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關(guān)于新冠病毒RT-PCR核酸檢測假陰性結(jié)果的思考2020/02/19: 關(guān)于新冠病毒RT-PCR核酸檢測假陰性結(jié)果的思考在新冠肺炎防治工作開展過程中，隨著對發(fā)病機(jī)制、臨床表現(xiàn)、臨床體征、診斷技術(shù)等方面認(rèn)識(shí)逐步清晰，病人的診治方案也逐步完善。近期，非常多的討論集中在新冠病毒核酸檢測方法出現(xiàn)漏檢和假陰性的問題上面。1.在全國其他省份新增確診人數(shù)連續(xù)下降的背景下，自2月12日起連續(xù)兩天的湖北省衛(wèi)健委發(fā)布的通報(bào)中，分別提到“當(dāng)日新增臨床診斷病例4890例，現(xiàn)有臨床診斷病例10567例”和“新增新冠肺炎病例14840例(含臨床診斷病例13332例)”?！缎滦凸跔畈《靖腥镜姆窝?

高通量測序技術(shù)是如何應(yīng)用于新冠病毒研究的2020/02/18: 解析｜高通量測序技術(shù)是如何應(yīng)用于新冠病毒研究的新型冠狀病毒肺炎確診人數(shù)還在增加，疫情牽動(dòng)人心，截止到2月13日16:00，全國已有確診病例59888例，疑似病例16067例。高通量測序技術(shù)又稱“下一代”測序技術(shù)，以能一次并行對幾十萬到幾百萬條DNA分子進(jìn)行序列測定和一般讀長較短等為標(biāo)志。因其高通量、不依賴于已知核酸序列和具有更高的靈敏度，在新型冠狀病毒的鑒定、分型、溯源、診斷等方面都展現(xiàn)了重要作用。我們現(xiàn)羅列疫情以來，NGS技術(shù)在新冠病毒研究方面的應(yīng)用，以饗讀者。一、NGS應(yīng)用于COVID-19

TaqMan qPCR實(shí)驗(yàn)?zāi)辽傩枰私膺@些！2020/01/03: 干貨┃TaqManqPCR實(shí)驗(yàn)?zāi)辽傩枰私膺@些！提到實(shí)時(shí)熒光定量PCR（簡稱qPCR），想必大家都很熟悉，它是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光化學(xué)物質(zhì)，利用熒光信號積累實(shí)時(shí)監(jiān)測PCR擴(kuò)增產(chǎn)物并進(jìn)行定量分析的方法。根據(jù)所用熒光化學(xué)物質(zhì)的不同，qPCR可分為熒光染料法（SYBRGreenⅠ法為代表）和熒光探針法（TaqMan法為代表）。SYBRGreenⅠ染料法因具有使用簡便，價(jià)格便宜等優(yōu)點(diǎn)而被廣泛使用。但其大的缺點(diǎn)是缺乏特異性，即染料可以與任何dsDNA結(jié)合。因此，qPCR反應(yīng)中有非特異性擴(kuò)增產(chǎn)物的

MolPure®核酸提取系列產(chǎn)品，更多選擇，更高質(zhì)量2019/12/27: MolPure®核酸提取系列產(chǎn)品，更多選擇，更高質(zhì)量核酸是由許多核苷酸聚合成的生物大分子化合物，為生命的基本物質(zhì)之一。核酸廣泛存在于所有動(dòng)植物細(xì)胞、微生物內(nèi)，并且常與蛋白質(zhì)結(jié)合形成核蛋白。核酸提取是分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中基礎(chǔ)的實(shí)驗(yàn)之一，幾乎所有的分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)上游都需要用到核酸提取。核酸提取方法核酸提取包含裂解和純化兩大步驟，裂解是使樣品中的核酸游離在裂解體系中的過程。通過使蛋白質(zhì)變性，破壞膜結(jié)構(gòu)及解開與核酸相連接的蛋白質(zhì)，從而實(shí)現(xiàn)核酸游離在裂解體系中。裂解體系中還可能加入蛋白酶，利用蛋白酶將蛋白質(zhì)消

