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科德角國(guó)際生物醫(yī)學(xué)科技(北京)有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第5年
內(nèi)毒素檢測(cè)時(shí),血液前處理方法的注意點(diǎn)有哪些?2022/12/07
1、在進(jìn)行血中內(nèi)毒素測(cè)定時(shí),要注意選擇方法和試劑。2、血漿或血清制備作為臨床上常用樣本主要為血漿,其使用率占95%以上,因此作為體液主要部分血漿的制備就顯得十分重要。據(jù)Das報(bào)道:內(nèi)毒素一般除了游離狀態(tài)外,還大量附著在血小板上,因此用含有大量血小板的血漿作為樣品更為合適。在制備人血漿或動(dòng)物血漿時(shí),目前國(guó)外為了防止細(xì)胞的破壞多采用低溫分離,使用含有大量血小板的血漿樣品,即在4℃1000gx10分鐘分離條件,或在無(wú)低溫離心機(jī)時(shí)用3000gx40秒分離條件。切不可在常溫下進(jìn)行高速、長(zhǎng)時(shí)間分離,另外,在
幾種血液中內(nèi)毒素的前處理測(cè)定方法2022/12/05
(1)氯仿提取法:測(cè)定方法如下:(2)稀釋加熱法:即水稀釋加熱法作為簡(jiǎn)便的前處理方法被普遍采用,由于稀釋倍數(shù),加熱溫度和時(shí)間不同,結(jié)果也不全相同,其中主要方法見表6。在這些方法中由于不確定因素太多,因此值得探索的地方很多。為了克服稀釋加熱法的缺陷,避免濁度生成,人們開發(fā)出了使用表面活性劑(0.04%TritonX-100)稀釋,80℃5分鐘加熱處理方法。這個(gè)前處理方法,能得到很好的血漿內(nèi)毒素回收率。減少非特異性濁度所引起的假陽(yáng)性反應(yīng)。尤其是日本和光純藥的ToxinonuterET201采用比濁時(shí)
除去血中干擾物質(zhì)的前處理方法2022/12/05
一般來(lái)說(shuō)由于血液的組成比較復(fù)雜,其中的許多物質(zhì)尤其是高等動(dòng)物的血漿或血清對(duì)TAL(LAL)試劑與內(nèi)毒素反應(yīng)很強(qiáng)的干擾作用。因此當(dāng)我們對(duì)這類樣品的內(nèi)毒素進(jìn)行測(cè)定時(shí),必須將其中的干擾物質(zhì)除去后,方可進(jìn)行檢測(cè)。目前作為血漿中的干擾物質(zhì)主要有:各種蛋白酶抑制劑、內(nèi)毒素結(jié)合蛋白以及纖溶酶原抑制劑等物質(zhì),對(duì)于比色法由于Xa因子能分解Boc-LEU-Gly-Arg-PNA肽鏈。因此在測(cè)定前排除這些干擾物是十分必要的。除去血中干擾物質(zhì)的前處理方法主要有以下幾種,現(xiàn)分別介紹如下:(1)稀釋加熱法:血漿用溶解水進(jìn)行
內(nèi)毒素與慢性阻塞性肺疾病2022/12/05
慢性阻塞性肺疾?。–OPD)在我國(guó)是常見病、多發(fā)病,發(fā)病率高達(dá)6%,嚴(yán)重地危害人民健康,特別對(duì)老年人的危害更大,嚴(yán)重地影響著老年人的生活質(zhì)量。盡管慢性阻塞性肺疾病的病因及發(fā)病機(jī)制尚未明了,但感染在發(fā)病中的作用是不可忽視的。尤其在慢性阻塞性肺疾病的急性發(fā)作期,感染是主要致病因素,多為病毒和細(xì)菌感染。病毒感染后,機(jī)體免疫能力下降,可繼發(fā)細(xì)菌感染。在細(xì)菌感染中,院外感染主要是革蘭氏陽(yáng)性菌;院內(nèi)感染多為革蘭氏陰性菌,但老年患者,則均多見于革蘭氏陰性桿菌感染。張慧利等對(duì)22例慢性支氣管炎患者進(jìn)行了血漿內(nèi)毒
