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上海谷研實(shí)業(yè)有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第10年
腫瘤細(xì)胞對(duì)生存壓力有降解能力2017/12/21
腫瘤細(xì)胞自噬是細(xì)胞應(yīng)對(duì)生存壓力而降解其內(nèi)非必要成分以提供營(yíng)養(yǎng)和能量的循環(huán)過程。巨胞飲過程則會(huì)從細(xì)胞外攝取流體、細(xì)胞膜、細(xì)菌和病毒等物質(zhì)并包裹成小囊泡。論文主要作者、西北大學(xué)醫(yī)學(xué)院皮膚科教授羅伯特·拉沃克說:“我們研究證實(shí),miR-103/107能同時(shí)調(diào)控這兩個(gè)重要過程,既能確保自噬過程堅(jiān)持到細(xì)胞分裂zui后階段,又能預(yù)防巨胞飲過程從細(xì)胞外過量攝取液體?!毖芯咳藛T讓miR103/107沉默后發(fā)現(xiàn),巨胞飲形成的大空泡并沒有像往常那樣從眼角膜邊緣上皮細(xì)胞內(nèi)降解掉,而是大量保留。為找到原因,他們利用超高
為什么腫瘤細(xì)胞不易轉(zhuǎn)染?2017/12/14
腫瘤細(xì)胞是指細(xì)胞生長(zhǎng)不依賴支持物表面,在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長(zhǎng),如淋巴細(xì)胞。在實(shí)驗(yàn)室經(jīng)常會(huì)遇到懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染,其和貼壁細(xì)胞轉(zhuǎn)染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室用的是脂質(zhì)體類的轉(zhuǎn)染試劑,脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染是基于電荷吸引原理,先形成脂質(zhì)體-DNA復(fù)合物,散布在細(xì)胞周圍,然后通過細(xì)胞的內(nèi)吞作用,將目的基因?qū)爰?xì)胞內(nèi),而脂質(zhì)體復(fù)合物與貼壁細(xì)胞的接觸機(jī)會(huì)比懸浮細(xì)胞高出很多倍,所以,脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染時(shí)懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率要明顯低于貼壁細(xì)胞。其次,脂質(zhì)體試劑的毒性較大,這就使得懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染更為困難了。另外,懸浮細(xì)胞不易培
ATCC細(xì)胞培養(yǎng)及外源基因?qū)氲膶?shí)驗(yàn)步驟2017/12/12
ATCC細(xì)胞的傳代培養(yǎng)(*天)1)顯微鏡觀察母細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài),確定傳代比例。為了獲得較高的轉(zhuǎn)染效率,必需保證細(xì)胞處于合適的生長(zhǎng)密度,因此應(yīng)根據(jù)母細(xì)胞的生長(zhǎng)密度調(diào)整傳代比例。磷酸鈣轉(zhuǎn)染的合適細(xì)胞密度為50%-70%,本實(shí)驗(yàn)中使用的293細(xì)胞長(zhǎng)成致密單層后一般按照1:6傳代即可。2)在酒精燈旁打開培養(yǎng)皿蓋,倒去皿中的細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)液,加入2mlHank’s液,輕輕搖動(dòng),將溶液倒出。3)消化與分裝。在培養(yǎng)皿中加入1ml消化液(0.53mMEDTA,0.05%胰蛋白酶液),37°C靜置5分鐘左右,顯微鏡觀察,
ATCC細(xì)胞多功能性2017/12/05
