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脂蛋白—研究代謝運輸?shù)闹?/a>2019/06/25
脂蛋白—研究代謝運輸?shù)闹直尘敖榻B脂蛋白(lipoproteins),與蛋白質(zhì)結(jié)合在一起形成的脂質(zhì)-蛋白質(zhì)復合物。脂蛋白中脂質(zhì)與蛋白質(zhì)之間沒有共價鍵結(jié)合,多數(shù)是通過脂質(zhì)的非極性部分與蛋白質(zhì)組分之間以疏水性相互作用而結(jié)合在一起。通常用溶解特性、離心沉降行為和化學組成來鑒定脂蛋白的特性。YEASEN(翊圣生物)致力于為診斷試劑公司和廣大科研用戶提供高品質(zhì)的低密度脂蛋白(LDL)和高密度脂蛋白(HDL)。產(chǎn)品應用常規(guī)脂蛋白的應用乙酰化脂蛋白的應用氧化性脂蛋白的應用相關(guān)產(chǎn)品(一)低密度脂蛋白低密度脂蛋白
qPCR文庫定量專題2019/06/20
HieffNGS®LibraryQuantificationKitforIllumina®——千真萬確,精益求精產(chǎn)品簡介本產(chǎn)品是用于lllumina®平臺高通量測序文庫濃度定量的試劑盒,提供定量所需的DNA標準品、qPCRMasterMix、定量擴增引物和參比染料ROX。其中,DNA標準品包含經(jīng)梯度稀釋的六份450bp的雙鏈DNA//片段溶液,濃度為20pM-0.0002pM;擴增引物對根據(jù)NGS文庫接頭序列P5和P7設計,可保證特異性擴增雙端接頭完整的文庫分子;qPCRMasterMix是基于
快速型DNA建庫試劑盒2019/06/20
HieffNGS®FastTagmentDNALibraryPrepKit——快速型DNA建庫試劑盒產(chǎn)品描述HieffNGS®FastTagmentDNALibraryPrepKitforIllumina®是針對lllumina®高通量測序平臺專業(yè)開發(fā)設計的轉(zhuǎn)座酶法建庫試劑盒。適用于1ng/50ng的基因組DNA、cDNA、擴增子(500bp)等樣本的建庫。與常規(guī)分步法建庫相比,僅需10min即可完成DNA片段化、末端修復和接頭連接過程,顯著縮短建庫時間,并獲得優(yōu)異的測序質(zhì)量。產(chǎn)品原理在Tran
5 min了解DNA磁珠的前世今生2019/06/14
磁珠是高通量測序過程*產(chǎn)品,通過磁顆?;钚曰鶊F在一定條件下可與核酸結(jié)合和解離的原理,將樣本中目的片段分離??蓪崿F(xiàn)對核酸樣本的高通量自動化操作,廣泛應用于基因測序以及分子診斷領(lǐng)域。背景篇磁珠的發(fā)明構(gòu)想初來自于挪威科技大學的化學家JohnUgelstad,他在1976年以聚苯乙烯為主要材料,制作出均勻磁化的球體粒子。1979年Vogelstein等報道在高濃度典化鈉存在的條件下,玻璃粉末作為吸附劑用于從瓊脂糖凝膠中提取DNA片段,而后基于硅膠和其他具有親水性表面載體的固相核酸純化技術(shù)廣泛發(fā)展起來。而
Benzonase Nuclease 核酸酶2019/06/12
核酸酶,又稱廣譜核酸酶,英文名稱BenzonaseNuclease,一種來源于SerratiaMarcescen的非特異性核酸內(nèi)切酶,可在鏈內(nèi)任意核苷酸間進行切割,將核酸*消化成3-8個堿基長度的5'-單磷酸寡核苷酸,能夠在非常廣泛的條件下降解所有形式的(雙鏈,單鏈,線狀,環(huán)狀,天然或變性)DNA和RNA。隨著技術(shù)的不斷進步,科學家對于效率的要求越來越高,在消耗同樣的時間和精力下,他們更愿意選擇快速,的方法。傳統(tǒng)核酸去除主要是超聲法和DNase/RNase酶法,因為對應的實驗周期長、去除效率低,
