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2023
09-22

mRNA技術(shù)應(yīng)用場(chǎng)景之TCR-T細(xì)胞療法
一、什么是TCR-T細(xì)胞療法?目前，腫瘤免疫治療方興未艾，群雄并起，其中有效的治療策略之一就是過(guò)繼細(xì)胞轉(zhuǎn)移療法（ACT）。嵌合抗原受體（CAR）和工程化T細(xì)胞受體（TCR）是近年來(lái)主要的過(guò)繼性T細(xì)胞免疫療法。TCR（Tcellreceptor）是T細(xì)胞表面的特異性受體，其α鏈和β鏈由高質(zhì)量、高親和力的抗原特異性T細(xì)胞克隆產(chǎn)生，以非共價(jià)鍵與CD3結(jié)合，形成TCR-CD3復(fù)合物，通過(guò)識(shí)別并結(jié)合MHC呈遞的抗原從而激活T細(xì)胞，促進(jìn)T細(xì)胞的分裂與分化；其作用機(jī)制是向普通T細(xì)胞中引入新的基因，使得改造過(guò)的
2023
09-21

干貨分享：細(xì)胞樣本如何做多色？
“你好，我的樣本是養(yǎng)的細(xì)胞，我還能做多色組化嗎？”答案是可以！對(duì)于多重?zé)晒饷庖呓M化（mIHC）來(lái)說(shuō)，幾乎不挑剔樣本類(lèi)型，但需要攻克一個(gè)難題——多輪洗脫。傳統(tǒng)的組織樣本經(jīng)過(guò)前期處理固定包埋，再加上防脫載玻片的助力，在洗脫過(guò)程中，脫片概率相對(duì)小，即使有小部分脫落，但影響不至于很大；而細(xì)胞樣本，有可能在一張片子上，本身細(xì)胞數(shù)量就不多，如果還有脫落，可能最后“顆粒無(wú)收”。今天Absin分享的是細(xì)胞樣本做多色的方法，其中不能缺少的依舊是我們的“老演員”——抗體洗脫液（abs994）。一、建議操作步驟：1）
2023
09-20

類(lèi)器官免疫共培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)方法
近年來(lái)，腫瘤免疫療法在癌癥治療中非常火熱。腫瘤免疫學(xué)治療的目的是激發(fā)或調(diào)動(dòng)機(jī)體的免疫系統(tǒng)，增強(qiáng)腫瘤微環(huán)境抗腫瘤免疫力，從而控制和殺傷腫瘤細(xì)胞。隨著免疫治療的興起也推動(dòng)了腫瘤研究的發(fā)展，但是由于人源化體系的復(fù)雜性、免疫系統(tǒng)的部分或無(wú)效重組建等問(wèn)題，致使免疫腫瘤模型面臨著巨大的挑戰(zhàn)，臨床上迫切需要能夠用于個(gè)體化驗(yàn)證療效的體外模型。類(lèi)器官的出現(xiàn)給腫瘤免疫治療提供了新的契機(jī)，然而，現(xiàn)有的類(lèi)器官中缺乏免疫細(xì)胞限制了其發(fā)展。小愛(ài)這次給大家介紹一下基本的腫瘤類(lèi)器官免疫共培養(yǎng)方法，如下：1、類(lèi)器官準(zhǔn)備1）提前一
2023
09-19

腫瘤免疫治療策略（IF 16.6）| 水凝膠微球疫苗，增強(qiáng)消融后抗腫瘤免疫反應(yīng)
胰腺癌對(duì)化療或免疫治療的應(yīng)答率較低。雖然微創(chuàng)不可逆電穿孔(IRE)消融術(shù)是治療不可切除胰腺癌的一種選擇，但是這種腫瘤類(lèi)型的免疫抑制腫瘤微環(huán)境容易導(dǎo)致腫瘤復(fù)發(fā)。因此，加強(qiáng)內(nèi)源性適應(yīng)性抗腫瘤免疫是提高消融治療和消融后免疫治療效果的關(guān)鍵。近日，上海交通大學(xué)王忠敏教授和崔文國(guó)教授在Naturecommunications(IF=16.6)上發(fā)表了題為“Interventionalhydrogelmicrospherevaccineasanimmuneampli?erforactivatedantitum
2023
09-15

