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試劑純、分析純、色譜純有什么區(qū)別2022/10/14: 實(shí)驗(yàn)室試劑--中國國家標(biāo)準(zhǔn)（GB）中一般試劑劃分標(biāo)準(zhǔn)在中國國家標(biāo)準(zhǔn)(GB)中,將一般試劑劃分為3個(gè)等級(jí):一級(jí)試劑為優(yōu)級(jí)純,二級(jí)試劑為分析純,三級(jí)試劑為化學(xué)純。定級(jí)的根據(jù)是試劑的純度(即含量)、雜質(zhì)含量、提純的難易,以及各項(xiàng)物理性質(zhì)。有時(shí)也根據(jù)用途來定級(jí),例如光譜純試劑、色譜純試劑,以及pH標(biāo)準(zhǔn)試劑等等。試劑純、分析純、色譜純有什么區(qū)別區(qū)別在于色譜純的試劑雜質(zhì)比分析純的更少，分析純比色譜純的少。試劑純：是指一般化學(xué)試驗(yàn)用的，有較少的雜質(zhì)，不妨礙實(shí)驗(yàn)要求。分析純：是指做分析測定用的試劑，雜質(zhì)更少，不

標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)定義、分級(jí)、編號(hào)及量值的溯源體系2022/10/13: 標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)是保證準(zhǔn)確量值和量值溯源的計(jì)量標(biāo)準(zhǔn)，它廣泛應(yīng)用于校準(zhǔn)測量儀器、評(píng)價(jià)測量方法、賦予材料特性量值。在質(zhì)量管理、質(zhì)量保證、技術(shù)仲裁等方面起著重要作用。標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)定義、分級(jí)、編號(hào)及量值的溯源體系⑴定義有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)是經(jīng)權(quán)/威部門認(rèn)證的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，其一種或多種特性量值通過建立了溯源性的程序確定，并可溯源到準(zhǔn)確復(fù)現(xiàn)表示該特性量值的計(jì)量單位。我國有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)由國家標(biāo)準(zhǔn)計(jì)量主管部門批準(zhǔn)、頒布并授權(quán)生產(chǎn)。⑵分級(jí)我國將標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)分為一級(jí)和二級(jí)，它們都符合有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的定義。一級(jí)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(PrimaryReferen

遠(yuǎn)慕解析高純試劑以及高純試劑分類2022/10/13: 純度遠(yuǎn)高于優(yōu)級(jí)純的試劑叫做高純試劑。是在通用試劑基礎(chǔ)上發(fā)展起來的，是為了專門的使用目的而用特殊方法生產(chǎn)的純度最高的試劑。高純試劑控制的是雜質(zhì)項(xiàng)含量，基準(zhǔn)試劑控制的是主含量，基準(zhǔn)試劑可用標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制，但高純試劑不能用于標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制（單質(zhì)氧化物除外）。目前在國際上也無統(tǒng)一的明確規(guī)格，我國除對少數(shù)產(chǎn)品制定了國家標(biāo)準(zhǔn)外，大部分高純試劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)還很不統(tǒng)一，在名稱上也有高純、超純、特純、光譜純、電子純等不同叫法。一般以9來表示產(chǎn)品的純度。故在規(guī)格欄中標(biāo)以2個(gè)9、3個(gè)9、4個(gè)9以此類推，根據(jù)這個(gè)原則可將

定量Western Blot內(nèi)參質(zhì)控的掌握技巧2022/10/13: WesternBlot是生物修煉的一大實(shí)驗(yàn)，現(xiàn)在不做定量WesternBlot，都不敢自詡學(xué)霸的了，暗暗擦汗的有沒有？在討論如何從WesternBlot中獲得定量數(shù)據(jù)之前，先定義一下我們所說的“定量”是什么意思是非常有用的，何為定量，必須符合下列準(zhǔn)則：使用一個(gè)定義的過程進(jìn)行檢測，即WesternBlot。這個(gè)過程產(chǎn)生一個(gè)可重復(fù)的結(jié)果，即是精確度。測量反映了一個(gè)“真實(shí)”的結(jié)果，即是準(zhǔn)確度。定量WesternBlot除了需要進(jìn)行蛋白抽提、蛋白定量、等量蛋白上樣電泳、轉(zhuǎn)膜、靶蛋白抗體孵育、顯色等步驟以

