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化學(xué)對(duì)照品的來(lái)源與正確使用方法2023/04/11: 質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中所需對(duì)照品，如為現(xiàn)行國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)收載并由中國(guó)藥品生物制品檢定所提供者，可直接按類別采用。但應(yīng)注明所用化學(xué)對(duì)照品的批號(hào)、類別等。其它來(lái)源的品種則應(yīng)按以下要求提供資料。一、化學(xué)對(duì)照品1．對(duì)照品的來(lái)源由植、動(dòng)物提取的需要說(shuō)明原料的科名、拉丁學(xué)名和藥用部位及有關(guān)具體的提取、分離工藝、方法；化學(xué)合成品注明供應(yīng)來(lái)源及其工藝方法。2．確證驗(yàn)證已知結(jié)構(gòu)的化合物需提供必要的參數(shù)及圖譜，并應(yīng)與文獻(xiàn)值或圖譜一致，如文獻(xiàn)無(wú)記載，則按未知物要求提供足以確證其結(jié)構(gòu)的參數(shù)。如元素分析、熔點(diǎn)、紅外光譜、紫外光譜、核磁

內(nèi)標(biāo)物、對(duì)照品、標(biāo)準(zhǔn)品的區(qū)分方法2023/04/11: 實(shí)際工作中，一般做液相要用到對(duì)照品，標(biāo)準(zhǔn)品可以從試劑公司買，但有的物質(zhì)是沒(méi)有標(biāo)準(zhǔn)品的，大家就常說(shuō)那是對(duì)照品，純度都可以達(dá)到98%，但是到底對(duì)照品和標(biāo)準(zhǔn)品有沒(méi)有一個(gè)嚴(yán)格的界定呢?還有，做內(nèi)標(biāo)法，說(shuō)用的是內(nèi)標(biāo)物，這個(gè)內(nèi)標(biāo)物和對(duì)照品和標(biāo)準(zhǔn)品又有什么不同呢?將一個(gè)已知質(zhì)量，樣品中不含有雜質(zhì)的純物質(zhì)，加入至待測(cè)樣品溶液中，以此純物質(zhì)的量為標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)比測(cè)定待測(cè)組分的含量，該純物質(zhì)稱為內(nèi)標(biāo)物。內(nèi)標(biāo)物需滿足下列要求：能wan全溶解于樣品中，且不與待測(cè)組分發(fā)生化學(xué)作用;峰位盡可能與待測(cè)組分的峰位靠近，但能與待測(cè)組分

遠(yuǎn)慕簡(jiǎn)述巨噬細(xì)胞的分離和純化2023/04/10: 1、取2～3公斤重的家兔，耳緣靜脈注射10ml空氣處死動(dòng)物或注射2ml（含130mg）戊巴bi妥麻醉動(dòng)物。仰臥固定，消毒胸部，剪開胸壁。以下過(guò)程注意無(wú)菌操作。小心從環(huán)狀軟骨下方剪下氣管，分離心臟和血管，取出肺，剪去脂肪和結(jié)締組織。用無(wú)菌紗布小心擦凈肺表面，稱重。2、分離肺泡巨噬細(xì)胞：用夾子夾住氣管，使肺懸空。向氣管中注射40ml無(wú)菌的冷生理鹽水，讓生理鹽水進(jìn)入全部肺泡。用鑷子提起氣管，從夾子下面剪斷氣管，將肺中的液體倒入離心管中。再用同樣方法，用40ml無(wú)菌冷生理鹽水沖洗肺泡，合并浸出液，置4℃

原代細(xì)胞與細(xì)胞系怎么選擇？2023/04/10: 原代細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢，一般認(rèn)為，原代細(xì)胞培養(yǎng)的第1代和傳代到第10代以內(nèi)統(tǒng)稱為原代培養(yǎng)。原代培養(yǎng)的細(xì)胞一般傳至10代左右就不容易傳下去了，細(xì)胞的生長(zhǎng)會(huì)出現(xiàn)停滯，大部分細(xì)胞衰老死亡。但是有極少數(shù)的細(xì)胞能夠度過(guò)“危機(jī)”而繼續(xù)傳下去，這些存活的細(xì)胞一般能夠傳到40-50代，這種傳代細(xì)胞叫做細(xì)胞株。當(dāng)細(xì)胞傳至50代以后又會(huì)出現(xiàn)“危機(jī)”，這時(shí)有部分細(xì)胞的遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變且?guī)в邪┳兊奶攸c(diǎn)，從而可能無(wú)限制地傳代下去，這種傳代細(xì)胞稱為細(xì)胞系。細(xì)胞系因其容易培養(yǎng)、種類多、產(chǎn)量可觀的優(yōu)點(diǎn)一直是細(xì)胞水平研究的Shou選

