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武漢尚恩生物技術(shù)有限公司

5
  • 2025

    03-27

    百問(wèn)百答 | 細(xì)胞有小黑點(diǎn),是碎片還是污染?

    各位奮戰(zhàn)在科研前線的戰(zhàn)友們,你們是否曾在凌晨三點(diǎn)的細(xì)胞房里,在顯微鏡下盯著細(xì)胞培養(yǎng)瓶里可疑的那些小黑點(diǎn),糾結(jié)這到底是細(xì)胞碎片還是污染,這細(xì)胞還能做實(shí)驗(yàn)嗎?事實(shí)上,細(xì)胞碎片和微生物污染都有其明顯的特征,了解這些特征,我們就能夠簡(jiǎn)單有效地將它們區(qū)分開。01細(xì)胞內(nèi)黑點(diǎn)和細(xì)胞外黑點(diǎn)的區(qū)分細(xì)胞內(nèi)黑點(diǎn):首先需要明確的是,細(xì)胞內(nèi)的黑色顆粒既不是碎片也不是污染,是細(xì)胞器及細(xì)胞外分泌泡,屬于細(xì)胞自身的結(jié)構(gòu)及特性。不同類型的細(xì)胞,胞內(nèi)顆粒的數(shù)量可能不同。培養(yǎng)條件也會(huì)影響細(xì)胞內(nèi)顆粒的數(shù)量。▲細(xì)胞內(nèi)黑色顆粒為自身結(jié)構(gòu)特
  • 2025

    03-04

    手把手教學(xué)!慢病毒轉(zhuǎn)染實(shí)操超全攻略來(lái)了!

    上兩期我們講了細(xì)胞轉(zhuǎn)染以及慢病毒轉(zhuǎn)染的相關(guān)內(nèi)容,這期我們繼續(xù)為大家介紹慢病毒轉(zhuǎn)染的實(shí)驗(yàn)操作、注意事項(xiàng)以及常見問(wèn)題。一慢病毒實(shí)驗(yàn)步驟慢病毒的實(shí)驗(yàn)流程大致分為:質(zhì)粒構(gòu)建—病毒包裝—病毒收集與濃縮—感染靶細(xì)胞—篩選與驗(yàn)證1質(zhì)粒構(gòu)建構(gòu)建重組質(zhì)粒,將外源目的基因片段插入質(zhì)粒載體,得到重組質(zhì)粒,在大腸桿菌內(nèi)轉(zhuǎn)化,并抽提得到重組質(zhì)粒DNA。2病毒包裝將重組質(zhì)粒DNA和其他包裝質(zhì)粒按照說(shuō)明書的一定比例一起共轉(zhuǎn)染293T細(xì)胞,48小時(shí)、72小時(shí)分別收獲含病毒的上清。3病毒收集濃縮收集的含病毒上清3000rpm離心
  • 2025

    03-04

    腦靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞的的分離方法有哪些?

    腦靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞的分離方法主要包括酶消化法和機(jī)械刮脫法,以下是具體的操作步驟:一、酶消化法材料準(zhǔn)備:無(wú)菌溶液:所有用于培養(yǎng)的溶液都需在37℃水浴中預(yù)熱。血管選擇:通常選擇新鮮的腦靜脈血管,確保血管無(wú)損傷、無(wú)凝血阻塞。血管處理:將血管放入含有抗生素(如青霉素和鏈霉素)的D-Hanks液中。在血管兩端插入磨平的注射器針頭并用絲線扎緊。用注射器從一端注入D-Hanks液沖洗血管,直至流出的液體無(wú)血跡。酶消化:注入適量的膠原酶溶液(濃度通常為0.1%),使血管充盈。將血管放入37℃無(wú)菌的D-Hanks
  • 2025

