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培養(yǎng)干細胞的凍存2017/8/1
干細胞低溫凍存是培養(yǎng)室常規(guī)工作和通用技術。細胞凍存在-196℃液氮中,儲存時間幾乎是無限的。細胞凍存及復蘇的原則是慢凍快融。1.凍存細胞(1)選對數(shù)增生期細胞(證明無支原體污染),在凍存前1d換液。(...
細胞計數(shù)與存活的測試實驗方法2017/7/27
腫瘤細胞冷凍與復蘇是細胞培養(yǎng)的常規(guī)工作,可以解決細胞因為連續(xù)繼代造成的退變或轉(zhuǎn)化。細胞的原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)以及細胞凍存和復蘇后都需要細胞計數(shù)。那么細胞計數(shù)與存活的測試實驗方法有哪些呢?1、原理:(1)...
轉(zhuǎn)化細胞培養(yǎng)技術中的準備工作2017/7/25
一、轉(zhuǎn)化細胞準備工作準備工作對開展細胞培養(yǎng)異常重要,推備工作中某一環(huán)節(jié)的疏忽可導致實驗失敗或無法進行。準備工作的內(nèi)容包括器皿的清洗、干燥與消毒,培養(yǎng)基與其他試劑的配制、分裝及滅菌,無菌室或超凈臺的清潔...
體外培養(yǎng)腫瘤細胞生物學檢測2017/7/20
一旦培養(yǎng)的腫瘤細胞生長成形態(tài)上單一的細胞群體或細胞系(或株)后,不論用于實驗研究還是建立細胞系,都需要做一系列的細胞生物學測定,主要的目的在于求得證明:所培養(yǎng)的細胞系的確來源于原體內(nèi)具有惡性的細胞,而...
間質(zhì)干細胞成脂和成骨誘導分化2017/7/18
成骨和成脂誘導是鑒定干細胞的一種重要的方法,也是zui常用、報道見得zui多的方法。成骨zui常用的染色方法是茜素紅染色(堿性磷酸酶),成脂誘導zui常用是OilRedO(油紅O)染色法。下面介紹一下...
轉(zhuǎn)化細胞大規(guī)模培養(yǎng)技術的操作方式2017/7/13
轉(zhuǎn)化細胞深層培養(yǎng)可分為:分批式、流加式、半連續(xù)式、連續(xù)式、連續(xù)式和灌注式五種。一、分批式培養(yǎng)(batchculture)是細胞規(guī)模培養(yǎng)發(fā)展進程中較早期采用的方式,也是其它操作方式的基礎。該方式采用機械...
腫瘤細胞培養(yǎng)方法2017/7/11
腫瘤細胞培養(yǎng)成功關鍵在于:取材、成纖維細胞的排除、選用適宜的培養(yǎng)液和培養(yǎng)底物等幾個方面。在具體培養(yǎng)方法方面,腫瘤細胞培養(yǎng)與正常組織細胞培養(yǎng)并無原則差別,初代培養(yǎng)應用組織塊和消化培養(yǎng)法均可。1、取材:人...
ATCC細胞轉(zhuǎn)染技術介紹2017/7/6
ATCC細胞轉(zhuǎn)染方法不同,對轉(zhuǎn)染結(jié)果影響很大。常見的轉(zhuǎn)染方法有:1.磷酸鈣法:該方法利用磷酸鈣DNA復合物吸附細胞膜被細胞內(nèi)吞原理得到瞬時或穩(wěn)定轉(zhuǎn)染結(jié)果,操作簡便但重復性差,不可用于原代細胞的轉(zhuǎn)染。2...
細胞死亡的檢驗方式2017/7/4
ATCC細胞發(fā)生凋亡時具有固有的形態(tài)特征,如細胞核表現(xiàn)縮小、染色質(zhì)邊緣化、凝集,凋亡晚期還會出現(xiàn)由核碎片與胞質(zhì)內(nèi)的部分細胞器混合在一起,且被細胞膜包裹形成的凋亡小體。DNA特異性染料(如Hoechst...
細胞分裂指數(shù)操作說明書2017/6/29
【實驗用品】材料:貼壁培養(yǎng)的ATCC細胞器材:離心機、顯微鏡、血細胞計數(shù)板試劑:Hanks液、0.25%胰蛋白酶、含10%小牛血清/胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基(根據(jù)實驗需要也可以是其他種類的培養(yǎng)基)【實...
細胞生長曲線的繪制操作步驟2017/6/27
ATCC細胞實驗用品材料:貼壁培養(yǎng)的細胞器材:24孔培養(yǎng)孔板、吸管、膠帽、離心管、培養(yǎng)皿、半對數(shù)坐標紙、蓋玻片、細胞計數(shù)板、酒精棉球、酒精燈、離心機、倒置顯微鏡、普通光學顯微鏡、超凈工作臺、CO2培養(yǎng)...
分析培養(yǎng)腫瘤細胞狀態(tài)欠佳的原因2017/6/22
1、腫瘤細胞培養(yǎng)基的新鮮程度:一般加入血清后的*培養(yǎng)基,2周內(nèi)用完。否則血清有效成分失活,影響細胞培養(yǎng)。建議:*培養(yǎng)基一次不要配太多,200ml以下?;蚋鶕?jù)用量決定。2、細胞外源微生物的污染:細胞不宜...
血管內(nèi)皮細胞特性2017/6/20
1.血管內(nèi)皮細胞重要標志(1)轉(zhuǎn)化細胞第Ⅷ因子關連抗原,可以由全身所有血管內(nèi)皮細胞產(chǎn)生,檢測這一因子主要用相應抗體。VWF有其特異性,人的VWF抗體對牛的內(nèi)皮細胞沒有交叉反應。兔疫熒光間接法測定該因子...
ATCC細胞肉眼觀察檢測方法2017/6/15
ATCC細胞一般常規(guī)檢查用肉眼即可觀察,主要看培養(yǎng)液的顏色和透明度的變化。培養(yǎng)細胞的觀察檢測方法大多數(shù)細胞適于在pH7.2~7.4條件下生長,低于pH6.8或高于pH7.6對細胞有害,甚至造成細胞退化...
細胞常見的轉(zhuǎn)染方法分析2017/6/13
ATCC細胞常見的轉(zhuǎn)染方法有:1.磷酸鈣法:該方法利用磷酸鈣DNA復合物吸附細胞膜被細胞內(nèi)吞原理得到瞬時或穩(wěn)定轉(zhuǎn)染結(jié)果,操作簡便但重復性差,不可用于原代細胞的轉(zhuǎn)染。2.DEAE-右旋糖苷法:帶正電的D...

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