內(nèi)毒素血癥與上呼吸道感染的關(guān)系2022/12/01
急性上呼吸道感染是指鼻腔、咽或喉部急性炎癥的概稱,是上呼吸道最常見的一種傳染病?;颊卟环帜挲g、性別、職業(yè)和地區(qū),不僅具有較強(qiáng)的傳染性,而且可引起嚴(yán)重并發(fā)癥,應(yīng)積極防治。根據(jù)病因不同,臨床表現(xiàn)可有不同的類型,如普通感冒、病毒性咽炎、喉炎和支氣管炎,皰疹性的咽喉炎,咽結(jié)膜熱﹑細(xì)菌性咽扁桃體炎。主要臨床表現(xiàn)為發(fā)熱、流涕、咽部充血、咳嗽﹑扁桃體腫大,充血、表面有黃色點(diǎn)狀滲出物,頜下淋巴結(jié)腫大等。急性上呼吸道感染主要由病毒感染引起,少數(shù)由細(xì)菌引起。其主要的病理過(guò)程為上呼吸道局部的改變,但近年來(lái)研究表明,上
內(nèi)毒素引發(fā)肺炎病理現(xiàn)象2022/12/01
肺炎(pneumonia)是肺實(shí)質(zhì)的炎癥,可由多種病原體引起,如細(xì)菌、病毒、真菌、寄生蟲等,其他如放射線、化學(xué),過(guò)敏因素等亦能引起肺炎。肺炎是常見病,我國(guó)每年約有250萬(wàn)例肺炎發(fā)生,12.5萬(wàn)人因肺炎死亡,在各種致死病因中居第5位,老年或機(jī)體免疫力低下者(用免疫抑制劑、腫瘤、糖尿病、嗜酒、艾滋病或久病體衰者)伴發(fā)肺炎時(shí),病死率尤高。肺炎按照病因分類可分為細(xì)菌性肺炎,病毒性肺炎、支原體肺炎、真菌性肺炎及其他病原體(立克次體、衣原體等)所致肺炎。在上述眾多病因中,細(xì)菌性肺炎最為常見,約占肺炎的80%
血液中的內(nèi)毒素含量測(cè)定與干擾物質(zhì)的去除2022/12/01
1、體液的組成體液包括血液(血漿、血清)、腹水、髓液、尿以及乳汁等,其中在臨床上一般以血液的使用率最為普遍。我們知道血液在心血管系統(tǒng)內(nèi)是由有形物質(zhì)(紅細(xì)胞、白細(xì)胞、血小板)及液體狀血漿組成。其基本組成如下圖:2、體液測(cè)定評(píng)價(jià)通過(guò)對(duì)體液中的內(nèi)毒素含量測(cè)定,可以對(duì)革蘭氏陰性菌所引起的敗血癥、菌血癥、術(shù)前術(shù)后感染癥以及真菌感染癥等進(jìn)行診斷,據(jù)國(guó)外文獻(xiàn)報(bào)道正常人血漿中的內(nèi)毒素水平在3pg/ml左右。通過(guò)對(duì)血液中的內(nèi)毒素含量測(cè)定可對(duì)以下一些癥狀進(jìn)行監(jiān)控和了解。(1)早期診斷;(2)給治療方案提供理論資料;
內(nèi)毒素與多器官功能衰竭中腎衰及中胃腸道損傷的關(guān)系2022/11/30
一、內(nèi)毒素與多器官功能衰竭中腎衰內(nèi)毒素對(duì)腎臟的作用還不太明確。早在60年代初,Hinshaw就提出內(nèi)毒素的早期靶器官是腎臟。其后Cavanagh證實(shí)了這一論點(diǎn)。動(dòng)物注射內(nèi)毒素后3分鐘腎血管阻力增加約6倍,與此同時(shí)并無(wú)心輸出量及血壓的下降。因此認(rèn)為內(nèi)毒素早期可影響腎臟。腎血流減少系毛細(xì)血管收縮所致,可能為功能性腎衰發(fā)生的基礎(chǔ)。Kikeri等給鼠注射內(nèi)毒素3.5小時(shí)后,尿及尿鈉排泄量顯著增多,而腎小球?yàn)V過(guò)率減少50%,超微結(jié)構(gòu)顯示吞噬細(xì)胞分離,腎小管周圍毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞水腫,但腎小球無(wú)明顯異常。證實(shí)
內(nèi)毒素與多器官功能衰竭中心肌及中肺損傷的關(guān)系2022/11/30
