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探秘細胞凋亡的過程2020/06/05

探秘細胞凋亡過程——實用檢測方法盤點背景圖1：細胞凋亡與壞死過程細胞壞死（necrosis）是因為病理而產(chǎn)生的被動死亡，如物理性或化學(xué)性的損害因子及缺氧與營養(yǎng)不良等均導(dǎo)致細胞壞死。表現(xiàn)為細胞脹大、胞膜破裂、細胞內(nèi)容物外溢、核變化較慢、DNA降解不充分和引起嚴重的局部炎癥反應(yīng)等。細胞凋亡與細胞壞死不同，細胞凋亡（Apoptosis）一般是指機體細胞在發(fā)育過程中或在某些因素作用下通過細胞內(nèi)基因及其產(chǎn)物的調(diào)控而發(fā)生的一種程序性細胞死亡過程，細胞壞死是細胞受到強烈理化或生物因素作用引起細胞無序變化的死亡

膠原酶2020/06/05

膠原酶——動物組織消化利器圖1：膠原酶產(chǎn)品介紹膠原酶（Collagenase）是一類能夠特異性的識別Pro-X-Gly-Pro序列（該序列高頻率出現(xiàn)在膠原中，很少發(fā)現(xiàn)于其他蛋白中），并切割該序列中的中性氨基酸（X）和甘氨酸（Gly）之間的肽鍵的肽鏈內(nèi)切酶，且能夠水解結(jié)締組織中的膠原蛋白。許多蛋白酶都能水解單鏈和變性的膠原多肽，但膠原酶是唯——種可以降解具有三股超螺旋結(jié)構(gòu)的天然膠原纖維的蛋白酶，其廣泛存在結(jié)締組織內(nèi)，其中有效的膠原酶是由厭氧細菌溶組織梭菌（Clostridiumhistolytic

NGS在病原微生物檢測中應(yīng)用2020/06/05

NGS在病原微生物檢測中的應(yīng)用背景相關(guān)由病原微生物引起的感染性疾病是臨床面臨的常見的疾病之一，并且隨著人群結(jié)構(gòu)變化、環(huán)境污染以及藥物濫用等因素的影響，病原體呈現(xiàn)多樣化和復(fù)雜化的趨勢，逐步威脅人類健康。隨著測序技術(shù)的飛速發(fā)展，NGS已逐步應(yīng)用于感染性疾病的診斷、治療和監(jiān)測，在病原微生物鑒定、分型、耐藥突變檢測及新型病原體鑒定方面有其*的優(yōu)勢。病原微生物檢測現(xiàn)狀快速準確的診斷可以對病情進行監(jiān)控，提供有效治療，控制疾病的蔓延。目前常用的病原微生物分子檢測方法主要有：PCR技術(shù)（包括常規(guī)PCR以及qPC

NGS在腫瘤檢測中的那些事兒2020/06/05

NGS在腫瘤檢測中的那些事兒一、背景介紹20世紀以來，癌癥已成為困擾人類健康的主要危害之一。根據(jù)2019年國家癌癥中心發(fā)布的2015年全國//////新癌癥統(tǒng)計數(shù)據(jù)，2015年惡性腫瘤發(fā)病約392.9萬人，死亡約233.8萬人。平均每天超1萬人被確診為癌癥，每分鐘7.5個人確診癌癥。癌癥負擔(dān)呈持續(xù)上升態(tài)勢，近10多年來，惡性腫瘤發(fā)病率每年保持約3.9％的增幅，死亡率每年保持2.5％的增幅。因而腫瘤基因突變檢測對指導(dǎo)腫瘤靶向治療、耐藥監(jiān)測及預(yù)后判斷有重要意義。圖1：中國2015年惡性腫瘤發(fā)病與死亡

干貨分享|磁珠常見問題與解決方案2020/06/02

干貨分享|磁珠常見問題與解決方案高通量測序技術(shù)的跨越式發(fā)展，使測序能力大幅上升。在整個NGS工作流程中，磁珠是*的產(chǎn)品。磁珠通過磁顆?；钚曰鶊F在一定條件下可與核酸結(jié)合和解離的原理，將樣本中目的片段分離?？蓪崿F(xiàn)對核酸樣本的高通量自動化操作，廣泛應(yīng)用于基因測序以及分子診斷領(lǐng)域。看起來很簡單的純化/分選實驗，卻在實際實驗中有各種意外的情況。那關(guān)于磁珠產(chǎn)品選擇和產(chǎn)品使用方面有什么需要注意的事項呢？接下來小翊將從磁珠的外觀、儲存、應(yīng)用和使用效果逐一對癥分析，希望能幫助大家了解磁珠實驗中的那些事。磁珠外觀Q

