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上海源葉生物科技有限公司
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間接熒光抗體試驗（1FA）檢測豬繁殖與呼吸綜合征2011/06/16
Yoon等（1992）報道用IFA檢測PRRSV抗體的方法，目前在北美應(yīng)用較為廣泛，該方法與IPMA具有相同的特異性和敏感性。用IFA方法能從感染后6天的動物體內(nèi)檢測出PRRS抗體，可用PAM、CL2621及MARC-145培養(yǎng)物進(jìn)行IFA，并以血清抗體效價≥1：20作為陽性判斷的依據(jù)。應(yīng)用IFA檢測東北、華北、華中、華南等10個地區(qū)的10個豬場，豬場陽性率為40％（4／10），而4個陽性豬場的平均陽性率為58．5％（郭寶清等，1996）；張鶴曉等（1996）應(yīng)用IFA檢測北京地區(qū)3個豬場的血清
化學(xué)發(fā)光技術(shù)2011/06/15
放射免疫分析法有很高的靈敏度，但存在著放射性防護(hù)和同位素污染等問題。近年來，許多非放射性同位素標(biāo)記的免疫分析方法相繼出現(xiàn)。其中，在化學(xué)發(fā)光反應(yīng)及抗原-抗體特異性識別基礎(chǔ)上建立起來的一種新的非放射免疫分析技術(shù)--化學(xué)發(fā)光免疫分析法，由于這種方法具有靈敏度高，特異性強(qiáng)，精密度好，線性范圍寬，儀器設(shè)備簡單，試劑價格低廉，方法穩(wěn)定、快速等優(yōu)點，已成為一種重要的非同位素標(biāo)記免疫學(xué)檢測方法。把化學(xué)發(fā)光物質(zhì)與免疫學(xué)反應(yīng)結(jié)合起來，用光反應(yīng)表現(xiàn)被測的免疫成分濃度，即把高靈敏的光反應(yīng)與特異性的免疫學(xué)反應(yīng)相結(jié)合的方法
免疫印跡技術(shù)和免疫斑點技術(shù)2011/06/15
免疫印跡技術(shù)和免疫斑點技術(shù)點擊次數(shù)：264發(fā)布時間：2009-9-30免疫印跡技術(shù)又稱Western印跡法，它將凝膠電泳與固相免疫結(jié)合，首先通過蛋白質(zhì)電泳技術(shù)將需要區(qū)分的蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移至固相載體如NC膜等上，再借助酶免疫、放射免疫等技術(shù)進(jìn)行測定。該法能分離分子大小不同的蛋白質(zhì)并確定其分子質(zhì)量，常用于檢測多種病毒抗體或抗原。免疫斑點試驗（dotimmunobindingassay，DIBA）是利用硝酸纖維素膜（NC膜）或乙酸纖維素膜作為固相支持物，進(jìn)行抗原—抗體反應(yīng)的免疫學(xué)檢測方法。該法具有微量、快速
染色質(zhì)免疫沉淀分析（ChIP）2011/06/15
染色質(zhì)免疫沉淀分析（ChIP）點擊次數(shù)：359發(fā)布時間：2009-9-22ChIP是目前確定與特定蛋白結(jié)合的基因組區(qū)域或確定與特定基因組區(qū)域結(jié)合的蛋白質(zhì)的方法（圖2—8），也可用于分析與轉(zhuǎn)錄、有絲分裂或DNA損傷相關(guān)的發(fā)生改變的組蛋白修飾。ChIP技術(shù)和芯片技術(shù)的結(jié)合有利于確定全基因組范圍內(nèi)染色體蛋白的分布模式以及組蛋白修飾情況。該技術(shù)主要應(yīng)用于：①組蛋白修飾研究；②轉(zhuǎn)錄調(diào)控分析；③藥物開發(fā)研究；④有絲分裂研究；⑤DNA損失與凋亡分析。ChIP是深入分析癌癥、心血管疾病以及中央神經(jīng)系統(tǒng)紊亂等疾病