間充質(zhì)干細(xì)胞鑒定手冊(cè)
間充質(zhì)干細(xì)胞（mesenchymalstemcells，MSCs）是來(lái)源于中胚層的多能成體干細(xì)胞，廣泛存在于臍帶、骨髓、脂肪、牙髓、月經(jīng)血等組織，體外培養(yǎng)可分化為成骨細(xì)胞、軟骨細(xì)胞、脂肪細(xì)胞等多種類(lèi)型的細(xì)胞。圖1TheMesengenicProcess（圖片來(lái)源于文獻(xiàn)，僅供學(xué)習(xí)參考用）MSCs具有自我更新能力和多向分化潛能，能夠釋放出許多具有抗凋亡、免疫調(diào)節(jié)、促血管生成等功能的生物活性因子，可刺激組織器官再生，并且低水平表達(dá)主要組織相容性復(fù)合體（MHC）Ⅰ類(lèi)分子，不表達(dá)MHC-Ⅱ類(lèi)分子，不易激活
2023
09-14

實(shí)驗(yàn)小白來(lái)集合！染色質(zhì)免疫共沉淀(ChIP)實(shí)驗(yàn)流程與常見(jiàn)問(wèn)題
染色質(zhì)免疫共沉淀技術(shù)的原理是在活細(xì)胞狀態(tài)下固定蛋白質(zhì)-DNA復(fù)合物，并將其隨機(jī)切斷為一定長(zhǎng)度范圍內(nèi)的染色質(zhì)小片段，然后通過(guò)免疫學(xué)方法沉淀此復(fù)合體，特異性地富集目的蛋白結(jié)合的DNA片段，通過(guò)對(duì)目的片斷的純化與檢測(cè)，從而獲得蛋白質(zhì)與DNA相互作用的信息。一、細(xì)胞交聯(lián)與裂解在裝有20ml生長(zhǎng)培養(yǎng)基的150mm培養(yǎng)皿中培養(yǎng)貼壁細(xì)胞，長(zhǎng)到80%-90%密度，約107個(gè)細(xì)胞。如有必要，可進(jìn)行刺激或處理。建議采用1×106個(gè)細(xì)胞作為一次ChIP的細(xì)胞量。1）在20ml培養(yǎng)基中加入終濃度為1%的甲醛，輕輕渦旋培
2023
09-13

冰凍切片如何做mIHC？
一、前言：多重?zé)晒饷庖呓M化(mIHC)主要的技術(shù)原理來(lái)自TSA技術(shù)，TSA即酪酰胺信號(hào)放大，是一類(lèi)利用辣根過(guò)氧化酶(HRP)對(duì)靶蛋白或核酸進(jìn)行高密度原位標(biāo)記的酶學(xué)檢測(cè)方法。用這種方法做多重?zé)晒馊旧抢枚股蠋в械腍RP（而不是直接偶聯(lián)熒光素），來(lái)催化后續(xù)添加入體系的非活性熒光素，該熒光素在HRP和過(guò)氧化氫的作用下被活化，跟臨近蛋白的酪氨酸殘基共價(jià)偶聯(lián)，使得蛋白樣品與熒光素穩(wěn)定結(jié)合。然后進(jìn)行微波處理，前一輪非共價(jià)結(jié)合的抗體被洗掉，共價(jià)結(jié)合的熒光素還留存在樣品上。再換個(gè)一抗來(lái)第二輪孵育，周而復(fù)始。
2023
09-12

膜蛋白研究推薦工具——去垢劑
膜蛋白是結(jié)合或整合在細(xì)胞膜或細(xì)胞器上的一類(lèi)蛋白，在各種重要的生理活動(dòng)中發(fā)揮著重要作用。人類(lèi)基因組約三分之一的基因都用于編碼膜蛋白[1-2]。作為生物膜功能的主要承擔(dān)者，膜蛋白負(fù)責(zé)細(xì)胞內(nèi)外和細(xì)胞間的物質(zhì)運(yùn)輸、能量傳遞和信息傳導(dǎo)等。其功能紊亂常常與人類(lèi)重大疾病相關(guān)，因此膜蛋白是一類(lèi)非常重要的藥物靶點(diǎn)。圖1細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)示意圖去垢劑也稱(chēng)為表面活性劑，是一類(lèi)同時(shí)具有親水頭部和疏水尾部的分子，能夠使脂膜解體釋放膜蛋白并維持去膜狀態(tài)下膜蛋白結(jié)構(gòu)和功能的穩(wěn)定性。去垢劑的雙極性和理化特性如臨界膠束濃度能夠極大影響去
2023
09-07

