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CRISPR檢測(cè)服務(wù)

具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
產(chǎn)品標(biāo)簽

CRISPR檢測(cè)基因編輯

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廣州艾迪基因科技有限責(zé)任公司由多名留學(xué)歸國(guó)博士和生物科技領(lǐng)域精英聯(lián)合創(chuàng)建,坐落于廣州產(chǎn)業(yè)示范基地——科學(xué)城。公司專注于發(fā)展和優(yōu)化基于CRISPR/Cas的基因組編輯技術(shù)


蛋白酶,細(xì)胞,試劑盒,基因編輯

CRISPR檢測(cè)服務(wù)

艾迪基因基于CRISPR檢測(cè)開發(fā)的高靈敏度、高特異性、快速恒溫核酸檢測(cè)技術(shù)——FASST快速檢測(cè)技術(shù),解決了傳統(tǒng)CRISPR檢測(cè)中存在的問題,如操作復(fù)雜、易污染、靈敏度低和耗時(shí)長(zhǎng)。通過自主開發(fā)的蛋白質(zhì)純化平臺(tái)優(yōu)化Cas酶結(jié)構(gòu),開發(fā)crRNA設(shè)計(jì)邏輯,生產(chǎn)高效crRNA,并使用自主設(shè)計(jì)的reporter,實(shí)現(xiàn)更高靈敏檢測(cè),簡(jiǎn)化操作步驟,減少污染風(fēng)險(xiǎn)??筛鶕?jù)您的實(shí)驗(yàn)需求選擇:分步定制或全套定制檢測(cè)服務(wù)。

 

服務(wù)詳情

服務(wù)內(nèi)容服務(wù)說明交付標(biāo)準(zhǔn)
制備靶標(biāo)基因模板合成靶標(biāo)質(zhì)粒靶標(biāo)質(zhì)粒
crRNA和RPA恒溫?cái)U(kuò)增引物的設(shè)計(jì)與合成根據(jù)靶標(biāo)序列設(shè)計(jì)crRNA和RPA引物crRNA,2 OD
RPA恒溫?cái)U(kuò)增引物的活性篩選多對(duì)RPA引物分別擴(kuò)增靶標(biāo)序列,確認(rèn)效率好的引物對(duì)RPA恒溫?cái)U(kuò)增引物,2 OD
crRNA的活性篩選多條crRNA進(jìn)行活性分析,確認(rèn)效率好的crRNA結(jié)題報(bào)告與原始數(shù)據(jù)
crRNA和RPA恒溫?cái)U(kuò)增引物的實(shí)驗(yàn)體系建立和優(yōu)化對(duì)RPA引物對(duì)和crRNA的組合進(jìn)行靈敏度測(cè)試、特異性測(cè)試和準(zhǔn)確性測(cè)試結(jié)題報(bào)告與原始數(shù)據(jù)
FASST檢測(cè)整套服務(wù)/結(jié)題報(bào)告,50個(gè)反應(yīng)的試劑CRISPR配套試劑盒

 

FASST快速檢測(cè)平臺(tái)

FASST(Fast, accurate, specific, and simple test)是?種基于CRISPR檢測(cè)開發(fā)的下?代?靈敏度、?特異性、快速恒溫的單管核酸檢測(cè)技術(shù)。FASST依靠多種酶類在常溫下協(xié)同作?,實(shí)現(xiàn)核酸的快速擴(kuò)增和檢測(cè),具有雙重特異性和雙重信號(hào)放大優(yōu)點(diǎn),是真正的POCT技術(shù)。
 
傳統(tǒng)CRISPR檢測(cè)主要包括兩管反應(yīng)和單管反應(yīng)兩種形式。其中,兩管反應(yīng)操作復(fù)雜、易受污染;單管反應(yīng)雖然簡(jiǎn)便且污染風(fēng)險(xiǎn)小,但靈敏度低、耗時(shí)。FASST技術(shù)基于艾迪基因自主開發(fā)的蛋白質(zhì)純化平臺(tái),通過優(yōu)化升級(jí)Cas酶結(jié)構(gòu),采用不同的crRNA設(shè)計(jì)邏輯,生產(chǎn)高效crRNA以及reporter,形成單管反應(yīng)檢測(cè),在降低污染風(fēng)險(xiǎn)的情況下,將檢測(cè)限提高到amol級(jí)別,將檢測(cè)時(shí)間縮短至十分鐘,實(shí)現(xiàn)了靈敏特異、快速準(zhǔn)確的核酸檢測(cè),解決了傳統(tǒng)CRISPR檢測(cè)的痛點(diǎn)。

原理圖

 

技術(shù)優(yōu)勢(shì)

 

技術(shù)對(duì)比

項(xiàng) FASSTPCRLAMP等恒溫?cái)U(kuò)增傳統(tǒng)CRISPR檢測(cè)
反應(yīng)溫度37-42℃ 恒溫95℃-55℃-72℃ 變溫65℃ 恒溫37-42℃ 恒溫
運(yùn)行時(shí)間5-20 mins1-2h40-60mins30-60 mins
引物數(shù)量2條2條4-6條2條
試劑狀態(tài)液體/凍干液體液體液體/凍干
設(shè)備要求恒溫設(shè)備(金屬浴,水浴等)PCR擴(kuò)增儀恒溫設(shè)備恒溫設(shè)備(金屬浴,水浴等)
操作性操作極為簡(jiǎn)單可實(shí)現(xiàn) 真正意義上的便攜專業(yè)操作要求,高設(shè)備操作復(fù)雜操作簡(jiǎn)單操作極為簡(jiǎn)單 可實(shí)現(xiàn)真正意義上的便攜
氣溶膠污染單管反應(yīng),污染風(fēng)險(xiǎn)低存在氣溶膠污染風(fēng)險(xiǎn)存在氣溶膠污染風(fēng)險(xiǎn)兩管反應(yīng),存在氣溶膠污染風(fēng)險(xiǎn)