遺傳統(tǒng)計分析2011/06/15
以等位基因方式表述與疾病易感性相關(guān)的多態(tài)，很少由單個SNP導(dǎo)致，大多是基因內(nèi)幾個SNP的組合即單倍型所引起。如ALOXP的單個SNP與心肌梗死均無相關(guān)性，但這些SNP組合形成的其中一個單倍型與冰島人心肌梗死的高危存在相關(guān)，另一單倍型與英國人心肌梗死相關(guān)。多巴胺D3受體基因3個SNP單獨(dú)與精神分裂癥并不存在顯著的相關(guān)性，但它們所形成的單倍型卻與精神分裂癥顯著性相關(guān)，提示這些SNP存在交互或協(xié)同作用。另一方面，一些單倍型的功能研究也顯示，不同的單倍型對基因的表達(dá)或功能有不同的影響。HCAPl編碼區(qū)5
皮張?zhí)烤页恋矸磻?yīng)操作技術(shù)2011/06/14
皮張?zhí)烤页恋矸磻?yīng)操作技術(shù)點擊次數(shù)：13發(fā)布時間：2011-5-23①器械與藥品準(zhǔn)備a．設(shè)備器材。大型高壓滅菌器，自動揀皮器、半自動揀皮器或手工揀皮器，反應(yīng)管木架與盤，20ml容量瓶與盤，過濾漏斗，各種量杯，各種容瓶，抗原與血清加注器，帶乳頭的毛細(xì)管，中性濾紙（中性石棉），大恒溫箱等。b．藥品與反應(yīng)成分。0．85％生理鹽水。浸皮液：氯化銨0．85g（鹽皮不加氯化鈉）6。0—8．0。苯酚0．3—0．5g，蒸餾水100ml，pH6.0-8.0炭疽菌粉標(biāo)準(zhǔn)抗原、炭疽沉淀素血清、陰性血清，均由獸醫(yī)生物藥品
單克隆抗體在醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用2011/05/30
單克隆抗體在醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用點擊次數(shù)：18發(fā)布時間：2010-12-259:47:50單克隆抗體是由一個產(chǎn)生抗體的細(xì)胞與一個骨髓瘤細(xì)胞融合而形成的雜交瘤細(xì)胞經(jīng)無性繁殖而來的細(xì)胞群所產(chǎn)生的，所以它的免疫球蛋白屬同一類型，質(zhì)地純一，而且它是針對某一抗原決定簇的，因此特異性強(qiáng)，親和性也一致。單克隆抗體在生物學(xué)和醫(yī)學(xué)研究領(lǐng)域中顯示了極大的應(yīng)用價值，是親和層析中重要的配體，是免疫組織化學(xué)中主要的抗體，是免疫檢驗中的新型試劑。作為醫(yī)學(xué)檢驗試劑，單克隆抗體也充分發(fā)揮其優(yōu)勢。由于其特異性強(qiáng)，可將抗原抗體反應(yīng)的特異性
雜交瘤技術(shù)的基本原理2011/05/30
雜交瘤技術(shù)的基本原理點擊次數(shù)：7發(fā)布時間：2010-12-2910:04:28雜交瘤抗體技術(shù)的基本原理是通過融合兩種細(xì)胞而同時保持兩者的主要特征。這兩種細(xì)胞分別是經(jīng)抗原免疫的小鼠B細(xì)胞和小鼠骨髓瘤細(xì)胞。脾淋巴細(xì)胞的主要特征是它的抗體分泌功能和能夠在選擇培養(yǎng)基中生長（選擇原理見后），小鼠骨髓瘤細(xì)胞則可在培養(yǎng)條件下無限分裂、增殖，即所謂永生性。在選擇培養(yǎng)基的作用下，只有B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合的雜交才具有持續(xù)增殖的能力，形成同時具備抗體分泌功能和保持細(xì)胞永生性兩種特征的細(xì)胞克隆。其原理從下列3個主要步
聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR） 檢測肉毒梭菌技術(shù)02011/05/30
是運(yùn)用PCR方法檢測肉毒神經(jīng)毒素基因以鑒定肉毒梭菌，只需2～3天。特別是基層CDC在購買不到試驗動物的情況下，PCR所具有快速、簡便、特異型強(qiáng)的優(yōu)點無疑可作為肉毒中毒的輔助檢測手段和一項有價值的指標(biāo)。P．Fach（1993）報道，應(yīng)用PCR可檢出食品樣品的肉毒梭菌A型菌株。趙晉、郭宗琪、楊小蓉等（2006）報道，應(yīng)用PCR可檢出肉毒食物中毒的病原菌。用1對人工合成的寡核苷酸引物擴(kuò)增A型、B型、C型、D型、E型、F型和G型肉毒神經(jīng)毒素基因的一段264bp的DNA片段，并對兩個食物中毒樣品的增菌產(chǎn)毒
聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR） 檢測肉毒梭菌技術(shù)2011/05/28
聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）檢測肉毒梭菌技術(shù)點擊次數(shù)：1發(fā)布時間：2011-4-2110:48:54是運(yùn)用PCR方法檢測肉毒神經(jīng)毒素基因以鑒定肉毒梭菌，只需2～3天。特別是基層CDC在購買不到試驗動物的情況下，PCR所具有快速、簡便、特異型強(qiáng)的優(yōu)點無疑可作為肉毒中毒的輔助檢測手段和一項有價值的指標(biāo)。P．Fach（1993）報道，應(yīng)用PCR可檢出食品樣品的肉毒梭菌A型菌株。趙晉、郭宗琪、楊小蓉等（2006）報道，應(yīng)用PCR可檢出肉毒食物中毒的病原菌。用1對人工合成的寡核苷酸引物擴(kuò)增A型、B型、C型、D
蠟樣芽孢桿菌食物中毒流行病學(xué)與臨床特征2011/05/28
*起蠟樣芽孢桿菌食物中毒早在1906年就有報告（Lubenau）。但直至1950年才明確其病因，之后許多國家，特別是j匕歐、東歐國家也報告了類似的中毒癥。1960～1968年間在匈牙利細(xì)菌性食物中毒中，蠟樣芽孢桿菌為第三個zui常見的致病菌，該菌所致食物中毒為已報告食物中毒起數(shù)的84％，中毒人數(shù)占總中毒人數(shù)的14．8％。1971年以來，英國報告過多起該菌食物中毒。我國南京市衛(wèi)生防疫站于1973年報告了南京某托兒所兒童因進(jìn)食泡飯引起嘔吐型蠟樣芽孢桿菌食物中毒?，F(xiàn)今除西藏外，各省、市已相繼報告該菌食
蠟樣芽孢桿菌食物中毒的檢查方法2011/05/28
蠟樣芽孢桿菌食物中毒的檢查方法點擊次數(shù)：2發(fā)布時間：2011-4-269:08:391．直接鏡檢和活菌計數(shù)（1）直接鏡檢采取患者嘔吐物或剩余殘食等為檢樣。將其用無菌生理鹽水浸漬、稀釋后制涂片，干燥，革蘭染色、鏡檢。若有革蘭陽性大桿菌[（4～5）um×1um左右l菌兩端較平整，芽孢不大于菌體寬度，中生或稍偏端，運(yùn)動，即為可疑菌。（2）活菌計數(shù)將殘余食物以無菌生理鹽水稀釋成1：10，1：100，1：1000，…，分別用lml的滅菌吸管各吸取稀釋液0．1ml作傾注培養(yǎng)，或接種于10％卵黃瓊脂平板上，用