    02-14

    兔海綿體平滑肌細(xì)胞可以用于哪些研究呢

    兔海綿體平滑肌細(xì)胞在研究中具有廣泛的應(yīng)用價(jià)值,特別是在男性生殖健康、勃起功能障礙(ED)機(jī)制探索以及新藥研發(fā)等領(lǐng)域。以下是對(duì)兔海綿體平滑肌細(xì)胞可用于的研究方向的詳細(xì)歸納:一、男性生殖健康研究兔海綿體平滑肌細(xì)胞作為勃起組織的主要成分,其結(jié)構(gòu)和功能的完整性對(duì)于維持正常的勃起功能至關(guān)重要。因此,研究兔海綿體平滑肌細(xì)胞可以深入了解男性生殖健康的生理和病理機(jī)制,為相關(guān)疾病的預(yù)防和治療提供理論基礎(chǔ)。二、勃起功能障礙(ED)機(jī)制探索受體與信號(hào)傳導(dǎo)研究:兔海綿體平滑肌細(xì)胞含有豐富的腎上腺素能受體、膽堿能受體等多
  • 2025

    02-10

    磷酸鹽緩沖液有哪些用途

    磷酸鹽緩沖液(PhosphateBufferedSaline,簡(jiǎn)稱PBS)在生物學(xué)、醫(yī)學(xué)和化學(xué)領(lǐng)域具有廣泛的用途。以下是一些主要的用途:細(xì)胞培養(yǎng):PBS作為細(xì)胞培養(yǎng)基的組成部分,為細(xì)胞提供一個(gè)穩(wěn)定且適宜的生存環(huán)境。在細(xì)胞傳代、換液和收獲等操作中,PBS常用于洗滌細(xì)胞,以去除殘留的血清、培養(yǎng)基或藥物等物質(zhì)。生物學(xué)實(shí)驗(yàn):在各種生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中,PBS作為稀釋液、洗滌液和反應(yīng)液,用于準(zhǔn)備樣品、洗滌實(shí)驗(yàn)器材和維持實(shí)驗(yàn)體系的酸堿平衡。在流式細(xì)胞術(shù)、熒光顯微鏡等檢測(cè)方法中,PBS用于稀釋抗體、熒光染料等試劑,并
  • 2025

    02-06

    細(xì)胞復(fù)蘇失敗原因分析——復(fù)蘇篇

    細(xì)胞復(fù)蘇成敗和凍存及復(fù)蘇操作密切相關(guān)。上個(gè)星期和大家分享了細(xì)胞凍存方面容易出錯(cuò)的細(xì)節(jié),詳見《細(xì)胞復(fù)蘇失敗原因分析——凍存篇》。本篇主要從復(fù)蘇角度分析,排查復(fù)蘇過(guò)程中容易出現(xiàn)的問(wèn)題。復(fù)蘇步驟同樣,我們先復(fù)習(xí)一下復(fù)蘇步驟:1.提前將水浴鍋預(yù)熱至37℃,培養(yǎng)基復(fù)溫,離心機(jī)設(shè)置好轉(zhuǎn)速;2.準(zhǔn)備一個(gè)15ml離心管并加入適量培養(yǎng)基。3.取出凍存管,浸入水浴鍋迅速搖晃使細(xì)胞在2min內(nèi)充分融化;4.將細(xì)胞懸液緩慢滴入提前加了培養(yǎng)基的離心管,1000rpm3min離心;5.棄上清,重懸細(xì)胞并接種至培養(yǎng)器皿中,放
  • 2025

    02-06

    細(xì)胞復(fù)蘇失敗原因分析——凍存篇

    最近經(jīng)常有同學(xué)和小尚反映細(xì)胞復(fù)蘇不起來(lái),復(fù)蘇是細(xì)胞培養(yǎng)的一個(gè)常規(guī)操作,但其中有諸多細(xì)節(jié)容易被忽視,復(fù)蘇成敗和凍存、復(fù)蘇操作都密切相關(guān),稍不注意就可能一失足成千古恨。本篇主要從凍存角度進(jìn)行分析,下周將更新復(fù)蘇操作的原因排查,歡迎同學(xué)們收藏追更~我們先復(fù)習(xí)一下凍存步驟:1.提前準(zhǔn)備好凍存液備用;2.離心獲得細(xì)胞沉淀后,加凍存液輕輕重懸細(xì)胞;3.將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移入凍存管;4.如果使用程序凍存液,將凍存管放進(jìn)程序凍存盒,放入-80℃冰箱過(guò)夜后液氮保存。如果使用非程序凍存液,則無(wú)需凍存盒。?凍存常見的錯(cuò)誤操
  • 2024

    12-23

    胎牛血清需要滅活嗎?