一、內(nèi)毒素與多器官功能衰竭中心肌損害關(guān)系內(nèi)毒素對(duì)心臟有無(wú)作用是一個(gè)爭(zhēng)論已久的問(wèn)題,70年代以前認(rèn)為內(nèi)毒素對(duì)心臟無(wú)影響,70年代后期大量研究表明對(duì)心臟有作用。Hinshaw等通過(guò)犬離體心實(shí)驗(yàn)證實(shí),心衰的發(fā)生機(jī)理不在于心臟抑制因子,而在于內(nèi)毒素對(duì)心肌的損害。許多研究表明,內(nèi)毒素可損害心肌線粒體、肌漿網(wǎng)、肌膜以及收縮蛋白等,使細(xì)胞膜系統(tǒng)受損,三磷酸腺苷產(chǎn)生及利用異常而發(fā)生心衰。過(guò)去對(duì)內(nèi)毒素休克心衰的研究未予重視,認(rèn)為心臟是休克最后衰竭的器官,臨床救治價(jià)值不大?,F(xiàn)在人們的認(rèn)識(shí)有所改變,心衰在膿毒癥或敗血
國(guó)內(nèi)人血漿內(nèi)毒素檢測(cè)的實(shí)驗(yàn)操作方法2022/11/30
一、樣品的前處理1、取0.5ml人血漿(S),按如下方法稀釋:0.5mlS+0.5mID+1.5mlW→2.5mlS5式中:D為專用的稀釋劑;W為專用的細(xì)菌內(nèi)毒素檢測(cè)(BET)用水;S5為稀釋了5倍的血漿,下標(biāo)數(shù)字表示稀釋倍數(shù)。2、把裝有S5的小瓶置70℃的水浴中10分鐘。3、把經(jīng)加熱處理的裝有S5的小瓶用3000rpm離心10分鐘,然后吸取上清液(仍記為S5)作BET。4、如果不立即作BET,可把經(jīng)離心的裝有S5的小瓶置2~3℃冰箱保存,可在3天內(nèi)作BET。二、稀釋標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)毒素1、取效價(jià)為10E
內(nèi)毒素與多器官功能衰竭2022/11/29
多器官功能衰竭常繼發(fā)于嚴(yán)重感染,因此有人稱為膿毒綜合征,Meakins等主張胃腸是其始動(dòng)部位,通過(guò)細(xì)菌和內(nèi)毒素起作用。Frg等指出感染過(guò)程中內(nèi)毒素是強(qiáng)有力的補(bǔ)體激活觸發(fā)物,它所激活的補(bǔ)體啟動(dòng)了“瀑布效應(yīng)”(cascade),釋放氧自由基、前列腺素類、內(nèi)啡肽等介質(zhì),產(chǎn)生細(xì)胞毒性效應(yīng)、微循環(huán)障礙、代謝紊亂,最終導(dǎo)致多器官功能衰竭的發(fā)生。大量研究表明,內(nèi)毒素血癥不僅發(fā)生于創(chuàng)傷休克的初期,而且自始至終可能起著重要作用,貫穿于多器官功能衰竭的整個(gè)病程。因此有學(xué)者認(rèn)為,感染的致命作用可能在于內(nèi)毒素侵入體內(nèi)導(dǎo)
血液中細(xì)菌內(nèi)毒素常用測(cè)定方法2022/11/29
1968年自Levin和Bang發(fā)現(xiàn)并建立鱟試驗(yàn)方法以來(lái),就逐漸得到臨床及藥檢部門的重視和研究。尤其是在臨床檢驗(yàn)方面的應(yīng)用更是飛速發(fā)展。在鱟試驗(yàn)法建立的初期,Levin就使用該法用于測(cè)定病人血漿中的內(nèi)毒素,之后其應(yīng)用范圍也越來(lái)越廣。隨著科學(xué)技術(shù)的不斷進(jìn)步發(fā)展,鱟試驗(yàn)方法的研究也逐漸完善,從最初的定性凝膠法逐漸向靈敏度更高的微量定量方面發(fā)展,因此使血液中內(nèi)毒素測(cè)定變得更加快速、準(zhǔn)確,更加適用于臨床各種內(nèi)毒素感染癥狀的診斷。目前,在日本國(guó)內(nèi),以合成基質(zhì)法為中心的血漿中的內(nèi)毒素含量測(cè)定研究進(jìn)行得比較深
