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2022
06-132022
06-01細(xì)胞克隆篩選系統(tǒng)的加藥時間和維持濃度的確定方法
細(xì)胞克隆篩選系統(tǒng)是新一代細(xì)胞克隆篩選和挑取技術(shù)，細(xì)胞克隆篩選系統(tǒng)能夠更少時間里，自動化篩選并挑取更高水平表達(dá)的細(xì)胞克隆，擁有5組熒光通道，可以同時使用3組，細(xì)胞克隆篩選系統(tǒng)避免有限稀釋，快速篩選挑取雜交瘤克隆，建立穩(wěn)定細(xì)胞株，干細(xì)胞及特殊表面標(biāo)記細(xì)胞挑取及昆蟲細(xì)胞篩選挑取。細(xì)胞克隆篩選系統(tǒng)的加藥時間和維持濃度的確定方法：1，由于基因轉(zhuǎn)染到細(xì)胞內(nèi)之后要一段時間才能表達(dá)出蛋白質(zhì)。所以篩選不能太早；但是也不能太晚，因?yàn)檗D(zhuǎn)染了外源基因的細(xì)胞代謝負(fù)荷較大，增值較慢，時間長了就會被沒有外源基因轉(zhuǎn)入的細(xì)胞所淹2022
06-01GSK：使用單一DNA結(jié)構(gòu)快速構(gòu)建穩(wěn)定的慢病毒載體生產(chǎn)細(xì)胞系
慢病毒載體(Lentiviralvectors,LVs)是以人類免疫缺陷型病毒（HIV）為基礎(chǔ)發(fā)展起來的基因治療載體，被廣泛應(yīng)用的慢病毒載體是基于雙鏈RNA病毒人類免疫缺陷I型病毒（HIV-1）[1]。HIV-1型慢病毒載體系統(tǒng)的建立，經(jīng)歷了一個逐步完善的過程，其生物安全性不斷提高。LVs對分裂細(xì)胞和非分裂細(xì)胞均具有感染能力，更加安全，并可以在體內(nèi)長期的表達(dá)。這一特性使LVs成為臨床研究的理想選擇，美國食品和藥物管理局(FDA)和歐洲藥物管理局(EMA)已經(jīng)批準(zhǔn)多個以慢病毒為基礎(chǔ)的基因療法。目前2022
05-272022
05-26基因與細(xì)胞治療領(lǐng)域的病毒載體生產(chǎn)用細(xì)胞株的開發(fā)
基因治療被認(rèn)為是許多嚴(yán)重的和危及生命的疾病有效的治療手段，得到越來越多人的關(guān)注。同時，基因治療的適應(yīng)癥正從罕見/極罕見疾病向更常見疾病發(fā)生轉(zhuǎn)變，患者數(shù)量和綜合療法越來越多。因而，大規(guī)模的基因治療病毒載體生產(chǎn)是行業(yè)的迫切需求。2020年，F(xiàn)DA更新了關(guān)于基因治療臨床試驗(yàn)申請(INDs)的化學(xué)、制造和控制指導(dǎo)原則，內(nèi)容包含穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株開發(fā)及細(xì)胞克隆性確證等。文件指出，細(xì)胞庫（Cellbank）的穩(wěn)定性及純度是一個需要考慮的重要方面。非單克隆來源的細(xì)胞群中，其細(xì)胞異質(zhì)性相對較高，產(chǎn)量低的細(xì)胞系往往與高產(chǎn)2022
05-19細(xì)胞拉伸培養(yǎng)儀使用時為什么要倒置培養(yǎng)？
細(xì)胞拉伸培養(yǎng)儀是指需要將培養(yǎng)物分割成小的部分，重新接種到另外的培養(yǎng)器皿（瓶）內(nèi)，再進(jìn)行培養(yǎng)的過程。對單層培養(yǎng)而言，80%匯合或剛匯合的細(xì)胞是較理想的傳代階段。原代細(xì)胞培養(yǎng)：與體內(nèi)原組織在形態(tài)結(jié)構(gòu)和功能活動上相似性大。由于培養(yǎng)的細(xì)胞剛剛從活體組織分離出來，故更接近于生物體內(nèi)的生活狀態(tài)。這一方法可為研究生物體細(xì)胞的生長、代謝、繁殖提供有力的手段。同時也為以后傳代培養(yǎng)創(chuàng)造條件。傳代細(xì)胞培養(yǎng)：當(dāng)原代培養(yǎng)成功以后，隨著培養(yǎng)時間的延長和細(xì)胞不斷分裂，一則細(xì)胞之間相互接觸而發(fā)生接觸性抑制，生長速度減慢甚至停止2022