小膠質(zhì)細(xì)胞和星形膠質(zhì)細(xì)胞的區(qū)別2023/04/10: 小膠質(zhì)細(xì)胞的簡(jiǎn)介1、神經(jīng)膠質(zhì)中具有吞噬功能的細(xì)胞。主要分布于大腦、小腦的皮質(zhì)及脊髓的灰質(zhì)，具有運(yùn)動(dòng)和吞噬神經(jīng)組織廢物的功能。2、神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞中最小的一種。胞體細(xì)長(zhǎng)或橢圓。核小，扁平或呈三角形，染色深。細(xì)胞的突起細(xì)長(zhǎng)，有分支，表面有許多小棘突。小膠質(zhì)細(xì)胞的數(shù)量少，僅占全部膠質(zhì)細(xì)胞的5%左右。中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷時(shí)，小膠質(zhì)細(xì)胞可轉(zhuǎn)變?yōu)榫奘杉?xì)胞，吞噬細(xì)胞碎屑及退化變性的髓鞘。3、胞體小、致密、呈長(zhǎng)圓形，細(xì)胞核與胞體長(zhǎng)軸一致，染色體密集，胞突短，表面有許多棘樣膨大。小膠質(zhì)細(xì)胞數(shù)量少，但在白質(zhì)和灰質(zhì)內(nèi)均存在。

關(guān)于人源細(xì)胞系你了解多少？2023/04/10: 人源細(xì)胞系（通過(guò)選擇的永生細(xì)胞株，包括HeLa、OVCAR-3和LNCaP等常見癌癥細(xì)胞系），人源細(xì)胞系是一個(gè)統(tǒng)稱，實(shí)驗(yàn)室常用的有結(jié)腸癌腫瘤細(xì)胞系，該細(xì)胞系中可檢測(cè)到活躍的人源。人神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞系，衍化神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(GDNF)ELISA試劑盒，常用檢測(cè)步驟：（1）將待檢血清用稀釋液從1：100開始作2倍連續(xù)稀釋，加入抗原孔，100μl/孔，同時(shí)設(shè)陰、陽(yáng)性對(duì)照，37℃水浴1小時(shí)；（2）棄去血清，用洗滌液洗滌5～6次；（3）加酶結(jié)合物，用稀釋液按工作濃度稀釋，100μl/孔，37℃水浴1小

遠(yuǎn)慕簡(jiǎn)述質(zhì)粒載體的分類情況2023/04/07: 質(zhì)粒載體的分類按復(fù)制形式分為嚴(yán)緊型和松弛型復(fù)制。根據(jù)質(zhì)粒DNA復(fù)制與宿主之間的關(guān)系或在宿主細(xì)胞的拷貝數(shù)的多少，可以將質(zhì)粒分為兩種不同的復(fù)制類型：嚴(yán)緊型和松弛型。嚴(yán)緊型質(zhì)粒復(fù)制受宿主染色體DNA復(fù)制的嚴(yán)格控制，拷貝數(shù)較小一般只有1~3個(gè)拷貝。疏松型質(zhì)粒的復(fù)制宿主的控制比較松，在宿主中的拷貝數(shù)比較多，一般有10~200個(gè)拷貝，有時(shí)可達(dá)到700個(gè)。按基因轉(zhuǎn)移性分兩類：（1）傳遞性質(zhì)粒：常為大型、嚴(yán)緊型質(zhì)粒；（2）非傳遞性質(zhì)粒：多為小型、松弛型質(zhì)粒。按遺傳性狀、產(chǎn)物分類（1）抗生素抗性：如氨芐西林、氯霉

