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如何讓ATCC細(xì)胞的蛋白合成速度Z大化2017/09/30
在ATCC細(xì)胞一項(xiàng)新的研究中,來自德國癌癥研究中心、海德堡大學(xué)分子生物學(xué)中心、科隆大學(xué)和美國賓夕法尼亞州立大學(xué)的研究人員研究了一種在蛋白合成中發(fā)揮著至關(guān)重要作用的分子伴侶(molecularchaperone,也被稱作伴侶蛋白)的作用機(jī)制。他們證實(shí)蛋白合成的速度與分子伴侶Ssb的功能相關(guān)聯(lián)。這種控制合成速度的信息儲存在細(xì)胞的遺傳密碼中,因而確保合成功能性蛋白的效率和度zui大化。相關(guān)研究結(jié)果近期發(fā)表在Cell期刊上,論文標(biāo)題為“ProfilingSsb-NascentChainInteracti
ATCC細(xì)胞分化特化神經(jīng)細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)2017/09/28
人類多能ATCC細(xì)胞是目前生物學(xué)領(lǐng)域zui引人注目的話題之一,其原因在于hPSCs可通過改善機(jī)體再生能力,為治療許多疾病提供了一個潛在的途徑。此外,hPSCs系統(tǒng)也適用于藥物篩選和毒性測試。通過hPSCs構(gòu)建神經(jīng)發(fā)育模型,為分析神經(jīng)早期發(fā)育,病理進(jìn)程和治療方法開辟了一個新的通道,威斯康星大學(xué)麥迪遜分校Waisman中心的張素春(Su-ChunZhang)教授發(fā)表綜述,介紹了來源自人類多能干細(xì)胞的特化神經(jīng)細(xì)胞。他指出,hPSCs來源的功能性特化神經(jīng)細(xì)胞亞型具有根據(jù)動物實(shí)驗(yàn)得來的發(fā)育基本規(guī)律,操控這
造血干細(xì)胞讓老年小鼠血液恢復(fù)青春2017/09/26
人體內(nèi)的干細(xì)胞是所有細(xì)胞的起源,而且干細(xì)胞可以無數(shù)次的分裂。當(dāng)干細(xì)胞分裂時,一個細(xì)胞保留為干細(xì)胞,其它的成熟的干細(xì)胞則轉(zhuǎn)化為人體需要的細(xì)胞,比如血細(xì)胞。“人的衰老過程實(shí)際上是干細(xì)胞超時變化的結(jié)果”,在瑞典德隆大學(xué)醫(yī)學(xué)院從事干細(xì)胞生物學(xué)研究的博士生及本文主要作者M(jìn)artinWahlestedt解釋道?!斑@些變化中有一些是不可逆的,比如干細(xì)胞DNA的損害。而有些是逐漸變化的,比如表觀遺傳變異。即使通過許多細(xì)胞分裂來維持,但是它們并不一定是可逆的。正如我們所研究的,當(dāng)干細(xì)胞更新時,表觀遺傳變異就會被刪
如何使ATCC細(xì)胞培養(yǎng)物適應(yīng)培養(yǎng)基?2017/09/21
許多ATCC細(xì)胞系容易適應(yīng)無血清培養(yǎng)基和無蛋白培養(yǎng)基,而對環(huán)境要求過高的其它細(xì)胞卻難以適應(yīng)變化,這就需要更為專業(yè)的方法來適應(yīng)變化。而根據(jù)細(xì)胞系的特性,有兩種方法可使細(xì)胞適應(yīng)無血清培養(yǎng)基。*種方法是連續(xù)適應(yīng)/循序隔絕法;另一種方法是直接適應(yīng)。連續(xù)適應(yīng)/循序隔絕法*種方法是連續(xù)適應(yīng)/循序隔絕法。通過一系列的血清還原步驟,使細(xì)胞適應(yīng)無血清培養(yǎng)基。這是優(yōu)先選用的方法,且不對細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境形成太過惡劣的變化。連續(xù)適應(yīng)/循序隔絕法——方法1使原培養(yǎng)基內(nèi)的細(xì)胞連續(xù)地經(jīng)過以下幾個階段:階段1:75%補(bǔ)加血清的培養(yǎng)