    關(guān)于是否應(yīng)對(duì)胎牛血清進(jìn)行熱滅活處理一直存在爭(zhēng)議。血清滅活起源于20世紀(jì)70年代之前,在過(guò)去并未有人質(zhì)疑滅活的必要性,滅活一直是默認(rèn)的常規(guī)操作。然而越來(lái)越多的證據(jù)表明,血清熱滅活對(duì)細(xì)胞并沒有顯著的正面作用。隨著研究者們對(duì)血清的理解加深以及胎牛血清生產(chǎn)工藝的不斷進(jìn)步,如今熱滅活不再是必選項(xiàng)。什么是滅活血清熱滅活是指將溶解狀態(tài)的血清置于56℃水浴加熱30min。滅活的主要目的是為了去除血清中的補(bǔ)體成分或者支原體等病原體。什么是補(bǔ)體補(bǔ)體是存在于動(dòng)物血液與組織液中的一組經(jīng)活化后具有酶活性的蛋白質(zhì),它們可輔
  • 2024

    12-16

    血清沉淀大揭秘:沉淀類型與應(yīng)對(duì)策略

    血清中含有豐富的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),包括各種蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長(zhǎng)因子、激素、無(wú)機(jī)物等,其中一些物質(zhì)在特定的條件下容易形成沉淀。無(wú)論血清產(chǎn)地、品質(zhì)如何,血清凍融后產(chǎn)生沉淀是無(wú)法避免的,因此各類血清以及含有血清的產(chǎn)品都可能會(huì)產(chǎn)生沉淀。血清沉淀類型血清中的沉淀主要為兩類:一類是絮狀沉淀,這是血清中的纖維蛋白原在解凍過(guò)程中轉(zhuǎn)化成纖維蛋白而形成的,絮狀物較大時(shí)肉眼可見。▲纖維蛋白絮狀沉淀一類是白色顆粒樣沉淀,主要是血清中的磷酸鈣的析出。也有部分脂蛋白、膽固醇、冷凝集素、玻連蛋白、胎球蛋白等一些脂質(zhì)或蛋
  • 2024

    12-09

    純正血源,嚴(yán)格質(zhì)量把控——尚恩生物血清系列產(chǎn)品

    血清在細(xì)胞培養(yǎng)中的應(yīng)用歷史可以追溯到上世紀(jì)50年代。當(dāng)時(shí)的研究人員就已經(jīng)認(rèn)識(shí)到血清對(duì)于細(xì)胞培養(yǎng)的重要性,并將其作為添加物加入到細(xì)胞培養(yǎng)基中,取得了較好的培育效果。血清是天然混合物,其中成分復(fù)雜,對(duì)于細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程具有多種促進(jìn)作用,血清應(yīng)用于細(xì)胞培養(yǎng)極大促進(jìn)了包括細(xì)胞生物學(xué)、分子生物學(xué)、生物醫(yī)藥、疫苗生產(chǎn)等學(xué)科及領(lǐng)域的發(fā)展,同時(shí)技術(shù)的發(fā)展也促進(jìn)了血清生產(chǎn)技術(shù)、成分研究的發(fā)展,血清品質(zhì)也越來(lái)越好。目前動(dòng)物血清應(yīng)用于細(xì)胞培養(yǎng)主要集中于牛血清,包括胎牛血清、新生牛血清、小牛血清等,還有其他動(dòng)物血清如馬血清
  • 2024

