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小鼠脾臟CD8+T細(xì)胞的磁珠分選2024/06/20

一、制備脾臟單細(xì)胞懸液8周齡C57BL/6小鼠摘眼球放血，無菌分離脾臟，于70um濾網(wǎng)上研磨收集脾細(xì)胞，過濾、離心，再以RPMI-1640wan全培養(yǎng)液重懸。二、磁珠標(biāo)記1.細(xì)胞計數(shù)為8×107/mL。2.400×g離心4分鐘，去除上清。3.每107個細(xì)胞總量使用40μL緩沖液重懸。4.每107個細(xì)胞總量添加10μLCD8+T細(xì)胞生物素抗體混合物。5.混勻，4℃孵育5分鐘。6.每107個細(xì)胞加入2mL緩沖液洗滌細(xì)胞，400×g離心4分鐘，去上清。7.每107個細(xì)胞添加80μL緩沖液。8.每107

整體課題實驗的意義2024/06/18

一、整體課題實驗的意義在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域，每一次的突破都離不開深入的實驗研究。而整體課題實驗，作為一種綜合性、系統(tǒng)性的研究方法，正日益受到科研人員的青睞。它不僅能夠深入剖析疾病的發(fā)病機(jī)制，還能為藥物的研發(fā)提供有力支持，為醫(yī)學(xué)事業(yè)的進(jìn)步注入新的活力。整體課題實驗，顧名思義，是一種將多個相關(guān)課題整合在一起，進(jìn)行系統(tǒng)性研究的實驗方法。它突破了傳統(tǒng)單一課題研究的局限性，通過整合不同領(lǐng)域的知識和技術(shù)，形成一個更為完整、全面的研究體系。這種方法的出現(xiàn)，不僅提高了研究效率，也為科研人員提供了更廣闊的思路和視角。在整體

什么是醫(yī)學(xué)實驗服務(wù)？2024/06/18

一、醫(yī)學(xué)實驗服務(wù)的意義醫(yī)學(xué)實驗服務(wù)是生命科學(xué)研究中的一環(huán)。無論是新藥研發(fā)、疾病診斷，還是基因測序、細(xì)胞培養(yǎng)，都離不開醫(yī)學(xué)實驗服務(wù)的支持。這些服務(wù)提供了專業(yè)的實驗技術(shù)、設(shè)備和人員，為科研人員提供了強(qiáng)大的后盾，使得他們能夠更專注于探索生命科學(xué)的奧秘。醫(yī)學(xué)實驗服務(wù)的優(yōu)勢在于其專業(yè)性和高效性。專業(yè)的實驗團(tuán)隊具備豐富的經(jīng)驗和技能，能夠確保實驗的準(zhǔn)確性和可靠性。他們熟悉各種實驗方法和技巧，能夠根據(jù)研究需求制定合適的實驗方案。同時，醫(yī)學(xué)實驗服務(wù)還具備高效性，能夠快速響應(yīng)科學(xué)家的需求，提供及時的技術(shù)支持和數(shù)據(jù)分

MPTP誘導(dǎo)的帕金森氏模型2024/06/17

藥品：1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine（MPTP）是一種廣泛使用的化學(xué)物質(zhì)，用于在動物體內(nèi)誘導(dǎo)類似于PD的狀態(tài)，注射MPTP的小鼠已被廣泛接受為PD模型。動物：成年雌性Balb/c小鼠，10周齡。造模：成年雌性Balb/c小鼠，連續(xù)7天給予MPTP（15mg/kg/天），腹腔注射。模型的評價：1.曠場活動測試（Openfieldlocomotionactivitytest）：曠場（45cm×45cm×25cm）準(zhǔn)備好，將小鼠放入盒子中，熟悉

大鼠腦缺血再灌注損傷模型2024/06/17

模型：麻醉大鼠，然后在頸部中線切開一個切口，暴露頸外動脈和頸內(nèi)動脈，用無菌縫合線結(jié)扎，血管夾夾住頸內(nèi)動脈。隨后在頸總動脈上切口，然后插入線栓。2h后，大鼠進(jìn)行再灌注。模型大鼠成功構(gòu)建的標(biāo)準(zhǔn)：大鼠出現(xiàn)癥狀如偏癱，對側(cè)前肢下垂和站立不穩(wěn)。Bederson評分在1-3分，48小時內(nèi)沒有死亡，就認(rèn)為模型成功。文獻(xiàn)上用的是2-3分的模型。優(yōu)點：無需開顱，創(chuàng)傷較??；缺血部位相對固定，可控性好；可實現(xiàn)腦缺血后再灌注，是理想的標(biāo)準(zhǔn)局灶性腦缺血動物模型。動物選擇：目前多選用SD大鼠?？紤]大鼠雌激素水平對腦缺血損傷