ATCC細(xì)胞培養(yǎng)的具體過程2017/09/19
一、ATCC細(xì)胞準(zhǔn)備工作準(zhǔn)備工作對開展細(xì)胞培養(yǎng)異常重要,工作量也較大,應(yīng)給予足夠的重視,推備工作中某一環(huán)節(jié)的疏忽可導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗或無法進(jìn)行。準(zhǔn)備工作的內(nèi)容包括器皿的清洗、干燥與消毒,培養(yǎng)基與其他試劑的配制、分裝及滅菌,無菌室或超凈臺的清潔與消毒,培養(yǎng)箱及其他儀器的檢查與調(diào)試。二、取材在無菌環(huán)境下從機(jī)體取出某種組織細(xì)胞(視實(shí)驗(yàn)?zāi)康亩ǎ?jīng)過一定的處理(如消化分散細(xì)胞、分離等)后接入培養(yǎng)器血中,這一過程稱為取材。如是細(xì)胞株的擴(kuò)大培養(yǎng)則無取材這一過程。機(jī)體取出的組織細(xì)胞的培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng)。理論上講各種
ATCC細(xì)胞抗衰老功效2017/09/14
ATCC細(xì)胞抗衰的功效:1.煥發(fā)皮膚活力和恢復(fù)容顏健康的皮膚光滑而富有彈性,新陳代謝功能旺盛。2.*新陳代謝功能新陳代謝是人體生命活動的物質(zhì)基礎(chǔ)。一提到干細(xì)胞很多人都是一頭霧水,對于干細(xì)胞,臨床上可以治療多種疾病,對于美容界,干細(xì)胞抗衰老已經(jīng)成為一種時尚,那么干細(xì)胞抗衰老有哪些功效?1、煥發(fā)皮膚活力和恢復(fù)容顏健康的皮膚光滑而富有彈性,新陳代謝功能旺盛。新生皮膚細(xì)胞來源與皮膚基礎(chǔ)層的皮膚干細(xì)胞,毛發(fā)的健康生長也有賴于毛囊里的毛囊干細(xì)胞,而皮膚干細(xì)胞和毛囊干細(xì)胞就來源于血液干細(xì)胞。干細(xì)胞是再造和恢復(fù)
利用生物技術(shù)清除無用的腫瘤細(xì)胞2017/09/12
腫瘤細(xì)胞能發(fā)育成所有類型的細(xì)胞,為再生治療帶來極大希望。然而,通過干細(xì)胞的轉(zhuǎn)化所生成的細(xì)胞類群也經(jīng)常包含少量未分化的干細(xì)胞,這會引起腫瘤的形成。NatureCommunications上報(bào)告了可提高干細(xì)胞療法安全性的一個“清除”程序。該方法利用一種只在干細(xì)胞上表達(dá)的細(xì)胞表面蛋白從混合細(xì)胞類群中將未分化的細(xì)胞清除。NissimBenvenisty及其同事發(fā)現(xiàn),“tight-junction蛋白”Claudin-6只見于人多能干細(xì)胞表面上。他們接著提出基于抗體或一種細(xì)菌毒素來識別和殺死表達(dá)Claud
轉(zhuǎn)化細(xì)胞為什么會衰老?2017/09/07
關(guān)于轉(zhuǎn)化細(xì)胞衰老的機(jī)理具有許多不同的學(xué)說,概括起來主要有差錯學(xué)派(Errortheories)和遺傳學(xué)派(Genetic/Programmedtheories)兩大類,前者強(qiáng)調(diào)衰老是由于細(xì)胞中的各種錯誤積累引起的,后者強(qiáng)調(diào)衰老是遺傳決定的自然演進(jìn)過程.其實(shí),現(xiàn)在看來兩者是相互統(tǒng)一的。(一)差錯學(xué)派細(xì)胞衰老是各種細(xì)胞成分在受到內(nèi)外環(huán)境的損傷作用后,因缺乏完善的修復(fù),使“差錯”積累,導(dǎo)致細(xì)胞衰老.根據(jù)對導(dǎo)致“差錯”的主要因子和主導(dǎo)因子的認(rèn)識不同,可分為不同的學(xué)說,這些學(xué)說各有實(shí)驗(yàn)證據(jù)。1.代謝廢物積
