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初級(jí)會(huì)員 | 第13年
用數(shù)據(jù)說(shuō)話,教你做雙熒光素酶報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)2020/04/08
你是否正在驗(yàn)證miRNA與lncRNA的作用機(jī)制?是否在分析確認(rèn)miRNA的靶基因?在研究轉(zhuǎn)錄因子和啟動(dòng)子的實(shí)驗(yàn)中,你是否想確定結(jié)合位點(diǎn)的序列?這些問(wèn)題都可以用雙熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)系統(tǒng)來(lái)嘗試解決。雙熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)系統(tǒng)介紹基于熒光素酶(luciferase)的發(fā)光原理,科學(xué)家發(fā)明了雙熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)系統(tǒng)。該系統(tǒng)包括螢火蟲熒光素酶(Fireflyluciferase)和海腎熒光素酶(Renillaluciferase)。兩者可催化各自的底物發(fā)生氧化作用產(chǎn)生生物熒光,產(chǎn)生的熒光數(shù)值大小即表
這有一份 FFPE 樣本建庫(kù)的檔案,還不趕緊 Pick?2020/04/02
■什么是FFPE?FFPE(Formalin-FixedandParrffinEmbedded),即福爾馬林固定石蠟包埋樣本。由于這種處理方法能夠較長(zhǎng)時(shí)間地保存組織或制備檢驗(yàn)所需的組織標(biāo)本,所以在臨床病理檢驗(yàn)、腫瘤基因檢測(cè)中應(yīng)用廣泛。在世界范圍內(nèi),大約有數(shù)十億份組織樣品保存在醫(yī)院或者組織樣品庫(kù)中,其中絕大多數(shù)是使用福爾馬林固定石蠟包埋的方法處理的樣品。FFPE樣本通常代表了珍貴且來(lái)源廣泛的生物醫(yī)學(xué)研究材料,為闡明疾病機(jī)制、回顧性研究等提供了寶貴的資源,但是由于樣本制備以及儲(chǔ)存等多方面的原因,F(xiàn)F
Hieff TransTM脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑,讓您對(duì)轉(zhuǎn)染自信滿滿2020/04/02
HieffTransTM脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑,讓您對(duì)轉(zhuǎn)染自信滿滿——效率高不高,一轉(zhuǎn)便知道背景介紹轉(zhuǎn)染能夠讓我們更好的研究目的基因是如何在細(xì)胞中進(jìn)行表達(dá)和調(diào)控。目前常見的轉(zhuǎn)染方法有:磷酸鈣共沉淀法、電穿孔法、DEAE-葡聚糖和ploybrene、機(jī)械法(如顯微注射和基因槍法)、陽(yáng)離子脂質(zhì)體試劑等,其中陽(yáng)離子脂質(zhì)體試劑轉(zhuǎn)染是目前zui常用的轉(zhuǎn)染方法。圖1:不同轉(zhuǎn)染方法轉(zhuǎn)染示意圖(圖片來(lái)源于每日生物評(píng)論)不同轉(zhuǎn)染方法的優(yōu)劣對(duì)比轉(zhuǎn)染方法優(yōu)勢(shì)劣勢(shì)磷酸鈣共沉淀法價(jià)格低廉,操作較為簡(jiǎn)單轉(zhuǎn)染效率不穩(wěn)定,易發(fā)生DNA
小分子化合物2020/04/02
小分子化合物專題一、信號(hào)通路信號(hào)通路是指當(dāng)細(xì)胞里要發(fā)生某種反應(yīng)時(shí)信號(hào)從細(xì)胞外到細(xì)胞內(nèi)傳遞了一種信息,細(xì)胞要根據(jù)這種信息來(lái)做出反應(yīng)的現(xiàn)象。信號(hào)通路(signalpathway)的提出早可追溯到1972年,不過(guò)當(dāng)時(shí)被稱為信號(hào)轉(zhuǎn)換(signaltransmission)。1980年M.Rodbell在一篇綜述中提到信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)(signaltransduction),此后該概念就被廣泛使用了。信號(hào)通路是指能將細(xì)胞外的分子信號(hào)經(jīng)細(xì)胞膜傳入細(xì)胞內(nèi)發(fā)揮效應(yīng)的一系列酶促反應(yīng)通路。這些細(xì)胞外的分子信號(hào)(稱為配體,l