小鼠脾臟單細(xì)胞懸液的制備方法2024/06/14

1.8周齡C57BL/6小鼠摘眼球放血。2.在75%的酒精中，浸泡5min。3.無菌狀態(tài)下取脾臟。4.取一干凈10cm大皿，放入無菌的70um濾網(wǎng)，將脾臟置于濾網(wǎng)上，加入2ml培養(yǎng)基。5.用研磨棒輕輕研磨臟器，將脾臟組織研磨成單細(xì)胞狀態(tài)，直到只剩下臟器的結(jié)締組織為止。6.研磨時動作應(yīng)輕柔，用力過大可導(dǎo)致細(xì)胞死亡。7.棄去濾網(wǎng)和濾網(wǎng)上的結(jié)締組織，收集平皿內(nèi)的細(xì)胞懸液，400g4min離心沉淀。8.用PBS重懸沉淀，就可以進(jìn)行后續(xù)實驗。

大鼠腹腔注射方法2024/05/11

1.大鼠腹腔注射的位置在兩后肢連線與腹中線交叉兩側(cè)1cm處。2.左手固定大鼠，使腹部向上，讓大鼠頭處于低位。3.注射位置消毒4.右手持連有5號針頭的注射器。5.將注射器沿45°角斜向穿過腹肌進(jìn)入腹腔，此時有落空感，回抽無回血或尿液，即可注入藥液。6.緩慢抽出注射器，用棉球按壓注射部位，注射完畢。注意事項1.注射時，大鼠腹部朝上，頭處于低位，使臟器移向胸部橫隔處，以免被針頭刺入。2.為避免注射后藥液從針孔流出，注射針頭不要太粗。

小鼠腹腔注射方法2024/05/11

1.小鼠腹腔注射的位置在兩后肢連線與腹中線交叉兩側(cè)0.5cm處。2.首先采用背側(cè)保定法抓取小鼠，使其頭部稍向后仰，腹部向上，小鼠左后肢用小指固定住。3.再用75%酒精棉球消毒注射部位。4.將注射器針頭與皮膚呈45度角刺入小鼠腹腔，回抽針?biāo)?，如無回血或液體即可注入藥物。5.注射后，緩慢拔出注射器，用棉球按壓注射部位，注射完畢。注意事項1.注射時，小鼠腹部朝上，頭處于低位，使臟器移向胸部橫隔處，以免被針頭刺入。2.為避免注射后藥液從針孔流出，注射針頭不要太粗。

大鼠尾靜脈注射方法2024/04/26

1.用固定裝置固定大鼠，將尾巴露出。2.使用酒精棉球擦拭消毒大鼠尾巴，擴(kuò)張血管。3.用1ml注射器。4.用左手拇指和食指固定住尾巴，在尾巴的下1/4處進(jìn)針，針頭與尾巴平行，進(jìn)針時，針頭斜面朝上。5.回抽看血液是否回流，以確保針頭在血管內(nèi)。6.注射完成后，用干棉球按壓注射部位1-2分鐘以止血。注意事項：1.固定大鼠也要固定尾巴。2.推注藥物時，如果有阻力或白色皮丘出現(xiàn)，則意味著針頭未刺入血管，此時應(yīng)更換位置。3.多次注射，要從尾巴遠(yuǎn)端開始注射。

小鼠尾靜脈注射方法2024/04/19

1.用專用固定裝置固定小鼠，前部有氣孔保障小鼠呼吸，后部將尾巴露出。2.小鼠尾靜脈左右兩條，使用酒精棉球擦拭消毒尾巴，擴(kuò)張血管。3.用1ml注射器，4號針頭。4.用左手拇指和食指固定住靠近尾部末端約1/3處。5.右手持注射器，針尖斜面朝上，沿與靜脈平行方向進(jìn)針。6.輕推針?biāo)?，如無阻力，即可注射藥物。7.拔出針頭前，先用干棉球按壓止血。注意事項：1.推注藥物時，如果有阻力或白色皮丘出現(xiàn)，則意味著針頭未刺入血管，此時應(yīng)更換位置。2.多次注射，要從尾巴遠(yuǎn)端開始注射，漸進(jìn)向尾根方向移動。

來自結(jié)直腸癌的病人類器官原代培養(yǎng)2024/04/19

一、操作步驟1.組織4℃條件下從醫(yī)院取回。2.消毒取樣的15ml管，取出組織，放到10ml大皿中。3.用含4抗的PBS溶液浸泡，清洗組織。4.再用組織緩沖液浸泡、清洗三遍。5.將組織剪成1mm3大小的組織塊，轉(zhuǎn)移到15ml管中消化。6.在37℃水浴鍋中，消化15min。7.取少量液體在顯微鏡下觀察，看到較多的單細(xì)胞和較少的細(xì)胞簇后，終止消化。8.用100μm篩過濾，然后300g4℃離心5min，移去上清。9.重懸沉淀，轉(zhuǎn)移到2ml離心管中，300g4℃離心5min，移去上清。10.估算沉淀的細(xì)胞

