培養(yǎng)箱。培養(yǎng)基需每 1-2 天更換一次，維持細(xì)胞密度在 2×10?-1×10?個(gè) /ml，避免密度過高導(dǎo)致營養(yǎng)耗竭。
傳代時(shí)采用直接稀釋法，將細(xì)胞懸液按 1:3-1:5 比例接種至新鮮培養(yǎng)基，無需消化處理，每 2-3 天傳代一次。進(jìn)行雜交瘤融合前，需將細(xì)胞傳代至對數(shù)生長期，確保活細(xì)胞率≥95%。
凍存液采用 90% 胎牛血清 + 10% DMSO 的混合液，細(xì)胞濃度調(diào)整為 5×10?個(gè) /ml，經(jīng)程序降溫（-1℃/min）至 - 80℃，24 小時(shí)后轉(zhuǎn)入液氮保存，復(fù)蘇存活率達(dá) 85% 以上，3 代內(nèi)可恢復(fù)正常增殖活性。運(yùn)輸采用液氮凍存運(yùn)輸或恒溫培養(yǎng)箱活細(xì)胞運(yùn)輸，收到細(xì)胞后需立即離心換液，鏡檢確認(rèn)無異常聚集后方可培養(yǎng)。該細(xì)胞系僅限科研使用，操作需符合生物安全二級防護(hù)要求。
Y3-Ag 1.2.3 大鼠骨髓瘤細(xì)胞系以其du特的 HGPRT 缺陷表型、高效的雜交融合能力及穩(wěn)定的生物學(xué)特性，在單克隆抗體技術(shù)和免疫腫瘤學(xué)研究中占據(jù)不可替代的地位，為抗體藥物研發(fā)和漿細(xì)胞疾病機(jī)制研究提供了可靠的細(xì)胞模型。
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