研究發(fā)現(xiàn)急性腎損傷的調(diào)控新機(jī)制
2023年7月17日，武漢大學(xué)鄭凌、華中科技大學(xué)黃昆及陳紅共同通訊在NatureCommunications發(fā)表題為“ArenalYY1-KIM1-DR5axisregulatestheprogressionofacutekidneyinjury”的研究論文，該研究報(bào)道腎小管特異性敲除Kim1可減輕順鉑或缺血/再灌注誘導(dǎo)的雄性小鼠急性腎損傷。在機(jī)制上，在AKI上下調(diào)的轉(zhuǎn)錄因子陰陽(yáng)1(YY1)與KIM1的啟動(dòng)子結(jié)合并抑制其表達(dá)。近年來(lái)，腎病作為繼腫瘤、心臟病之后的第三大“殺手”，全球發(fā)病率呈逐年上
2023
09-06

質(zhì)粒提取小課堂，讓你學(xué)完不emo
質(zhì)粒小科普質(zhì)粒(Plasmid)是廣泛存在于生物界中的環(huán)狀雙鏈DNA分子。目前在細(xì)菌、放線菌、真菌和不少動(dòng)植物細(xì)胞中均發(fā)現(xiàn)有質(zhì)粒的存在，其中細(xì)菌質(zhì)粒是研究最深入、應(yīng)用較廣泛的[1]。因?yàn)橘|(zhì)粒分子本身具有復(fù)制功能的遺傳結(jié)構(gòu)，可攜帶一些遺傳信息，并且其自我復(fù)制能力和攜帶遺傳信息能力非常強(qiáng)大，經(jīng)過(guò)基因表達(dá)后可使其宿主細(xì)胞表現(xiàn)相應(yīng)的性狀，所以質(zhì)粒常被用作基因載體，在分子生物學(xué)、生物化學(xué)與細(xì)胞生物學(xué)等學(xué)科中得到廣泛的應(yīng)用[2]。圖1大腸桿菌質(zhì)粒分子結(jié)構(gòu)示意圖質(zhì)粒提取方法及原理質(zhì)粒的提取是分子克隆中常用的一
2023
09-05

HaCaT細(xì)胞培養(yǎng)攻略
HaCaT細(xì)胞是人類(lèi)永生化表皮細(xì)胞，由角質(zhì)形成細(xì)胞培育而來(lái)的，保留了角質(zhì)形成細(xì)胞分化能力，是非腫瘤來(lái)源的人正常皮膚永生化角質(zhì)形成細(xì)胞株，與正常人角質(zhì)形成細(xì)胞分化特性相似，可以繁殖150代以上，但不是腫瘤細(xì)胞，不具有腫瘤特性。細(xì)胞名稱(chēng)HaCaT（人永生化角質(zhì)形成細(xì)胞）細(xì)胞來(lái)源一位62歲患有黑色素瘤男性的病灶外圍正常皮膚形態(tài)上皮細(xì)胞樣生長(zhǎng)特性貼壁生長(zhǎng)營(yíng)養(yǎng)體系89%MEM(abs9503)+10%胎牛血清優(yōu)級(jí)(abs972)+1%雙抗(abs9244)+0.2%牛腦垂體提取物(abs9119)傳代1:
2023
09-01

產(chǎn)品專(zhuān)題——低密度脂蛋白及其應(yīng)用
低密度脂蛋白（LowDensityLipoprotein，簡(jiǎn)稱(chēng)為L(zhǎng)DL）是血液中五種常見(jiàn)脂蛋白之一，由極低密度脂蛋白(VLDL)通過(guò)脂蛋白脂肪酶(LPL)的作用使其喪失部分甘油三酯轉(zhuǎn)化而來(lái)。LDL是主要的膽固醇和膽固醇酯轉(zhuǎn)運(yùn)體，占血漿脂蛋白總量的一半以上，其通過(guò)低密度脂蛋白受體(LDLR)介導(dǎo)的內(nèi)吞作用被肝臟和其他組織吸收。研究表明低密度脂蛋白在動(dòng)脈壁內(nèi)的異常蓄積及其誘發(fā)復(fù)雜免疫炎癥反應(yīng)過(guò)程，不僅是動(dòng)脈粥樣硬化(atherosclerosis,AS)發(fā)生的始動(dòng)環(huán)節(jié)，更是最終導(dǎo)致動(dòng)脈粥樣硬化血栓形
2023
08-31