(UDG), Heat-Labile高效預(yù)防PCR氣溶膠污染2020/03/31
UracilDNAGlycosylase,Heat-Labile高效預(yù)防PCR氣溶膠污染——酶活高效,活性可控操作環(huán)境中的氣溶膠污染是造成PCR結(jié)果假陽(yáng)性zui常見的因素。美國(guó)科學(xué)家Lindahl早在大腸桿菌和枯草芽孢桿菌中發(fā)現(xiàn)了UDG酶(UracilDNAGlycosylase,尿嘧啶DNA糖基化酶),利用UDG酶選擇性水解含dU的DNA單鏈或DNA雙鏈的機(jī)制,巧妙地引入dUTP取代PCR體系中的dTTP而構(gòu)成了dUTP/UDG酶防污染系統(tǒng)。穩(wěn)定使用該系統(tǒng),可有效消除PCR體系中混入的擴(kuò)增殘留
性能怪獸,集體驗(yàn)度和滿意度于一身的qPCR預(yù)混液2020/03/30
性能怪獸,集體驗(yàn)度和滿意度于一身的qPCR預(yù)混液熒光定量PCR是一類高靈敏的實(shí)驗(yàn),要求實(shí)驗(yàn)人員操作高度精細(xì)化。因此,在進(jìn)行qPCR實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,我們總是必可避免的會(huì)遇到問(wèn)題:一、非實(shí)驗(yàn)因素的相關(guān)問(wèn)題?實(shí)驗(yàn)室qPCR實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目多,儀器被占用,辛苦配制后的反應(yīng)體系不知如何處置?定量樣品多,加樣任務(wù)繁重,眼花目眩擔(dān)心加樣錯(cuò)誤,實(shí)驗(yàn)結(jié)果不可信?上機(jī)時(shí)間長(zhǎng),上機(jī)實(shí)驗(yàn)次數(shù)受限,實(shí)驗(yàn)任務(wù)不能按計(jì)劃定期完成?實(shí)驗(yàn)室儀器更換新儀器,實(shí)驗(yàn)室定量?jī)x器多,定量試劑與儀器不匹配二、受實(shí)驗(yàn)因素限制的問(wèn)題:?低豐度基因定量問(wèn)題?
何必舍近求遠(yuǎn)?國(guó)內(nèi)本土優(yōu)質(zhì)IVD診斷原料值得信賴2020/03/30
何必舍近求遠(yuǎn)?國(guó)內(nèi)本土優(yōu)質(zhì)IVD診斷原料值得信賴原料短缺,國(guó)內(nèi)IVD企業(yè)產(chǎn)能受阻近日,加拿大卑詩(shī)省疾控中心表示,用于新冠病毒核酸測(cè)試的拭子(swabs)出現(xiàn)了供應(yīng)短缺。除拭子外,膠體金試紙條、診斷酶等新冠檢測(cè)關(guān)鍵用料全部面臨缺貨情況。因國(guó)內(nèi)IVD原料起步晚、品質(zhì)良莠不齊等現(xiàn)象的存在,國(guó)內(nèi)IVD企業(yè)診斷原料酶長(zhǎng)期依賴進(jìn)口。隨著國(guó)外新冠疫情大面積蔓延,新冠檢測(cè)試劑盒需求猛增。但由于跨國(guó)供應(yīng)鏈問(wèn)題,多家國(guó)內(nèi)IVD企業(yè)拿著大量的境外訂單,卻面臨進(jìn)口原料儲(chǔ)備不足,產(chǎn)能受限的制約。國(guó)產(chǎn)優(yōu)質(zhì)IVD原料值得信賴
熒光定量實(shí)驗(yàn)問(wèn)題,我們來(lái)解決——這里有專屬于你的定量試劑2020/03/27
