国产精品视频一区二区三区四,亚洲av美洲av综合av,99国内精品久久久久久久,欧美电影一区二区三区电影

細胞衰老檢測具體方法2023/12/11

細胞衰老是細胞在正常環(huán)境條件下發(fā)生的功能減退、逐漸趨向死亡的現(xiàn)象。衰老的細胞表現(xiàn)為細胞體積變大，呈扁平狀；細胞核變大，核膜內(nèi)陷，染色質(zhì)聚集、固縮、裂解；胞質(zhì)內(nèi)顆粒增加，有空泡形成；線粒體的數(shù)目及形狀發(fā)生改變；膜流動性降低；溶酶體內(nèi)容物增多，導致溶酶體酶β-半乳糖苷酶活性升高。衰老細胞所具有的上述特征成為各種細胞衰老檢測手段的依據(jù)。其中，對衰老相關(guān)β-半乳糖苷酶的檢測是有效檢測細胞衰老的經(jīng)典方法。X-Gal（5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷）是β-半乳糖苷酶的底物，X-Gal本身無色，經(jīng)

制作劃痕實驗需要注意事項2023/12/04

傷口愈合試驗，也通常稱為“劃痕試驗”，是一種廣泛建立的研究體外集體細胞遷移的技術(shù)。細胞劃痕（WoundHealing)是一種操作簡單，經(jīng)濟實惠的研究細胞遷移/腫瘤侵襲的體外試驗方法。其實驗原理是，當細胞長到融合成單層狀態(tài)時，在融合的單層細胞上人為一個空白區(qū)域，稱為“劃痕”。劃痕邊緣的細胞會逐漸進入空白區(qū)域使“劃痕”愈合。條件好的實驗室可以使用活細胞成像來分析創(chuàng)傷愈合實驗中角質(zhì)形成細胞或者成纖維細胞的遷移活動。結(jié)合包含的軟件分析算法，有可能延遲量化間隙表面關(guān)閉和關(guān)閉推移時間的速度。使用延時顯微鏡獲

免疫印跡(WB)實驗步驟闡述2023/11/28

WB，蛋白質(zhì)印跡(Westernblotting)又稱免疫印跡(immunoblotting)，是根據(jù)抗原抗體的特異性結(jié)合檢測復雜樣品中的某種蛋白的方法。該法是在凝膠電泳和固相免疫測定技術(shù)基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種新的免疫生化技術(shù)，具有SDS-PAGE的高分辨力和固相免疫測定的高特異性和敏感性，現(xiàn)已成為蛋白分析的一種常規(guī)技術(shù)。免疫印跡常用于鑒定某種蛋白，并能對蛋白進行定性和半定量分析。實驗步驟：一、蛋白質(zhì)樣品制備原始樣品可為細胞、組織、培養(yǎng)上清、免疫沉淀或親和純化的蛋白，以下為定性檢測目的蛋白時細胞樣

化學成分之化學分析方法詳情2023/11/20

化學分析從大類分是指經(jīng)典的重量分析和容量分析。重量分析是指根據(jù)試樣經(jīng)過化學實驗反應后生成的產(chǎn)物的質(zhì)量來計算式樣的化學組成，多數(shù)是指質(zhì)量法。容量法是指根據(jù)試樣在反應中所需要消耗的標準試液的體積。容量法即可以測定式樣的主要成分，也可以測定試樣的次要成分。1、重量分析指采用添加化學試劑是待測物質(zhì)轉(zhuǎn)變?yōu)橄鄳某恋砦?，并通過測定沉淀物的質(zhì)量來確定待測物的含量。2、容量分析滴定分析主要分為酸堿滴定分析、絡合滴定分析、氧化還原滴定分析、沉淀滴定分析。酸堿滴定分析是指以酸堿中和反應為原理，利用酸性標定物來滴定堿

實時定量PCR檢測結(jié)果出現(xiàn)異常解析2023/11/13

實時定量PCR技術(shù)（real-timePCR）也叫qPCR（QuantitavePCR），是指在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號累積實時監(jiān)測整個PCR進程，最后通過特定數(shù)學原理對未知模板進行定量分析的方法。下面對實時定量PCR檢測結(jié)果出現(xiàn)異常解析：1、無Ct值出現(xiàn)a)、檢測熒光信號的步驟有誤：一般染料法采用72℃延伸時采集，探針法則一般在退火結(jié)束時或延伸結(jié)束采集信號。b)、引物或探針降解：可通過PAGE電泳檢測其完整性。c)、模板量不足：對未知濃度的樣品應從系列稀釋樣本的最高濃度做起。