如何分辨抗體是磷酸化還是非磷酸化2022/10/13: 磷酸化和非磷酸化的抗體主要區(qū)別有：1.磷酸化抗體的檢測的是出于活性狀態(tài)（磷酸化）的蛋白。2.磷酸化抗體只針對磷酸化位點(diǎn)設(shè)計(jì)，是一種位點(diǎn)特異性的多抗，這到有些單抗的特性。3.普通抗體的合成（多抗）：原核表達(dá)蛋白-〉純化-〉免疫動(dòng)物-〉收獲抗體。4.磷酸化抗體合成：人工合成含磷酸化位點(diǎn)的多肽-〉人工體外磷酸化-〉鏈接半抗原-〉免疫動(dòng)物-〉收獲抗體。5.磷酸化的蛋白很大部分是轉(zhuǎn)錄相關(guān)因子。因此使用磷酸化抗體和普通抗體。檢測同一個(gè)蛋白，原位檢測可能具有不同的細(xì)胞定位。轉(zhuǎn)錄因子磷酸化后由細(xì)胞質(zhì)進(jìn)入細(xì)胞核。

菌落繁殖為何會(huì)連成一片？2022/10/12: 菌落總數(shù)檢測1、為什么平板計(jì)數(shù)瓊脂需要調(diào)節(jié)pH？由于大部分細(xì)菌是嗜中性的，培養(yǎng)基為符合細(xì)菌生長要求，需要調(diào)節(jié)pH至7.0±0.2，盡量保證較適宜的環(huán)境，確保檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。2、如何保證檢測結(jié)果的有效性？設(shè)計(jì)空白對照（1）檢驗(yàn)過程中需要做空白對照，用來判斷培養(yǎng)基、稀釋液、平皿或吸管是否存在污染，完/美的空白試驗(yàn)平板上應(yīng)該無細(xì)菌生長。實(shí)驗(yàn)環(huán)境要求（2）定期檢測空氣潔凈度，判斷實(shí)驗(yàn)環(huán)境是否符合標(biāo)準(zhǔn)要求。滅菌處理（3）細(xì)菌檢測過程中所用到的一切用具和培養(yǎng)基都需經(jīng)過滅菌程序。3、如何提高檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性

多重疫情下實(shí)驗(yàn)室生物安全如何保證？2022/10/12: 生物安全長期存在于人類發(fā)展的歷史長河中。無論是瘋牛病、埃博拉、新冠等重大疫情給我們帶來的健康威脅，還是一場非洲豬瘟對肉價(jià)和市場供應(yīng)的影響，亦或于20世紀(jì)戰(zhàn)爭中出現(xiàn)的細(xì)菌戰(zhàn)，都與生物安全息息相關(guān)。生物安全是國家安全的重要組成部分，其中實(shí)驗(yàn)室生物安全是生物安全的重要內(nèi)容之一，是從事檢驗(yàn)工作的相關(guān)機(jī)構(gòu)或單位實(shí)行實(shí)驗(yàn)室管理的重中之重。什么是實(shí)驗(yàn)室生物安全？根據(jù)《病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全通用準(zhǔn)則》的定義，實(shí)驗(yàn)室生物安全是指實(shí)驗(yàn)室的生物安全條件和狀態(tài)不低于容許水平，可避免實(shí)驗(yàn)室人員、來訪人員、社區(qū)及環(huán)境受到

微生物操作中常見問題的討論與分析2022/10/12: 微生物操作中常見問題的討論與分析1、劃線獲得單個(gè)菌落的方法。劃不出單個(gè)菌落的原因：(1)平板上有過多的水分；(2)劃線時(shí)接種環(huán)未經(jīng)反復(fù)灼燒；(3)多區(qū)劃線，三區(qū)或四區(qū)劃線。2、涂布和傾注的區(qū)別：涂布利于觀察，但由于涂布棒上會(huì)帶有少量的菌液，可能影響計(jì)數(shù)的準(zhǔn)確性；傾注更為準(zhǔn)確，但不利于觀察菌落的狀態(tài)。3、培養(yǎng)基配制時(shí)應(yīng)注意的問題：(1)滅菌溫度要嚴(yán)格控制，按照要求滅菌，尤其含糖量較高的培養(yǎng)基溫度不應(yīng)太高，過高會(huì)導(dǎo)致糖分焦化，影響質(zhì)量；(2)瓊脂培養(yǎng)基不能反復(fù)溶化。反復(fù)溶化會(huì)破壞培養(yǎng)基中的營養(yǎng)成分；