NGS文庫構(gòu)建產(chǎn)品選擇指南2019/05/30
NGS文庫構(gòu)建產(chǎn)品選擇指南YEASEN與NGS高通量測序是對傳統(tǒng)測序技術(shù)的革命性創(chuàng)新,大力推動了科學技術(shù)的發(fā)展。Yeasen長期以來一直對高通量測序技術(shù)保持高度關(guān)注。自2009年成立以來,公司致力于分子酶的創(chuàng)新開發(fā),結(jié)合自身多年分子酶研發(fā)經(jīng)驗,集結(jié)了在基因組學和生物信息學等領(lǐng)域有豐富經(jīng)驗的科研人員組建了高通量測序研發(fā)團隊,成功推出了高通量測序上游樣本文庫制備的完整產(chǎn)品線。不僅可以提供的建庫試劑盒,同時還可以根據(jù)客戶的需求定制開發(fā)測序相關(guān)產(chǎn)品。廣泛應用于醫(yī)學檢測、科學研究等各個領(lǐng)域。公司注重產(chǎn)品品
qPCR進階攻略——帶你玩轉(zhuǎn)儀器設置!2019/05/20
熒光定量PCR實驗是分子實驗室常用的一項技術(shù)。持續(xù)關(guān)注小翊的應該都掌握了高質(zhì)量cDNA的獲取方法,引物設計指南以及反應體系的配制技巧(還未get的小伙伴戳文末鏈接),然而上機時,發(fā)現(xiàn)和別人的反應條件不一致卻又不敢動儀器?本期小翊將帶你玩轉(zhuǎn)qPCR儀器的設置!目前市面上的qPCR儀器種類五花八門,但基本上儀器的設置都相對一致。我們以ABI7500為例進行介紹。反應板設置實驗目的選擇:我們將實驗命名為“Yeasen”,進行“Quantitation:ΔΔCt”實驗。實驗方法選擇:如選用SYBRGre
測序數(shù)據(jù)不好?是不是建庫出了問題?!2019/05/17
HB190313測序數(shù)據(jù)不好?是不是建庫出了問題?!——從測序數(shù)據(jù)看文庫構(gòu)建高通量測序中的文庫構(gòu)建指的是在DNA兩端連接特定的接頭從而使其符合測序平臺要求的過程,在高通量測序過程中,文庫質(zhì)量直接影響終測序數(shù)據(jù)的質(zhì)量,打個比方,如果文庫上機測序的濃度很低,樣本在FlowCell上擴增所形成的DNA樣本簇就會很少,測序數(shù)據(jù)量也將減少,這就可能導致測序失敗,所以我們說文庫的質(zhì)量控制和質(zhì)量評估也是NGS中的關(guān)鍵步驟。文庫如何質(zhì)控?評估文庫質(zhì)量的方法有哪些?n文庫質(zhì)控:文庫在上機之前都有會進行質(zhì)量檢測,質(zhì)
這有一份FFPE樣本建庫的檔案,還不趕緊Pick?2019/05/17
這有一份FFPE樣本建庫的檔案,還不趕緊Pick?什么是FFPE?FFPE(Formalin-FixedandParrffinEmbedded),即福爾馬林固定石蠟包埋樣本。由于這種處理方法能夠較長時間地保存組織或制備檢驗所需的組織標本,所以在臨床病理檢驗、腫瘤基因檢測中應用廣泛。在世界范圍內(nèi),大約有數(shù)十億份組織樣品保存在醫(yī)院或者組織樣品庫中,其中絕大多數(shù)是使用福爾馬林固定石蠟包埋的方法處理的樣品。FFPE樣本通常代表了珍貴且來源廣泛的生物醫(yī)學研究材料,為闡明疾病機制、回顧性研究等提供了寶貴的資
10 min ,get甲基化研究速成指南2019/05/16