影響微生物生長因素之溫度解析2023/11/06

微生物與所處的環(huán)境之間具有復雜的相互影響和相互作用:一方面,各種各樣的環(huán)境因素對微生物的生長和繁殖有影響,另一方面,微生物生長繁殖也會影響和改變環(huán)境.研究環(huán)境因素與微生物之間的關(guān)系,可以通過控制環(huán)境條件來利用微生物有益的一面,同時防止它有害的一面。溫度是影響微生物生長的最重要因素之一。溫度對微生物的影響具體表現(xiàn)在：1、影響酶活性，溫度變化影響酶促反應速率，最終影響細胞合成。2、影響細胞膜的流動性，溫度高，流動性大，有利于物質(zhì)的運輸，溫度低，流動性降低，不利于物質(zhì)運輸，因此，溫度3、變化影響營養(yǎng)物

ELISA測定標本需要考慮方面2023/10/30

用于ELISA測定的標本最為常用的是血清(漿)，有時因為特定的檢測目的，也用到唾液、腦脊液、尿液、糞便等標本。目前使用血清標本測定的標志物一般有傳染性病原體的抗原和抗體、腫瘤標志物、激素、特種蛋白、細胞因子和治療藥物等。對用于激素和治療藥物測定的血清標本的收集，要注意收集時間甚或體位有可能會對測定結(jié)果產(chǎn)生影響。如可的松在早晨4～6點之間，會有一峰值出現(xiàn)：生長激素、促黃體激素(LH)和促卵泡激素(FSH)均以陣發(fā)性方式釋放，因此，在測定此類激素時，有必要在密切相連的時間間隔內(nèi)采取數(shù)份血樣本，以其中

小鼠ELISA檢測試劑盒試驗標本收集事項2023/10/23

做ELISA實驗，在處理樣本前應該先了解收集樣本的注意事項。一、標本收集注意事項：1.收集血液的試管應為一次性的無熱原，無內(nèi)毒素試管。2.血清和血漿避免使用溶血，高血脂標本。3.標本應清澈透明，懸浮物應離心去除。4.標本收集后若不及時檢測，需按一次使用量分裝，凍存于-20℃，-80℃電冰箱內(nèi)，避免反復凍融。5.可根據(jù)標本的實際情況，做適當倍數(shù)稀釋(建議做預實驗，以確定稀釋倍數(shù))。6.收集標本，盡量做到雙份的用量，避免一次實驗失敗，重復實驗時標本缺失，從而耽誤實驗進程。7.收集標本時，應該做好防護

淺談單克隆抗體技術(shù)了解下2023/10/16

單克隆抗體(monoclonalantibody，Mab)技術(shù)是20世紀免疫學技術(shù)的一項里程碑式突破．該技術(shù)將免疫小鼠的B淋巴細胞與小鼠骨髓瘤細胞融合生成雜交瘤細胞，這種雜交瘤細胞核內(nèi)含有雙親細胞的染色體，繼承了親代細胞的特征．它既具有瘤細胞在體外培養(yǎng)中迅速增殖的能力．又具備免疫脾細胞合成和分泌特異性抗體的特性。隨后用適當方法把雜交瘤細胞分離出來，進行單個細胞培養(yǎng)，使之大量繁殖，在培養(yǎng)液中形成單個雜交瘤細胞的克隆(也稱細胞系)。由于每個B淋巴細胞只有合成一種抗體的遺傳基因，所以單個雜交腐細胞的克

RT-PCR實驗反應體系靈敏度提升方法匯總2023/10/08

增加反應體系的靈敏度：1.分離高質(zhì)量RNA：成功的cDNA合成來自高質(zhì)量的RNA。高質(zhì)量的RNA至少應保證全長并且不含逆轉(zhuǎn)錄酶的抑制劑，如EDTA或SDS。RNA的質(zhì)量決定了你能夠轉(zhuǎn)錄到cDNA上的序列信息量的最大值。一般的RNA純化方法是使用異硫氰酸胍/酸性酚的一步法。為了防止痕量RNase的污染，從富含RNase的樣品(如胰臟)中分離到的RNA需要貯存在甲醛中以保存高質(zhì)量的RNA，對于長期貯存更是如此。從大鼠肝臟中提取的RNA，在水中貯存一個星期就基本降解了，而從大鼠脾臟中提取的RNA，在水