小鼠灌胃操作2024/03/26

一、左手固定小鼠，確保其身體成一直線，頭部固定，避免活動。二、灌胃針從小鼠左側(cè)嘴角進(jìn)入，壓住舌頭，抵住上顎，輕輕向內(nèi)推進(jìn)，進(jìn)入食管后會有一個刺空感。三、在灌注藥液時需注意小鼠是否有強(qiáng)烈掙扎現(xiàn)象。四、一般灌胃針插入深度：小鼠2-3cm。五、一次灌胃量：0.1-0.2ml/10g。伊萊博生物科技（上海）有限公司，公司總部位于上海長江軟件園。2024年1月與上海大學(xué)醫(yī)學(xué)院成立聯(lián)合研究中心，主要以生命科學(xué)研究為基礎(chǔ)，專注于研究成果轉(zhuǎn)化及技術(shù)服務(wù)創(chuàng)新，建立了包含腫瘤生物學(xué)、病理學(xué)、免疫學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、生物

大鼠灌胃操作2024/03/26

一、用左手固定大鼠的頭部，使其頭部和頸部成一直線，方便灌胃針頭進(jìn)入口腔。二、將灌胃針從大鼠的左側(cè)嘴角插入，壓住舌頭，抵住上顎，輕輕向內(nèi)推進(jìn)，進(jìn)入食管后會有一個刺空感。三、在灌胃針插入過程中，應(yīng)緊貼咽后壁進(jìn)針，避免損傷食道。若灌胃針進(jìn)入氣管，大鼠會劇烈掙扎。四、觀察大鼠的反應(yīng)，如無過度掙扎，可嘗試推注藥物。如阻力過大或動物反應(yīng)劇烈，可退針后插入。五、一般灌胃針插入深度：大鼠4-6cm。六、一次灌胃量：大鼠1-2ml/100g。伊萊博生物科技（上海）有限公司，公司總部位于上海長江軟件園。2024年1

成年小鼠關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞原代培養(yǎng)2024/03/19

1.C57小鼠，8-10周，通過頸椎脫位處死，浸入75%乙醇浸泡5分鐘，轉(zhuǎn)移到通風(fēng)柜中的解剖盤中。2.使用眼科剪和鑷子，使髖關(guān)節(jié)脫臼，保持股骨頭完整。3.用止血鉗去除每個股骨頭的軟骨帽，將組織放入含2%雙抗的PBS中。4.用冰冷的含2%雙抗的PBS清洗2-3遍，將關(guān)節(jié)軟骨小心移到2ml離心管中。5.用眼科剪刀將軟骨帽剪成約1mm3的碎片，加入3ml預(yù)熱的CollagenaseD（1.5mg/ml）。6.放入37℃、80rpm的搖床中進(jìn)行第一次消化，時間2h。7.第一次消化結(jié)束后，加入含血清的培養(yǎng)

大鼠骨髓來源的內(nèi)皮祖細(xì)胞體外培養(yǎng)方法2024/03/19

1.SD大鼠，250g，通過頸椎脫位處死大鼠，浸入75%乙醇浸泡5分鐘，轉(zhuǎn)移到通風(fēng)柜中的解剖盤中。2.打開皮膚，暴露、收集股骨，無菌狀態(tài)下移除附著的肌肉和組織。3.并轉(zhuǎn)移股骨至預(yù)冷含雙抗的PBS中，洗滌三次。冰上操作。4.切斷股骨骨骺，使用5mlPBS，1ml注射器針頭沖洗，沖洗液由棕色變成粉紅色即可（股骨變白）。沖洗后，用1ml注射器吹打3-5次。5.70um濾網(wǎng)過濾，棄去篩網(wǎng)。使用15ml離心管，先加入分離液，然后緩慢加入濾過的懸液。20℃環(huán)境下，600g離心25min。6.離心后，離心管中

上海大學(xué)醫(yī)學(xué)院伊萊博聯(lián)合研究中心細(xì)胞平臺介紹2024/03/08

細(xì)胞平臺硬件：擁有人、小鼠、大鼠來源的多種原代或永生化細(xì)胞株儲存的細(xì)胞庫，配備雙人操作的生物安全柜，進(jìn)口培養(yǎng)箱；服務(wù)：主要包含原代細(xì)胞分離、永生化細(xì)胞株培養(yǎng)、耐藥株篩選、穩(wěn)轉(zhuǎn)株構(gòu)建以及細(xì)胞功能相關(guān)實驗檢測、高清顯微拍照等；項目：CCK-8、細(xì)胞轉(zhuǎn)染、流式細(xì)胞術(shù)、原代細(xì)胞分離及培養(yǎng)、穩(wěn)轉(zhuǎn)株篩選及驗證、細(xì)胞侵襲/遷移/劃痕、平板克隆、破骨/成骨細(xì)胞誘導(dǎo)分化、細(xì)胞成管實驗、彗星實驗等。伊萊博生物擁有豐富的研究經(jīng)驗，具備完善的系統(tǒng)化管理能力和科研服務(wù)體系。目前已自建細(xì)胞、分子、病理等實驗平臺近1000平

