植物原花青素（Oligomeric Proantho Cyanidins, OPC）

試劑盒說(shuō)明書(shū)

可見(jiàn)分光光度法

注意：正式測(cè)定之前選擇 2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。

測(cè)定意義

原花色素（Oligomeric Proantho Cyanidins，OPC）是一類(lèi)黃烷醇單體及其聚合體的多酚化合物，廣泛存在于植物的各種器官中，具有*的抗氧化性和清除自由基的作用，廣泛的應(yīng)用于醫(yī)藥，食品，化妝品，保健品行業(yè)。

測(cè)定原理

在酸性條件下，植物原花青素A環(huán)上的間苯二酚和與香草醛發(fā)生縮合反應(yīng)，產(chǎn)生有色化合物，在500nm處有特征吸收峰，測(cè)定500nm光吸收值，可計(jì)算植物中原花青素的含量。

自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器

天平、常溫離心機(jī)、可見(jiàn)分光光度計(jì)、1 mL玻璃比色皿、蒸餾水、8%鹽酸和60%乙醇。

試劑組成和配制

提取液：60% 乙醇，自備，4℃保存。

試劑一：8% 鹽酸 20mL，自備，4℃保存。

試劑二：粉劑 0.2g×1 瓶，4℃避光保存，臨用前加 20mL 雙蒸水溶解。

工作液：臨用前按照用量將試劑一和試劑二按照 1:1 混合。

OPC 提取

將樣本烘干至恒重，粉碎，過(guò)40目篩之后，稱(chēng)取約0.1g，加入2.5mL提取液，用超聲提取法進(jìn)行提取，超聲功率300W，破碎5s，間歇8s，提取30min， 12000rpm，25℃，離心 10min，取上清，用提取液定容至 2.5mL，待測(cè)。

測(cè)定操作表

OPC 計(jì)算公式

標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)：y=0.0194x+0.0006，R² =0.999

OPC 含量（mg /g）=（A₅₀₀-0.0006）÷0.0184×V 反總÷(V 樣÷V 樣總×W)×10^-3

= 0.644×(A 500 -0.0006 ) ÷ W

V 樣總：加入提取液體積，2.5mL；V 反總：反應(yīng)總體積，1mL；V 樣：反應(yīng)中樣品體積，

0.2mL；W：樣品質(zhì)量，g

注意事項(xiàng)

1、配制好的試劑二應(yīng)盡快使用，4℃保存時(shí)間不超過(guò)一個(gè)月。

2、吸光度變化應(yīng)該控制在0.05~0.8之間。否則加大樣品量或稀釋樣品，注意計(jì)算公式中參

與計(jì)算的稀釋倍數(shù)要相應(yīng)改變。

3、低檢出限為30μg/g。