【IF分享】再也不用羨慕別人的圖片好看了
一、免疫熒光的原理免疫熒光(Immunofluorescence，IF)技術(shù)是根據(jù)抗原抗體反應(yīng)的原理，先將已知的抗原或抗體標(biāo)記上熒光素，制成熒光抗體再用這種熒光抗體（或抗原）作為探針檢測(cè)組織或細(xì)胞內(nèi)的相應(yīng)抗原（或抗體）。在組織或細(xì)胞內(nèi)形成的抗原抗體復(fù)合物上含有標(biāo)記的熒光素，利用熒光顯微鏡觀察標(biāo)本，熒光素受外來(lái)激發(fā)光的照射而發(fā)生明亮的熒光（黃綠色或橘紅色），可以看見(jiàn)熒光所在的組織細(xì)胞，從而確定抗原或抗體的性質(zhì)、定位，以及利用定量技術(shù)測(cè)定含量。二、IF分類(lèi)中文全稱(chēng)縮寫(xiě)中文全程實(shí)驗(yàn)樣本細(xì)胞免疫熒光IF
2023
08-31

細(xì)胞凍存液使用需要注意哪些
細(xì)胞凍存液(科研級(jí))是愛(ài)必信生物研發(fā)的一款無(wú)血清、無(wú)需程序降溫的細(xì)胞凍存液，本產(chǎn)品適用細(xì)胞類(lèi)型更廣，尤其對(duì)干細(xì)胞以及原代細(xì)胞有很好凍存效果。生產(chǎn)過(guò)程嚴(yán)格執(zhí)行cGMP操作標(biāo)準(zhǔn)。特點(diǎn)：1、是一種通用型的細(xì)胞凍存液，可用于凍存人和各種動(dòng)物細(xì)胞株；2、凍存液配方，即開(kāi)即用，方便快捷；3、非程序降溫，-80℃低溫冰箱長(zhǎng)期凍存，也可液氮凍存；4、特別配方(主要成分為DMSO和氨基酸)具有有效提高細(xì)胞凍存活率和復(fù)蘇活力；5、不含動(dòng)物來(lái)源性蛋白，能減少各類(lèi)病毒、霉菌和支原體等的污染，確保凍存細(xì)胞安全；6、可孔板
2023
08-30

外泌體miRNA可通過(guò)細(xì)胞衰老途徑參與結(jié)腸炎發(fā)生？
外泌體是直徑為30-200nm的小囊泡，幾乎來(lái)自所有細(xì)胞[1]。外泌體中包裹了RNA、DNA、蛋白質(zhì)和脂質(zhì)，通過(guò)在不同細(xì)胞之間的傳遞，介導(dǎo)多種生理和病理過(guò)程。作為小的非編碼單鏈RNA，microRNAs(miRNAs)通過(guò)轉(zhuǎn)錄后抑制基因表達(dá)，顯著調(diào)節(jié)細(xì)胞生長(zhǎng)和代謝，可以被包裝在外泌體中以防止RNase的消化并進(jìn)入循環(huán)，可作為潛在的疾病生物標(biāo)志物[2]。圖1外泌體miRNA分泌機(jī)制2023年8月7日，武漢大學(xué)人民醫(yī)院董衛(wèi)國(guó)教授團(tuán)隊(duì)在國(guó)際學(xué)術(shù)期刊GutMicrobes在線發(fā)表了題為“Exosomal
2023
08-29

多色文獻(xiàn)分享：腎小球壁層上皮細(xì)胞的生物學(xué)特性與多樣性
腎小球壁層上皮細(xì)胞(parietalepithelialcells，PECs)是內(nèi)襯于鮑曼囊（腎小球囊）的一層扁平上皮，與足細(xì)胞來(lái)源于同一細(xì)胞譜系，在成熟腎中兩者解剖關(guān)系鄰近，是備受關(guān)注的具備向足細(xì)胞分化潛能的“前體細(xì)胞”。在過(guò)往的大量研究中，人們發(fā)現(xiàn)PECs與新月體腎炎的形成密切相關(guān)，2023年4月23日，北京中醫(yī)藥大學(xué)徐安龍教授團(tuán)隊(duì)在腎臟病期刊KidneyInternational上在線發(fā)表了題為“Singlecelllandscapeofparietalepithelialcellsinh
2023
08-25