人胚胎腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)方法2017/09/05
腫瘤細(xì)胞為了能夠適用于醫(yī)學(xué)移植,人類胚胎干細(xì)胞(hESCs)需要保持一種“未分化”狀態(tài),即它們沒有變換成其他類型的細(xì)胞。為了確定培養(yǎng)hESCs的方法能使它們保持未分化狀態(tài),也能生長、增殖和存活,研究人員經(jīng)常使用動物來源的血細(xì)胞“飼養(yǎng)層”,通常來自于小鼠(小鼠胚胎成纖維細(xì)胞MEFs)。然而,這種方法存在各種污染問題,包括病原體和病毒的傳播。為了避免污染問題,使用作為飼養(yǎng)層細(xì)胞,他們發(fā)現(xiàn),MBMCs可以取代動物來源的飼養(yǎng)系統(tǒng),用于培養(yǎng)人類胚胎干細(xì)胞,并能夠使它們成長在一個未分化的階段。研究人員指出:
怎樣開始腫瘤細(xì)胞重編程2017/08/31
腫瘤細(xì)胞環(huán)境有著超越基因組的影響,正因如此,大規(guī)?!敖M學(xué)"數(shù)據(jù)將是未來細(xì)胞重編程的一個重要方面。雖然我們認(rèn)為iPSC和ESC在功能上是相同的,但轉(zhuǎn)錄組、蛋白質(zhì)組和表觀基因組水平的深入研究將有助于闡明環(huán)境對重編程的影響。另外,在單個細(xì)胞中同時檢測多個“組學(xué)",將能鑒定那些造成iPSC多能性差異的基礎(chǔ)元件。目前,細(xì)胞重編程領(lǐng)域普遍缺乏定量數(shù)據(jù)。實(shí)際上,文獻(xiàn)中的重編程效率差異,可能更多的是由體細(xì)胞內(nèi)部異質(zhì)性造成的,而不是方法學(xué)上的問題。定量理解這樣的異質(zhì)性,可以幫助我們從細(xì)胞群體中區(qū)分出想要的細(xì)胞。上
干細(xì)胞和癌變細(xì)胞之間的差異2017/08/29
目前為止,干細(xì)胞這種磁共振成像(MRI)技術(shù),只檢測試管中生長的細(xì)胞和小鼠,研究人員說:“我們認(rèn)為,這是科學(xué)家們發(fā)現(xiàn)細(xì)胞黏菌成像的一種用法,當(dāng)細(xì)胞發(fā)生癌變,其外膜上的一些蛋白質(zhì)會脫落糖分子,并變得不黏滑,可能是因?yàn)樗鼈儞頂D的緊密結(jié)合在一起。如果我們調(diào)整MRI來檢測附著于特定蛋白質(zhì)上的糖分子,我們就可以看到正常。此項(xiàng)研究是基于其他研究機(jī)構(gòu)zui近的調(diào)查結(jié)果,表明通過一種微調(diào)MRI技術(shù),根據(jù)這種指示葡萄糖與周圍水分子的*相互作用方式,可以檢測到它們,而不需要施用染料。其他研究人員已經(jīng)使用MRI,但需
腫瘤細(xì)胞清洗與滅菌2017/08/24
一、腫瘤細(xì)胞實(shí)驗(yàn)?zāi)康哪塥?dú)立地進(jìn)行用于細(xì)胞培養(yǎng)的各種器皿的清洗與消毒,掌握干熱滅菌法、濕熱滅菌法和濾過除菌法的操作,了解化學(xué)消毒法的使用方法。二、實(shí)驗(yàn)原理清洗與消毒是組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)的*步,是組織培養(yǎng)中工作量zui大,也是zui基本的步驟。體外培養(yǎng)細(xì)胞所使用的各種玻璃或塑料器皿對清潔和無菌的要求程度很高。細(xì)胞養(yǎng)不好與清洗不*有很大關(guān)系。清洗后的玻璃器皿,不僅要求干凈透明,無油跡,而且不能殘留任何物質(zhì)。如有毒的化學(xué)物質(zhì),哪怕殘留0.1個,也可能影響細(xì)胞生長。滅菌手段的選擇十分重要,對不同的物品需采用不同
腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)遞送siRNA*方法2017/08/22