蛋白結(jié)構(gòu)研究分析2019/12/06: 蛋白結(jié)構(gòu)研究分析一、研究背景上個(gè)世紀(jì)初，科學(xué)家們認(rèn)為蛋白質(zhì)是生命體的遺傳物質(zhì)，而具有*的作用。隨著這個(gè)理論被證偽，真正的遺傳物質(zhì)DNA的結(jié)構(gòu)被給予了很大關(guān)注。然而，蛋白質(zhì)作為生命體的重要大分子，其重要性也從未被忽視，而且在1950年代開始，科學(xué)家一直在探尋DNA序列和蛋白質(zhì)序列的相關(guān)性。與此同時(shí)，蛋白質(zhì)測序和結(jié)構(gòu)解析蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的努力開始慢慢獲得回報(bào)。更多的生化研究揭示了蛋白質(zhì)的功能重要性，因此蛋白質(zhì)的三維結(jié)構(gòu)的解析對于深入理解蛋白質(zhì)功能和生理現(xiàn)象起著決定性作用圖1:蛋白三維結(jié)構(gòu)圖二、蛋白結(jié)構(gòu)研究

翊圣推出華大MGI平臺(tái)整體解決方案2019/12/03: 翊圣推出華大MGI平臺(tái)整體解決方案“基因科技，造福人類”是華大基因堅(jiān)持不變的使命，近幾年隨著華大技術(shù)的不斷突破，測序平臺(tái)的不斷完善，華大基因已經(jīng)成為國產(chǎn)高通量測序儀的中堅(jiān)力量。“國產(chǎn)試劑，助力中國智造”，致力于成為分子酶產(chǎn)業(yè)創(chuàng)新者，翊圣生物一直保持對高通量測序技術(shù)的高度關(guān)注，并長期專注于分子酶原料及建庫試劑盒等產(chǎn)品研發(fā)和生產(chǎn)，加上與華大平臺(tái)的密切合作，現(xiàn)推出華大平臺(tái)建庫的完整解決方案，可滿足主流的測序應(yīng)用。解決方案part1HieffNGS®UltimaDNALibraryPrepKitforM

Yeasen第三代逆轉(zhuǎn)錄酶預(yù)混液，高質(zhì)量cDNA的*！2019/11/27: Hifair®Ⅲ1stStrandcDNASynthesisSuperMixforqPCR(gDNAdigesterplus)——Yeasen第三代逆轉(zhuǎn)錄酶預(yù)混液，高質(zhì)量cDNA的*！研發(fā)背景RT-qPCR是一個(gè)多步驟連貫實(shí)驗(yàn)，逆轉(zhuǎn)錄的實(shí)驗(yàn)結(jié)果只能通過后續(xù)qPCR進(jìn)行判定，因此這一過程的成功與否十分關(guān)鍵。實(shí)驗(yàn)過程中，你是否有遇到過這些問題？1.逆轉(zhuǎn)錄效率低導(dǎo)致后續(xù)qPCR實(shí)驗(yàn)結(jié)果Ct值偏大？2.RNA具有復(fù)雜二級結(jié)構(gòu)或GC含量高導(dǎo)致逆轉(zhuǎn)錄失?。?.逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)品組分多，加樣麻煩誤差還大？。。。。。。

兼容常規(guī)與鏈特異性mRNA文庫構(gòu)建2019/10/30: HieffNGS®MaxUpIIDual-modemRNALibraryPrepKitforIllumina——兼容常規(guī)與鏈特異性mRNA文庫構(gòu)建背景簡介RNA被認(rèn)為是生物信息傳遞的“橋梁”。而轉(zhuǎn)錄組測序可利用NGS技術(shù)對組織或者細(xì)胞中的RNA反轉(zhuǎn)錄之后的cDNA文庫測序，通過分析可計(jì)算不同RNA的表達(dá)量、發(fā)現(xiàn)新的轉(zhuǎn)錄本、進(jìn)行轉(zhuǎn)錄本定位、分析可變剪切、檢測基因融合等，提供全面的轉(zhuǎn)錄組信息。圖遺傳學(xué)中心法則目前主流的mRNA建庫主要流程是mRNA純化，mRNA逆轉(zhuǎn)錄，雙鏈cDNA合成，末端修復(fù)，A