D-熒光素2020/05/28

D-熒光素原理D-熒光素（D-Luciferin）是熒光素酶（Luciferase）的常用底物，普遍應(yīng)用于整個生物技術(shù)領(lǐng)域，尤其是體內(nèi)活體成像技術(shù)。其作用機制是在ATP和熒光素酶的作用下，熒光素（底物）能夠被氧化發(fā)光。當(dāng)熒光素過量時，產(chǎn)生的光量子數(shù)與熒光素酶的濃度呈正相關(guān)性（見下圖）。將攜帶熒光素酶編碼基因（Luc）的質(zhì)粒轉(zhuǎn)染入細胞后，導(dǎo)入研究動物如大、小鼠體內(nèi)，之后注入熒光素，通過生物發(fā)光成像技術(shù)（BLI）來檢測光強度變化，從而實時監(jiān)測疾病發(fā)展狀態(tài)或藥物的治療功效等。也可以利用ATP對此反應(yīng)體

轉(zhuǎn)鐵蛋白（Transferrin）2020/05/26

轉(zhuǎn)鐵蛋白（Transferrin）------無血清細胞培養(yǎng)添加物背景介紹轉(zhuǎn)鐵蛋白又名運鐵蛋白（Transferrin，TRF、Tf），負責(zé)運載由消化管吸收的鐵和由紅細胞降解釋放的鐵。以三價鐵復(fù)合物（Tf-Fe3+）的形式進入骨髓中，供成熟紅細胞的生成。轉(zhuǎn)鐵蛋白主要存在于血漿中，血漿中的轉(zhuǎn)鐵蛋白供應(yīng)機體絕大部分組織的鐵，而在其不能到達的部位，由這些組織自己合成的轉(zhuǎn)鐵蛋白在局部產(chǎn)生轉(zhuǎn)鐵作用。圖1:轉(zhuǎn)鐵蛋白的結(jié)構(gòu)人轉(zhuǎn)鐵蛋白（HumanTransferrin）主要在肝臟合成，是由位于同源N-端和C-端

免疫球蛋白G（IgG）2020/05/26

免疫球蛋白G（IgG）——模擬抗體活性，神似抗體結(jié)構(gòu)免疫球蛋白免疫球蛋白（Ig）指具有抗體（Ab）活性或化學(xué)結(jié)構(gòu)，與抗體分子相似的球蛋白。免疫球蛋白是由兩條相同的輕鏈和兩條相同的重鏈通過鏈間二硫鍵連接而成的四肽鏈結(jié)構(gòu)。免疫球蛋白分為五類，即免疫球蛋白G（IgG）、免疫球蛋白A（IgA）、免疫球蛋白M（IgM）、免疫球蛋白D（IgD）和免疫球蛋白E（IgE）。圖1五類免疫球蛋白結(jié)構(gòu)示意圖IgG簡介免疫球蛋白G（ImmunoglobulinG，IgG）是血清中免疫球蛋白主成分，約占血清中免疫球蛋白總

免疫球蛋白G2020/05/26

免疫球蛋白G（IgG）——模擬抗體活性，神似抗體結(jié)構(gòu)免疫球蛋白免疫球蛋白（Ig）指具有抗體（Ab）活性或化學(xué)結(jié)構(gòu)，與抗體分子相似的球蛋白。免疫球蛋白是由兩條相同的輕鏈和兩條相同的重鏈通過鏈間二硫鍵連接而成的四肽鏈結(jié)構(gòu)。免疫球蛋白分為五類，即免疫球蛋白G（IgG）、免疫球蛋白A（IgA）、免疫球蛋白M（IgM）、免疫球蛋白D（IgD）和免疫球蛋白E（IgE）。圖1五類免疫球蛋白結(jié)構(gòu)示意圖IgG簡介免疫球蛋白G（ImmunoglobulinG，IgG）是血清中免疫球蛋白主成分，約占血清中免疫球蛋白總

【干貨】qPCR常見問題及解決方案2020/05/26

qPCR常見問題及解決方案對于從事分子生物學(xué)研究的實驗猿來說，RT-qPCR實驗可謂是老生常談了。看似風(fēng)平浪靜，只需“RNA提取-反轉(zhuǎn)錄-熒光定量”這些按部就班的操作，實則險象環(huán)生，一丁點的出錯都有可能讓我們懷疑人生。即便如此，在CNS的召喚下我們?nèi)耘f一遍遍的重復(fù)、重復(fù)、再重復(fù)。小翊深有體會，為此嘔心瀝血整理出來常用的SYBRGreen染料法RT-qPCR實驗的幾個常見問題，并給出了可能的原因和解決方案，希望大家能夠順利度過RT-qPCR大關(guān)。RT-qPCR實驗中，大家或多或少會遇到擴增曲線異常