直接免疫熒光法和間接免疫熒光法簡介2022/10/12: 免疫熒光技術(shù)是將熒光素如異硫氰酸熒光素(fluoresceinisothiocyanate,FITC)與相應(yīng)抗體（或抗原）以化學(xué)的方法結(jié)合，將熒光標(biāo)記抗體（或抗原）與標(biāo)本中相應(yīng)的抗原結(jié)合形成熒光標(biāo)記的抗體-抗原復(fù)合物，用熒光顯微鏡觀察。在鏡下見到有熒光存在即推斷有抗原抗體復(fù)合物的存在，根據(jù)已知的抗體（或抗原）即可推知另一個(gè)未知抗原（或抗體）的存在。1.直接免疫熒光法直接免疫熒光法是利用熒光色素標(biāo)記的特異性抗體直接與相應(yīng)的抗原結(jié)合，以鑒定未知抗原。本法具有操作簡單、時(shí)程短、特異性高的優(yōu)點(diǎn)，但也存在

冷凍樣本真的不適合做單細(xì)胞測序嗎？2022/10/11: “單細(xì)胞測序”可以說是這幾年的一個(gè)熱門詞匯，越來越多的研究者在自己的研究中用到這項(xiàng)技術(shù)，大家都知道目前單細(xì)胞測序不管是哪個(gè)平臺(tái)，基本還是需要新鮮的活體組織樣本，這對于很多研究者來說是難以做到的，雖然目前也有單細(xì)胞核測序技術(shù)來解決新鮮組織難以獲取，或者是一些特殊組織樣本難以用活細(xì)胞上機(jī)的困境，但是很多老師還是擔(dān)心：冷凍樣本會(huì)不會(huì)不適合單細(xì)胞測序呢？冷凍樣本獲得的數(shù)據(jù)質(zhì)量會(huì)不會(huì)不如新鮮樣本呢？真相來了，新的文章研究表明：人類癌癥樣本的冷凍保存可保留腫瘤異質(zhì)性，用于單細(xì)胞多組學(xué)分析。高通量單細(xì)胞RNA

什么是引物？如何溶解和保存引物？2022/10/11: 什么是引物？引物（primer），是一小段單鏈DNA或RNA，作為DNA復(fù)制的起始點(diǎn)，在核酸合成反應(yīng)時(shí)，作為每個(gè)多核苷酸鏈進(jìn)行延伸的出發(fā)點(diǎn)而起作用的多核苷酸鏈，在引物的3′-OH上，核苷酸以二酯鏈形式進(jìn)行合成，因此引物的3′-OH，必須是游離的。如何溶解引物？干燥后的引物質(zhì)地非常疏松，開蓋前最好瞬時(shí)離心一下，或管垂直向上在桌面上敲敲，將引物粉末收集到管底。根據(jù)計(jì)算出的體積加入去離子無菌水或TE(pH8.0)緩沖液，室溫放置幾分鐘，振蕩助溶，離心將溶液收集到管底。溶解引物用的水一般不要用蒸餾水，因

ELISA、WB、Q-PCR采樣及取樣注意事項(xiàng)2022/10/11: ELISA取樣及運(yùn)輸注意事項(xiàng)一、血清提取方法：1.全血促凝管取血，輕輕顛倒兩三次，放置片刻讓全血凝固，凝固后3000轉(zhuǎn)15-30min離心取上清。2.全血普通EP管取血，室溫放置2h左右，讓其凝固，凝固后3000轉(zhuǎn)15-30min離心取上清。特別注意：取血清避免震蕩，以防止溶血，溶血會(huì)對結(jié)果有影響。二、樣本取量及運(yùn)輸每個(gè)指標(biāo)做單孔檢測，一個(gè)樣本需取血清30ul，3個(gè)復(fù)孔需90ul，冰盒-20度中短時(shí)運(yùn)輸（小鼠建議采取摘眼球取血，如果血樣有限在試驗(yàn)方案允許的前提下可以取多只小鼠血樣混合）。三、樣本

