氧化型/脫氫抗壞血酸（DHA）含量測試盒

微量法 100T/96S 

注意：正式測定之前選擇 2-3 個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定。 

測定意義： 

AsA 作為植物細(xì)胞一個重要生理指標(biāo)，其 AsA 的含量、氧化還原狀態(tài)(AsA/DHA 比率)及其合成與代謝相關(guān)酶類活性的變化涉及植物對一系列環(huán)境脅迫的響應(yīng)。DHA 是 AsA 的可逆的氧化型，在生物體內(nèi)，與抗壞血酸共同組成氧化還原系統(tǒng)，具有電子受體的作用。 

測定原理： 

DTT 還原 DHA 生成 AsA，通過測定體系中 AsA 的生成速率，即可計(jì)算出 DHA 含量。 

自備儀器和用品： 

低溫離心機(jī)、紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96 孔板（UV 板）、可調(diào)式移液器、研缽、冰和蒸餾水。 

試劑組成和配制： 

試劑一：液體 100 mL×1 瓶，室溫保存。 

試劑二：液體 16mL×1 瓶，室溫保存。 

試劑三：粉劑×1 瓶，4℃保存。臨用前加入 5mL 蒸餾水充分溶解。標(biāo)準(zhǔn)品：粉劑×1 瓶， 4℃保存。臨用前加入 5.743 mL 蒸餾水充分溶解；吸取 0.1 mL 上述溶液，加入 0.9 mL 蒸餾水，混勻，即為 100μmol/L DHA。 

樣品中 DHA 提?。?nbsp;

1. 組織：按照組織質(zhì)量（g）：試劑一體積(mL)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g 組織，加入 1mL 試劑一）進(jìn)行冰浴勻漿。12000g，4℃離心 20min，取上清置冰上待測。

2. 細(xì)菌、真菌：按照細(xì)胞數(shù)量（104個）：試劑一體積（mL）為 500~1000：1 的比例（建議500 萬細(xì)胞加入 1mL 試劑一），冰浴超聲波破碎細(xì)胞（功率 300w，超聲 3 秒，間隔 7 秒，總時間 3min）；12000g，4℃離心 10min，取上清液置于冰上待測。

3. 血清等液體：直接測定。氧化型/脫氫抗壞血酸（DHA）含量測試盒