Hifair Ⅲ 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix for qPCR （gDNA digester plus）2020/05/21

Hifair®Ⅲ1stStrandcDNASynthesisSuperMixforqPCR(gDNAdigesterplus)——Yeasen第三代逆轉(zhuǎn)錄酶預(yù)混液，高質(zhì)量cDNA的*！研發(fā)背景RT-qPCR是一個多步驟連貫實驗，逆轉(zhuǎn)錄的實驗結(jié)果只能通過后續(xù)qPCR進行判定，因此這一過程的成功與否十分關(guān)鍵。實驗過程中，你是否有遇到過這些問題？1.逆轉(zhuǎn)錄效率低導(dǎo)致后續(xù)qPCR實驗結(jié)果Ct值偏大？2.RNA具有復(fù)雜二級結(jié)構(gòu)或GC含量高導(dǎo)致逆轉(zhuǎn)錄失??？3.逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)品組分多，加樣麻煩誤差還大？。。。。。。

搞事情，翊圣請來了四位ECL超級魔術(shù)師？2020/05/20

搞事情啊，翊圣請來了四位ECL超級魔術(shù)師？？老板，都說你家ECL功能強，我給個飛克級的蛋白，能變出條帶嗎？辦不到？？老板，我多給點小費，把蛋白提高到皮克級，能不能變出條帶？還是辦不到？？那也太差勁了，還想不想混了！不，小伙，你理解錯了，是通通不是問題??！跟著我往下看！點亮您的印跡膜，一觸即發(fā)ECL試劑，即化學(xué)發(fā)光法辣根過氧化物酶（HRP）底物，是目前Westernblotting檢測中為靈敏的試劑。目前市場上普通ECL試劑在使用過程中經(jīng)常出現(xiàn)易淬滅、高背景、不穩(wěn)定以及低豐度蛋白難以檢測等問題，影

小翊帶你輕松搞定qPCR數(shù)據(jù)分析2020/05/20

化繁為簡！小翊帶你輕松搞定qPCR數(shù)據(jù)分析熒光定量PCR（qPCR）是實驗室常用的一種技術(shù)，該技術(shù)可以應(yīng)用于基因表達分析、基因分型、病原體檢測、SNP分析等。qPCR實驗操作簡單，原理易懂，但面對一堆凌亂的數(shù)據(jù)，如何進行結(jié)果分析成了頭疼的問題，今天小翊將帶你學(xué)會如何化繁為簡，輕松獲得可以發(fā)表SCI的數(shù)據(jù)！qPCR常用的分析方法有相對定量和定量，需根據(jù)不同的實驗設(shè)計進行選擇。本期我們關(guān)注的是qPCR常見的應(yīng)用—基因表達分析，一般選擇相對定量法。1.實驗設(shè)計假設(shè)目前需要研究光誘導(dǎo)對擬南芥AtSUC2

YEASEN高性能預(yù)制膠系列產(chǎn)品2020/05/14

YEASEN高性能預(yù)制膠系列產(chǎn)品——為您的實驗爭分奪秒產(chǎn)品背景相對于傳統(tǒng)的手工灌膠，使用預(yù)制膠可以避免接觸大量有毒試劑，節(jié)約大量時間，有效解決手工灌膠差異大等問題。YEASEN提供的蛋白預(yù)制膠包含梯度濃度和固定濃度，多種不同濃度可滿足不同蛋白電泳需求。其采用*的凝膠制備工藝制備而成，電泳效果極jia，兼容市面上各種電泳槽（Bio-Rad、天能、Life等），具有適應(yīng)性廣、分辨率高、穩(wěn)定性高、條帶清晰均勻等優(yōu)點。預(yù)制膠參數(shù)YEASEN高分辨率梯度預(yù)制膠，品質(zhì)更優(yōu)！·使用方便：即開即用；·適用范圍廣

活死細菌、細胞檢測2020/05/13

活死細菌、細胞檢測-----探尋生命的奧秘背景介紹真核生物（哺乳動物細胞）和原核生物（細菌）細胞增殖和細胞死亡間平衡對維持細胞有機的發(fā)育與生命的維持至關(guān)重要，如果出現(xiàn)失衡將導(dǎo)致各種疾病的發(fā)生?；钏罓顟B(tài)是研究生物增殖生長的常見研究目的，例如；對于真核活死細胞主要通過分析細胞質(zhì)膜完整性與細胞內(nèi)酯酶活性，經(jīng)過特定儀器觀察判斷，為研究細胞狀態(tài)提供了一種方便的方法，同時分析活細胞與死細胞，用于評估細胞的活力?？梢詰?yīng)用于大多數(shù)的真核哺乳動物細胞，但不適用于真菌和酵母。主要對于藥物研究、毒性判定、細胞生長狀態(tài)