    12-02

    配制PBS磷酸鹽緩沖液的具體步驟

    配制PBS磷酸鹽緩沖液的具體步驟如下:一、準(zhǔn)備材料與設(shè)備材料:NaCl(氯化鈉)KClNa2HPO4(磷酸氫二鈉,注意根據(jù)結(jié)晶水的不同選擇適當(dāng)重量)KH2PO4(磷酸二氫鉀)去離子水設(shè)備:磁力攪拌器燒杯(至少兩個(gè),一個(gè)用于溶解,一個(gè)用于定容)轉(zhuǎn)子量筒(用于精確測(cè)量液體體積)微波爐或水浴鍋(用于加熱去離子水)稱量天平pH計(jì)(可選,用于精確調(diào)整pH值)0.22微米濾器(用于無(wú)菌過(guò)濾,可選)二、配制步驟清洗與準(zhǔn)備:清洗干凈所有將要用到的燒杯、轉(zhuǎn)子和量筒,確保無(wú)雜質(zhì)殘留。預(yù)熱與溶解:向一個(gè)燒杯中加入約1
  • 2024

    11-25

    細(xì)胞“罷工”?!細(xì)胞傳代后增殖緩慢之謎!

    培養(yǎng)箱里,我們的“小勞?!奔?xì)胞們每天忙著分裂增殖,為我們的實(shí)驗(yàn)貢獻(xiàn)著力量。然而,有時(shí)候,這些小家伙們卻會(huì)突然“罷工”,傳代后的增殖速度變得慢如蝸牛,仿佛一夜之間愛上了慢生活。這背后究竟是什么原因呢?怎樣才能讓細(xì)胞們恢復(fù)干勁呢?請(qǐng)看下文:接種密度低你知道嗎?很多細(xì)胞都有密度依賴。細(xì)胞自身會(huì)分泌一些因子到培養(yǎng)基中促進(jìn)周圍的細(xì)胞生長(zhǎng)(旁分泌)。細(xì)胞密度太低,這種化學(xué)信號(hào)的傳遞減弱,細(xì)胞狀態(tài)受到影響。接種密度越低,增殖越慢,甚至不增殖。解決方案:根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)速度確定合適的傳代比例和接種密度。如果細(xì)胞已經(jīng)
  • 2024

    11-05

    SiHa細(xì)胞特征與應(yīng)用意義

    SiHa細(xì)胞來(lái)源于一位55歲日本女性的原發(fā)性子宮組織樣本片段,是從其宮頸鱗狀細(xì)胞癌組織中建立起來(lái)的。這些細(xì)胞具有遺傳特性和豐富的細(xì)胞學(xué)特征,是研究宮頸癌和其他相關(guān)疾病的重要工具。細(xì)胞特性:形態(tài)與生長(zhǎng):SiHa細(xì)胞形態(tài)上呈上皮細(xì)胞樣,生長(zhǎng)特性為貼壁生長(zhǎng)。在電鏡下,可以觀察到細(xì)胞間典型的橋粒和細(xì)胞質(zhì)中豐富的張力絲。遺傳特性:SiHa細(xì)胞是一種超三倍體人類細(xì)胞系,模式染色體數(shù)為71,存在于24%的細(xì)胞中。大多數(shù)細(xì)胞的染色體數(shù)量分布在69到72之間。此外,SiHa細(xì)胞還整合了HPV16基因組,每個(gè)細(xì)胞中
  • 2024