免疫酶組織化學(xué)技術(shù)的酶及其特點2011/05/27
凡對抗體無毒性又具有高催化效率的酶，理論上均可標(biāo)記抗體。但免疫酶組織化學(xué)技術(shù)要求酶與底物作用生成的有色產(chǎn)物能在光鏡及電鏡下觀察到，所以這些產(chǎn)物必須具備兩個條件：*，產(chǎn)物必須是不透光或不透電子的，否則不能被光鏡及電鏡觀察到；第二，產(chǎn)物必須是不溶解的，否則產(chǎn)物將發(fā)生擴(kuò)散，影響其準(zhǔn)確定位。而理想的酶也應(yīng)盡可能符合下列標(biāo)準(zhǔn)：①性質(zhì)穩(wěn)定，活性高；②該酶較易獲得純制品，而且純度要很高；③酶與免疫球蛋白等物質(zhì)結(jié)合時不喪失其活性；④酶反應(yīng)產(chǎn)物必須穩(wěn)定，不應(yīng)發(fā)生擴(kuò)散，影響組織學(xué)定位；⑤酶相應(yīng)底物易于保存、制備；⑥
熒光顯微鏡所看到的熒光圖像的記錄方法2011/05/27
熒光顯微鏡所看到的熒光圖像，一是具有形態(tài)學(xué)特征，二是具有熒光的顏色和亮度，在判斷結(jié)果時，必須將二者結(jié)合起來綜合判斷。結(jié)果記錄根據(jù)主觀指標(biāo)，即憑工作者目力觀察，作為一般定性觀察基本上是可靠的。隨著技術(shù)科學(xué)的發(fā)展，采用細(xì)胞分光光度計、流式細(xì)胞儀、激光共聚焦顯微鏡和圖像分析儀等儀器。但這些儀器記錄的結(jié)果，也必須結(jié)合主觀的判斷。熒光顯微鏡攝影技術(shù)對于記錄熒光圖像十分必要，由于熒光很易減弱褪色，要及時攝影記錄結(jié)果。方法與普通顯微鏡攝影技術(shù)基本相同。只是需要采用高速感光膠片如ASA400以上或感光度27以上
熒光顯微鏡標(biāo)本制作的要求2011/05/27
（一）載玻片載玻片厚度應(yīng)在0．8～L2mm之間，太厚的玻片，一方面光吸收多，另一方面不能使激發(fā)光在標(biāo)本上聚焦。載玻片必須光潔，厚度均勻，無明顯自發(fā)熒光。有時需用石英載玻片。（二）蓋玻片蓋玻片厚度在o．17mm左右，光潔。為了加強(qiáng)激發(fā)光，也可用干涉蓋玻片，這是一種特制的表面鍍有若干層對不同波長的光起不同干涉作用的物質(zhì)（如氟化鎂）的蓋玻片，它可以使熒光順利通過，而反射激發(fā)光，這種反射的激發(fā)光又可激發(fā)標(biāo)本。（三）標(biāo)本組織切片或其他標(biāo)本不能太厚，如太厚激發(fā)光大部消耗在標(biāo)本下部，而物鏡直接觀察到的上部不能
熒光顯微鏡的使用注意事項和維護(hù)與保養(yǎng)2011/05/27
（1）嚴(yán)格按照熒光顯微鏡出廠說明書要求進(jìn)行操作，不要隨意改變程序。（2）應(yīng)在暗室中進(jìn)行檢查，進(jìn)人暗室后接通高壓穩(wěn)壓器電源，開啟3～5rain后再開啟激發(fā)高壓汞燈，當(dāng)看到高壓汞燈*亮后，停止激發(fā)，再開始觀察標(biāo)本。（3）防止紫外線對眼睛的損害，在調(diào)整光源時應(yīng)戴上防護(hù)眼睛。（4）檢查時間每次以1h為宜，超過90min，高壓汞燈發(fā)光強(qiáng)度逐漸下降，熒光減弱，標(biāo)本經(jīng)激發(fā)15min后，熒光亦明顯減弱。（5）熒光顯微鏡的激發(fā)裝置及高壓汞燈壽命有限，標(biāo)本應(yīng)集中檢查，節(jié)省時間。（6）標(biāo)本染色后立刻觀察，因存放時間太