各種血液樣品的保存方法和保存期2022/10/11: 1、全血儲(chǔ)存溫度：2℃～6℃。保存期：含ACD-B、CPD血液/保存液的全血保存期為21d；含CPDA-1（含腺嘌呤）血液/保存液的全血保存期35d。使用其他血液/保存液時(shí)，按其說明書規(guī)定的保存期執(zhí)行。2、去白細(xì)胞全血儲(chǔ)存溫度：2℃～6℃。保存期：同1去白細(xì)胞全血應(yīng)在血液采集后48h內(nèi)去除白細(xì)胞。3、濃縮紅細(xì)胞儲(chǔ)存溫度：2℃～6℃。存期：同14、去白細(xì)胞濃縮紅細(xì)胞儲(chǔ)存溫度：2℃～6℃。保存期：同15、懸浮紅細(xì)胞儲(chǔ)存溫度：2℃～6℃。保存期：紅細(xì)胞/保存液為ACD-B、CPD的懸浮紅細(xì)胞保存期為2

了解這些知識(shí)，養(yǎng)好細(xì)胞不是事兒！2022/10/10: 抗體藥物是目前生物技術(shù)藥物研究中活躍的領(lǐng)域，特別是在腫瘤和自身免疫性疾病等方面的臨床應(yīng)用，更是大放異彩。隨著臨床需求的增加，單克隆抗體藥物發(fā)展迅速，F(xiàn)DA已批準(zhǔn)的抗體藥物多達(dá)70多個(gè)，抗體藥物銷售量年增長率基本在10%以上，大大高于制藥行業(yè)平均水平，其市場規(guī)模已經(jīng)達(dá)到千億美元。我國針對單克隆抗體藥物的研究與開發(fā)也是如火如荼，行業(yè)內(nèi)競爭異常激烈。據(jù)統(tǒng)計(jì)我國生物類似藥研發(fā)占全球在研類似藥總數(shù)的36%。目前，我國約有600家企業(yè)在抗體藥物領(lǐng)域布局，約有200家企業(yè)已提交抗體藥物臨床試驗(yàn)申請，且靶點(diǎn)比較

提取RNA時(shí)如何去除DNA的污染2022/10/10: 提取RNA時(shí)如何去除DNA的污染的方法：注意實(shí)驗(yàn)室的標(biāo)準(zhǔn)化問題，注意污染的存在，同時(shí)嚴(yán)格按照說明書上的操作應(yīng)該沒有問題。發(fā)現(xiàn)DNA污染，用DNAseI消化1小時(shí)，37度離心取上清的時(shí)候，一定要小心不要取到中間的膜和下面的液體。直接加NaOH溶液與提取液混合攪拌,然后離心就可以了.因?yàn)镽NA可溶于NaOH溶液,而DNA不可溶,離心后的上清液就不含有DNA了。RNA提取步驟：1.勻漿處理：①組織將組織在液氮中磨碎，每50-100mg組織加入1mlTRIzol，用勻漿儀進(jìn)行勻漿處理。樣品體積不應(yīng)超過T

細(xì)胞轉(zhuǎn)染如何提高實(shí)驗(yàn)效率？2022/10/10: 【組織培養(yǎng)試劑】一般提示：優(yōu)化您的細(xì)胞生長條件。只使用新鮮配制的培養(yǎng)基和添加劑，并經(jīng)可能減少所用試劑的變更。基礎(chǔ)培養(yǎng)基—目前所使用的各種市售培養(yǎng)基(如，RPMI1640和DMEM)。培養(yǎng)基的成分包括營養(yǎng)物質(zhì)(氨基酸，葡萄糖)，維生素，無機(jī)鹽，和緩沖物質(zhì)。有些成分非常不穩(wěn)定，因此如果不在使用時(shí)新鮮加入就可能會(huì)產(chǎn)生問題。務(wù)必要使培養(yǎng)基避光保存。因?yàn)橐阎幸恍┙M分和緩沖物質(zhì)，如HEPES，當(dāng)暴露于光照下就會(huì)分解產(chǎn)生細(xì)胞毒性物質(zhì)。酚紅試劑可保護(hù)細(xì)胞免受一些HEPES降解所產(chǎn)生的毒性效應(yīng)，但在使用未加酚紅