您的熒光定量實(shí)驗(yàn)問(wèn)題,我們來(lái)解決————這里有專屬于你的定量試劑作為實(shí)驗(yàn)達(dá)人,是否會(huì)遇到以下qPCR實(shí)驗(yàn)難題?在Prime3設(shè)計(jì)出的眾多引物中徘徊不定,且糾結(jié)于所選的引物的好與壞?既糾結(jié)于溶解曲線的峰型,而又缺少理想溶解曲線峰型的理論支持?既要排長(zhǎng)隊(duì)預(yù)約qPCR儀,又要費(fèi)心勞力、分秒必爭(zhēng)的計(jì)算體系配制時(shí)間,就為能及時(shí)上機(jī)?問(wèn)題的解決只需要一款“高Ct值真實(shí)性產(chǎn)品”HieffUNICON®PowerqPCRSYBRGreenMasterMix,采用的抗體法熱啟動(dòng)TaqDNA聚合酶,有效抑制樣品準(zhǔn)備
qPCR實(shí)驗(yàn)的Ct值的合理范圍--Ct值過(guò)大或過(guò)小的解決方法2020/03/26
理性闡述qPCR實(shí)驗(yàn)的Ct值的合理范圍。(附Ct值過(guò)大或過(guò)小的解決方法)Ct值是什么?Ct值具有什么樣的作用?Ct值的正常范圍是多少?Ct值太大或者太小的原因?Ct值是熒光定量PCRzui重要的結(jié)果呈現(xiàn)形式。它被用于計(jì)算基因表達(dá)量差異或者基因拷貝數(shù)。那么熒光定量的Ct值多大可被認(rèn)為是合理?如何保證Ct值的有效范圍呢?今天就讓小編來(lái)為大家解答這個(gè)問(wèn)題。Ct值是什么?qPCR擴(kuò)增過(guò)程中,擴(kuò)增產(chǎn)物的熒光信號(hào)達(dá)到設(shè)定的熒光閾值時(shí)的所對(duì)應(yīng)的擴(kuò)增循環(huán)數(shù)(CycleThreshold)。C代表Cycle,T代
掌握這幾個(gè)影響因素,你的反轉(zhuǎn)錄實(shí)驗(yàn)就完美了2020/03/26
小翊君前幾期一直在和大家聊qPCR,今天我們開啟一個(gè)新的話題,聊一聊反轉(zhuǎn)錄。反轉(zhuǎn)錄(reversetranscription)定義:反轉(zhuǎn)錄過(guò)程簡(jiǎn)單來(lái)說(shuō)是以RNA為模板合成DNA的過(guò)程,是對(duì)中心法則的重要修正和補(bǔ)充。中心法則通常會(huì)出現(xiàn)兩個(gè)不同的表述,逆轉(zhuǎn)錄和反轉(zhuǎn)錄,二者的本質(zhì)區(qū)別在于:反轉(zhuǎn)錄是在研究過(guò)程中人為提取RNA并以之為模板人工合成DNA的過(guò)程。逆轉(zhuǎn)錄是RNA病毒自主行為,以RNA為模板形成DNA的過(guò)程。前者發(fā)生在體外,后者發(fā)生在體內(nèi)。反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)的示意圖如下圖所示:反轉(zhuǎn)錄實(shí)驗(yàn)過(guò)程看似簡(jiǎn)單的反
三色預(yù)染蛋白marker一眼鎖定您的目的蛋白2020/03/26
三色預(yù)染蛋白marker——一眼鎖定您的目的蛋白YEASEN蛋白marker,采用超純且已校準(zhǔn)的蛋白作為標(biāo)準(zhǔn),可直接上樣。分子范圍高達(dá)10-245kDa,條帶濃度高達(dá)0.1-0.4mg/mL,具有靚麗清晰的條帶和寬泛的條帶范圍,可在PAGE、WesternBlotting等蛋白實(shí)驗(yàn)中全程監(jiān)測(cè)電泳進(jìn)程、評(píng)估轉(zhuǎn)印效率、可靠定位您的目的蛋白!三色預(yù)染蛋白質(zhì)分子量標(biāo)準(zhǔn)10-180kDa三色預(yù)染蛋白質(zhì)分子量標(biāo)準(zhǔn)10-245kDa產(chǎn)品特點(diǎn)1.條帶銳利度高圖1.將20351和20352與T品牌的產(chǎn)品進(jìn)行電泳結(jié)
Yeasen*特級(jí)胎牛血清2020/03/26
背景介紹血清主要作用是為細(xì)胞生長(zhǎng)提供基本營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、提供激素和各種生長(zhǎng)因子、提供結(jié)合蛋白、提供促接觸和伸展因子使細(xì)胞貼壁免受機(jī)械損傷,對(duì)培養(yǎng)中的細(xì)胞起到某些保護(hù)作用。根據(jù)牛出生時(shí)間和血清采制分離方法的不同可將血清分為以下幾種:血清品質(zhì)等級(jí):胎牛新生牛小牛成年牛產(chǎn)品信息及特點(diǎn)純凈的來(lái)源,穩(wěn)定的性能決定了血清能否成為細(xì)胞培養(yǎng)成功的關(guān)鍵。Yeasen特級(jí)胎牛血清取自南美唯—被認(rèn)可的可以出口中國(guó)牛血清的國(guó)家——烏拉圭。Yeasen為您提供的*血清。目前Yeasen特級(jí)*胎牛血清已經(jīng)受到了高學(xué)府和院校的認(rèn)可