ATCC細(xì)胞——可以轉(zhuǎn)化為人體的各種組織,來產(chǎn)生腸道類器官。該研究小組將從皮膚和血樣中提取的成人細(xì)胞,轉(zhuǎn)化成“空白”的iPSCs,然后,將干細(xì)胞置于一種特殊的分子雞尾酒中,這樣它們就會(huì)形成腸道類器官。然后,研究人員將這種人類移植到小鼠的腎臟囊體中,提供一種必要的血液供應(yīng),使類器官細(xì)胞發(fā)育成為*成熟的人類腸道組織。研究人員指出,這一步是再生醫(yī)學(xué)的一個(gè)主要進(jìn)步性標(biāo)志,世界各地的科學(xué)家已經(jīng)為之奮斗了許多年。研究中使用的小鼠,通過基因工程改造,它們的免疫系統(tǒng)會(huì)接受人體組織的引入。根據(jù)研究人員介紹,移植程
ATCC細(xì)胞分裂的特殊需求2017/11/30
ATCC細(xì)胞基因之中不僅含有蛋白的編碼,還含有被稱為內(nèi)含子的序列,這些序列不是蛋白所需的,會(huì)在蛋白合成之前被切除。研究人員降低了細(xì)胞切除內(nèi)含子的效率,發(fā)現(xiàn)只有在胚胎發(fā)育早期表達(dá)的基因發(fā)生了讀取故障,而這正是細(xì)胞快速分裂的時(shí)候。研究人員在此基礎(chǔ)上推測(cè),高度增殖的組織需要在短時(shí)間內(nèi)表達(dá)基因和合成蛋白,而內(nèi)含子切除是一個(gè)耗費(fèi)時(shí)間的過程,很容易出現(xiàn)問題。為了驗(yàn)證這一理論,他們向果蠅的早期胚胎引入了多重內(nèi)含子,這是一種包含基因的非典型內(nèi)含子。研究顯示,快速分裂的細(xì)胞無法有效加工其中的基因。研究團(tuán)隊(duì)總結(jié)道,
干細(xì)胞進(jìn)行循環(huán)的重要過程2017/11/28
干細(xì)胞自噬是真核生物中進(jìn)化保守的對(duì)細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)進(jìn)行循環(huán)的重要過程。在該過程中,一些損壞的細(xì)胞質(zhì)蛋白或細(xì)胞器被自噬小泡包裹后,送入溶酶體(動(dòng)物)或液泡(酵母和植物)中降解并得以循環(huán)利用。劉玉樂等zui早報(bào)道細(xì)胞自噬參與植物免疫,然而其機(jī)制一直不清楚。在這項(xiàng)研究中,研究人員發(fā)現(xiàn)細(xì)胞自噬可通過自噬蛋白ATG8與木爾坦棉花曲葉病毒(CottonleafcurlMultanvirus,CLCuMuV)衛(wèi)星分子編碼的βC1蛋白互作,進(jìn)而降解βC1,從而起到抑制病毒復(fù)制的作用。βC1上第32位纈氨酸的突變消除與
腫瘤細(xì)胞鑒別新方法2017/11/23
腫瘤細(xì)胞的固定化作用通常是通過一種兼容的溶膠-凝膠封裝法來實(shí)現(xiàn)的,其能夠產(chǎn)生孔隙性高的多孔基質(zhì)來滿足細(xì)胞足夠的營(yíng)養(yǎng)需求、氣體擴(kuò)散并且滿足細(xì)胞的代謝需求,但如果孔隙過小就會(huì)抑制細(xì)胞運(yùn)動(dòng)和增殖。據(jù)研究者介紹,對(duì)模型的驗(yàn)證加速了腫瘤休眠學(xué)研究領(lǐng)域的發(fā)展,我們都知道癌癥的特殊轉(zhuǎn)移通常是由休眠細(xì)胞所引發(fā)的,而科學(xué)家們很難對(duì)休眠的癌細(xì)胞進(jìn)行靶向作用,如果他們能夠分離并且研究這些休眠細(xì)胞,就能夠開發(fā)出特殊方法有效將其殺滅。在癌癥發(fā)展的過程中,休眠的癌細(xì)胞通常會(huì)經(jīng)歷靜止階段,在該階段癌細(xì)胞并不會(huì)增殖,但卻會(huì)保持
轉(zhuǎn)化細(xì)胞配置注意重點(diǎn)2017/11/21
轉(zhuǎn)化細(xì)胞是供微生物、植物組織和動(dòng)物組織生長(zhǎng)和維持用的人工配制的養(yǎng)料,一般都含有碳水化合物、含氮物質(zhì)、無機(jī)鹽(包括微量元素)以及維生素和水等。不同培養(yǎng)基可根據(jù)實(shí)際需要,添加一些自身無法合成的化合物,即生長(zhǎng)因子。有些微生物,如自養(yǎng)型微生物,不需要碳源,所以上述物質(zhì)只具有一般性。雖然不同培養(yǎng)基配置的細(xì)節(jié)會(huì)有些不一樣,但是重點(diǎn)步驟還是相同的。培養(yǎng)基配置要點(diǎn):1)確認(rèn)培養(yǎng)基的成分,并稱量;2)加入各個(gè)成分的順序;3)準(zhǔn)確調(diào)pH;4)適當(dāng)?shù)臏缇椒ǎ?)轉(zhuǎn)化細(xì)胞無菌條件下分裝。Sanguinarine血根堿