    10-28

    染色凋亡試劑盒在細(xì)胞凋亡研究中扮演著重要角色

    染色凋亡試劑盒在細(xì)胞凋亡研究中扮演著重要角色,通過(guò)合理選擇和使用這些試劑盒可以更準(zhǔn)確地揭示細(xì)胞凋亡的機(jī)制和過(guò)程。染色凋亡試劑盒的使用注意事項(xiàng):1.確保試劑新鮮有效:在使用之前,應(yīng)檢查所有試劑是否在有效期內(nèi),并確保它們處于良好的狀態(tài)。過(guò)期或變質(zhì)的試劑可能會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。2.正確儲(chǔ)存試劑:根據(jù)試劑盒說(shuō)明書的要求,將試劑儲(chǔ)存在適當(dāng)?shù)臏囟群蜅l件下。例如,某些試劑如TdT酶需要稀釋后當(dāng)天使用,并且對(duì)于不同的試劑要嚴(yán)格遵循存儲(chǔ)條件,如溫度和避光等要求,以保證其穩(wěn)定性和活性。3.避免交叉污染:在實(shí)驗(yàn)過(guò)
  • 2024

    10-23

    染色凋亡試劑盒的應(yīng)用場(chǎng)景包括但不限于以下幾個(gè)方面

    細(xì)胞凋亡,也稱為程序性細(xì)胞死亡,是一種基因調(diào)控的細(xì)胞自我毀滅過(guò)程,對(duì)于維持生物體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定和功能平衡至關(guān)重要。在生物學(xué)研究和醫(yī)學(xué)診斷中,準(zhǔn)確檢測(cè)細(xì)胞凋亡狀態(tài)是了解疾病機(jī)制、評(píng)估治療效果以及進(jìn)行藥物篩選的關(guān)鍵步驟。染色凋亡試劑盒的應(yīng)用場(chǎng)景包括但不限于以下幾個(gè)方面:一、基礎(chǔ)科學(xué)研究在基礎(chǔ)科學(xué)研究中,染色凋亡試劑盒被用于深入探索細(xì)胞凋亡的機(jī)制。細(xì)胞凋亡是一種有序的、程序化的細(xì)胞自我毀滅過(guò)程,對(duì)于維持生物體的發(fā)育和健康至關(guān)重要。通過(guò)染色凋亡試劑盒,研究人員可以檢測(cè)和定量細(xì)胞凋亡,觀察凋亡細(xì)胞在形態(tài)和生
  • 2024

    10-08

    黑膠蟲清除試劑的使用說(shuō)明

    黑膠蟲清除試劑含有特殊成分,能夠殺滅和抑制“黑膠蟲”的生長(zhǎng)。這些試劑經(jīng)過(guò)了多種細(xì)胞的測(cè)試和長(zhǎng)期的實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,對(duì)細(xì)胞無(wú)害,但對(duì)清除“黑膠蟲”污染效果很顯著。黑膠蟲清除試劑的使用說(shuō)明:保存條件:黑膠蟲清除試劑通常需要保存在-20℃的環(huán)境中,避光保存,避免反復(fù)凍融。配制方法:根據(jù)所培養(yǎng)細(xì)胞的特性,將黑膠蟲清除試劑配制成相應(yīng)的完全培養(yǎng)基。建議現(xiàn)配現(xiàn)用,以保證試劑的活性。稀釋比例:不同品牌的黑膠蟲清除試劑稀釋比例可能有所不同。例如,有的試劑推薦稀釋比例為1:200,即10mL的完全培養(yǎng)基加入50μL的清除試
  • 2024

    09-26

    染色凋亡試劑盒在生物學(xué)研究中具有廣泛的應(yīng)用

    染色凋亡試劑盒在生物學(xué)研究中具有廣泛的應(yīng)用。它們可以用于研究細(xì)胞凋亡的機(jī)制、藥物篩選、疾病診斷和治療等領(lǐng)域。通過(guò)使用,研究人員可以更準(zhǔn)確地檢測(cè)和定量細(xì)胞凋亡,從而深入了解細(xì)胞死亡的調(diào)控機(jī)制,并為疾病的預(yù)防和治療提供新的策略,需要注意的是,其選擇應(yīng)根據(jù)具體的實(shí)驗(yàn)需求和目標(biāo)來(lái)確定。不同的試劑盒可能適用于不同類型的細(xì)胞和凋亡標(biāo)志物。因此,在使用之前,研究人員應(yīng)仔細(xì)閱讀產(chǎn)品說(shuō)明書,并遵循正確的操作步驟,以確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可重復(fù)性。細(xì)胞凋亡是一種有序的、程序化的細(xì)胞自我毀滅過(guò)程,對(duì)于維持生物體的發(fā)育
  • 2024