內(nèi)毒素與彌漫性血管內(nèi)凝血2022/11/25
彌散性血管內(nèi)凝血(disseminatedordiffuseintravascularcoagulation,DIC)為臨床常見的、嚴(yán)重危及病人生命的病理過(guò)程,它不是一個(gè)獨(dú)立的疾病,多并發(fā)于感染性疾病,表現(xiàn)為貧血和多部位的栓塞、出血,鑒于其情況復(fù)雜,發(fā)病機(jī)制中許多問(wèn)題尚不清楚,因此防治比較困難。彌漫性血管內(nèi)凝血常是多器官功能衰竭發(fā)生的重要誘因,尤其是重癥膿毒癥并發(fā)彌漫性血管內(nèi)凝血極易發(fā)展為多器官功能衰竭,預(yù)后甚差。內(nèi)毒素能促發(fā)彌漫性血管內(nèi)凝血早已為人們所認(rèn)識(shí),其機(jī)理是多方面的,也是甚為復(fù)雜的,與
內(nèi)毒素引起敗血癥休克的原因2022/11/25
目前,敗血癥休克病人的死亡率非常高,如在血液或腫瘤病房死亡率特別高,據(jù)某些報(bào)道難治性白血病病人可達(dá)90%,而在插導(dǎo)管相關(guān)的菌血癥導(dǎo)致的敗血癥休克病人中,由于感染因素的去除及抗生素的應(yīng)用,死亡率僅15%。美國(guó)每年有10~15萬(wàn)患者死于敗血性休克,在過(guò)去50年中,敗血癥的死亡率沒有變化,但事實(shí)上敗血性休克的發(fā)病率在過(guò)去50年中不斷增長(zhǎng)。其主要原因可能是內(nèi)毒素引起的毒性問(wèn)題。敗血癥患者內(nèi)毒素的來(lái)源有二,一是抗生素誘導(dǎo)內(nèi)毒素釋放,二是源于腸源性內(nèi)毒素血癥。如果內(nèi)毒素一旦起到了“扳機(jī)”作用,炎癥的瀑布效應(yīng)
鱟資源保護(hù)措施與策略2022/11/25
雖然我國(guó)目前沒有鱟資源的調(diào)查資料,但鑒于鱟是一種經(jīng)濟(jì)價(jià)值和科研價(jià)值較高的海洋珍-稀動(dòng)物,世界上屈-指-可-數(shù)的“活化石”,東方鱟現(xiàn)已被列人國(guó)家、自治區(qū)(1993年)重點(diǎn)保護(hù)水生、野生動(dòng)物名錄中。許多專家及鱟試劑生產(chǎn)廠家強(qiáng)烈呼吁:建立鱟自然保護(hù)區(qū),他們聯(lián)名上書請(qǐng)求福建省有關(guān)部門制訂法規(guī)、保護(hù)鱟資源,嚴(yán)禁捕殺食用鱟。廈門大學(xué)生物系教授,著名的鱟研究專家洪水根在1999年3月2日《廈門晚報(bào)》以“建立鱟自然保護(hù)區(qū)刻不容緩”為題,描述了鱟資源現(xiàn)狀,并建議:1.開展鱟資源重要性宣傳,提高市民鱟資源和環(huán)境保護(hù)
內(nèi)毒素血癥——免疫低下兒童發(fā)燒的一個(gè)重要原因2022/11/24
免疫低下兒童出現(xiàn)原因不明的發(fā)燒是很普遍的事情,在診斷和治療上一直存在著許多問(wèn)題,能作出正常診斷的只占病例的40%~60%,因此,臨床醫(yī)生往往不得不根據(jù)經(jīng)驗(yàn)應(yīng)用抗生素治療,但有時(shí)療效不甚理想。AadHass等人對(duì)36例免疫低下發(fā)燒的兒童進(jìn)行了研究。在發(fā)燒期間,利用鱟試驗(yàn)法多次檢測(cè)了病人血中內(nèi)毒素的濃度,其中11名病人(35.5%)的血中內(nèi)毒素含量0.1Eu/ml(內(nèi)毒素血癥的診斷標(biāo)準(zhǔn)),其中一名檢測(cè)值位于0.23Eu/ml到0.64Eu/ml之間。其中5名內(nèi)毒素血癥患者,發(fā)燒期間血培養(yǎng)陰性,也沒有