05-19抗體藥生產(chǎn)用細(xì)胞株構(gòu)建和篩選策略
在抗體藥生產(chǎn)過程中細(xì)胞株開發(fā)及單克隆性確認(rèn)是非常關(guān)鍵的步驟。創(chuàng)建穩(wěn)定的用于生產(chǎn)的高產(chǎn)細(xì)胞株的步驟包括：宿主細(xì)胞株選擇、表達(dá)載體工程、轉(zhuǎn)染、克隆和細(xì)胞擴(kuò)增、以及各種篩選步驟，從而選擇細(xì)胞活力高、生長能力強(qiáng)，并且表達(dá)水平、以及表達(dá)的穩(wěn)定性、質(zhì)量情況都具有最高表現(xiàn)的單克隆細(xì)胞株。單細(xì)胞打印機(jī)提高篩選單克隆細(xì)胞效率Genentech公司在2018年提出，使用單細(xì)胞打印機(jī)（SinglecellPrinter，SCP）進(jìn)行單細(xì)胞分選，結(jié)合成像設(shè)備，可以準(zhǔn)確地識別單細(xì)胞，實(shí)現(xiàn)高效率的單克隆細(xì)胞篩選和單克隆細(xì)胞2022
05-162022
05-07超聲波轉(zhuǎn)染儀具有轉(zhuǎn)染效率高的優(yōu)點(diǎn)
轉(zhuǎn)染是將外源性基因?qū)爰?xì)胞內(nèi)的一種專門技術(shù)。隨著基因與蛋白功能研究的深入，轉(zhuǎn)染目前已成為實(shí)驗(yàn)室工作中經(jīng)常涉及的基本方法。常規(guī)轉(zhuǎn)染技術(shù)可分為兩大類,一類是瞬時轉(zhuǎn)染,一類是穩(wěn)定轉(zhuǎn)染（轉(zhuǎn)染）。轉(zhuǎn)染大致可分為物理介導(dǎo)、化學(xué)介導(dǎo)和生物介導(dǎo)三類途徑。電穿孔法、顯微注射和基因槍屬于通過物理方法將基因?qū)爰?xì)胞的范例；化學(xué)介導(dǎo)方法很多，如經(jīng)典的磷酸鈣共沉淀法、脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染方法、和多種陽離子物質(zhì)介導(dǎo)的技術(shù)；生物介導(dǎo)方法，有較為原始的原生質(zhì)體轉(zhuǎn)染，和現(xiàn)在比較多見的各種病毒介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染技術(shù)。超聲波轉(zhuǎn)染儀具有轉(zhuǎn)染效率高、細(xì)胞2022
04-26Sepragen純化系統(tǒng)的主要特點(diǎn)有哪些，現(xiàn)在知道還不晚
由于在自然界生命活動中起重要作用的蛋白質(zhì)在機(jī)體細(xì)胞內(nèi)的濃度比較低，并且存在于細(xì)胞的各個機(jī)構(gòu)中的蛋白質(zhì)幾乎都是以復(fù)雜的混合形式存在的。為了在不破壞蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)及上等結(jié)構(gòu)，和不影響其生理功能的情況下，把蛋白質(zhì)分離、純化出來，需要使用一些技術(shù)，如重組蛋白純化技術(shù)。疏水相互作用層析法是蛋白分離純化的一種方法。Sepragen純化系統(tǒng)是專門用來分離蛋白質(zhì)、多肽及多核苷酸的系統(tǒng)，可應(yīng)用于蛋白、有機(jī)化合物的分離純化，定量測定蛋白的含量和和確定蛋白的分子量。具有快速、高分辨率等特性，而且還具有柱容量大、回收2022
