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上海佰利萊生物科技有限公司
初級(jí)會(huì)員 | 第4年
生物芯片在藥物分析中的應(yīng)用2022/12/07
生物芯片技術(shù)是20世紀(jì)90年代初伴隨著人類基因組計(jì)劃的實(shí)施而產(chǎn)生的一門新技術(shù),已成為、大規(guī)模獲取相關(guān)信息的重要手段。它主要通過(guò)微加工技術(shù)和微電子技術(shù),將成千上萬(wàn)與生命相關(guān)的信息集成在一塊厘米見(jiàn)方的硅、玻璃、塑料等材料制成的芯片上,以達(dá)到對(duì)基因、配體、細(xì)胞、蛋白質(zhì)、抗原以及其他生物組分準(zhǔn)確、快速地分析和檢測(cè)。目前,生物芯片技術(shù)被廣泛研究應(yīng)用于基因序列分析、疾病診斷、藥物研究、微生物檢測(cè)、農(nóng)林業(yè)生產(chǎn)、食品、環(huán)境保護(hù)和檢測(cè)等領(lǐng)域,現(xiàn)簡(jiǎn)單介紹其在藥物分析中的應(yīng)用。生物芯片在藥物分析中的應(yīng)用主要是指采用毛
佰利萊告訴你常用的培養(yǎng)基耗材和細(xì)胞接種量2022/12/02
我們常用的細(xì)胞培養(yǎng)容器有T25培養(yǎng)瓶、10cm培養(yǎng)皿、多孔板等,尤其是是多孔板,需要加多少培養(yǎng)基,很多客戶不太確定,下面佰利萊生物為大家整理了常見(jiàn)的培養(yǎng)容器的加液體積和建議接種量:耗材名稱規(guī)格培養(yǎng)面積(cm^2)加液體積(ml)建議接種量(×10^6)T25培養(yǎng)瓶底面積25cm^22551.25T75培養(yǎng)瓶底面積75cm^27515~303.75T175培養(yǎng)瓶底面積175cm^217535~408.756cm培養(yǎng)皿直徑6cm21.251.0610cm培養(yǎng)皿直徑10cm60.88~103.0415
佰利萊生物細(xì)胞傳代操作步驟2022/11/28
一、貼壁細(xì)胞傳代(以一個(gè)T25瓶為例)1、吸出原培養(yǎng)液;2、加入2ml左右PBS,輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶潤(rùn)洗細(xì)胞,吸出PBS丟棄;3、加入1ml左右胰酶,輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶使之浸潤(rùn)所有細(xì)胞,放入培養(yǎng)箱消化;4、消化時(shí)間跟據(jù)細(xì)胞特性有所不同,顯微鏡下看到細(xì)胞塊中間的細(xì)胞顯著分離變圓,側(cè)立培養(yǎng)瓶細(xì)胞可以滑落時(shí)可終止消化,全程不要拍打培養(yǎng)瓶;5、加入3ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,奏樂(lè)細(xì)胞使之脫落并在液體里反復(fù)奏樂(lè)使細(xì)胞,使之盡量呈單顆細(xì)胞的懸浮液,這時(shí)可以在顯微鏡看下;6、收集細(xì)胞懸液離心,1200rpm(約25
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法2022/11/25
原代細(xì)胞最jie近和最能反映體內(nèi)生長(zhǎng)特性,適宜用于藥物敏感性試驗(yàn)、細(xì)胞分化等實(shí)驗(yàn)研究。原代細(xì)胞的培養(yǎng),也叫初代培養(yǎng),是從供體取得組織細(xì)胞在體外進(jìn)行的首ci培養(yǎng),是建立細(xì)胞系的第一步,是一項(xiàng)基本技術(shù)。原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:①組織塊培養(yǎng)法組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。②消化培養(yǎng)法③懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞
原代細(xì)胞的取材和分離方法2022/11/22
將動(dòng)物機(jī)體的各種組織從機(jī)體中取出,經(jīng)各種酶(常用胰蛋白酶)、螯合劑(常用EDTA)或機(jī)械方法處理,分散成單細(xì)胞,置合適的培養(yǎng)基中培養(yǎng),使細(xì)胞得以生存、生長(zhǎng)和繁殖,這一過(guò)程稱原代培養(yǎng)。原代細(xì)胞培養(yǎng)的步驟一般是:取材→分離→培養(yǎng)和維持,今天我們重點(diǎn)介紹原代細(xì)胞的取材和分離方法。一、取材人和動(dòng)物細(xì)胞的取材是原代細(xì)胞培養(yǎng)成功的首要條件,直接影響細(xì)胞的體外培養(yǎng)。取材的基本要求:①取材要注意新鮮和保鮮②應(yīng)嚴(yán)格無(wú)菌③防止機(jī)械損傷④去除無(wú)用組織和避免干燥⑤應(yīng)注意組織類型、分化程度、年齡等⑥作好記錄各類組織的取材
原代細(xì)胞的復(fù)蘇步驟2022/11/21
細(xì)胞一般儲(chǔ)存在液氮中,溫度達(dá)-196℃,理論上儲(chǔ)存時(shí)間是無(wú)限的。細(xì)胞凍存及復(fù)蘇的基本原則是慢凍快融,實(shí)驗(yàn)證明這樣可以最大限度的保存細(xì)胞活力。細(xì)胞復(fù)蘇就是要把原本冷凍保存(凍存)著的細(xì)胞恢復(fù)到一般的生長(zhǎng)狀態(tài),今天我們來(lái)看看原代細(xì)胞的復(fù)蘇步驟。一、檢查收到細(xì)胞株包裹時(shí),請(qǐng)檢查細(xì)胞株冷凍管是否有解凍情形,若有請(qǐng)立即處理告訴寄方。細(xì)胞株請(qǐng)盡速開(kāi)始培養(yǎng),或立即冷凍保存(置于–70℃,隔夜后,移到液氮罐保存)。二、冷凍細(xì)胞解凍方法一:1、準(zhǔn)備好37度水浴鍋,預(yù)熱至37度;2、準(zhǔn)備好T25培養(yǎng)瓶,加入10ml
動(dòng)物組織樣本的前處理2022/11/18
一、勻漿介質(zhì)的制備:一般采用pH7.4,0.01mol/LTris-HCl,1mmol/LEDTA-2Na,0.01mol/L蔗糖,0.8%氯化鈉溶液或直接用0.86%的生理鹽水作為勻漿介質(zhì)。二、組織勻漿的制備1、取組織塊(0.1g~0.2g)最少可到2~5mg在冰冷的生理鹽水中漂洗,除去血液,濾紙拭干,準(zhǔn)確稱重,放入5ml的勻漿管中。2、按重量(g):體積(ml)=1:9的比例加入9倍體積的勻漿介質(zhì)(pH7.4,0.01mol/LTris-HCl,1mmol/LEDTA-2Na,0.01mol
原代細(xì)胞傳代方法哪有幾種?2022/11/17
原代細(xì)胞是指從機(jī)體的組織(如人組織、小鼠組織、大鼠組織和兔組織等)經(jīng)蛋白酶或其它的方法獲得單個(gè)細(xì)胞并在體外進(jìn)行模擬機(jī)體培養(yǎng)的細(xì)胞,稱為原代細(xì)胞。一般認(rèn)為,培養(yǎng)的原代的第1代細(xì)胞和傳代到第10代以內(nèi)的細(xì)胞統(tǒng)稱為原代細(xì)胞培養(yǎng)。在人工條件下使其原代細(xì)胞生存、生長(zhǎng)、繁殖和傳代,進(jìn)行細(xì)胞生命過(guò)程、細(xì)胞癌變、細(xì)胞工程等問(wèn)題的研究。那么關(guān)于原代細(xì)胞的傳代培養(yǎng),我們應(yīng)該怎么做呢?一般有以下兩種方法:一、貼壁細(xì)胞的消化法傳代1、吸除或倒掉瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液。2、加入1ml左右消化液(胰蛋白酶或與EDTA混合液)輕輕搖動(dòng)
原代細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中的常見(jiàn)問(wèn)題2022/11/16