NGS在病原微生物檢測中的應(yīng)用2019/09/25: NGS在病原微生物檢測中的應(yīng)用背景相關(guān)由病原微生物引起的感染性疾病是臨床面臨的常見的疾病之一，并且隨著人群結(jié)構(gòu)變化、環(huán)境污染以及藥物濫用等因素的影響，病原體呈現(xiàn)多樣化和復(fù)雜化的趨勢，逐步威脅人類健康。隨著測序技術(shù)的飛速發(fā)展，NGS已逐步應(yīng)用于感染性疾病的診斷、治療和監(jiān)測，在病原微生物鑒定、分型、耐藥突變檢測及新型病原體鑒定方面有其*的優(yōu)勢。病原微生物檢測現(xiàn)狀快速準(zhǔn)確的診斷可以對病情進(jìn)行監(jiān)控，提供有效治療，控制疾病的蔓延。目前常用的病原微生物分子檢測方法主要有：PCR技術(shù)（包括常規(guī)PCR以及qPC

RT-qPCR需要注意的那些事，你都了解嗎？2019/09/12: RT-qPCR需要注意的那些事，你都了解嗎？在RT-qPCR實(shí)驗(yàn)中不論是實(shí)驗(yàn)小白還是老司機(jī)，都會(huì)遇到各種不同的實(shí)驗(yàn)問題。解決問題不僅要浪費(fèi)額外的樣品和試劑，還要占用大量的時(shí)間一遍遍的重復(fù)和分析，真是被實(shí)驗(yàn)折磨得焦頭爛額。那實(shí)驗(yàn)過程中應(yīng)該注意哪些細(xì)節(jié)呢？小翊精心為大家總結(jié)了RT-qPCR實(shí)驗(yàn)的注意事項(xiàng)，希望助小伙伴們一臂之力。RT-qPCR實(shí)驗(yàn)包括RNA提取與質(zhì)量評估，逆轉(zhuǎn)錄和qPCR三大步驟，每個(gè)步驟都有很多注意事項(xiàng)，才能做出可靠的數(shù)據(jù)。下面由小翊給您詳細(xì)介紹。RNA質(zhì)量評估在RT-qPCR實(shí)驗(yàn)

膠原酶——?jiǎng)游锝M織消化利器2019/09/05: 膠原酶——?jiǎng)游锝M織消化利器圖1：膠原酶產(chǎn)品介紹膠原酶（Collagenase）是一類能夠特異性的識(shí)別Pro-X-Gly-Pro序列（該序列高頻率出現(xiàn)在膠原中，很少發(fā)現(xiàn)于其他蛋白中），并切割該序列中的中性氨基酸（X）和甘氨酸（Gly）之間的肽鍵的肽鏈內(nèi)切酶，且能夠水解結(jié)締組織中的膠原蛋白。許多蛋白酶都能水解單鏈和變性的膠原多肽，但膠原酶是唯——種可以降解具有三股超螺旋結(jié)構(gòu)的天然膠原纖維的蛋白酶，其廣泛存在結(jié)締組織內(nèi)，其中有效的膠原酶是由厭氧細(xì)菌溶組織梭菌（Clostridiumhistolytic

如何完成一次又經(jīng)濟(jì)的Tunel檢測2019/08/29: 如何完成一次又經(jīng)濟(jì)的Tunel檢測？——YeasenTUNELdetectionKit讓“美”原位呈現(xiàn)通過TdT轉(zhuǎn)移酶將Fluorescein-dUTP結(jié)合到有缺口的DNA上是檢測細(xì)胞凋亡的常用方法之一，如Roche提供的InSituCellDeathKit正是基于這個(gè)原理。產(chǎn)品中的TdT轉(zhuǎn)移酶活性直接影響到標(biāo)記的效率。翊圣生物立足于酶制劑生產(chǎn)，力求開發(fā)以酶制劑為基礎(chǔ)的產(chǎn)品，推出三款熒光素（AlexaFluor640，AlexaFluor488，F(xiàn)ITC）標(biāo)記的Tunel檢測試劑，在滿足客戶對產(chǎn)