實(shí)驗(yàn)室常用的這些化學(xué)品要注意了！2023/04/07: 1.乙酸(濃)必須非常小心地操作?？赡苡捎谖牖蚱つw吸收而受到傷害。要戴合適的手套和護(hù)目鏡。在化學(xué)通風(fēng)櫥\生物安全柜里使用。2.乙腈是非常易揮發(fā)和特別易燃的，它是一種刺激物和化學(xué)窒息劑，可因吸入、咽下或皮膚吸收而發(fā)揮其效應(yīng)。嚴(yán)重中毒的病人可按qing化物中毒方式處理。操作時(shí)要戴合適的手套和安全眼鏡。只能在通風(fēng)櫥\生物安全柜里使用，遠(yuǎn)離熱、火花和明火。3.氯化銨(NH4Cl)可因吸入、咽下或皮膚吸收而危害健康。操作時(shí)要戴合適的手套和安全眼鏡并在通風(fēng)櫥\生物安全柜里進(jìn)行。4.氫氧化銨(NH4OH)是

指示劑的分類、原理用量以及配制介紹2023/04/07: 指示劑是化學(xué)試劑中的一類。在一定介質(zhì)條件下，其顏色能發(fā)生變化、能產(chǎn)生渾濁或沉淀，以及有熒光現(xiàn)象等。常用它檢驗(yàn)溶液的酸堿性；滴定分析中用來(lái)指示滴定終點(diǎn)；環(huán)境檢測(cè)中檢驗(yàn)有害物。一般分為酸堿指示劑、氧化還原指示劑、金屬指示劑、吸附指示劑等。指示劑分類1、酸堿指示劑指示溶液中H+濃度的變化，是一種有機(jī)弱酸或有機(jī)弱堿，其酸性和堿性具有不同的顏色。指示劑酸HIn在溶液中的離解常數(shù)Ka=[H+][In-]/[HIn]，即溶液的顏色決定于[In-]/[HIn]，而[In-]/[HIn]又決定于[H+]。以甲基橙

標(biāo)準(zhǔn)菌株的應(yīng)用以及管理的相關(guān)流程2023/04/07: 一、標(biāo)準(zhǔn)菌株的概念及其應(yīng)用1.1標(biāo)準(zhǔn)菌株概念1）GB/T27405-2008實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制規(guī)范食品微生物檢測(cè)：①標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)物：標(biāo)準(zhǔn)菌株、標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株和工作菌株的統(tǒng)稱。②標(biāo)準(zhǔn)菌株：至少定義至屬或種水平的菌株。按其特征進(jìn)行分類和描述，有明確的來(lái)源。③標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備菌株：標(biāo)準(zhǔn)菌株經(jīng)過(guò)一代轉(zhuǎn)接后獲得的同種菌株。④工作菌株：由標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備轉(zhuǎn)接后獲得的同種菌株。1.2標(biāo)準(zhǔn)菌株的應(yīng)用：各種國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)、國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)及企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)等的相關(guān)微生物檢測(cè)，用于驗(yàn)收培養(yǎng)基(包括試劑盒)、驗(yàn)證方法和評(píng)估實(shí)驗(yàn)操作。二、微生物菌種管理的相

影響抗原抗體反應(yīng)的三大因素2023/04/06: （1）電解質(zhì)：抗原和抗體通常為蛋白質(zhì)分子，等電點(diǎn)分別為pH3～5和pH5～6，在中性或:弱堿性的環(huán)境中，表面均帶負(fù)電荷，適當(dāng)濃度的電解質(zhì)會(huì)使他們失去一部分負(fù)電荷而相互結(jié)合，出現(xiàn)肉眼可見的凝集或沉淀現(xiàn)象：在抗原抗體反應(yīng)中，常用0.85%的NaCI溶液或各種緩沖液作為抗原、抗體的稀釋液，以提供適當(dāng)濃度的電解質(zhì)。（2）溫度：抗原抗體反應(yīng)必須在適宜的溫度中進(jìn)行，一般為15～40℃，通常最適為37℃。一定范圍內(nèi)，溫度升高，可促進(jìn)抗原抗體分子問(wèn)的碰撞機(jī)會(huì)，加速抗原抗體復(fù)合物的形成，加快可見反應(yīng)的速度，若溫度

遠(yuǎn)慕簡(jiǎn)述PCR原理的圖解和優(yōu)缺點(diǎn)2023/04/06: 聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）是一種用于放大擴(kuò)增特定的DNA片段的分子生物學(xué)技術(shù)，它可看作是生物體外的特殊DNA復(fù)制，PCR的最大特點(diǎn)是能將微量的DNA大幅增加。因此，無(wú)論是化石中的古生物、歷史人物的殘骸，還是幾十年前兇殺案中兇手所遺留的毛發(fā)、皮膚或血液，只要能分離出一丁點(diǎn)的DNA，就能用PCR加以放大，進(jìn)行比對(duì)。PCR是利用DNA在體外攝氏95°高溫時(shí)變性會(huì)變成單鏈，低溫（經(jīng)常是60°C左右）時(shí)引物與單鏈按堿基互補(bǔ)配對(duì)的原則結(jié)合，再調(diào)溫度至DNA聚合酶最適反應(yīng)溫度（72°C左右），DNA聚合酶沿著磷