類(lèi)器官crispr-cas9基因編輯及慢病毒轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)方法
近幾年，類(lèi)器官研究十分火熱，在信號(hào)通路機(jī)制，藥篩藥敏等研究中對(duì)類(lèi)器官模型需求激增，其中利用crispr-cas9基因編輯技術(shù)對(duì)類(lèi)器官進(jìn)行敲低或敲減來(lái)造模是個(gè)不錯(cuò)的實(shí)驗(yàn)方法，今天小愛(ài)帶大家來(lái)了解crispr-cas9基因編輯技術(shù)及慢病毒轉(zhuǎn)染方法。crispr基因編輯技術(shù)中有三個(gè)最為重要的組成部分：crRNA、sgRNA和Cas9蛋白。crRNA與Cas9蛋白形成復(fù)合物，sgRNA指引（crRNA/cas9）復(fù)合物靶向目的DNA區(qū)域定向切割DNA，從而達(dá)到基因編輯的目的。圖1crispr-cas9基
2023
08-24

細(xì)胞養(yǎng)得好，血清有門(mén)道
血清是細(xì)胞培養(yǎng)的必要成分之一，胎牛/新生牛/小牛/成牛種類(lèi)繁多，加上市場(chǎng)上各種品牌，讓細(xì)胞小白挑花了眼，小愛(ài)圍繞以下問(wèn)題帶您一站式了解。?血清為何對(duì)細(xì)胞狀態(tài)影響如此之大？?血清到底如何挑選？?絮狀物、沉淀、過(guò)濾、滅活等使用常見(jiàn)問(wèn)題？?細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn)題如何判斷是否與血清有關(guān)？一、血清為何對(duì)細(xì)胞狀態(tài)影響如此之大？血清中含有多種已知和未知的成分，主要包括：蛋白質(zhì)和多態(tài)、多種因子、氨基酸、激素、其他微量元素及不確定成分。其中生長(zhǎng)因子促進(jìn)細(xì)胞增值，附著因子促進(jìn)細(xì)胞貼壁并具有抗胰酶活性，各種蛋白質(zhì)可提供細(xì)胞生長(zhǎng)
2023
08-23

抗體文獻(xiàn)分享：我國(guó)科學(xué)家在鹿角中發(fā)現(xiàn)具有強(qiáng)大再生潛力的干細(xì)胞群
2023年2月24日西北工業(yè)大學(xué)生態(tài)環(huán)境學(xué)院邱強(qiáng)教授和王文教授團(tuán)隊(duì)、空軍軍醫(yī)大學(xué)西京醫(yī)院黃景輝教授團(tuán)隊(duì)、長(zhǎng)春科技學(xué)院李春義教授團(tuán)隊(duì)與吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)李志鵬教授團(tuán)隊(duì)等在SCIENCE上發(fā)表了題為“Apopulationofstemcellswithstrongregenerativepotentialdiscoveredindeerantlers”的研究論文。該研究發(fā)現(xiàn)鹿角芽基祖細(xì)胞(deerantlerblastemaprogenitorcell)是高等脊椎動(dòng)物中保守的再生性細(xì)胞的可能來(lái)源。研究指出
2023
08-21

(IF 29.4)│腫瘤靶向細(xì)菌鞭毛觸發(fā)局部出血重編程TAMs以改善抗腫瘤治療
腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞(tumor-associatedmacrophages，TAMs)是腫瘤微環(huán)境中一種可塑性異質(zhì)細(xì)胞群體，占某些實(shí)體腫瘤的50%，TAMs通常表現(xiàn)出免疫抑制M2表型，導(dǎo)致預(yù)后不良。TAMs通過(guò)刺激血管生成，增加腫瘤細(xì)胞的遷移和侵襲，抑制抗腫瘤免疫引起惡性發(fā)展。由于TAMs的高度可塑性，將抗炎巨噬細(xì)胞極化為促炎巨噬細(xì)胞是一種很有前途的抗腫瘤方法。目前常用的策略是通過(guò)局部或全身給藥來(lái)輸送外源性物質(zhì)，如免疫因子、單抗和免疫激動(dòng)劑。然而，在不影響正常凝血的情況下，精確誘導(dǎo)腫瘤出血的新材料

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