qPCR常見問題及解決方案2019/08/15: qPCR常見問題及解決方案對于從事分子生物學(xué)研究的實(shí)驗(yàn)猿來說，RT-qPCR實(shí)驗(yàn)可謂是老生常談了?？此骑L(fēng)平浪靜，只需“RNA提取-反轉(zhuǎn)錄-熒光定量”這些按部就班的操作，實(shí)則險(xiǎn)象環(huán)生，一丁點(diǎn)的出錯(cuò)都有可能讓我們懷疑人生。即便如此，在CNS的召喚下我們?nèi)耘f一遍遍的重復(fù)、重復(fù)、再重復(fù)。小翊深有體會(huì)，為此嘔心瀝血整理出來常用的SYBRGreen染料法RT-qPCR實(shí)驗(yàn)的幾個(gè)常見問題，并給出了可能的原因和解決方案，希望大家能夠順利度過RT-qPCR大關(guān)。RT-qPCR實(shí)驗(yàn)中，大家或多或少會(huì)遇到擴(kuò)增曲線異常

轉(zhuǎn)鐵蛋白（Transferrin）——無血清細(xì)胞培養(yǎng)添加物2019/08/09: 轉(zhuǎn)鐵蛋白（Transferrin）------無血清細(xì)胞培養(yǎng)添加物背景介紹轉(zhuǎn)鐵蛋白又名運(yùn)鐵蛋白（Transferrin，TRF、Tf），負(fù)責(zé)運(yùn)載由消化管吸收的鐵和由紅細(xì)胞降解釋放的鐵。以三價(jià)鐵復(fù)合物（Tf-Fe3+）的形式進(jìn)入骨髓中，供成熟紅細(xì)胞的生成。轉(zhuǎn)鐵蛋白主要存在于血漿中，血漿中的轉(zhuǎn)鐵蛋白供應(yīng)機(jī)體絕大部分組織的鐵，而在其不能到達(dá)的部位，由這些組織自己合成的轉(zhuǎn)鐵蛋白在局部產(chǎn)生轉(zhuǎn)鐵作用。圖1:轉(zhuǎn)鐵蛋白的結(jié)構(gòu)人轉(zhuǎn)鐵蛋白（HumanTransferrin）主要在肝臟合成，是由位于同源N-端和C-端

精品推薦：系列ECL化學(xué)發(fā)光試劑盒 ——點(diǎn)亮您的印跡膜，一觸即發(fā)！2019/08/06: 搞事情啊，翊圣請來了四位ECL超級魔術(shù)師？？老板，都說你家ECL功能強(qiáng)，我給個(gè)飛克級的蛋白，能變出條帶嗎？辦不到？？老板，我多給點(diǎn)小費(fèi)，把蛋白提高到皮克級，能不能變出條帶？還是辦不到？？那也太差勁了，還想不想混了！不，小伙，你理解錯(cuò)了，是通通不是問題！！跟著我往下看！點(diǎn)亮您的印跡膜，一觸即發(fā)ECL試劑，即化學(xué)發(fā)光法辣根過氧化物酶（HRP）底物，是目前Westernblotting檢測中為靈敏的試劑。目前市場上普通ECL試劑在使用過程中經(jīng)常出現(xiàn)易淬滅、高背景、不穩(wěn)定以及低豐度蛋白難以檢測等問題，影

化繁為簡！小翊帶你輕松搞定qPCR數(shù)據(jù)分析2019/07/29: 化繁為簡！小翊帶你輕松搞定qPCR數(shù)據(jù)分析熒光定量PCR（qPCR）是實(shí)驗(yàn)室常用的一種技術(shù)，該技術(shù)可以應(yīng)用于基因表達(dá)分析、基因分型、病原體檢測、SNP分析等。qPCR實(shí)驗(yàn)操作簡單，原理易懂，但面對一堆凌亂的數(shù)據(jù)，如何進(jìn)行結(jié)果分析成了頭疼的問題，今天小翊將帶你學(xué)會(huì)如何化繁為簡，輕松獲得可以發(fā)表SCI的數(shù)據(jù)！qPCR常用的分析方法有相對定量和定量，需根據(jù)不同的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)進(jìn)行選擇。本期我們關(guān)注的是qPCR常見的應(yīng)用—基因表達(dá)分析，一般選擇相對定量法。1.實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)假設(shè)目前需要研究光誘導(dǎo)對擬南芥AtSUC2