分不清轉(zhuǎn)染和轉(zhuǎn)化？遠(yuǎn)慕解析轉(zhuǎn)染和轉(zhuǎn)化區(qū)別！2022/10/10: 轉(zhuǎn)染的定義是“將具生物功能的核酸轉(zhuǎn)移或運(yùn)送到細(xì)胞內(nèi)并使核酸在細(xì)胞內(nèi)維持其生物功能”。其中，核酸包括DNA（質(zhì)粒和線性雙鏈DNA），反義寡核苷酸及RNAi（RNAinterference）。基因轉(zhuǎn)染技術(shù)已廣泛應(yīng)用于基因組功能研究（基因表達(dá)調(diào)控，基因功能，信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和藥物篩選研究）和基因治療研究?；蜣D(zhuǎn)染需要一定的轉(zhuǎn)染試劑將帶有目的基因的載體運(yùn)送到細(xì)胞內(nèi)。早期的磷酸鈣轉(zhuǎn)染法轉(zhuǎn)染效率很低，且對很多細(xì)胞株無效，因此不能滿足很多科研工作的需要。目前，最/常用的轉(zhuǎn)染試劑是陽離子脂質(zhì)體和陽離子聚合物，它們在克服

胰酶的使用注意事項(xiàng)以及配置方法2022/10/10: 胰酶使用注意：1、在使用胰酶細(xì)胞消化液的過程中要特別注意避免消化液被細(xì)菌污染。2、胰酶細(xì)胞消化液消化細(xì)胞時(shí)間不宜過長，否則細(xì)胞鋪板后生長狀況會(huì)較差。貼壁細(xì)胞的消化：1、吸去培養(yǎng)液，用無菌的PBS、Hanks液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次，以去除殘余的血清2、加入少量胰酶細(xì)胞消化液，略蓋過細(xì)胞即可，根據(jù)胰酶效率差異可以增加惑減少胰酶用量。室溫放置30秒至2分鐘（不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同）3、顯微鏡下觀察，細(xì)胞明顯收縮，并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變化呈白茫狀；或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)

蛋白酶抑制劑混合物使用注意事項(xiàng)2022/10/09: 蛋白酶抑制劑混合物（100×，哺乳動(dòng)物樣品提取用）儲(chǔ)存條件：-20℃保存，有效期一年。蛋白酶抑制劑混合物產(chǎn)品簡介蛋白酶抑制劑混合物(哺乳動(dòng)物樣品抽提用,100×)(Proteaseinhibitorcocktailformammaliancellａndtissueextracts,100×)是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞或組織蛋白提取的蛋白酶抑制劑混合物(100mMAEBSF,80μMAprotinin,5mMBestatin,1.5mME64,2mMLeupeptinand1mMPepstatinAi

如何區(qū)別動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基？培養(yǎng)基的分類了解一下！2022/10/09: 細(xì)胞培養(yǎng)基（cellculturemedium）是人工模擬動(dòng)物細(xì)胞的體內(nèi)生長環(huán)境，維持體外細(xì)胞存活和增殖的營養(yǎng)物質(zhì)基礎(chǔ)，其主要功能是為細(xì)胞提供適宜的pH和滲透壓，以及細(xì)胞本身不能合成的各種營養(yǎng)物質(zhì)。本文將對細(xì)胞培養(yǎng)基的種類、成分及理化性質(zhì)，以及相關(guān)問題等方面進(jìn)行介紹。細(xì)胞培養(yǎng)基的種類按照細(xì)胞培養(yǎng)基的發(fā)展歷史，細(xì)胞培養(yǎng)基大致可分為平衡/鹽溶液、天然細(xì)胞培養(yǎng)基、合成細(xì)胞培養(yǎng)基、無血清細(xì)胞培養(yǎng)基、限定化學(xué)成分細(xì)胞培養(yǎng)基等幾大種類。1.1平衡/鹽溶液（balancedsaltsolution，BSS）B

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