什么是DNA甲基化DNA甲基化(DNAmethylation)是DNA化學修飾的一種形式,能夠在不改變DNA序列的前提下改變遺傳表現(xiàn)。DNA甲基化是指在DNA甲基化轉(zhuǎn)移酶的作用下,在基因組CpG二核苷酸的胞嘧啶5'碳位共價鍵結(jié)合一個甲基基團。DNA甲基化的結(jié)果,一般是使甲基化位點的下游基因表達量變少。圖1:DNA甲基化原理圖為什么研究DNA甲基化DNA甲基化是早發(fā)現(xiàn)的基因表觀修飾方式之一,可能存在于所有高等生物中。DNA甲基化在維持細胞正常功能、傳遞基因組印記、胚胎發(fā)育、腫瘤發(fā)生等方面發(fā)揮重要作
小分子化合物專題2019/05/15
小分子化合物專題一、信號通路信號通路是指當細胞里要發(fā)生某種反應時信號從細胞外到細胞內(nèi)傳遞了一種信息,細胞要根據(jù)這種信息來做出反應的現(xiàn)象。信號通路(signalpathway)的提出早可追溯到1972年,不過當時被稱為信號轉(zhuǎn)換(signaltransmission)。1980年M.Rodbell在一篇綜述中提到信號轉(zhuǎn)導(signaltransduction),此后該概念就被廣泛使用了。信號通路是指能將細胞外的分子信號經(jīng)細胞膜傳入細胞內(nèi)發(fā)揮效應的一系列酶促反應通路。這些細胞外的分子信號(稱為配體,l
如何定量低豐度目的基因的表達2019/01/28
如何定量低豐度目的基因的表達(含詳細解決方法)有時候,qPCR實驗會成為阻礙你課題順利開展的強勢攔路虎!看似簡單的基因表達量差異驗證,當遇到低豐富表達的基因時,也許就舉步維艱。模板獲取困難導致的RNA提取量少或RNA質(zhì)量不佳,即使選蕞佳的試劑、篩選出良好的引物,也有可能qPCR定量得到的內(nèi)參基因CT值在18-20個cycle,而目的基因在31-35個循環(huán)。遇到這種情況,你是怎么解決的呢?qPCR在低豐度表達基因定量中的局限性基因的豐度是指基因在基因組中的拷貝數(shù)??煞譃楦哓S度,中等豐度和低豐度。低
dsDNA HS Assay Kit for Qubit®數(shù)據(jù)測評2018/05/23
行走江湖靠的就是實力dsDNAHSAssayKitforQubit®數(shù)據(jù)測評——簡便、靈敏、準確、穩(wěn)定dsDNAAssayKitforQubit®是Yeasen生物開發(fā)的專門用于Qubit®熒光儀或熒光酶標儀的試劑盒,線性范圍0.2-100ng,即使在存在ssDNA、RNA和單體核苷酸的條件下,也可以選擇性的檢測dsDNA,且耐受較高濃度的蛋白質(zhì)、鹽類、洗滌劑等污染物。產(chǎn)品名稱產(chǎn)品編號規(guī)格儲存dsDNAHSAssayKitforQubit®12640ES60100T2-8℃dsDNAHSAssa
文獻 | Molecular Plant: 解密水稻半矮桿與應用之謎2018/05/23
文獻|MolecularPlant:解密水稻半矮桿與應用之謎倒伏是影響水稻高產(chǎn)穩(wěn)產(chǎn)的主要限制因素之一。自20世紀60年代以來,以作物矮化育種為標志的“綠色革命”主要是利用赤霉素合成基因SD1的突變體,培育半矮稈性狀,提高作物(水稻)的抗倒伏能力,使水稻產(chǎn)量得到了大面積的顯著增加。經(jīng)過多年研究,雖然在水稻中發(fā)現(xiàn)了超過60個基因可以導致半矮稈性狀,但這些基因除影響莖稈長度還影響其它農(nóng)藝性狀,難以應用于培育抗倒伏品種。目前,SD1的突變?nèi)匀皇桥嘤景氚捫誀畹闹饕?。由于單一的可用基因,抗倒伏性?
