果膠含量試劑盒說明書

可見分光光度法

正式測定前取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定

測定意義：

果膠是一種植物膠體，分布于果蔬類植物中，存在于植物的細(xì)胞壁和細(xì)胞內(nèi)層。果膠中含有半乳糖醛酸、乳糖、阿拉伯糖、葡萄糖醛酸等，主要成分是半乳糖醛酸，其*的物理、化

學(xué)性質(zhì)影響著植物源食品的口感和品質(zhì)。

測定原理：

采用咔唑比色法測定果膠含量。果膠水解成半乳糖醛酸，在硫酸溶液中與咔唑試劑進(jìn)行縮合反應(yīng)，生成紫紅色化合物，在530 nm處有大吸收峰。測定樣品中半乳糖醛酸的含量，即可確定果膠的含量。

需自備的儀器和用品：

可見分光光度計(jì)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、濃硫酸（不允許快遞）、研缽和蒸餾水。

試劑的組成和配制：

試劑一：標(biāo)準(zhǔn)液1mL×1支，4℃保存。

試劑二：液體5mL×1瓶，4℃保存；

樣品的前處理：

按照樣品質(zhì)量(g)和蒸餾水體積(mL)為 1:5~10 的比列（建議取約 0.1g 樣品，加入1mL蒸餾水），充分勻漿。8000g 4℃離心 10min，取上清液待測。

測定步驟：

1、分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長至530nm處，蒸餾水調(diào)零；試劑一和試劑二37℃預(yù)熱 10min以上；

2、操作表：

混勻 95℃水浴 5min 后，530nm 處讀取吸光值，空白管、標(biāo)準(zhǔn)管、對(duì)照管和測定管吸光值分別記為 A1、A2、A3 和 A4。若A大于1，需將待測樣本用蒸餾水稀釋（可稀釋10倍或20倍）?？瞻坠芎蜆?biāo)準(zhǔn)管只要做一管，每個(gè)測定管需設(shè)一個(gè)對(duì)照管。

果膠含量計(jì)算：

1、果膠含量(mg/mg prot)=(C 標(biāo)準(zhǔn)×V1)×(A4-A3)÷(A2-A1)÷(V1×Cpr) ×稀釋倍數(shù)

=0.05×(A4-A3)÷(A2-A1)÷Cpr×稀釋倍數(shù)。

2、果膠含量(mg /g 鮮重)= (C 標(biāo)準(zhǔn)×V1) ×(A4-A3)÷(A2-A1)÷(W×V1÷V2) ×稀釋倍數(shù)

=0.05×(A4-A3)÷(A2-A1)÷W×稀釋倍數(shù)

C 標(biāo)準(zhǔn)：標(biāo)準(zhǔn)管濃度，0.05mg/mL；V1：加入樣本體積，0.1mL；V2：加入提取液體積，1mL；

Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；W：樣本鮮重，g。

注意：低檢測限為 50μg/g 鮮重或 0.5μg/mg prot