04-24細(xì)胞拉伸培養(yǎng)儀目前的主流方向上是應(yīng)用在醫(yī)療領(lǐng)域
細(xì)胞拉伸培養(yǎng)儀目前的主流方向上是應(yīng)用在醫(yī)療領(lǐng)域，大型醫(yī)療機(jī)構(gòu)每天有上千個樣本進(jìn)行檢測，因此生化分析儀的試劑包正常情況下也是500T起，并且每個分析儀都會有自己特殊條碼系統(tǒng)，耗材之間不能通用，由于條碼系統(tǒng)的存在，耗材很容易實(shí)現(xiàn)壽命控制（試劑包從掃碼之日開始計時，一定時間之后試劑包自動失效，要求客戶重新更換試劑包，否則儀器無法檢測），臨床生化分析儀的盈利模式主要依靠耗材。細(xì)胞拉伸培養(yǎng)儀一般是有保溫器、反應(yīng)池或反應(yīng)管道、打印機(jī)、樣品器、取樣裝置、檢測器、功能監(jiān)測器、微處理器等幾個部分組成的：1、保溫器2022
04-192022
04-15一次性生物反應(yīng)器的生產(chǎn)工藝和開發(fā)設(shè)計
一次性生物反應(yīng)器在過去幾年中已經(jīng)在現(xiàn)代生物制藥工藝中逐步得到應(yīng)用。因?yàn)樵摷夹g(shù)能夠增加靈活性，降低投資及操作成本。此外，一次性技術(shù)還可提升產(chǎn)量，縮短藥物上市時間，如今對于哺乳動物細(xì)胞和昆蟲細(xì)胞培養(yǎng)而言，市場上已經(jīng)有許多一次性生物反應(yīng)器可供選擇，但可供微生物培養(yǎng)的一次性解決方案仍是十分有限。一般情況下，通常在臺式攪拌型生物反應(yīng)器中進(jìn)行工藝的建立和優(yōu)化。在開發(fā)一個穩(wěn)健的細(xì)胞培養(yǎng)工藝過程中，人們面臨的一個挑戰(zhàn)便是如何便捷地放大至生產(chǎn)規(guī)模。當(dāng)使用和已有充分理解的攪拌式原理不同的生物反應(yīng)器時，該放大過程則顯2022
03-242022
03-18提升高產(chǎn)細(xì)胞株篩選效率，助力基因治療、抗體藥物等工藝開發(fā)
目前全球生物醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)發(fā)展處于快速上升期，后疫情時代的醫(yī)藥健康行業(yè)，迎來新一輪的變革與機(jī)遇。其中，抗體藥物、細(xì)胞與基因治療藥物被認(rèn)為是未來醫(yī)藥領(lǐng)域發(fā)展的主力軍。無論是抗體藥物的生產(chǎn)還是基于病毒載體的基因治療藥物的制備，都涉及單克隆細(xì)胞株的篩選。在工藝開發(fā)過程中，研發(fā)人員需要分離單細(xì)胞克隆，篩選出高產(chǎn)且穩(wěn)定的細(xì)胞株來建立種子細(xì)胞庫和工作細(xì)胞庫，用于后續(xù)的病毒載體或抗體等藥物的生產(chǎn)。2020年，美國食品藥品監(jiān)督管理局（FDA）更新了關(guān)于基因治療臨床試驗(yàn)申請(INDs)的化學(xué)、制造和控制指導(dǎo)原則（Che2022
03-172022
03-10過程參數(shù)分析儀的這些知識值得我們學(xué)習(xí)