掌握這幾個(gè)影響因素,你的反轉(zhuǎn)錄實(shí)驗(yàn)就了2020/03/24
小翊君前幾期一直在和大家聊qPCR,今天我們開啟一個(gè)新的話題,聊一聊反轉(zhuǎn)錄。反轉(zhuǎn)錄(reversetranscription)定義:反轉(zhuǎn)錄過(guò)程簡(jiǎn)單來(lái)說(shuō)是以RNA為模板合成DNA的過(guò)程,是對(duì)中心法則的重要修正和補(bǔ)充。中心法則通常會(huì)出現(xiàn)兩個(gè)不同的表述,逆轉(zhuǎn)錄和反轉(zhuǎn)錄,二者的本質(zhì)區(qū)別在于:反轉(zhuǎn)錄是在研究過(guò)程中人為提取RNA并以之為模板人工合成DNA的過(guò)程。逆轉(zhuǎn)錄是RNA病毒自主行為,以RNA為模板形成DNA的過(guò)程。前者發(fā)生在體外,后者發(fā)生在體內(nèi)。反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)的示意圖如下圖所示:反轉(zhuǎn)錄實(shí)驗(yàn)過(guò)程看似簡(jiǎn)單的反
溶酶體探針(LysoTracker & LysoSensor)2020/03/20
溶酶體探針(LysoTracker&LysoSensor)——酸性細(xì)胞器示蹤劑背景介紹溶酶體是一種分解蛋白質(zhì)、核酸、多糖等生物大分子的細(xì)胞器。溶酶體具單層膜囊狀結(jié)構(gòu),內(nèi)含60余種酸性水解酶,包括蛋白酶、核酸酶、糖苷酶、脂酶等,分解各種外源和內(nèi)源的大分子物質(zhì)。溶酶體水解酶的適pH為3.5~5.5,溶酶體內(nèi)的酸性環(huán)境是依靠膜上的特殊轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(H泵)來(lái)維持的。溶酶體標(biāo)志酶為酸性磷酸酶,目前針對(duì)溶酶體的定位也主要圍繞酸性磷酸酶展開。圖1.溶酶體結(jié)構(gòu)溶酶體功能溶酶體存在著形態(tài)上的多樣性和異質(zhì)性,根據(jù)溶酶體
雙熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)數(shù)據(jù)集2020/03/17
雙熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)數(shù)據(jù)集雙熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)系統(tǒng)因其具有靈敏度高、無(wú)細(xì)胞內(nèi)源性表達(dá)干擾等優(yōu)勢(shì),現(xiàn)已被廣泛用于基因表達(dá)調(diào)控的研究中。該系統(tǒng)包括螢火蟲熒光素酶(Fireflyluciferase)和海腎熒光素酶(Renillaluciferase),通過(guò)和底物的相互作用檢測(cè)基因的表達(dá)。通常海腎熒光素酶相對(duì)更多地被用作轉(zhuǎn)染效率的內(nèi)參,以消除細(xì)胞數(shù)量和轉(zhuǎn)染效率的差異,實(shí)驗(yàn)結(jié)果為螢火蟲熒光素酶的熒光值和海腎熒光素酶的熒光值的比值。雙報(bào)告檢測(cè)方法的應(yīng)用十分廣泛,如調(diào)控元件功能研究、轉(zhuǎn)錄因子研究、信號(hào)轉(zhuǎn)
關(guān)于抗冠狀病毒新研藥Remdesivir信息,看完這篇就夠了2020/03/03