由于腫瘤細(xì)胞使用RNAi技術(shù)可以特異性剔除或關(guān)閉特定基因的表達(dá),所以該技術(shù)已被廣泛用于探索基因功能和傳染性疾病及惡性腫瘤的基因治療領(lǐng)域。而siRNA轉(zhuǎn)染途徑也是一種常用的RNAi技術(shù),那么本文在此介紹向培養(yǎng)細(xì)胞遞送siRNA的*化方法。以下的所有建議適用于siRNA,確切地說,同樣可用于遞送siRNA模擬物/抑制劑。(1)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)時要保持一致條件優(yōu)化后,應(yīng)注意確保操作中每一步的順序、時間和方式一致。整個實(shí)驗(yàn)中變動因素越少,實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可重復(fù)性及可靠性越高。(2)轉(zhuǎn)染時選擇恰當(dāng)?shù)捻樞驑?biāo)準(zhǔn)的轉(zhuǎn)染操作中
綠色木霉對ATCC細(xì)胞有何作用?2017/08/17
【方法】ATCC細(xì)胞用海藻酸鈉和氯化鈣固定綠色木霉,將游離綠色木霉和固定化綠色木霉分別培養(yǎng)一段時間,離心培養(yǎng)液,用分光光度計(jì)法檢測上清液中纖維素酶活性。在上清液中加入濃縮的小球藻懸浮液,用顯微鏡計(jì)數(shù)細(xì)胞壁破碎的小球藻?!窘Y(jié)果】綠色木霉能同時分泌內(nèi)切葡聚糖酶、外切葡聚糖酶及β-1,4葡萄糖苷酶3種纖維素酶,其中外切葡聚糖酶活性zui高。固定化綠色木霉反復(fù)使用5次后,分泌的纖維素酶活性能保持到初次的67.4%。市售纖維素酶、游離綠色木霉、固定化綠色木霉初次及第5次分解小球藻細(xì)胞壁的效率分別為47.3
誘導(dǎo)性干細(xì)胞定向分化2017/08/15
日本學(xué)者山中伸彌將oct4、Sox2、Klf4、c-myc四個基因插入到成體干細(xì)胞DNA中重編程細(xì)胞恢復(fù)到胚胎干細(xì)胞狀態(tài),由此建立了iPS細(xì)胞。這些細(xì)胞可以向胚胎干細(xì)胞一樣,轉(zhuǎn)變?yōu)閹缀跛械慕M織類型。為此,山中伸彌在2011年獲得諾貝爾獎。雖然iPS細(xì)胞有潛力發(fā)育為任何組織器官,但如何誘導(dǎo)它們往正確的方向分化問題尚未解決。由中科院上海生命科學(xué)院/上海交大醫(yī)學(xué)院健康科學(xué)研究所金穎教授帶隊(duì)的關(guān)于“基于誘導(dǎo)多能干細(xì)胞技術(shù)的若干重大疾病模型與機(jī)理研究”的“973”科技部重大科學(xué)研究項(xiàng)目,就是希望能找到誘
口腔干細(xì)胞活性Z強(qiáng)可以保護(hù)乳牙2017/08/10
專家發(fā)現(xiàn),乳牙中含有的干細(xì)胞是間充質(zhì)干細(xì)胞,而間充質(zhì)干細(xì)胞在醫(yī)學(xué)界對其價值早有肯定,從2010年~2015年的數(shù)年間,醫(yī)學(xué)雜志中刊載有諸如“脫落乳牙干細(xì)胞和骨髓干細(xì)胞改善了紅斑狼瘡小鼠模型的骨密度和骨結(jié)構(gòu),抑制了骨質(zhì)疏松的發(fā)生。”“對比人脫落乳牙干細(xì)胞和骨髓干細(xì)胞發(fā)現(xiàn),脫落乳牙干細(xì)胞具有遠(yuǎn)優(yōu)于骨髓干細(xì)胞的免疫調(diào)節(jié)能力”“牙齒干細(xì)胞的免疫調(diào)節(jié)特性使其成為自身免疫疾病和炎癥相關(guān)疾病細(xì)胞治療的重要干細(xì)胞來源,其獲取遠(yuǎn)比骨髓干細(xì)胞容易”等多種理論。2011年,翟永標(biāo)、凌均棨也在《口腔醫(yī)學(xué)雜志》第38卷2
干細(xì)胞驚人異質(zhì)性2017/08/08