內(nèi)毒素與全身炎性反應(yīng)綜合征2022/11/24
全身炎性反應(yīng)綜合征(systemicinflammatoryresorsesyndrome,SIRS)是膿毒癥新定義中的Ⅰ期表現(xiàn)。1992年美國(guó)胸科學(xué)會(huì)和危重病急救醫(yī)學(xué)會(huì)聯(lián)合倡議,將沿用多年但含義模糊的名詞——膿毒癥(sepsis)予以重新定義,并將其分為序貫發(fā)生的4期:Ⅰ期全身炎性反應(yīng)綜合征:具有下列2種以上表現(xiàn):體溫38℃或℃;心率90次/分;呼吸20次/分,或PaCO2;白細(xì)胞計(jì)數(shù)12x109/L或或10%為幼稚型(桿狀核);Ⅱ期膿毒癥:全身炎性反應(yīng)綜合征加細(xì)菌培養(yǎng)陽(yáng)性;Ⅲ期嚴(yán)重膿毒癥:膿
鱟成瀕臨物種,保護(hù)迫在眉睫2022/11/24
目前世界上現(xiàn)存的鱟只有二亞科三屬四種,主要分布在北美的美國(guó)(美洲鱟)和東南亞的中國(guó)和日本(東方鱟)。我國(guó)是世界上少數(shù)擁有鱟資源的國(guó)家之一。在中國(guó)東方鱟主要分布在廣東、廣西、福建沿海海域,其主要來(lái)源有湛江、北海、長(zhǎng)樂、平潭等地。廈門是我國(guó)具有鱟資源并具有綜合開發(fā)利用能力的主要城市,在市政府和市科委的支持下,廈門市的鱟開發(fā)研究已經(jīng)取得良好效果。近年來(lái),由于鱟醫(yī)用藥劑生產(chǎn)以及人們食用的需求,每年捕殺鱟的數(shù)量都在數(shù)萬(wàn)頭以上。這一方面致使鱟數(shù)量銳減,另一方面也從根本上切斷鱟自然繁殖的最根本環(huán)節(jié),使得鱟每年
內(nèi)毒素血癥—發(fā)燒病人敗血癥的早期預(yù)測(cè)2022/11/23
革蘭氏陰性菌敗血癥是住院病人死亡的重要原因。確切診斷要依據(jù)血培養(yǎng)結(jié)果,需花費(fèi)幾天的時(shí)間,許多實(shí)驗(yàn)表明,無(wú)論是人和動(dòng)物,革蘭氏陰性菌敗血癥的許多癥狀是由內(nèi)毒素血癥造成的。內(nèi)毒素可以激活單核巨噬細(xì)胞系統(tǒng),通過(guò)白細(xì)胞介素-1、白細(xì)胞介素-6、白細(xì)胞介素-8腫瘤壞死因子等產(chǎn)生一系列毒性反應(yīng)。即內(nèi)毒素是革蘭氏陰性菌敗血癥的主要致病因素,用鱟試驗(yàn)法測(cè)定病人血中內(nèi)毒素,可以預(yù)測(cè)發(fā)燒病人敗血癥發(fā)生率。Sander等人對(duì)473例發(fā)燒病人血中內(nèi)毒素進(jìn)行了研究,其中發(fā)生敗血癥病人在3天追蹤觀察期間有6人(32%)死亡
燒傷后內(nèi)毒素血癥的意義2022/11/23
燒傷可由熱水、蒸汽、火焰、電流、激光、放射線、酸、堿﹑磷等各種因子引起,燒傷除了高溫直接造成局部組織細(xì)胞損傷外,整個(gè)機(jī)體會(huì)產(chǎn)生一系列的改變。處于應(yīng)激狀態(tài)可能釋放出:①應(yīng)激性激素,由于疼痛刺激,血容量降低等,兒茶酚胺、皮質(zhì)激素,抗利尿激素,血管加壓素,醛固酮等釋放增加;②炎癥介質(zhì),由于傷處組織受損或加以沾染細(xì)菌,緩激肽,補(bǔ)體碎片(C3a、C5a)等,組胺﹑色胺釋放;③花生四烯酸由于磷脂酶等作用,變?yōu)榍傲邢偎?、血栓質(zhì)、白三烯;④各種其他因子,如血小板激活因子、白細(xì)胞介素,腫瘤壞死因子等。以上各種生物
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