上海大學(xué)醫(yī)學(xué)院伊萊博聯(lián)合研究中心動物中心平臺介紹2024/03/08

動物中心硬件：擁有1600平方米的SPF級的動物實驗中心，以及200平方米的常規(guī)清潔級動物房，滿足多種動物模型的構(gòu)建，同時設(shè)有動物行為學(xué)檢測平臺：如水迷宮、曠場監(jiān)測系統(tǒng)、高十字架、平衡木等；服務(wù)：主要包含大、小鼠的服務(wù)內(nèi)容：飼養(yǎng)、繁殖、造模、灌胃/注射治療、樣本取材（保存）、活體成像、動物指標(biāo)檢測（如血常規(guī)、尿常規(guī)、栓塞等）；項目：多種模型構(gòu)建，在體相關(guān)研究。伊萊博生物擁有豐富的研究經(jīng)驗，具備完善的系統(tǒng)化管理能力和科研服務(wù)體系。目前已自建細(xì)胞、分子、病理等實驗平臺近1000平方米，擁有先進(jìn)的儀器

伊萊博實驗技術(shù)服務(wù)內(nèi)容2024/02/28

伊萊博生物深耕生命科學(xué)領(lǐng)域十余載，積累了豐富的理論與實操經(jīng)驗，可根據(jù)不同的研究方向制定相應(yīng)的科研規(guī)劃，助力更好的科研成果產(chǎn)出。服務(wù)內(nèi)容發(fā)病機(jī)制研究：根據(jù)研究內(nèi)容，設(shè)計（優(yōu)化）方案，完成實驗服務(wù)內(nèi)容，闡述疾病的調(diào)控機(jī)制；靶向藥物設(shè)計：根據(jù)靶點信息，預(yù)測調(diào)解位點，通過虛擬篩選，體內(nèi)外實驗驗證，協(xié)助論文發(fā)表和zhaunli申請；新藥研發(fā)服務(wù)：將篩選的單體進(jìn)行藥效學(xué)分析，推進(jìn)成果產(chǎn)業(yè)化，完成臨床前CRO服務(wù)，協(xié)助zhaunli申請，協(xié)助市級或guojiaji發(fā)明獎等獎項申報；科室建設(shè)服務(wù)：根據(jù)不同科室，

小鼠腦缺血再灌注損傷模型2024/02/21

1.體重22-28g的雄性C57Bl/6小鼠，用5%異氟醚深度麻醉小鼠，然后2.5%異氟醚維持麻醉。2.在頸部中線切開一個切口。3.分離右側(cè)的頸總動脈和迷走神經(jīng)。4.右側(cè)的頸總動脈暫時結(jié)扎。5.分離右側(cè)的頸外動脈和頸內(nèi)動脈，右側(cè)的頸內(nèi)動脈暫時結(jié)扎；右側(cè)的頸外動脈頭端結(jié)扎，近心端掛線備用。6.隨后，用無菌的1ml注射器針頭在右側(cè)頸外動脈上做一個小洞，然后插入線栓，近心端掛線適度的系牢插入右側(cè)頸外動脈的線栓，以防止血從小洞中流出；松開右側(cè)頸內(nèi)動脈暫時的結(jié)扎線，輕輕送入線栓到大腦中動脈，當(dāng)感覺到阻力時

腦積水大鼠模型的建立2024/01/10

1.雄性SD大鼠、8周齡，麻醉。2.大鼠頭頸部皮膚去毛后，固定在立體定位上，常規(guī)消毒。3.在頸部后面的皮膚上做一個中線切口，鈍性分離肌肉，暴露寰枕膜。4.微量注射器進(jìn)入寰枕膜失去阻力后停針，注入0.02mL無菌高嶺土懸浮液。5.注射速度6ul/s，注射后停針10min。6.拔針后，用醫(yī)用耳腦膠封閉針眼，縫合切口，術(shù)后抗感染治療。7.術(shù)后每天給大鼠稱重并監(jiān)測其神經(jīng)功能缺陷。8.大鼠術(shù)后3周，經(jīng)MRI檢查確認(rèn)模型成功后，取其腦組織，4%多聚甲醛固定。9.常規(guī)HE染色，光鏡觀察，可看到模型組大鼠側(cè)腦室