ATCC細(xì)胞三種類型的信號(hào)2017/11/16
ATCC細(xì)胞是一個(gè)動(dòng)態(tài)體系,每時(shí)每刻都有大量的生化反應(yīng)在進(jìn)行。對(duì)于信號(hào)傳導(dǎo)來說,這個(gè)系統(tǒng)充斥著高水平的噪音。那么細(xì)胞是怎樣在這種條件下準(zhǔn)確傳遞化學(xué)信號(hào)的呢?細(xì)胞對(duì)外界化學(xué)信號(hào)的應(yīng)答,取決于自己的生理狀態(tài)。但細(xì)胞生理狀態(tài)存在顯著的波動(dòng),比如說細(xì)胞中各種蛋白的含量會(huì)出現(xiàn)高達(dá)25%的變動(dòng)?!斑@是相當(dāng)大的噪音”。為了了解細(xì)胞如何編碼化學(xué)信號(hào)的水平,將顯微成像與信息學(xué)理論結(jié)合了起來。他們研究了三個(gè)不同的化學(xué)通訊系統(tǒng),鈣離子、ERK和NF-κB。這三種類型的信號(hào)傳導(dǎo)分別持續(xù)幾分鐘、一小時(shí)和差不多十小時(shí)。研究
ATCC細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)的基本步驟2017/11/14
人體ATCC細(xì)胞之間的信息轉(zhuǎn)導(dǎo)可通過相鄰細(xì)胞的直接接觸來實(shí)現(xiàn),但更重要的也是更為普遍的則是通過細(xì)胞分泌各種化學(xué)物質(zhì)來調(diào)節(jié)自身和其他細(xì)胞的代謝和功能,因此在人體中,信息傳導(dǎo)通路通常是由分泌釋放信息物質(zhì)的特定細(xì)胞、信息物質(zhì)(包含細(xì)胞間與細(xì)胞內(nèi)的信息物質(zhì)和運(yùn)載體、運(yùn)輸路徑等)以及靶細(xì)胞(包含特異受體等)等構(gòu)成。細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)通路-2.信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的基本步驟信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通常包括以下步驟:特定的細(xì)胞釋放信息物質(zhì)→信息物質(zhì)經(jīng)擴(kuò)散或血循環(huán)到達(dá)靶細(xì)胞→與靶細(xì)胞的受體特異性結(jié)合→受體對(duì)信號(hào)進(jìn)行轉(zhuǎn)換并啟動(dòng)細(xì)胞內(nèi)信使系統(tǒng)→靶細(xì)
轉(zhuǎn)化細(xì)胞周期概述2017/11/09
轉(zhuǎn)化細(xì)胞周期指由細(xì)胞分裂結(jié)束到下一次細(xì)胞分裂結(jié)束所經(jīng)歷的過程,所需的時(shí)間叫細(xì)胞周期時(shí)間??煞譃樗膫€(gè)階段:①G1期(gap1),指從有絲分裂完成到期DNA復(fù)制之前的間隙時(shí)間;②S期(synthesisphase),指DNA復(fù)制的時(shí)期,只有在這一時(shí)期H3-TDR才能摻入新合成的DNA中;③G2期(gap2),指DNA復(fù)制完成到有絲分裂開始之前的一段時(shí)間;④M期又稱D期(mitosisordivision),細(xì)胞分裂開始到結(jié)束。細(xì)胞周期(cellcycle)是指細(xì)胞從前一次分裂結(jié)束起到下一次分裂結(jié)束為
自體多能性干細(xì)胞修復(fù)血管的技術(shù)取得巨大進(jìn)展2017/11/07
干細(xì)胞專家們開發(fā)出了能夠使血管形成長(zhǎng)期的自我修復(fù)功能的技術(shù)。這一技術(shù)能夠?yàn)橹委熗庵苎芗膊〉於ɑA(chǔ)。由Young-supYoon博士領(lǐng)導(dǎo)的研究者們開發(fā)出了一類利用自體多能性干細(xì)胞分化血管上皮細(xì)胞的手段,分化出的上皮細(xì)胞用支持性膠包裹,之后移植進(jìn)入小鼠受損的血管中。這部分細(xì)胞能夠形成新的血管組織,存在時(shí)間超過10個(gè)月。此前一些研究者們?cè)鲞^相似的嘗試,但植入的細(xì)胞存在時(shí)間不會(huì)超過幾天到一周。當(dāng)細(xì)胞移植進(jìn)入體內(nèi)之后,大部分會(huì)快速死亡,而當(dāng)把這些細(xì)胞用膠包裹起來之后,則能夠得到很好的保護(hù)。在這一條件下