原代細(xì)胞與細(xì)胞系有什么區(qū)別?根據(jù)傳統(tǒng)定義,自組織第一次收獲和接種的細(xì)胞被稱為原代細(xì)胞[Freshney,R.I.(1987).CultureofAnimalCells.AManualofBasicTechnique.(NewYork,AlanR.Liss,Inc.)].這類細(xì)胞直接從組織分離,生命周期有限,經(jīng)數(shù)次傳代后會(huì)逐漸停止生長(zhǎng)。原代細(xì)胞在有限的生命周期內(nèi)需掌握好細(xì)胞的最大生長(zhǎng)空間,以保持細(xì)胞群中基因型和表型的一致性。細(xì)胞系是不斷生長(zhǎng)、分化的細(xì)胞群,因其經(jīng)過(guò)遺傳改造,致使其具有無(wú)限增長(zhǎng)的潛能
人與動(dòng)物及各類動(dòng)物間藥物劑量的換算方法2022/11/14
1.人與動(dòng)物用藥量換算人與動(dòng)物對(duì)同一藥物的耐受性是相差很大的。一般說(shuō)來(lái),動(dòng)物的耐受性要比人大,也就是單位體重的用藥理動(dòng)物比人要大。人的各種藥物的用量在很多書上可以查得,但動(dòng)物用藥量可查的書較少,而且動(dòng)物用的藥物種類遠(yuǎn)不如人用的那么多。因此,必須將人的用藥量換算成動(dòng)物的用藥量。一般可按下列比例換算:人用藥量為1,小白鼠、大白鼠為25-50,兔、豚鼠為15-20,狗、貓為5-10。此外,可以采用人與動(dòng)物的體表面積計(jì)算法來(lái)?yè)Q算:(1)人體體表面積計(jì)算法計(jì)算我國(guó)人的體表面積,一般認(rèn)為許文生氏公式(中國(guó)生
上海佰利萊生物ELISA試劑盒規(guī)范曲線的制作關(guān)鍵簡(jiǎn)述2022/11/11
很多試劑檢查都涉及到規(guī)范曲線的疑問(wèn),ELISA試劑盒規(guī)范曲線做的好與壞會(huì)直接影響到試驗(yàn)的成果,乃至關(guān)系到試驗(yàn)的成敗,那么究竟怎么繪制或制造規(guī)范曲線呢?一、做規(guī)范曲線樣品檢查時(shí)有幾個(gè)疑問(wèn)需要注意1、樣品的濃度等目標(biāo)是依據(jù)規(guī)范曲線計(jì)算出來(lái)的,所以首先要把做規(guī)范曲線看作是比做正式試驗(yàn)還要主要的一件事,不然后邊的試驗(yàn)成果無(wú)從談起。2、設(shè)置規(guī)范曲線樣品的規(guī)范濃度規(guī)模要有一個(gè)對(duì)比大的跨度,而且要能包括你所要檢查試驗(yàn)樣品的濃度,即樣品的濃度要在規(guī)范曲線濃度規(guī)模以內(nèi),人ELISA試劑盒包括上限和下限。而對(duì)于呈S
PCR技術(shù)原理、實(shí)驗(yàn)步驟和應(yīng)用2022/11/08
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?.掌握聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)的原理。2.掌握移液槍和PCR儀的基本操作技術(shù)。二、實(shí)驗(yàn)原理PCR技術(shù),即聚合酶鏈反應(yīng)(polymerasechainreaction,PCR)是由美國(guó)PECetus公司的KaryMullis在1983年(1993年獲諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng))建立的。這項(xiàng)技術(shù)可在試管內(nèi)的經(jīng)數(shù)小時(shí)反應(yīng)就將特定的DNA片段擴(kuò)增數(shù)百萬(wàn)倍,這種迅速獲取大量單一核酸片段的技術(shù)在分子生物學(xué)研究中具有舉足輕重的意義,極大地推動(dòng)了生命科學(xué)的研究進(jìn)展。它不僅是DNA分析zui常用的技術(shù),而且在DNA重組與表
蛋白質(zhì)免疫印跡(Western Blot,WB )2022/11/02
