天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)檢測(cè)試劑盒      BB-47449

天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)檢測(cè)試劑盒  

使用方法：

1、 準(zhǔn)備樣品：

① 血漿、血清樣品：血漿、血清按照常規(guī)方法制備，可以直接用于本試劑盒的測(cè)定，

-20℃保存1個(gè)月有效，用于AST/GOT的檢測(cè)。

② 細(xì)胞或組織樣品：取恰當(dāng)細(xì)胞或組織進(jìn)行勻漿，低速離心取上清，-20℃保存1個(gè)

月有效，用于AST/GOT的檢測(cè)。

③ (選做)樣品準(zhǔn)備完畢后可以用BCA蛋白濃度測(cè)定試劑盒測(cè)定蛋白濃度，以便于后續(xù)

計(jì)算單位蛋白重量組織或細(xì)胞內(nèi)的AST/GOT含量。

2、 制作AST標(biāo)準(zhǔn)曲線：

混勻，向各管中加入二硝基苯肼顯色液，混勻孵育后，加入AST顯色基液200μl，混勻。室溫放置，分光光度計(jì)505nm處，以蒸餾水調(diào)零，讀取各管吸光度。各管吸光度均減去”0”號(hào)管吸光度，所得吸光度差值(縱坐標(biāo))與對(duì)應(yīng)的卡門酶活力單位(橫坐標(biāo))作圖。

3、 AST酶促反應(yīng)：按照下表設(shè)置對(duì)照管、測(cè)定管，溶液應(yīng)按照順序依次加入，并注意避免

產(chǎn)生氣泡。如果樣品中的酶活性過高，可以減少樣品用量或適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行測(cè)定。

 4、 AST檢測(cè)：混勻，室溫放置5min。酶標(biāo)儀505nm處檢測(cè)吸光度，以蒸餾水調(diào)零，讀

取各管吸光度值。一般應(yīng)數(shù)小時(shí)內(nèi)檢測(cè)完畢。

 5、計(jì)算：

      以標(biāo)準(zhǔn)管活力單位為橫坐標(biāo)，以吸光度值為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

測(cè)定管吸光度減去對(duì)照管吸光度后，從標(biāo)準(zhǔn)曲線查得AST活力單位。

參考范圍：

成年健康人血清AST：8-28卡門單位/ml

天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)檢測(cè)試劑盒  

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