腫瘤細(xì)胞“微環(huán)境”抵御白血病惡化的工作原理2017/11/02
通過阻斷急性腫瘤細(xì)胞母細(xì)胞白血病(T-ALL)核心中T細(xì)胞表面的特殊蛋白受體的活性,從而成功地抑制并且逆轉(zhuǎn)了T-ALL的特殊癌性白細(xì)胞的生長(zhǎng)。對(duì)小鼠和人類細(xì)胞進(jìn)行試驗(yàn),研究者發(fā)現(xiàn),阻斷名為CXCR4的特殊分子就可以在兩周內(nèi)抑制骨髓和脾臟組織中疾病的進(jìn)展,而CXCR4是一種特殊的歸巢受體蛋白分子,其可以幫助T細(xì)胞成熟并且將血細(xì)胞吸引到骨髓中;而該實(shí)驗(yàn)可以使得實(shí)驗(yàn)活老鼠機(jī)體中的白細(xì)胞至少超過30周時(shí)間免于癌變,進(jìn)一步對(duì)發(fā)展為T-ALL的小鼠進(jìn)行研究發(fā)現(xiàn),剔除CXCR4所結(jié)合的蛋白CXCL12或許也可
干細(xì)胞可作為抗腫瘤靶標(biāo)的新成分2017/10/31
干細(xì)胞在研究中運(yùn)用了多種實(shí)驗(yàn)方法,涵蓋了生物化學(xué)、分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)的技術(shù)。同時(shí)和其他的實(shí)驗(yàn)室也有非?;钴S的合作,合作領(lǐng)域涉及線蟲、小鼠等模式系統(tǒng)的遺傳學(xué),包括X-射線結(jié)晶學(xué)、電子顯微鏡的結(jié)構(gòu)生物學(xué),以及高通量篩選化合物庫及化學(xué)合成的化學(xué)生物學(xué)。研究組計(jì)劃在NIBS建立這些技術(shù)并使這些技術(shù)能為所有NIBS的實(shí)驗(yàn)室利用。在NIBS的實(shí)驗(yàn)室將繼續(xù)研究細(xì)胞凋亡的生化途徑。同時(shí)將研究RNA干擾(RNAi)的生化機(jī)制及其在哺乳動(dòng)物系統(tǒng)中的生物學(xué)功能PTEN是一種重要的具有磷酸酶活性的信號(hào)因子,PI3K
腫瘤細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)的介紹2017/10/26
腫瘤細(xì)胞實(shí)驗(yàn)是一種簡(jiǎn)單易行的檢測(cè)細(xì)胞運(yùn)動(dòng)的方法,實(shí)驗(yàn)成本低,可以用來檢測(cè)貼壁生長(zhǎng)腫瘤細(xì)胞的侵襲轉(zhuǎn)移能力。實(shí)驗(yàn)材料細(xì)胞樣品試劑、試劑盒無血清培養(yǎng)基PBS儀器、耗材6孔板marker筆直尺槍頭抗體HamsterIgG3,λ抗體HamsterIgG3,λ抗體HamsterIgG3,λ抗體實(shí)驗(yàn)步驟一.準(zhǔn)備:所有能滅菌的器械都要滅菌,直尺和marker筆在操作前紫外照射30min(超凈臺(tái)內(nèi))二.流程:1.先用marker筆在6孔板背后,用直尺比著,均勻得劃?rùn)M線,大約每隔0.5~1cm一道,橫穿過孔。每孔至
轉(zhuǎn)化細(xì)胞屬性竟可以轉(zhuǎn)換2017/10/24
終末分化的成體轉(zhuǎn)化細(xì)胞屬性維持在一個(gè)相對(duì)穩(wěn)定的不可逆的命運(yùn)決定狀態(tài)。研究證明當(dāng)細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)錄因子的表達(dá)發(fā)生改變時(shí),會(huì)發(fā)生細(xì)胞屬性轉(zhuǎn)換,由此引發(fā)的表觀遺傳修飾狀態(tài)發(fā)生改變的細(xì)胞,會(huì)被細(xì)胞屬性檢查點(diǎn)機(jī)制所抑制,從而發(fā)生死亡或者細(xì)胞增殖抑制,然而其中的分子機(jī)制并不清楚。惠利健研究組利用小鼠成纖維細(xì)胞向肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)分化的研究模型,發(fā)現(xiàn)了當(dāng)轉(zhuǎn)入肝細(xì)胞特異轉(zhuǎn)錄因子后會(huì)導(dǎo)致大量成纖維細(xì)胞的增殖抑制及死亡;并證明了轉(zhuǎn)錄途徑的活化導(dǎo)致上述現(xiàn)象出現(xiàn),而這一響應(yīng)的信號(hào)通路就像鐵絲網(wǎng),抵制細(xì)胞的屬性轉(zhuǎn)換。由于不同屬性細(xì)胞之