免疫熒光技術(shù)直接法測(cè)抗原實(shí)驗(yàn)步驟2023/04/06: 免疫熒光技術(shù)直接法測(cè)抗原實(shí)驗(yàn)步驟⑴基本原理將熒光素標(biāo)記在相應(yīng)的抗體上,直接與相應(yīng)抗原反應(yīng)。其優(yōu)點(diǎn)是方法簡(jiǎn)便、特異性高,非特異性熒光染色少。缺點(diǎn)是敏感性偏低;而且每檢查一種抗原就需要制備一種熒光抗體。此法常用于細(xì)菌、病毒等微生物的快速檢查和腎炎活檢、皮膚活檢的免疫病理檢查。⑵試劑與儀器磷酸鹽緩沖鹽水(PBS):0.01mol/L,pH7.4熒光標(biāo)記的抗體溶液:以0.01mol/L,pH7.4的PBS進(jìn)行稀釋緩沖甘油:分析純無(wú)熒光的甘油9份+pH9.20.2M碳酸鹽緩沖液1份配制搪瓷桶三只(內(nèi)有0.

完wan全抗原，半抗原和超抗原的概念區(qū)別2023/04/06: wan全抗原，半抗原和超抗原的概念區(qū)別wan全抗原：同時(shí)具有免疫原性和抗原性的抗原，又稱免疫原。半抗原：僅具備抗原性而無(wú)免疫原性的抗原，如某些寡糖、類脂和藥物等。超抗原：能非特異激活多克隆T細(xì)胞并能刺激其分泌大量細(xì)胞因子的抗原。超抗原與普通抗原超抗原（superantigen，SAg）是一類只需極低濃度（≤10-9M）即可激活大量的T細(xì)胞克隆，產(chǎn)生ji強(qiáng)免疫應(yīng)答的物質(zhì)。超抗原與普通抗原相比，不需要常規(guī)的細(xì)胞內(nèi)抗原提呈，無(wú)MHC限制性。超抗原一端與APC表面的MHC-Ⅱ類分子抗原結(jié)合槽外的非多態(tài)區(qū)

遠(yuǎn)慕分享：動(dòng)植物細(xì)胞大量培養(yǎng)的培養(yǎng)方法2023/04/04: 大量培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞的方法可分為兩種：①懸浮培養(yǎng)，淋巴細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞等能在液體培養(yǎng)基中懸浮生長(zhǎng)。懸浮培養(yǎng)系統(tǒng)，工業(yè)放大容易，成本低，不易受污染，可在帶螺旋槳或平槳攪拌的通用發(fā)酵罐中進(jìn)行。②大多數(shù)動(dòng)物細(xì)胞需要附著在一定的固定表面上才能增殖，因此稱單層培養(yǎng)。單層培養(yǎng)的突出問(wèn)題是提供細(xì)胞生長(zhǎng)所需的表面積。迄今為止應(yīng)用最guang泛的是滾瓶法,滾瓶是平放的玻璃瓶，內(nèi)盛培養(yǎng)基，細(xì)胞在其內(nèi)壁上附著生長(zhǎng)，隨著瓶子滾動(dòng)細(xì)胞間歇地接觸空氣和培養(yǎng)基。此外，最you效地提供比表面積（表面積/培養(yǎng)基體積）的是微珠法。微珠的

【細(xì)胞凍存】懸浮細(xì)胞與貼壁細(xì)胞的存儲(chǔ)方法2023/04/04: 細(xì)胞的凍存:為避免污染造成的損失，最小化連續(xù)細(xì)胞系的遺傳改變和避免有限細(xì)胞系的老化和轉(zhuǎn)化，需要凍存哺乳細(xì)胞。凍存細(xì)胞前，細(xì)胞應(yīng)該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來(lái)凍存細(xì)胞。對(duì)于包含有血清的培養(yǎng)基，成分可能如下：◆包含10％甘油的wan全培養(yǎng)基，◆包含10％二甲基亞砜（DMSO）的wan全培養(yǎng)基，◆50％細(xì)胞條件培養(yǎng)基和50％含有10％甘油的新鮮培養(yǎng)基，或◆50％細(xì)胞條件培養(yǎng)基和50％含有10％二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對(duì)于無(wú)血清培養(yǎng)基，一些普通的培養(yǎng)基成分可能是：◆50％細(xì)胞條件無(wú)血清培養(yǎng)