    09-19

    染色凋亡試劑盒的操作指南

    染色凋亡試劑盒是用于檢測(cè)細(xì)胞凋亡的實(shí)驗(yàn)工具。它通常包含一組特定的染料和試劑,用于標(biāo)記和檢測(cè)細(xì)胞在凋亡過(guò)程中發(fā)生的特定變化。這些試劑盒通?;诓煌牡蛲鰳?biāo)志物進(jìn)行設(shè)計(jì),如DNA斷裂、膜聯(lián)蛋白V結(jié)合、線粒體膜電位變化等。細(xì)胞凋亡是一種程序性的細(xì)胞死亡過(guò)程,它在生物體的發(fā)育、組織更新和疾病防御中起著重要作用。凋亡過(guò)程涉及一系列生化和形態(tài)學(xué)的變化,包括細(xì)胞縮小、核濃縮、DNA斷裂和膜泡化等,其作用是通過(guò)特定的染料和試劑來(lái)檢測(cè)這些變化,從而確定細(xì)胞是否處于凋亡狀態(tài)。染色凋亡試劑盒的操作指南:-實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
  • 2024

    09-02

    A3細(xì)胞研究與發(fā)展

    A3人T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞(通常簡(jiǎn)稱為A3細(xì)胞或A3白血病細(xì)胞)是一種在白血病研究中使用的細(xì)胞系,特別是在研究T淋巴細(xì)胞白血病的發(fā)病機(jī)制、生物學(xué)特性以及治療策略時(shí)。T淋巴細(xì)胞白血病是白血病的一種類型,屬于淋巴系統(tǒng)惡性腫瘤,其特點(diǎn)是T淋巴細(xì)胞在骨髓、血液或其他淋巴組織中的異常增殖。A3細(xì)胞系作為實(shí)驗(yàn)?zāi)P?,為科學(xué)家們提供了一個(gè)在體外研究T淋巴細(xì)胞白血病的平臺(tái)。這些細(xì)胞可以在實(shí)驗(yàn)室條件下培養(yǎng)、擴(kuò)增,并用于各種實(shí)驗(yàn),如基因表達(dá)分析、藥物敏感性測(cè)試、細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)途徑研究等。通過(guò)這些研究,科學(xué)家們可以更好地
  • 2024

    08-27

    深入探討細(xì)胞培養(yǎng)基的優(yōu)勢(shì)特點(diǎn)

    細(xì)胞培養(yǎng)基是實(shí)驗(yàn)室中用于支持和維持細(xì)胞生長(zhǎng)、繁殖和實(shí)驗(yàn)研究的重要試劑。它提供了細(xì)胞所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),如氨基酸、維生素、礦物質(zhì)和生長(zhǎng)因子,從而確保細(xì)胞能在體外環(huán)境中存活和增殖。以下將深入探討細(xì)胞培養(yǎng)基的優(yōu)勢(shì)特點(diǎn):-無(wú)血清培養(yǎng)基:無(wú)血清培養(yǎng)基避免了動(dòng)物血清的復(fù)雜性和批次差異,其標(biāo)準(zhǔn)化的化學(xué)成分有利于實(shí)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)的重復(fù)性和可追溯性。-化學(xué)定義培養(yǎng)基:使得研究者能準(zhǔn)確控制實(shí)驗(yàn)條件,方便對(duì)細(xì)胞生理和病理過(guò)程進(jìn)行深入研究。-多種細(xì)胞類型:從哺乳動(dòng)物到人類細(xì)胞,從正常組織到腫瘤細(xì)胞,能適應(yīng)各種細(xì)胞類型的培養(yǎng)需要。-
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