腫瘤細(xì)胞或能修復(fù)人體組織2017/10/19
腫瘤細(xì)胞該技術(shù)可用于再生醫(yī)學(xué)領(lǐng)域,特別是作為修復(fù)人體組織的方法。Pelling在去年2月的溫哥華TED大會(huì)上分享了他的想法,許多人剛開始時(shí)并不支持。“沒有人這樣做,事實(shí)上,在早期的人們認(rèn)為我會(huì)失敗,”Pelling說?!拔艺嬲闷娴氖牵绻幸惶?,它可以修復(fù),重建和增大我們自己的身體,就用我們?cè)趶N房做飯用的東西。Pellin以前是一個(gè)生物工程師,利用蘋果的纖維素結(jié)構(gòu),并用人類的細(xì)胞代替Macintosh蘋果的細(xì)胞。熟悉內(nèi)情的人士注意到了Pelling如何一步一步的進(jìn)行水果實(shí)驗(yàn)的過程。開始為了去除
關(guān)鍵腫瘤抑制蛋白在ATCC細(xì)胞中的作用2017/10/17
ATCC細(xì)胞研究人員通過研究描述了一種關(guān)鍵腫瘤抑制蛋白的分子結(jié)構(gòu),或?yàn)楹笃陉U明該蛋白在細(xì)胞中的關(guān)鍵角色提供新的思路。BRCA1是一種人類機(jī)體基因,其能夠產(chǎn)生名為BRCA1的腫瘤抑制蛋白,該基因突變會(huì)導(dǎo)致個(gè)體在一生中出現(xiàn)65%-75%患乳腺癌的可能性;同時(shí)高風(fēng)險(xiǎn)乳腺癌的家族成員也都會(huì)進(jìn)行BRCA1和相關(guān)的BRCA2基因的突變篩查。當(dāng)然BRCA1蛋白在機(jī)體DNA修復(fù)過程中也扮演著保護(hù)性的角色,同時(shí)還能夠幫助維持機(jī)體的遺傳穩(wěn)定性。BRCA1基因的突變會(huì)導(dǎo)致相應(yīng)蛋白產(chǎn)生不足,進(jìn)而就會(huì)抑制DNA修復(fù),從而
腫瘤細(xì)胞間相互作用影響iPSc的成熟實(shí)驗(yàn)2017/10/12
腫瘤細(xì)胞經(jīng)典四步法誘導(dǎo)iPSc肝分化從生長(zhǎng)狀態(tài)良好的iPSc中去除分化的細(xì)胞,用胰蛋白酶消化成單細(xì)胞,接種至基質(zhì)膠包被好的細(xì)胞培養(yǎng)皿上,用Duncan的四步法進(jìn)行肝細(xì)胞定向誘導(dǎo)分化。1材料與方法1.1細(xì)胞培養(yǎng)將iPSc接種在基質(zhì)膠(matrigel)包被的細(xì)胞培養(yǎng)皿上,用經(jīng)典多能干細(xì)胞無滋養(yǎng)層培養(yǎng)基培養(yǎng)。細(xì)胞達(dá)70%匯合后,先用4型膠原酶消化,然后機(jī)械切割成小的細(xì)胞團(tuán)塊傳代。1.2誘導(dǎo)iPSc肝分化1.2.1經(jīng)典四步法誘導(dǎo)iPSc肝分化從生長(zhǎng)狀態(tài)良好的iPSc中去除分化的細(xì)胞,用胰蛋白酶消化成單
如何解決干細(xì)胞存活率低的問題?2017/10/10
在解凍凍存干細(xì)胞時(shí),發(fā)現(xiàn)會(huì)出現(xiàn)存活率低、大量細(xì)胞碎片及生長(zhǎng)緩慢等問題,是什么原因?qū)е?,該怎么進(jìn)行解決?現(xiàn)在我們大家一起往下看吧?;蛟S能給您的實(shí)驗(yàn)問題的解決找到答案!低存活率出現(xiàn)低存活率的可能原因及推薦解決方案如下:1.解凍過程中細(xì)胞裂解推薦的解決方案:可預(yù)期到一定量的細(xì)胞死亡,因此細(xì)胞的濃度應(yīng)足夠高,考慮到這一損失。起始濃度為106至107細(xì)胞/毫升。2.解凍過程中的問題推薦的解決方案:在-70℃至-80℃下保存冷凍的培養(yǎng)物,保存時(shí)間為1-5天,但這不是保存的方法。在37℃充分解凍后應(yīng)立即開始培
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