Yeasen第三代逆轉(zhuǎn)錄酶預(yù)混液2020/05/12

新品推薦|反轉(zhuǎn)、高質(zhì)量cDNA，用Yeasen第三代逆轉(zhuǎn)錄酶預(yù)混液你的逆轉(zhuǎn)錄，交給YEASEN三代逆轉(zhuǎn)錄酶來守護！Hifair®Ⅲ1stStrandcDNASynthesisSuperMixforqPCR(gDNAdigesterplus)是基于翊圣Hifair®ⅢReverseTranscriptase而開發(fā)的即用型預(yù)混液。該產(chǎn)品可耐受高達65℃的反應(yīng)溫度，適合具有復(fù)雜二級結(jié)構(gòu)的RNA模板的逆轉(zhuǎn)錄；同時增強了與模板的親和力，非常適合少量模板以及低拷貝基因的逆轉(zhuǎn)錄。產(chǎn)品帶基因組DNA去除成分，適

揭秘各種主流二代測序儀攻略2020/05/12

揭秘各種主流二代測序儀，無瓜攻略隨著基因領(lǐng)域研究的不斷深入，自sanger測序?qū)崿F(xiàn)對堿基信息的可讀取后，更高通量的需求使得二代測序在基因組測序、臨床檢測和生物制藥等領(lǐng)域展現(xiàn)出的潛力。對于剛?cè)胄械男』锇?，面對各式各樣的測試平臺好奇又迷茫，Roche454、Illumina、ThermoFisher，以及國產(chǎn)MGI平臺等，這么多測序儀，他們的特點是什么？背后的發(fā)展歷程是怎樣的？今天小翊借花獻佛，梳理了目前主流的二代測序平臺，讓我們了解二代測序這十幾年的發(fā)展歷程。表1二代測序部分儀器展示備注：圖片來源

牛血清白蛋白2020/05/12

牛血清白蛋白、免疫球蛋白G（IgG）、牛凝血酶、轉(zhuǎn)鐵蛋白、胰島素、封閉血清和低密度脂蛋白YEASEN（翊圣生物）致力于為診斷試劑公司和廣大科研用戶提供高品質(zhì)的牛血清白蛋白、免疫球蛋白G（IgG）、牛凝血酶、轉(zhuǎn)鐵蛋白、胰島素、封閉血清和低密度脂蛋白，系列產(chǎn)品如下：（一）牛血清白蛋白（BSA）牛血清白蛋白（BovineSerumAlbumin,BSA）是牛血清中的一種球蛋白，又稱第五組分（需要注意的是，第五組分并不是BSA的一種組份，而是EdwinJ.Cohn教授早期從血液中通過特定的分離技術(shù)得到5

牛血清白蛋白系列產(chǎn)品2020/05/12

牛血清白蛋白、免疫球蛋白G（IgG）、牛凝血酶、轉(zhuǎn)鐵蛋白、胰島素、封閉血清和低密度脂蛋白YEASEN（翊圣生物）致力于為診斷試劑公司和廣大科研用戶提供高品質(zhì)的牛血清白蛋白、免疫球蛋白G（IgG）、牛凝血酶、轉(zhuǎn)鐵蛋白、胰島素、封閉血清和低密度脂蛋白，系列產(chǎn)品如下：（一）牛血清白蛋白（BSA）牛血清白蛋白（BovineSerumAlbumin,BSA）是牛血清中的一種球蛋白，又稱第五組分（需要注意的是，第五組分并不是BSA的一種組份，而是EdwinJ.Cohn教授早期從血液中通過特定的分離技術(shù)得到5

干貨分享|熱啟動酶耐熱機制全面解析2020/05/08

干貨分享|熱啟動酶耐熱機制全面解析常規(guī)PCR技術(shù)因能夠快速擴增任何已知的DNA///片段而被廣泛應(yīng)用于分子生物學(xué)的各個領(lǐng)域。但常規(guī)型PCR技術(shù)容易出現(xiàn)引物二聚體或錯配引起的非特異性擴增等現(xiàn)象，造成實驗結(jié)果的不準確性。熱啟動型PCR能夠很好的解決上述問題，是常用的提高PCR特異性的方法。熱啟動酶介紹熱啟動酶（Hotstartenzyme）主要利用酶的修飾物在常溫下抑制DNA聚合酶的活性，加熱至變性溫度時修飾物失活，釋放酶活，從而使PCR反應(yīng)得以正常進行。目前市面上常用的DNA聚合酶熱啟動修飾方法主