BY-1250 9L/lacZ大鼠膠質(zhì)肉瘤細(xì)胞系
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- 公司名稱 上海乾思生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號(hào) BY-1250
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- 更新時(shí)間 2025/7/23 15:38:19
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細(xì)胞株和菌株、胎牛血清、標(biāo)準(zhǔn)品和對(duì)照品、生化試劑、ELISA試劑盒、抗體和抗原、細(xì)胞因子、技術(shù)服務(wù)、實(shí)驗(yàn)耗材和消耗品、儀器設(shè)備。
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9L/lacZ大鼠膠質(zhì)肉瘤細(xì)胞系
9L/lacZ大鼠膠質(zhì)肉瘤細(xì)胞系作為穩(wěn)定表達(dá) lacZ 基因的大鼠腦腫瘤細(xì)胞模型，因兼具膠質(zhì)肉瘤的惡性生物學(xué)特性與可追蹤的報(bào)告基因功能，在腦腫瘤侵襲機(jī)制、基因治療及藥物遞送研究中具有du特jia值，成為探究中樞神經(jīng)系統(tǒng)惡性腫瘤的重要實(shí)驗(yàn)工具。
細(xì)胞特性與來(lái)源背景：該細(xì)胞系源自 9L 大鼠膠質(zhì)肉瘤細(xì)胞經(jīng) lacZ 基因穩(wěn)定轉(zhuǎn)染構(gòu)建，通過(guò) G418 篩選獲得單克隆細(xì)胞株。細(xì)胞形態(tài)呈多形性，主要為梭形和星形，胞體直徑約 15-30μm，胞質(zhì)豐富，可見(jiàn)嗜酸性顆粒，約 12% 細(xì)胞呈現(xiàn)多核現(xiàn)象，細(xì)胞核大而畸形，核質(zhì)比顯著增高，核仁明顯。生長(zhǎng)方式為貼壁生長(zhǎng)，部分細(xì)胞呈懸浮狀態(tài)，無(wú)接觸抑制，傳代后 24 小時(shí)貼壁率達(dá) 88%。核心參數(shù)表現(xiàn)出重組細(xì)胞特征：倍增時(shí)間約 30 小時(shí)，連續(xù)傳代 50 次后染色體核型不穩(wěn)定（染色體數(shù)約 54-58 條）；膠質(zhì)細(xì)胞標(biāo)志物膠質(zhì)纖維酸性蛋白（GFAP）、波形蛋白（Vimentin）免疫熒光陽(yáng)性率分別為 91% 和 96%，lacZ 基因表達(dá)穩(wěn)定，X-gal 染色陽(yáng)性率達(dá) 98%；具有ji強(qiáng)的侵襲能力，Transwell 實(shí)驗(yàn)中穿膜細(xì)胞數(shù)是正常膠質(zhì)細(xì)胞的 5.3 倍；無(wú)微生物污染，細(xì)胞純度達(dá) 97%，保障實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性。
科研應(yīng)用價(jià)值：在腦腫瘤侵襲機(jī)制研究中，9L/lacZ 細(xì)胞經(jīng)表皮生長(zhǎng)因子（EGF）刺激后，基質(zhì)金屬蛋白酶 - 2（MMP-2）活性增加 4.8 倍，侵襲能力提升 3.6 倍，結(jié)合 lacZ 基因的可視化追蹤，可清晰觀察到細(xì)胞在腦切片中的遷移路徑，為解析膠質(zhì)肉瘤的腦內(nèi)侵襲模式提供理想模型。
基因治療研究方面，該細(xì)胞作為報(bào)告基因模型，在腺相關(guān)病毒（AAV）介導(dǎo)的基因遞送實(shí)驗(yàn)中，lacZ 表達(dá)量增加 6.2 倍，轉(zhuǎn)染效率達(dá) 75%，可直觀評(píng)估基因治療載體的靶向性和效率。在藥物篩選領(lǐng)域，該細(xì)胞對(duì)替mo唑胺處理敏感，24 小時(shí)后細(xì)胞活力下降 45%，β- 半乳糖苷酶活性與細(xì)胞存活狀態(tài)呈線性相關(guān)，可通過(guò)比色法快速評(píng)估藥物療效，篩選效率提升 40%。
此外，將該細(xì)胞立體定向接種于大鼠腦內(nèi)，7 天后形成可通過(guò) X-gal 染色定位的腫瘤灶，21 天后腫瘤體積達(dá) 0.8cm3，成瘤率 100%，且腫瘤侵襲范圍與 lacZ 陽(yáng)性區(qū)域高度一致，為體內(nèi)評(píng)估抗腫瘤藥物的穿透性和靶向性提供可靠模型。
培養(yǎng)與保存規(guī)范：推薦使用含 10% 胎牛血清的 F-12K 培養(yǎng)基，添加 400μg/ml G418、2mM 谷an酰胺及 1% 抗生素混合液，培養(yǎng)環(huán)境為 37℃、5% CO?飽和濕度培養(yǎng)箱。培養(yǎng)基需每 1-2 天更換一次，維持 G418 選擇壓力以確保 lacZ 基因穩(wěn)定表達(dá)。傳代時(shí)，采用細(xì)胞刮除法收集貼壁細(xì)胞，輕柔吹打制成單細(xì)胞懸液，傳代比例 1:4-1:6，每 2-3 天傳代一次，避免細(xì)胞聚團(tuán)影響活性。
凍存液配方為培養(yǎng)基 + 10% DMSO+20% 胎牛血清，細(xì)胞濃度調(diào)整為 8×10?個(gè) /ml，經(jīng)程序降溫（-20℃1 小時(shí)→-80℃過(guò)夜→液氮保存）后，復(fù)蘇存活率達(dá) 90% 以上，2 代內(nèi)可恢復(fù) lacZ 基因的穩(wěn)定表達(dá)。運(yùn)輸采用 T-25 培養(yǎng)瓶活細(xì)胞運(yùn)輸，收到細(xì)胞后需立即更換含 G418 的新鮮培養(yǎng)基，靜置培養(yǎng) 24 小時(shí)后觀察細(xì)胞狀態(tài)，X-gal 染色驗(yàn)證 lacZ 表達(dá)正常后方可進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。該細(xì)胞系僅限科研使用，操作需符合生物安全二級(jí)防護(hù)要求。
9L/lacZ 大鼠膠質(zhì)肉瘤細(xì)胞系以其穩(wěn)定的報(bào)告基因表達(dá)、典型的膠質(zhì)肉瘤惡性表型及高效的可追蹤特性，在腦腫瘤研究與基因治療開(kāi)發(fā)中發(fā)揮著重要作用，為揭示腦腫瘤的侵襲機(jī)制和評(píng)估新型治療策略提供了可靠的可視化研究平臺(tái)。
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