抗體特異性選擇技巧分析2023/10/03

抗體是哺乳動物適應性免疫系統(tǒng)對抗病原體的核心，它是在病原體刺激下由漿細胞（效應B細胞）所分泌的一種免疫球蛋白，能夠識別并結(jié)合特異的病原體抗原，隨后通過介導中和作用、調(diào)理作用、效應T細胞殺傷等來清除病原體特異性（specificity）的本質(zhì)含義是“Connectedwithoneparticularthingonly"即只與唯yi的特定事物相關(guān)，具有專一性。在免疫學上我們會說“抗體具有特異性"，指的就是抗體具有專一性，某一特定的抗體只能與唯yi一種抗原結(jié)合。其實準確來講是一類具有特定抗原表位的抗

實時熒光定量PCR與普通PCR的不同點敘述2023/09/25

實時熒光定量PCR與普通PCR二者的實驗結(jié)果相同，都能說明生物體外的特殊DNA復制的整個過程的擴增效率和溶解溫度情況。但是二者也有以下不同之處。1、二者系統(tǒng)組成不同熒光定量PCR儀比普通的PCR儀多了熒光信號采集系統(tǒng)和計算機分析處理系統(tǒng)。2、二者原理不同熒光定量PCR實時監(jiān)測與DNA結(jié)合的熒光染料激發(fā)的熒光，普通OCR通過檢測插入DNA中核算染料的量來測定PCR最終產(chǎn)物量。3、二者反應要求不同熒光定量PCR對擴增片段有較高的要求，一般為100-300bp，普通PCR可以擴增長點的片段。4、二者應

實驗室化學試劑穩(wěn)定性判斷遵循原則2023/09/22

實驗室通常使用各種化學試劑，使用過程中人們總是習慣于用生產(chǎn)日期來判斷試劑能否使用，但實際上很多廠家生產(chǎn)的化學試劑并不會標注明確的保質(zhì)期，這讓使用者非常頭疼，實際上這種判斷方式通常是不準確的?；瘜W試劑在貯存、運輸和銷售過程中會受到溫度、光輻照、空氣和水份等外在因素的影響，容易發(fā)生潮解、霉素、變色、聚合、氧化、揮發(fā)、升華和分解等物理化學變化，使其失效而無法使用。因此要采用合理的包裝，適當?shù)馁A存條件和運輸方式，保證化學試劑在貯存、運輸和銷售過程中不變質(zhì)。對一些對貯存和運輸有特殊要求的應按特殊要求辦理。

RNA純化過程中需注意的問題2023/09/11

RNAse的無處不在導致了RNA的脆弱敏感。要改善RNA提取的質(zhì)量，在RNA純化過程中要特別注意的10個問題介紹。1、在收獲組織及細胞死亡之后，應立即滅活內(nèi)源的RNA酶，以防止RNA降解。以下3個方法均可有效使內(nèi)源RNA酶失活：1）用含離液（如胍鹽）的細胞裂解液收獲樣品，并立即勻漿。2）用液氮瞬間凍結(jié)樣品。值得特別注意的是：組織塊必須保證足夠小，在浸入液氮的瞬間就能凍結(jié)，以確保瞬間令RNA酶失活3）立即將樣品置于RNAlater?TissueCollection:RNAStabilization

細胞系主要應用領(lǐng)域追蹤2023/09/08

細胞系是指原代細胞經(jīng)過增殖、傳代之后衍生出來的細胞克隆群。他們具有相同基因型和表現(xiàn)型的細胞，它們在體外培養(yǎng)中具有一定的生長能力和增殖能力，可以進行長期細胞培養(yǎng)。細胞系相比原代細胞更易于培養(yǎng)、保存和傳播，堅持相同的細胞生物學特征，長期保存在實驗室中，成為細胞和分子生物學和醫(yī)學研究的重要工具。細胞系指原代細胞培養(yǎng)物經(jīng)首ci傳代成功后所繁殖的細胞群體，也指可長期連續(xù)傳代的培養(yǎng)細胞?，F(xiàn)在細胞系廣泛的應用于科學研究和藥物生產(chǎn)，用途包括：1、科學研究：藥物研究開發(fā)與基礎(chǔ)研究藥物研究與開發(fā)（1）新藥篩選：如化

