Q：在測(cè)定細(xì)胞周期的時(shí)候,由于固定、消化等處理后會(huì)出現(xiàn)很多細(xì)胞碎片，影響測(cè)量結(jié)果，無(wú)法找到G1期細(xì)胞群。另外，在測(cè)定亞二倍體時(shí)，不是那么很清楚的顯示出來(lái)。

A：方法改進(jìn)：

在測(cè)定細(xì)胞周期的時(shí)候（以BD公司的Calibur為例），除了設(shè)置好獲取數(shù)據(jù)的模版外，另外設(shè)置以FL3為橫坐標(biāo)的直方圖，測(cè)量模式為對(duì)數(shù)（log），調(diào)整放大倍數(shù)，使二倍體峰出現(xiàn)在橫坐標(biāo)10*3的位置，就很容易的找到了二倍體峰和細(xì)胞周期個(gè)時(shí)相細(xì)胞的分布情況。根據(jù)它再調(diào)節(jié)FL2（線性模式下）的放大 倍數(shù)，使二倍體峰在10*2的位置即可。

Q：我要做流式分析細(xì)胞周期，我大概收集了10的6次方細(xì)胞，但細(xì)胞在乙醇固定之后，還看到有細(xì)胞沉淀的，但PBS洗滌兩次之后，就基本沒什么細(xì)胞沉淀了，上機(jī)發(fā)現(xiàn)就發(fā)現(xiàn)不了細(xì)胞了。這是怎么回事??？怎么解決這個(gè)問題啊？

A：很可能是洗細(xì)胞的過程中丟失了，解決辦法有： 

（1）盡量采用尖底的離心管和水平離心機(jī) 

（2）離心后盡量用吸管吸取上清，不要傾倒；吸上清時(shí)殘留1mm左右的水膜，不要吸完。 

（3）離心的轉(zhuǎn)速或時(shí)間可稍微增加一點(diǎn)兒 

（4）每次加試劑時(shí)，吸頭不要接觸液面；混勻時(shí)不要用吸頭吹打，以免吸頭掛壁帶走部分細(xì)胞。