淺談DNA磁珠的作用原理2018/05/23
作為DNA分選磁珠的生產(chǎn)廠商,我們zui經(jīng)常被客戶問到的問題就是:高通量測序(NGS)文庫制備時,DNA磁珠為什么可以用來純化和分選文庫?在這里我們整理相關(guān)的資料,對這個問題做簡單的闡述。分選磁珠的作用原理是基于一種固相載體可逆化固定(SPRI)的分離純化方法。磁珠體系中一般包含:磁珠、DNA、聚乙二醇(PEG)、以及鹽離子等,在一定濃度的PEG和鹽離子環(huán)境中,DNA可吸附到羧基修飾的高分子磁珠表面(即固相載體),該過程是可逆的,在適當條件下,結(jié)合的DNA分子可以被洗脫回收。納米級別的磁珠表面性
Western Blot快速實驗攻略2018/05/23
一、WesternBlot實驗原理蛋白免疫印跡(WesternBlot,WB)是將蛋白質(zhì)經(jīng)電泳分離后轉(zhuǎn)移到膜上,然后利用抗體進行檢測的技術(shù)。完整的WB流程,如下圖所示,包含樣本制備、SDS-PAGE、轉(zhuǎn)膜、抗體結(jié)合、蛋白檢測等5個大步驟。二、試劑準備詳見文末附錄。三、實驗步驟1.樣本制備1)融解RIPA裂解液,混勻。取適當量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入PMSF,使PMSF的zui終濃度為1mM。2)貼壁細胞:去除培養(yǎng)液,用PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍。按照6孔板每孔加入150-250μ
RIPA裂解液,讀這些就夠了!2017/12/01
1.什么是RIPA裂解液?RIPA裂解液(RadioImmunoprecipitationAssayLysisbuffer,放射免疫沉淀法裂解緩沖液)是一種傳統(tǒng)的可用于裂解細胞或組織的快速裂解液,其原理為利用表面活性劑等裂解細胞膜(包括核膜),從組織或細胞中抽取可溶性蛋白。RIPA裂解液裂解后得到的蛋白一般可直接用于常規(guī)的WB、IP、co-IP等實驗。2.RIPA裂解液里有什么?RIPA裂解液的配制方法有很多種,主要包括裂解成分、蛋白酶抑制劑和磷酸酶抑制劑三種組分。裂解成分可通過破壞細胞膜和蛋白
Benzonase Nuclease高活力核酸酶2017/05/23
BenzonaseNuclease高活力核酸酶——消滅核酸,拒絕污染1.前言核酸污染是生物樣本制備中常常遇到的問題。在蛋白純化的過程中,如果您提取的蛋白粘度很高、蛋白純化的得率很低、蛋白檢測的結(jié)果很差,那么您的樣本可能遭受了核酸污染。如何去除核酸?超聲法和DNase/RNase酶法是常用的方法,但存在諸多缺陷(表1)。表1核酸去除,超聲法與DNase/RNase酶法優(yōu)缺點超聲法DNase/RNase酶法優(yōu)點利用剪切力可在一定程度上降解核酸利用核酸內(nèi)切酶活性,可在溫和條件下,較好的消化核酸缺點僅能
3D多肽水凝膠超越基質(zhì)膠2017/03/03
PeptideHydrogelSuitablefor3DCellCulture——3D多肽水凝膠超越基質(zhì)膠(matrigel)Yeasen多肽水凝膠產(chǎn)品是由一種由16個氨基酸組成的多肽,在鹽離子存在情況下自發(fā)組裝成的水凝膠支架結(jié)構(gòu)。多肽的大小通常在5nm左右,是親水性和疏水性氨基酸殘基交替排列組成的兩性分子肽段,能形成折疊片結(jié)構(gòu),并自組裝形成納米纖維,這些納米纖維相互交織在一起形成基質(zhì)并進一步形成含水量超過99.5%的水凝膠支架(見圖1)。Yeasen多肽水凝膠無需通過調(diào)節(jié)聚合物和交聯(lián)劑的量來獲
Chromotek GFP-Traps2016/03/23
關(guān)鍵詞:ChromoTek、GFP、RFP、免疫沉淀、IP、抗體、瓊脂糖、磁珠德國ChromoTek公司成立于2008年,擁有德國制造的良好質(zhì)量,致力于細胞生物學和蛋白質(zhì)組學的研發(fā)與研究,公司擁有強大的研發(fā)團隊,有*生物制劑,主要使命是花費較少的時間和成本,使客戶獲得得高質(zhì)量的實驗數(shù)據(jù)。產(chǎn)品包括單克隆抗體、重組單域抗體、熒光抗體、GFP或RFP連接蛋白等。德國ChromoTek是一家專業(yè)研發(fā)生產(chǎn)標簽抗體的公司,利用羊駝抗體的特異性解決了傳統(tǒng)GFP/RFP抗體分子量過大、轉(zhuǎn)染表達效率低的問題,研發(fā)
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