BY-1271 N1大鼠骨髓源神經(jīng)嵴祖細胞系
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- 公司名稱 上海乾思生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號 BY-1271
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- 廠商性質 生產(chǎn)廠家
- 更新時間 2025/7/24 12:08:08
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N1大鼠骨髓源神經(jīng)嵴祖細胞系
N1大鼠骨髓源神經(jīng)嵴祖細胞系系作為源自大鼠骨髓的神經(jīng)嵴譜系祖細胞模型,因保留神經(jīng)嵴細胞te有的多向分化潛能與遷移特性,在神經(jīng)發(fā)育調控、神經(jīng)損傷修復及神經(jīng)嵴相關疾病研究中具有du特jia值,成為探究神經(jīng)嵴細胞生物學特性及應用的重要實驗工具。
細胞特性與來源背景:該細胞系源自大鼠骨髓基質細胞,經(jīng)神經(jīng)誘導分化和克隆篩選獲得。細胞形態(tài)呈典型的神經(jīng)前體細胞樣,多為紡錘形或 bipolar 形,胞體大小均勻(長度約 40-60μm,寬度約 10-15μm),胞質呈弱嗜堿性,可見豐富的微管和神經(jīng)絲,約 20% 細胞可見細長的神經(jīng)突樣突起(長度可達胞體直徑的 3-5 倍),細胞核呈橢圓形,位于細胞中央,核仁清晰。生長方式為貼壁生長,呈放射狀或網(wǎng)狀排列,接觸抑制較弱,傳代后 24 小時貼壁率達 93%。核心參數(shù)符合神經(jīng)嵴祖細胞特征:倍增時間約 48 小時,連續(xù)傳代 20 次后仍保持穩(wěn)定的生物學特性;表面標志物表達du特,nestin 陽性率達 96%,神經(jīng)嵴特異性標志物 p75NTR 陽性率 95%,SOX10 陽性率 93%,而造血細胞標志物 CD45 陽性率低于 2%;具有正常的二倍體核型(染色體數(shù) 42 條),無染色體畸變;多向分化潛能顯著,在神經(jīng)元誘導培養(yǎng)基中培養(yǎng) 10 天后,β- 微管蛋白 Ⅲ(Tuj1)陽性率達 82%,突觸素(synaptophysin)表達量增加 7 倍;在施萬細胞誘導條件下,S100β 陽性率達 78%,髓鞘堿性蛋白(MBP)分泌量達 35ng/mL;在平滑肌細胞誘導環(huán)境中,α- 平滑肌肌動蛋白(α-SMA)陽性率達 75%;遷移能力突出,Transwell 實驗中 24 小時遷移率達 65%,受神經(jīng)生長因子(NGF)誘導后遷移率提升至 85%;無微生物污染,細胞純度達 96%,保障實驗結果的可靠性。
科研應用價值:在神經(jīng)發(fā)育研究中,N1 細胞經(jīng)視huang酸處理 7 天后,神經(jīng)嵴分化調控基因 SOX9 表達量增加 5.2 倍,神經(jīng)突平均長度從 45μm 延長至 180μm,可模擬神經(jīng)嵴細胞向神經(jīng)元分化的早期過程,為解析神經(jīng)嵴細胞命運決定機制提供理想模型。
神經(jīng)損傷修復研究方面,該細胞與損傷脊髓組織共培養(yǎng)時,可向損傷區(qū)域遷移,遷移距離達 1.2mm,促進神經(jīng)再生相關基因 GAP-43 表達量增加 4.8 倍,髓鞘修復率達 55%;經(jīng)腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)預處理后,細胞存活率提升 40%,神經(jīng)突分支數(shù)增加 2.3 倍,可模擬神經(jīng)嵴祖細胞在神經(jīng)損傷后的修復作用,適用于探究周圍神經(jīng)再生機制。
神經(jīng)退行性疾病研究領域,該細胞經(jīng) 6 - 羥基多巴胺(6-OHDA)處理后,多巴胺能神經(jīng)元標志物 TH 陽性率下降 60%,活性氧水平提升 75%,凋亡率達 42%,能很好地模擬帕金森病模型中神經(jīng)嵴來源神經(jīng)元的損傷過程,為探究神經(jīng)嵴相關神經(jīng)元退變機制提供實驗基礎。此外,該細胞與神經(jīng)膠質細胞共培養(yǎng)時,星形膠質細胞的神經(jīng)營養(yǎng)因子分泌量增加 3 倍,可用于探究神經(jīng)嵴祖細胞與膠質細胞的相互作用在神經(jīng)保護中的機制。
培養(yǎng)與保存規(guī)范:推薦使用含 20% 胎牛血清的 DMEM/F12 培養(yǎng)基,添加 20ng/mL 堿性成纖維細胞生長因子(bFGF)、10ng/mL 表皮生長因子(EGF)及 1% 抗生素混合液,培養(yǎng)環(huán)境為 37℃、5% CO?飽和濕度培養(yǎng)箱。培養(yǎng)基需每天更換,以維持細胞的增殖活性和分化潛能。傳代時,用 PBS 沖洗細胞 2 次,加入專用細胞解離液,37℃孵育 5-7 分鐘,待細胞間隙增大后輕輕吹打使細胞脫落,傳代比例為 1:2-1:3,每 3 天傳代一次,避免細胞過度密集導致分化。
凍存液采用培養(yǎng)基 + 10% DMSO+20% 胎牛血清的混合液,細胞濃度調整為 4×10?個 /ml,經(jīng)程序降溫(-20℃1 小時→-80℃過夜→液氮保存)后,復蘇存活率達 85% 以上,2 代內可恢復正常的生長和分化能力。運輸采用干冰冷凍運輸或專用細胞運輸培養(yǎng)基,收到細胞后需靜置培養(yǎng) 12 小時,更換培養(yǎng)基后觀察細胞形態(tài),確認神經(jīng)突生長正常且無異常漂浮物后進行實驗。該細胞系僅限科研使用,操作時需避免頻繁更換誘導因子濃度,以防影響細胞分化方向穩(wěn)定性。
N1 大鼠骨髓源神經(jīng)嵴祖細胞系以其穩(wěn)定的神經(jīng)嵴細胞特性、多樣的分化潛能及顯著的神經(jīng)修復能力,在神經(jīng)發(fā)育生物學、再生醫(yī)學及神經(jīng)疾病研究中發(fā)揮著重要作用,為揭示神經(jīng)嵴細胞的生物學功能和開發(fā)神經(jīng)損傷治療策略提供了可靠的細胞模型。
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