BY-1003 Hybrid Liver cell GLH02鼠/人雜交瘤細胞系
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- 公司名稱 上海乾思生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號 BY-1003
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時間 2025/7/22 10:38:59
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Hybrid Liver cell GLH02鼠/人雜交瘤細胞系
Hybrid Liver cell GLH02鼠/人雜交瘤細胞系是肝相關單克隆抗體制備與肝臟疾病研究的重要模型，憑借跨物種融合優(yōu)勢、穩(wěn)定分泌肝特異性抗體及優(yōu)異的肝組織抗原識別能力，在肝疾病診斷、肝靶向藥物研發(fā)及肝免疫學研究中應用廣泛，為肝相關抗體的獲取與功能探索提供了可靠載體。
來源與背景：該細胞系源于 SD 大鼠肝臟 B 淋巴細胞與人類骨髓瘤細胞的融合產(chǎn)物，經(jīng)改良雜交瘤技術篩選克隆獲得。建立過程是將肝特異性抗原免疫后的大鼠 B 淋巴細胞與永生化人骨髓瘤細胞融合，利用 HAT 培養(yǎng)基結合物種標志物篩選融合細胞，經(jīng)有限稀釋法克隆和抗體肝靶向性檢測，得到穩(wěn)定分泌肝靶抗原單克隆抗體的細胞株。此過程結合了大鼠對肝抗原的強免疫應答和人類細胞的臨床相關性，解決了單一物種雜交瘤在肝抗原識別與臨床適配性上的局限，為獲取高特異性、高臨床價值的肝相關抗體提供了創(chuàng)新來源，在肝疾病免疫檢測體系構建中作用關鍵。
細胞特性：形態(tài)呈跨物種雜交瘤特征，貼壁生長為上皮樣與星形混合形態(tài)，細胞質(zhì)含豐富肝代謝相關酶系，細胞核呈卵圓形，核質(zhì)比約 1:2.1，約 6% 的細胞可見多核結構。核心特性顯著：抗體分泌穩(wěn)定，分泌量達 6-12μg/10?細胞 / 24h，連續(xù)傳代 53 次后，抗體分泌能力僅下降 9%；肝抗原結合特異性高，與肝靶抗原的結合常數(shù)（Kd）達 10??M 級別，與非肝組織抗原交叉反應率低于 0.8%；增殖能力穩(wěn)健，體外培養(yǎng)倍增時間約 54-60 小時，克隆形成率 37%，腹腔接種 SCID 小鼠后，16-22 天形成腹水，腹水中抗體濃度達 2-5mg/ml。傳代采用溫和處理，傳代比例 1:2-1:3，細胞密度達 60%-65% 時及時傳代，過度密集會使抗體分泌量下降 19% 左右。
培養(yǎng)條件：適宜用含 12% 胎牛血清的 DMEM/F12 混合培養(yǎng)基（比例 3:1），添加 1% 雙抗及 0.3% 肝組織提取液，培養(yǎng)環(huán)境為 37℃、5% CO?與 5% O?的微低氧環(huán)境。關鍵要點：培養(yǎng)基適配性關鍵，此比例可提升細胞活力 13%，肝組織提取液維持抗體肝靶向性；血清質(zhì)量嚴格，需用超低內(nèi)毒素胎牛血清（<0.2EU/ml），劣質(zhì)血清會使細胞跨物種特性丟失 27%，抗體分泌量減少 34%；無血清培養(yǎng)需特定配方，添加肝生長因子復合物可維持細胞生長，且利于抗體人源化修飾；腹水制備規(guī)范，SCID 小鼠腹腔預先注射弗氏不wan全佐劑，10 天后接種 1.3×10?個細胞，18-24 天收集腹水，每只收獲 1-4ml，純化后保持對人肝組織高親和力。凍存用含 15% DMSO 與 5% 人血清白蛋白的凍存液，程序降溫后液氮保存，復蘇后 72 小時貼壁率達 74%，抗體分泌功能恢復 80% 以上。
檢測鑒定：經(jīng)嚴格檢測，無細菌、真菌、支原體及反轉(zhuǎn)錄病毒污染，符合跨物種雜交瘤細胞質(zhì)量標準。抗體亞型為大鼠 IgG1 型，輕鏈含人源化修飾特征；通過 ELISA、免疫組化等驗證，能特異性結合人肝組織靶抗原，與肝外組織交叉反應率低于 0.7%；染色體核型分析顯示，染色體數(shù)目 103-113 條，融合大鼠（約 39%）與人類（約 61%）染色體特征，存在物種特異性染色體易位；功能驗證中，用于人肝組織切片免疫染色時，精準定位肝靶抗原，陽性信號集中于特定區(qū)域，背景干擾低，證實其檢測精準性。
應用領域：在肝疾病分子檢測中，基于其抗體構建的 ELISA 試劑盒，檢測靈敏度達 0.45ng/ml，適用于肝炎、肝纖維化等疾病的血清標志物分析；在診斷試劑研發(fā)中，開發(fā)的免疫熒光探針用于肝穿刺組織染色，對早期肝損傷診斷符合率達 90%。在肝免疫學研究中，可繪制肝抗原表位圖譜，為肝靶向藥物設計提供靶點。此外，因含人源成分，在抗體人源化改造中具優(yōu)勢，經(jīng)基因編輯可使人源化程度達 83% 以上，降低免疫排斥風險，為肝相關單克隆抗體藥物研發(fā)提供高效平臺，推動肝疾病精準診斷與治療發(fā)展。
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