實(shí)驗(yàn)方法原理Western免疫印跡,是將蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移到膜上,然后利用抗體進(jìn)行檢測(cè)的方法。對(duì)已知表達(dá)蛋白,可用相應(yīng)抗體作為一抗進(jìn)行檢測(cè),對(duì)新基因的表達(dá)產(chǎn)物,可通過(guò)融合部分的抗體檢測(cè)。與Southern或Northern雜交方法類似,但WesternBlot采用的是聚丙烯酰胺凝膠電泳,被檢測(cè)物是蛋白質(zhì),探針是抗體,顯色用標(biāo)記的二抗。經(jīng)過(guò)PAGE分離的蛋白質(zhì)樣品,轉(zhuǎn)移到固相載體(例如硝酸纖維素薄膜)上,固相載體以非共價(jià)鍵形式吸附蛋白質(zhì),且能保持電泳分離的多肽類型及其生物學(xué)活性不變。以固相載體上的蛋白質(zhì)或
淺述人elisa試劑盒洗板方法2022/11/02
在用人elisa試劑盒的時(shí)候,用于檢測(cè)人原鈣黏素的時(shí)候,由于抗原抗體的結(jié)合位點(diǎn)的關(guān)系,導(dǎo)致在清洗的時(shí)候不是很方便,如果清洗的不好又會(huì)造成結(jié)果的誤差。所以以下介紹兩種比較好用也方便的方法清洗人elisa試劑盒:1.手工清洗:先吸掉酶標(biāo)板中的液體,在試驗(yàn)臺(tái)上事先鋪好紙然后用力向下拍打酶標(biāo)板,那么里面的液體差不多就會(huì)拍出,再注入一些緩沖液到孔內(nèi),浸泡,這樣反復(fù)幾次直至洗干凈、2.自動(dòng)清洗:如果有自動(dòng)清洗的設(shè)備的話,那么就直接將檢測(cè)樣本、血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)液、體液等都放入里面進(jìn)行清洗就好。雖然清洗只是
上海佰利萊生物講述植物生長(zhǎng)素試劑盒的操作步驟2022/10/31
植物生長(zhǎng)素試劑盒的操作步驟1.使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時(shí)加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。2.根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來(lái)定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。3.加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時(shí)。4.甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍
上海佰利萊淺談如何區(qū)分雙抗夾心法、間接法和競(jìng)爭(zhēng)法2022/10/18
雙抗體夾心法測(cè)抗原:雙抗體夾心法是檢測(cè)抗原常用的方法,適用于測(cè)定二價(jià)或二價(jià)以上的大分子抗原,但不適用于測(cè)定半抗原及小分子單價(jià)抗原,因其不能形成兩位點(diǎn)夾心。雙抗原夾心法測(cè)抗體:反應(yīng)模式與雙抗體夾心法類似。用特異性抗原進(jìn)行包被和制備酶結(jié)合物,以檢測(cè)相應(yīng)的抗體。與間接法測(cè)抗體的不同之處為以酶標(biāo)抗原代替酶標(biāo)抗抗體。此法中受檢標(biāo)本不需稀釋,可直接用于測(cè)定,因此其敏感度相對(duì)高于間接法。乙肝標(biāo)志物中抗HBs的檢測(cè)常采用本法。本法關(guān)鍵在于酶標(biāo)抗原的制備,應(yīng)根據(jù)抗原結(jié)構(gòu)的不同,尋找合適的標(biāo)記方法。間接法:是檢測(cè)抗
RAW264.7細(xì)胞培養(yǎng)說(shuō)明書2022/10/11
細(xì)胞描述此細(xì)胞株源自Abelson鼠科白血病病毒誘導(dǎo)的腫瘤。sIg-,Ia-抗原、Thy-1.2表面抗原陰性。此細(xì)胞株不分泌可檢測(cè)到的病毒顆粒,XC斑點(diǎn)形成試驗(yàn)陰性。可以胞飲中性紅并吞噬乳膠顆粒與酵母聚糖。可以抗體依賴性地分解綿羊紅血球與腫瘤靶細(xì)胞。LPS或PPD處理2天可誘導(dǎo)分解紅血球但對(duì)腫瘤靶細(xì)胞無(wú)作用。細(xì)胞特性1)來(lái)源:鼠科白血病病毒誘導(dǎo)的腫瘤;單核細(xì)胞;巨噬細(xì)胞2)形態(tài):不規(guī)則圓形,紡錘狀,貼壁細(xì)胞,少量懸浮。3)含量:1x106細(xì)胞數(shù)4)規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝5)用途:僅供