熒光顯微鏡的原理部件及激發(fā)方式2011/05/27
熒光顯微鏡與普通光學(xué)顯微鏡不同，它不是通過普通光源的照明觀察標(biāo)本，而是利用一定波長的光（通常是紫外光、藍(lán)紫光）激發(fā)顯微鏡下標(biāo)本內(nèi)的熒光物質(zhì)，使之發(fā)射熒光，所以，熒光顯微鏡的光源所起的作用不是直接照明，而是作為一種激發(fā)標(biāo)本的內(nèi)熒光物質(zhì)的能源。我們之所以能觀察標(biāo)本，是由于光源的照明，而是標(biāo)本內(nèi)熒光物質(zhì)吸收激發(fā)的光能后所呈現(xiàn)的熒光現(xiàn)象。由此可知，熒光顯微鏡的特點，主要是它的光源能供給大量特定波長范圍的激發(fā)光，使受檢標(biāo)本內(nèi)的熒光物質(zhì)能獲得必要強(qiáng)度的激發(fā)光。同時，熒光顯微鏡必須具備相應(yīng)的濾光鏡系統(tǒng)。熒光顯
銀納米粒子對某些有益細(xì)菌傷害極大2011/05/25
4月9日加拿大科學(xué)家研究認(rèn)為，某些工業(yè)產(chǎn)品中含有的銀納米粒子對一些生活在北極極地土壤中有益的細(xì)菌來說毒性非常大?？茖W(xué)家發(fā)現(xiàn)，將一定數(shù)量的銀納米粒子加入取自北極極地的土壤中后，會造成土壤中的許多種類的細(xì)菌數(shù)量減少，還會使一種有益的慢生菌全部消失?？茖W(xué)家擔(dān)心納米粒子進(jìn)入自然環(huán)境可能破壞土壤生態(tài)系統(tǒng)。相關(guān)文章發(fā)表在一期出版的《有毒材料》雜志上。銀納米粒子作為抗微生物劑被大量用于防臭襪和T恤衫等日用消費(fèi)品中。據(jù)統(tǒng)計，目前市場上有1300多種產(chǎn)品含有納米粒子，這些產(chǎn)品包括不粘鍋、織物柔軟劑、長毛絨玩具以及
大腸桿菌顯色培養(yǎng)基2011/05/25
大腸桿菌顯色培養(yǎng)基大腸桿菌顯色培養(yǎng)基是青島海博生物公司改良的培養(yǎng)基，用于食品、水、牛奶、冰激凌和肉制品中大腸桿菌的快速檢測。大腸桿菌顯藍(lán)綠色，大腸菌群顯無色，其它菌顯黃色或無色，革蘭氏陽性菌被抑制。--------------------------------------------------------------------------------成份（g/L）特殊營養(yǎng)物質(zhì)37.9顯色劑0.2瓊脂12.0pH6.8±0.225℃此配方可以進(jìn)行改良或增加營養(yǎng)成份以獲得*的結(jié)果。注意此培養(yǎng)基
大腦研究抽樣過程2011/05/21
隨機(jī)選擇一側(cè)大腦半球，將其包埋于6％瓊脂中，切取等距離腦組織切片，切片厚度為7mm，共切取20張切片。我們確定從一側(cè)大腦半球抽取5塊大腦白質(zhì)進(jìn)行研究，首先，將從20張腦組織切片中抽取5片，即每4張等距切片中抽取一張（每隔3張抽取一張）。從前4個數(shù)字當(dāng)中隨機(jī)選擇一個，這個數(shù)字則作為*張腦片的抽取位置，假設(shè)選擇3，則第3張腦片作為*個腦組織塊抽取的位置，然后每隔3張腦片抽取一片，即3，7，11，15，19號腦片。由于腦片較大，還需在所得腦片上再次抽取組織塊。在所得腦片上隨機(jī)疊放等距有孔測試點，這些測
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