背景在中國(guó)農(nóng)歷新年伊始,源于中國(guó)中部省份湖北武漢新型冠狀病毒所引起的肺炎疫情牽動(dòng)著億萬(wàn)國(guó)人的心,全國(guó)上下積極行動(dòng)都在為消滅此次疫情貢獻(xiàn)自己的力量。新型冠狀病毒是以前從未在人體中發(fā)現(xiàn)的冠狀病毒新毒株,被暫命名為(2019-nCoV)。1、冠狀病毒(coronavirus)是一個(gè)大型病毒家族,已知可引起感冒以及中東呼吸綜合征(MERS)和嚴(yán)重急性呼吸綜合征(SARS)等較嚴(yán)重疾病。WHO(世界衛(wèi)生組織)介紹,經(jīng)詳細(xì)調(diào)查結(jié)果顯示,中國(guó)2002年發(fā)生了從果子貍傳至人的SARS冠狀病毒疫情;沙特阿拉伯20
NTP Set Solution2020/03/03
NTPSetSolution(ATP,CTP,UTP,GTP,100mMeach)產(chǎn)品信息產(chǎn)品名稱產(chǎn)品編號(hào)規(guī)格價(jià)格(元)NTPSet(ATP,CTP,UTP,GTP,100mMeach)10133ES031Set(4vial)2453.00產(chǎn)品描述本品為ATP、UTP、GTP和CTP共4種溶液的套裝,可用于分子生物學(xué)中多種相關(guān)應(yīng)用,如體外轉(zhuǎn)錄、RNA擴(kuò)增,siRNA合成等。還可作為多種酶的反應(yīng)底物或輔酶。本品為純度≥99%的ATP、UTP、GTP和CTP的三鈉鹽配制所得的無(wú)色透明水溶液,pH(2
Clodronate Liposomes體內(nèi)巨噬細(xì)胞清除利器2020/03/02
ClodronateLiposomes體內(nèi)巨噬細(xì)胞清除利器-、迅捷、持久——、迅捷、持久去除巨噬細(xì)胞(depletionofmacrophages)是研究巨噬細(xì)胞功能的重要方法。荷蘭阿姆斯特丹VrijeUniversity的NicovanRooijen教授開發(fā)的一款ClodronateLiposomes,可以利用巨噬細(xì)胞的內(nèi)吞機(jī)制,將膜不通透性的氯磷酸(clodronate)帶入細(xì)胞內(nèi),氯磷酸被釋放,當(dāng)達(dá)到一定的濃度時(shí)可引發(fā)巨噬細(xì)胞的凋亡,從而達(dá)到去除巨噬細(xì)胞的目的。作用原理兩親性磷脂分子在水中
新冠肺炎R(shí)T-PCR檢測(cè)試劑開發(fā)策略2020/02/27
從武漢肺炎爆發(fā)以來(lái),翊圣生物積極參與其中,基于長(zhǎng)期儲(chǔ)備的分子酶雙向改造、蛋白發(fā)酵純化和高效抗體篩選技術(shù)平臺(tái),翊圣生物已儲(chǔ)備有2000多萬(wàn)份新型冠狀病毒檢測(cè)試劑盒酶原料,可日組裝40萬(wàn)次新型冠狀病毒核酸檢測(cè)試劑盒!現(xiàn)在我們總結(jié)武漢肺炎診斷試劑盒(RT-PCR法)中的核心原料的開發(fā)策略,供讀者參閱。一、開發(fā)目的:利用中國(guó)CDC和WHO指導(dǎo)文件中相關(guān)基因的引物和探針,依次驗(yàn)證質(zhì)粒標(biāo)準(zhǔn)品、假病毒標(biāo)準(zhǔn)品,篩選出適合新冠病毒的RNA擴(kuò)增試劑。二、開發(fā)策略:1.模擬測(cè)試質(zhì)粒標(biāo)準(zhǔn)品樣本將檢測(cè)靈敏度和特異性作為R
高品質(zhì)葡聚糖硫酸鈉鹽 ——物有所需,價(jià)有所值2020/02/26
高品質(zhì)葡聚糖硫酸鈉鹽——物有所需,價(jià)有所值葡聚糖硫酸鈉鹽(dextransulfatesodiumsalt,DSS)是葡聚糖的聚陰離子衍生物,由葡聚糖和lv磺酸的酯化反應(yīng)形成,白色粉末,在水或鹽溶液中溶解得到澄清溶液翊圣生物利用*的生產(chǎn)工藝開發(fā)的DSS包含了分子量1,500~500,000Da范圍內(nèi)的多個(gè)產(chǎn)品,硫含量17-20%。其中分子量為36000-50000Da的DSS,可根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康恼{(diào)整DSS濃度和給藥時(shí)間,建立急性、慢性和急慢性交替性模型。造模操作簡(jiǎn)便,性價(jià)比高,重復(fù)性好,是腸炎建模的
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