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7種細(xì)胞凋亡有效的檢測方法2020/08/21
7種細(xì)胞凋亡有效的檢測方法一、細(xì)胞凋亡的形態(tài)學(xué)檢測根據(jù)凋亡細(xì)胞固有的形態(tài)特征,人們已經(jīng)設(shè)計了許多不同的細(xì)胞凋亡形態(tài)學(xué)檢測方法。1光學(xué)顯微鏡和倒置顯微鏡2熒光顯微鏡和共聚焦激光掃描顯微鏡3透射電子顯微鏡觀察二、磷脂酰絲氨酸外翻分析(AnnexinV法)磷脂酰絲氨酸(Phosphatidylserine,PS)正常位于細(xì)胞膜的內(nèi)側(cè),但在細(xì)胞凋亡的早期,PS可從細(xì)胞膜的內(nèi)側(cè)翻轉(zhuǎn)到細(xì)胞膜的表面,暴露在細(xì)胞外環(huán)境中(圖3)。Annexin-V是一種分子量為35~36KD的Ca2+依賴性磷脂結(jié)合蛋白,能與P
提高細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率的方法2020/08/14
1.選擇合適的轉(zhuǎn)染試劑不同細(xì)胞系轉(zhuǎn)染效率通常不同,但細(xì)胞系的選擇通常是根據(jù)實驗的需要,因此在轉(zhuǎn)染實驗前應(yīng)根據(jù)實驗要求和細(xì)胞特性選擇適合的轉(zhuǎn)染試劑。每種轉(zhuǎn)染試劑都會提供一些已經(jīng)成功轉(zhuǎn)染的細(xì)胞株列表和文獻(xiàn),通過這些資料可選擇適合實驗設(shè)計的轉(zhuǎn)染試劑。當(dāng)然,適合的是高效、低毒、方便、廉價的轉(zhuǎn)染試劑。2.保持佳的細(xì)胞狀態(tài)一般低的細(xì)胞代數(shù)(3.選擇高效的轉(zhuǎn)染方法不同轉(zhuǎn)染試劑有不同的轉(zhuǎn)染方法,但大多大同小異。轉(zhuǎn)染時應(yīng)跟據(jù)具體轉(zhuǎn)染試劑推薦的方法,但也要注意,因不同實驗室培養(yǎng)的細(xì)胞性質(zhì)不同,質(zhì)粒定量差異,操作手法
動脈粥樣硬化模型2020/08/14
動脈粥樣硬化(atherosclerosis)是CVD常見和基本的病理基礎(chǔ)。動脈粥樣硬化的主要病理過程包括血管內(nèi)皮細(xì)胞的活化、單核細(xì)胞黏附并遷移到內(nèi)膜下、巨噬細(xì)胞吞噬氧化修飾的脂蛋白轉(zhuǎn)化為泡沫細(xì)胞、內(nèi)膜中膜增生,終形成粥樣斑塊或引起血栓堵塞血管,引起缺血性疾病。長期以來,一系列的實驗動物,如小鼠、大鼠、家兔、地鼠、鵪鶉、豬和猴子等,被應(yīng)用于動脈粥樣硬化的研究。根據(jù)來源,動脈粥樣硬化動物模型可分為自發(fā)性、誘發(fā)性和基因修飾三大類。一、自發(fā)性動脈粥樣硬化動物模型渡邊兔(Watanabeheritabl
抑郁癥應(yīng)激動物模型2020/04/20
(一)行為絕望(behavioraldespair)模型行為絕望模型具有簡單、快速、敏感等特點,常用于抗抑郁藥物的快速篩選。主要包括兩種動物模型。一是大鼠、小鼠強迫游泳實驗:大鼠、小鼠被迫在一局限的空間游泳,它們首先拼命地泳動試圖逃跑,隨后處于一種漂浮的不動狀態(tài),僅露出鼻孔維持呼吸,四肢偶爾劃動以保持身體不至于沉下去,這種狀態(tài)被稱為不動狀態(tài),實際是動物放棄逃脫的希望,屬于“行為絕望”。二是小鼠懸尾實驗:懸尾小鼠為克服不正常體位而掙扎活動,但活動一定時間后,出現(xiàn)間斷性不動,顯示“絕望”狀態(tài),多數(shù)抗
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