上海佰利萊生物ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)前的嚴(yán)格要求2022/10/08
我們公司為全面回饋新老客戶,所有ELISA試劑盒均*銷售,我司專業(yè)提供各種種屬,各種系列ELISA試劑盒、通蔚免疫檢測(cè)試劑盒,貨期短,質(zhì)量?jī)?yōu),配備專業(yè)的技術(shù)人員,和完善的售后服務(wù)!按試劑盒說(shuō)明書的要求準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)中需用的試劑。ELISA中用的蒸餾水或去離子水,包括用于洗滌的,應(yīng)為新鮮的和高質(zhì)量的。自配的緩沖液應(yīng)用pH計(jì)測(cè)量較正。ELISA試劑盒從冰箱中取出的試驗(yàn)用試劑應(yīng)待溫度與室溫平衡后使用。試劑盒中本次試驗(yàn)不需用的部分應(yīng)及時(shí)放回冰箱保存。ELISA試劑盒的配制:對(duì)于每種細(xì)胞因子應(yīng)仔細(xì)閱讀說(shuō)明書,注
植物(Plant)蓖麻毒素(Ricin)ELISA檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書2022/09/27
檢測(cè)原理試劑盒采用雙抗一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被蓖麻毒素抗原的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體,經(jīng)過(guò)溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的蓖麻毒素(Ricin)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),計(jì)算樣品濃度。樣品收集、處理及保存方法1.樣本不能含疊氮鈉(NaN3),因?yàn)榀B氮鈉(NaN3)是辣根過(guò)氧化物酶(HRP)的抑制劑。2.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)
上海佰利萊生物ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)的主要優(yōu)勢(shì)是準(zhǔn)確度2022/09/19
ELISA試劑盒在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,如確是是產(chǎn)品本身質(zhì)量問(wèn)題,請(qǐng)?jiān)?0天內(nèi)以書面形式提出,并提供詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)資料;有關(guān)產(chǎn)品質(zhì)量問(wèn)題投訴的解決僅限于產(chǎn)品本身,對(duì)其間接的影響,本公司不予承擔(dān)!準(zhǔn)確度好是ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)的主要優(yōu)勢(shì)之一,那么如何知道elisa試劑盒的準(zhǔn)確度是多少呢?當(dāng)Elisa試劑盒同一樣本達(dá)一定次數(shù)后所得的一組數(shù)據(jù),其中靠近均值(X)的±1SD范圍內(nèi)的數(shù)據(jù),占該組數(shù)據(jù)的68%,在X±2SD范圍內(nèi)分布的數(shù)據(jù)占總體的95%,在X±3SD范圍內(nèi)分布的數(shù)據(jù)占總體的99%。當(dāng)我們要求檢驗(yàn)結(jié)果在X±
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