 

實(shí)驗(yàn)流程

 

CRISPR檢測(cè)相關(guān)產(chǎn)品

● Cas酶

艾迪基因提供高純度、高活性的 Cas 酶,其靈敏度和活性均處于行業(yè)前沿水平。

 

● crRNA

 

● DNA恒溫?cái)U(kuò)增試劑盒

DNA恒溫快速擴(kuò)增試劑盒是基于一種常溫恒溫核酸快速擴(kuò)增技術(shù)開發(fā)的試劑盒,適用于實(shí)驗(yàn)室級(jí)別的DNA擴(kuò)增以及其他檢測(cè)用途的DNA擴(kuò)增使用。具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、反應(yīng)時(shí)間短等優(yōu)點(diǎn),反應(yīng)組分為干粉狀態(tài),操作簡(jiǎn)便,易于保存。使用金屬浴、水浴鍋等即可進(jìn)行反應(yīng)操作,無(wú)需購(gòu)買PCR儀等價(jià)格高昂的設(shè)備。

 

 ● RNA恒溫?cái)U(kuò)增試劑盒

RNA恒溫快速擴(kuò)增試劑盒是基于一種恒溫核酸快速擴(kuò)增技術(shù)開發(fā)的試劑盒,適用于實(shí)驗(yàn)室級(jí)別的RNA擴(kuò)增以及其他檢測(cè)用途的RNA擴(kuò)增使用。具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、反應(yīng)時(shí)間短(僅需30 min)等優(yōu)點(diǎn),反應(yīng)組分為干粉狀態(tài),操作簡(jiǎn)便,易于保存。使用金屬浴、水浴鍋等即可進(jìn)行反應(yīng)操作,無(wú)需購(gòu)買PCR儀等價(jià)格高昂的設(shè)備。


 

● 試紙條 


 

● 探針 


 

● T7體外轉(zhuǎn)錄試劑盒 


● RNase 抑制劑


 

應(yīng)用案例

① 非洲豬瘟病毒檢測(cè)
結(jié)果:使用ASFV 1070檢測(cè)非洲豬瘟病毒,CRISPR/Cas12a一管法檢測(cè)技術(shù)可在10min內(nèi)檢測(cè)到100 copies的核酸;可在20min內(nèi)檢測(cè)到10-50 copies的核酸。 
 
② 鸚鵡博爾納病毒檢測(cè)
結(jié)果:CRISPR/Cas12a兩管法檢測(cè)技術(shù)(RPA反應(yīng)30min,CRISPR檢測(cè)10min)可在40min內(nèi)檢測(cè)到10 copies的鸚鵡博爾納病毒核酸。 
 
③ 流產(chǎn)布魯桿菌檢測(cè)
結(jié)果: CRISPR/Cas12a兩管法檢測(cè)技術(shù)(RPA反應(yīng)30min,CRISPR檢測(cè)10min)可在40min內(nèi)檢測(cè)到100 copies的流產(chǎn)布魯桿菌核酸。 
 

FAQ

1、 如何提高Cas酶的檢測(cè)靈敏度?
1)設(shè)計(jì)高效的crRNA序列。通過合理的設(shè)計(jì)以及在線網(wǎng)站結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè),選擇合適的crRNA,以獲得良好的Cas酶反式切割活性。
2)選擇合適的信號(hào)報(bào)告底物。有關(guān)研究指出,使用15 nt的單鏈DNA(ssDNA)作為報(bào)告底物時(shí),Cas12a的切割反應(yīng)速率達(dá)到一個(gè)高的值,相較于常用的5-nt ssDNA,反應(yīng)速率顯著提升。
3)優(yōu)化反應(yīng)條件和緩沖液。通過優(yōu)化CRISPR反應(yīng)的條件如Cas酶與crRNA比例、Cas酶使用濃度、反應(yīng)溫度等可以在一定程度上提高檢測(cè)效果。
 
2、 如何設(shè)計(jì)crRNA?
可根據(jù)以下步驟進(jìn)行設(shè)計(jì)
1)明確目的基因序列。
2)明確使用的Cas蛋白。不同的Cas蛋白,需要識(shí)別相應(yīng)的PAM(Protospacer Adjacent Motif)序列,例如Cas12a需要依靠“TTTV”PAM序列進(jìn)行靶標(biāo)識(shí)別。
3)選擇crRNA靶向區(qū)域。在目標(biāo)基因上選擇一個(gè)20nt核苷酸序列,該序列緊鄰PAM位點(diǎn),且與crRNA的互補(bǔ)鏈配對(duì)。
4)選定的20nt靶向區(qū)域作為 target sequence(可變部分)加上scaffold sequence (固定部分)以設(shè)計(jì)crRNA序列。
5)使用在線工具如CRISPR design tool(例如CRISPOR、 Benchling等)來幫助設(shè)計(jì)crRNA。這些工具可以預(yù)測(cè)sgRNA的效率和特異性,避免可能的脫靶效應(yīng)。
6)設(shè)計(jì)完成后,可以通過合成生物學(xué)公司訂購(gòu)合成的crRNA序列。




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