干細(xì)胞能夠無限增殖,也能分化和發(fā)育為數(shù)百種不同細(xì)胞和身體組織的任何種類,這種多能性使得干細(xì)胞具有巨大的生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)潛力。然而直到現(xiàn)在人們都難以確定整個細(xì)胞變化狀態(tài)過程干細(xì)胞發(fā)育調(diào)控的復(fù)雜性。利用強(qiáng)大的新型單細(xì)胞遺傳分析技術(shù),揭示出多能干細(xì)胞的變化遠(yuǎn)比以前所認(rèn)識的要多得多。使得研究人員朝著某天能夠?qū)⒍喾N不同類型的干細(xì)胞應(yīng)用于疾病治療和再生治療又近了一步。在干細(xì)胞群中單個細(xì)胞之間具有很大的差異。一直以來它都被視作是開發(fā)可預(yù)測的干細(xì)胞工程學(xué)方法中存在的一個問題。現(xiàn)在,我們發(fā)現(xiàn)人們從前認(rèn)為有問題的差異
轉(zhuǎn)化細(xì)胞培養(yǎng)液的成分分析2017/08/03
轉(zhuǎn)化細(xì)胞培養(yǎng)液的成分:體外細(xì)胞培養(yǎng)所需營養(yǎng)物質(zhì)與體內(nèi)基本相同,例如,需要糖、氨基酸、無機(jī)鹽、促生長因子、微量元素等。將細(xì)胞所需的上述物質(zhì)按其種類和所需數(shù)量嚴(yán)格配制而成的培養(yǎng)基,稱為合成培養(yǎng)基。由于動物細(xì)胞生活的內(nèi)環(huán)境還有一些成分尚未研究清楚,所以需要加入動物血清以提供一個類似生物體內(nèi)的環(huán)境,因此在使用合成培養(yǎng)基時,通常需加入血清、血漿等一些天然成分。1、動物細(xì)胞培養(yǎng)液的特點(diǎn):液體培養(yǎng)基、通常含動物血清。2、動物細(xì)胞培養(yǎng)的條件:①無菌、無毒的環(huán)境:對培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具進(jìn)行無菌處理,通常還要在培養(yǎng)
培養(yǎng)干細(xì)胞的凍存2017/08/01
干細(xì)胞低溫凍存是培養(yǎng)室常規(guī)工作和通用技術(shù)。細(xì)胞凍存在-196℃液氮中,儲存時間幾乎是無限的。細(xì)胞凍存及復(fù)蘇的原則是慢凍快融。1.凍存細(xì)胞(1)選對數(shù)增生期細(xì)胞(證明無支原體污染),在凍存前1d換液。(2)按常規(guī)方法把培養(yǎng)細(xì)胞制備成懸液,計(jì)數(shù),使細(xì)胞密度達(dá)5×107/ml左右密度,離心,去上清。(3)加入配制好的凍存液(培養(yǎng)液6.8ml,小牛血清2ml,DMSO1ml,5.6%NaHCO30.1ml),按與去上清相同的量一滴一滴加入離心管中,然后用吸管輕輕吹打令細(xì)胞重懸。凍存細(xì)胞時培養(yǎng)液中加入保護(hù)
細(xì)胞計(jì)數(shù)與存活的測試實(shí)驗(yàn)方法2017/07/27
腫瘤細(xì)胞冷凍與復(fù)蘇是細(xì)胞培養(yǎng)的常規(guī)工作,可以解決細(xì)胞因?yàn)檫B續(xù)繼代造成的退變或轉(zhuǎn)化。細(xì)胞的原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)以及細(xì)胞凍存和復(fù)蘇后都需要細(xì)胞計(jì)數(shù)。那么細(xì)胞計(jì)數(shù)與存活的測試實(shí)驗(yàn)方法有哪些呢?1、原理:(1)計(jì)算細(xì)胞數(shù)目可用血球計(jì)數(shù)盤或是Coultercounter粒子計(jì)數(shù)器自動計(jì)數(shù)。(2)血球計(jì)數(shù)盤一般有二個chambers,每個chamber中細(xì)刻9個1mm2大正方形,其中4個角落之正方形再細(xì)刻16個小格,深度均為0.1mm。當(dāng)chamber上方蓋上蓋玻片后,每個大正方形之體積為1mm2×0.1mm
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