細(xì)胞培養(yǎng)工程是生物工程的一個重要組成部分，工業(yè)生產(chǎn)上通過“細(xì)胞培養(yǎng)”來加工或制作產(chǎn)品，其對應(yīng)的加工或制作工藝被稱為“細(xì)胞培養(yǎng)工藝”。細(xì)胞培養(yǎng)工藝的過程控制有點(diǎn)像走鋼絲，要在短時間內(nèi)，通過細(xì)胞培養(yǎng)的方法獲取更高的產(chǎn)量，則必須謹(jǐn)慎且連續(xù)地控制工藝過程中的參數(shù)。過程參數(shù)分析儀主要用于細(xì)胞亞群分析、細(xì)胞凋亡和周期分析、細(xì)胞表面抗原的免疫學(xué)分析、細(xì)胞因子多重分析、活性氧相關(guān)檢測、細(xì)胞鈣流、磷酸化等，用于測定血液樣本、體液樣本、培養(yǎng)細(xì)胞樣本、組織樣本等。還可以檢測復(fù)雜的細(xì)胞學(xué)過程并追蹤單細(xì)胞水平下正常狀態(tài)和2022
03-03細(xì)胞制備系統(tǒng)是傳統(tǒng)GMP的理想升級替代品
細(xì)胞制備系統(tǒng)是傳統(tǒng)GMP的理想升級替代品?？蓪?shí)現(xiàn)高精度的溫度、氣體（CO2、O2）濃度控制及壓力控制，結(jié)合高效NEPA過濾系統(tǒng)、消毒系統(tǒng)、傳遞隔離系統(tǒng)，達(dá)到GMP-*的潔凈度和生物安全性要求，可按您的細(xì)胞生產(chǎn)工藝流程定制，從而更好地符合GMP細(xì)胞制品生產(chǎn)要求。細(xì)胞制備系統(tǒng)部分結(jié)構(gòu)介紹：1.培養(yǎng)箱細(xì)胞培養(yǎng)的核心倉室，采用一體式圓弧設(shè)計，清潔*；加熱技術(shù)，確保溫度控制的快速、均一、穩(wěn)定氣體（CO2、O2)、溫度、濕度、壓力等全參數(shù)精密控制，便于模擬適合細(xì)胞生長的體內(nèi)生理環(huán)境.培養(yǎng)箱內(nèi)部空間為方形設(shè)計2022
02-15簡化CRISPR 基因編輯的干細(xì)胞的工作流程，提高單克隆效率
人誘導(dǎo)多能干細(xì)胞iPSC被廣泛用于疾病建模、藥物開發(fā)和疾病的細(xì)胞治療，隨著基因編輯技術(shù)的進(jìn)一步發(fā)展，對疾病誘導(dǎo)多能干細(xì)胞進(jìn)行基因編輯，校正致病基因的突變并用于細(xì)胞治療正成為轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)和再生醫(yī)學(xué)研究的熱點(diǎn)。CRISPR介導(dǎo)的基因編輯為研究人員提供了一種更快、更有效的方法來編輯細(xì)胞中感興趣的關(guān)鍵基因。雖然比傳統(tǒng)方法更有效，但基因組編輯過程通常會損害細(xì)胞活力，因此從編輯后的單細(xì)胞生長成到單克隆細(xì)胞團(tuán)是一個困難的過程。CRISPR工作流程的一個主要瓶頸是單細(xì)胞克隆。細(xì)胞轉(zhuǎn)染后，產(chǎn)生的細(xì)胞群是異質(zhì)的，具有不2022
01-21高壓細(xì)胞破碎儀破碎速度快，胞內(nèi)產(chǎn)物損失小
高壓細(xì)胞破碎儀有一個或數(shù)個往復(fù)運(yùn)動的柱塞，物料在柱塞作用下進(jìn)入可調(diào)節(jié)壓力大小的閥組中，經(jīng)過特定寬度的限流縫隙（工作區(qū)）后，瞬間失壓的物料以*的流速（1000-1500米/秒）噴出，碰撞在碰撞閥組件之一的沖擊環(huán)上，產(chǎn)生三種效應(yīng)：空穴效應(yīng)、撞擊效應(yīng)、剪切效應(yīng)。經(jīng)過這三種效應(yīng)處理過后，物料粒徑可均勻細(xì)化到100nm以下，破碎率大于95%！高壓細(xì)胞破碎儀破碎細(xì)胞速度快，胞內(nèi)產(chǎn)物損失小，設(shè)備容易放大，受到生物化工學(xué)術(shù)界的重視。高壓破碎法所用設(shè)備是高壓細(xì)胞破碎儀，它由高壓泵和細(xì)胞破碎閥組成，從高壓室（兒十到掃一掃訪問手機(jī)商鋪
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