蛋白質(zhì)純化膠體過濾法步驟2023/08/28

不同大小的蛋白質(zhì)分子進入膠體過濾管柱，可依其分子量差異分離；是一種廣泛應用的partition色析法（Pharmacia操作手冊，GelFiltration）。儀器設(shè)備：色析管柱（PharmaciaCcolumn,1.6×100cm）、鐵架、鐵夾及水平儀；部分收集器（fractioncollector,需準備干凈試管約100支）；濃縮用離心機（低速5,000rpm）；濃縮用離心管Centriprep-30（Amicon4322）請注意其使用方法藥品試劑：膠體SephacrylS-300（Phar

實驗室推選：ELISA實驗結(jié)果出現(xiàn)各種問題解決方案2023/08/21

ELISA是酶聯(lián)接免疫吸附劑測定(Enzyme-LinkedImmunosorbnentAssay)的簡稱。它是繼免疫熒光和放射免疫技術(shù)之后發(fā)展起來的一種免疫酶技術(shù)。在檢測時，受檢標本（測定其中的抗原）與固相載體表面的抗體反應。洗滌后加入酶標記的抗體，通過反應結(jié)合在固相載體上。加入酶反應的底物后，底物被酶催化成為有色產(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，可根據(jù)呈色的深淺進行定性或定量分析。ELISA實驗結(jié)果出現(xiàn)異常剖析：一、白板異常：顯色步驟結(jié)束后，酶標板所有孔均無顏色。陽性對照不顯色。1

資訊推送：抗體科學保存指引2023/08/16

抗體保存得當與否，直接決定了抗體的活性和使用效果！如果抗體保存得當，大部分抗體活性都可以維持數(shù)月甚至數(shù)年。請謹記無論何時請按照說明書推薦的保存條件正確保存抗體.抗體濃度過低（1、多克隆抗體多克隆抗體在血清中于-20℃保存十年其活性損失不大。然而，一旦抗體被純化后，儲存在50%的甘油中于-20℃保存，即使沒有凍融，其活性的損失也可以觀察到，盡管其進程仍然非常緩慢。即使沒有甘油，只要你b反fu凍融，抗體也可以存儲在-20℃幾年甚至幾十年。另一個重要的事情是，該抗體濃度應高于1毫克/毫升，因為稀的抗體

污染細胞價值較大清除回收辦法2023/08/07

培養(yǎng)細胞一經(jīng)污染，多數(shù)較難處理。在細胞培養(yǎng)中如果污染細胞價值不大，宜棄之；在尋找原因后徹di消毒操作室，復蘇或重新購置細胞，再進行細胞培養(yǎng)。污染細胞價值較大，又難于重新得到，可采取以下辦法清除。1、細菌和真菌的清除抗生素對殺滅細菌較有效。聯(lián)合用藥比單獨用藥。預防用藥比污染后再用藥。預防用藥一般用雙抗生素，污染后清除用藥需采用大于常用量5～10倍的沖洗法，于加藥后作用24～48小時，再換常規(guī)培養(yǎng)液。此法在污染早期有效。2、支原體的清除(1)、用MRA處理用MRA（MycoplasmaRemoval

微生物篩選鑒別方法及培養(yǎng)注意事項2023/08/01

一、微生物的篩選方法1、單菌落挑取法:利用平板劃線法或稀釋涂布平板法接種在固體培養(yǎng)基表面，根據(jù)目的微生物特定的菌落特征，利用單菌落挑取的方法挑選目的微生物2、選擇培養(yǎng)法:利用選擇培養(yǎng)基對微生物進行選擇培養(yǎng)，直接篩選目的微生物3、鑒定培養(yǎng)法:利用鑒別培養(yǎng)基使目的微生物菌落呈現(xiàn)te有的特征，然后篩選目的微生物4.根據(jù)功能可分為選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基。二、微生物的鑒別方法1、菌落特征鑒別法:根據(jù)微生物在固體平板培養(yǎng)基表面形成的菌落的形狀、大小、隆起程度和顏色等特征進行鑒別2、指示劑鑒別法:如在以尿素為