關(guān)于懸浮細(xì)胞換液需要注意的事項(xiàng)2023/04/04: 1、細(xì)胞換液是否需要用PBS清洗我們知道，在“貼壁細(xì)胞傳代”中，培養(yǎng)基中的血清會(huì)抑制胰酶的活性，影響消化的效果，所以必須要PBS的清洗。但對(duì)于細(xì)胞換液，尚未查到有資料明確說(shuō)明是否需要PBS清洗。我覺(jué)得這里應(yīng)該根據(jù)細(xì)胞的具體情況考慮：1.若細(xì)胞比較“嬌氣”或生長(zhǎng)狀態(tài)不是特別好時(shí)，建議還是不要用PBS清洗。一方面，細(xì)胞貼壁的狀態(tài)可能不是很牢固，PBS的沖洗會(huì)破壞細(xì)胞的貼壁狀態(tài)；另一方面，PBS可能會(huì)洗掉細(xì)胞分泌的一些生長(zhǎng)因子，這同樣不利于細(xì)胞狀態(tài)的調(diào)整。如果一定要洗，可以緩慢清洗，減少對(duì)細(xì)胞的傷害2

標(biāo)記抗體的方法和對(duì)應(yīng)的應(yīng)用2023/04/04: 熒光素標(biāo)記熒光色素是最常chang用于標(biāo)記抗體的標(biāo)記物之一。熒光素經(jīng)恰當(dāng)?shù)募ぐl(fā)可發(fā)光，從而得知抗體的定位和待測(cè)抗原的分布情況，主要用于細(xì)胞分選或高分辨率免疫染色，是一種非常好的亞細(xì)胞水平精確定位的方法。酶標(biāo)記酶標(biāo)記抗體是將酶與特異性抗體經(jīng)適當(dāng)方法連接而成，其應(yīng)用范圍非常廣泛，結(jié)果即時(shí)可見、敏感性高，但較難應(yīng)用于定量分析。生物su標(biāo)記生物su標(biāo)記反應(yīng)簡(jiǎn)單、溫和且很少抑制抗體活性，將生物su與抗體共價(jià)結(jié)合是一種非常簡(jiǎn)便、直接的標(biāo)記方法。免疫熒光技術(shù)（Immunofluorescencetechniq

PCR實(shí)驗(yàn)到底需要哪些種類的酶？2023/04/03: 聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）是一種用于放大擴(kuò)增特定的核苷酸片段的分子生物學(xué)技術(shù)，它可看作是生物體外的特殊核苷酸復(fù)制，PCR的最大特點(diǎn)是能將微量的核苷酸進(jìn)行大幅擴(kuò)增，從而達(dá)到容易鑒定和識(shí)別程度。各種PCR到底需要哪些種類的酶？下面一起跟著遠(yuǎn)慕生物來(lái)了解一下。DND聚合酶——又稱DNA依賴的DNA聚合酶它是以DNA為模板，催化底物dNTP分子聚合形成子代DNA的一類酶。DNA聚合酶根據(jù)聚合酶活力特征和外切酶活性特征的不同，有可以分為多種。在IVD領(lǐng)域中比較常見的酶如下：TaqDNA聚合酶——TaqDNA

PCR技術(shù)的各種變體了解一下2023/04/03: 1.遞減PCR(touchdownPCR)：前幾循環(huán)溫度逐漸下降。2.逆轉(zhuǎn)錄PCR(RT-PCR)：以由mRNA逆轉(zhuǎn)錄而來(lái)的DNA為模板，由此產(chǎn)生出來(lái)的DNA不帶有內(nèi)含子(基因中不具意義的段落)，常應(yīng)用于分子克隆技術(shù)。3.熱啟動(dòng)PCR(hotstartPCR)：以高熱活化型核酸聚合酶進(jìn)行反應(yīng)，減少非專一性產(chǎn)物。4.即時(shí)PCR(real-timePCR)：PCR過(guò)程中利用螢光探針或染料定量檢測(cè)，又稱定量PCR(quantitativePCR)。5.巢式PCR(nestedPCR)：先用低特異性引物

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