活細(xì)菌/死細(xì)菌染色試劑盒2019/07/22: 產(chǎn)品信息產(chǎn)品名稱產(chǎn)品編號規(guī)格儲(chǔ)存價(jià)格Live&DeadBacterialStainingKit活細(xì)菌/死細(xì)菌染色試劑盒40274ES60100T4℃避光保存3683.00產(chǎn)品描述試劑盒內(nèi)含兩種熒光染料DMAO和EthD-III，可分別將活細(xì)菌和死細(xì)菌染上綠色和紅色。其中DMAO是一種綠色核酸熒光染料，可染色活細(xì)菌和死細(xì)菌。EthD-III是一種紅色核酸熒光染料，僅染色細(xì)胞膜受損的死細(xì)菌。將DMAO和EthD-III混合使用染色時(shí)具有完整細(xì)胞膜的細(xì)菌呈現(xiàn)綠色，而具有受損細(xì)胞膜的細(xì)菌呈現(xiàn)綠色和紅色。

新品推薦|反轉(zhuǎn)、高質(zhì)量cDNA，用Yeasen第三代逆轉(zhuǎn)錄酶預(yù)混液2019/07/17: 新品推薦|反轉(zhuǎn)、高質(zhì)量cDNA，用Yeasen第三代逆轉(zhuǎn)錄酶預(yù)混液你的逆轉(zhuǎn)錄，交給YEASEN三代逆轉(zhuǎn)錄酶來守護(hù)！Hifair®Ⅲ1stStrandcDNASynthesisSuperMixforqPCR(gDNAdigesterplus)是基于翊圣Hifair®ⅢReverseTranscriptase而開發(fā)的即用型預(yù)混液。該產(chǎn)品可耐受高達(dá)65℃的反應(yīng)溫度，適合具有復(fù)雜二級結(jié)構(gòu)的RNA模板的逆轉(zhuǎn)錄；同時(shí)增強(qiáng)了與模板的親和力，非常適合少量模板以及低拷貝基因的逆轉(zhuǎn)錄。產(chǎn)品帶基因組DNA去除成分，適

活死細(xì)菌、細(xì)胞檢測——探尋生命的奧秘2019/07/17: 活死細(xì)菌、細(xì)胞檢測-----探尋生命的奧秘背景介紹真核生物（哺乳動(dòng)物細(xì)胞）和原核生物（細(xì)菌）細(xì)胞增殖和細(xì)胞死亡間平衡對維持細(xì)胞有機(jī)的發(fā)育與生命的維持至關(guān)重要，如果出現(xiàn)失衡將導(dǎo)致各種疾病的發(fā)生。活死狀態(tài)是研究生物增殖生長的常見研究目的，例如；對于真核活死細(xì)胞主要通過分析細(xì)胞質(zhì)膜完整性與細(xì)胞內(nèi)酯酶活性，經(jīng)過特定儀器觀察判斷，為研究細(xì)胞狀態(tài)提供了一種方便的方法，同時(shí)分析活細(xì)胞與死細(xì)胞，用于評估細(xì)胞的活力?？梢詰?yīng)用于大多數(shù)的真核哺乳動(dòng)物細(xì)胞，但不適用于真菌和酵母。主要對于藥物研究、毒性判定、細(xì)胞生長狀態(tài)

揭秘各種主流二代測序儀，無瓜攻略2019/07/10: 揭秘各種主流二代測序儀，無瓜攻略隨著基因領(lǐng)域研究的不斷深入，自sanger測序?qū)崿F(xiàn)對堿基信息的可讀取后，更高通量的需求使得二代測序在基因組測序、臨床檢測和生物制藥等領(lǐng)域展現(xiàn)出的潛力。對于剛?cè)胄械男』锇椋鎸Ω魇礁鳂拥臏y試平臺(tái)好奇又迷茫，Roche454、Illumina、ThermoFisher，以及國產(chǎn)MGI平臺(tái)等，這么多測序儀，他們的特點(diǎn)是什么？背后的發(fā)展歷程是怎樣的？今天小翊借花獻(xiàn)佛，梳理了目前主流的二代測序平臺(tái)，讓我們了解二代測序這十幾年的發(fā)展歷程。表1二代測序部分儀器展示備注：圖片來源

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