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2021
07-08

細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基現(xiàn)應(yīng)用于快速生長(zhǎng)的細(xì)胞中使用
細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基是化學(xué)組成比較復(fù)雜的液體培養(yǎng)基。合適的培養(yǎng)基可支持細(xì)胞多次傳代培養(yǎng)。標(biāo)準(zhǔn)的培養(yǎng)基成分包括鹽、碳水化合物、維生素、氨基酸、生長(zhǎng)因子、代謝的前體物質(zhì)、激素和微量元素組成。不同細(xì)胞系對(duì)營(yíng)養(yǎng)的需求不同，因而有許多不同的培養(yǎng)基配方。絕大多細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基是建立在平衡鹽溶液（BSS）基礎(chǔ)上，添加了氨基酸、維生素和其它與血清中濃度相似的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。廣泛應(yīng)用的培養(yǎng)基是Eearle'sMEM的混合物，其中含有13種必需氨基酸、8種維生素。而Ham/sF12也包括非需要氨基酸，維生素的范圍亦很廣，另外常規(guī)
2021
06-07

胎牛血清能夠用在科研，生物技術(shù)等控制領(lǐng)域
胎牛血清應(yīng)用在哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)中，應(yīng)用很廣泛。比如，能夠用在科研、工業(yè)生產(chǎn)、人獸疫苗生產(chǎn)的質(zhì)量控制及生物技術(shù)藥物的質(zhì)量控制領(lǐng)域。血清是血液凝固后的液體部分，不含血細(xì)胞、纖維蛋白及凝集因子等，含有多種對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)需要的營(yíng)養(yǎng)因子及大分子物質(zhì)。血清白蛋白是血清主要成分。此外，重要的是，胎牛血清中含有大量對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)需要的生長(zhǎng)因子，也含有一些小分子物質(zhì)，如氨基酸、糖類、脂類及激素類物質(zhì)。胎牛血清采血：1、挑選出大約8月齡以上的健康妊娠母牛，經(jīng)剖腹獲取小牛。2、將小牛清洗干凈后，側(cè)放在萬(wàn)級(jí)潔凈房間內(nèi)的采血臺(tái)上
2021
05-24

磷酸鹽緩沖液作為常用緩沖劑的原因是什么？
磷酸鹽緩沖液使用中的注意事項(xiàng)：不少緩沖溶液都含有易揮發(fā)組分，如，氨-氯化銨中的氨酷酸-醋酸鈉中的醋酸?，F(xiàn)在，不少實(shí)驗(yàn)室引入了定量加液器，用定量加液器加試劑，具有簡(jiǎn)便準(zhǔn)確誤差恒定的特點(diǎn)，特別是在做成批樣品時(shí)更顯出它的*性，不少同志也喜歡用它來(lái)加緩沖液，但是，應(yīng)注意緩沖液不能長(zhǎng)久存放在定量加液器中，因該器皿不密閉，易造成氨的揮發(fā)（醋酸-醋酸鈉緩沖液中的醋酸也同理），從而，導(dǎo)致溶液失效，正確的做法是緩沖液應(yīng)適量配制，使用后及時(shí)密閉并置于低溫中保存。當(dāng)往某些溶液中加入一定量的酸和堿時(shí)，有阻礙溶液pH變化
2021
05-11

非洲綠猴腎細(xì)胞在醫(yī)藥研究中廣泛應(yīng)用
Vero細(xì)胞來(lái)源于非洲綠猴腎細(xì)胞，被成功的用來(lái)培養(yǎng)狂犬病疫苗、乙腦疫苗等多種疫苗，在非典期間又為研究冠狀病毒做出貢獻(xiàn)，在醫(yī)藥研究中廣泛應(yīng)用。形態(tài)：上皮細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁注釋：該細(xì)胞是日本千葉大學(xué)的Y.Yasumura和Y.Kawakita于1962年3月27日從一只正常的成年非洲綠猴腎組織培養(yǎng)出來(lái)的。培養(yǎng)液：MEM（含2mML-谷氨酰胺和Earle'sBSS，1.5g/LNaHCO3,0.1mM非需氨基酸,1.0mM丙酮酸鈉），10%胎牛血清傳代：吸去培養(yǎng)液。用0.25%(w/v)Trypsin
2021
04-14

細(xì)胞系的用途有哪些？
細(xì)胞系指原代細(xì)胞培養(yǎng)物經(jīng)*傳代成功后所繁殖的細(xì)胞群體，也指可長(zhǎng)期連續(xù)傳代的培養(yǎng)細(xì)胞。現(xiàn)在細(xì)胞系廣泛的應(yīng)用于科學(xué)研究和藥物生產(chǎn)，用途包括：1、科學(xué)研究：藥物研究開發(fā)與基礎(chǔ)研究藥物研究與開發(fā)（1）新藥篩選：如化學(xué)合成藥物藥效研究、中藥有效成分篩選與鑒定等。（2）疫苗研究與開發(fā)：如病毒性疫苗的研究與開發(fā)（肝炎病毒疫苗、艾滋病疫苗等）、腫瘤疫苗(多肽疫苗)等。（3）基因工程藥物研究與開發(fā)：如干擾素研究與開發(fā)，細(xì)胞生長(zhǎng)因子研究與開發(fā)等。（4）細(xì)胞工程藥物研究與開發(fā)：生物活性多肽研究與開發(fā)，人參皂甙、紫杉醇
2021
04-07

原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法
原代細(xì)胞接近和最能反映體內(nèi)生長(zhǎng)特性，適宜用于藥物敏感性試驗(yàn)、細(xì)胞分化等實(shí)驗(yàn)研究。原代細(xì)胞的培養(yǎng)，也叫初代培養(yǎng)，是從供體取得組織細(xì)胞在體外進(jìn)行的*培養(yǎng)，是建立細(xì)胞系的首步，是一項(xiàng)基本技術(shù)。原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：①組織塊培養(yǎng)法組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。②消化培養(yǎng)法③懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、
2021
04-07

原代細(xì)胞的取材和分類方法
將動(dòng)物機(jī)體的各種組織從機(jī)體中取出，經(jīng)各種酶(常用胰蛋白酶)、螯合劑(常用EDTA)或機(jī)械方法處理，分散成單細(xì)胞，置合適的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，使細(xì)胞得以生存、生長(zhǎng)和繁殖，這一過程稱原代培養(yǎng)。原代細(xì)胞培養(yǎng)的步驟一般是：取材→分離→培養(yǎng)和維持，今天我們重點(diǎn)介紹原代細(xì)胞的取材和分離方法。一、取材人和動(dòng)物細(xì)胞的取材是原代細(xì)胞培養(yǎng)成功的首要條件，直接影響細(xì)胞的體外培養(yǎng)。取材的基本要求：①取材要注意新鮮和保鮮②應(yīng)嚴(yán)格無(wú)菌③防止機(jī)械損傷④去除無(wú)用組織和避免干燥⑤應(yīng)注意組織類型、分化程度、年齡等⑥作好記錄各類組織的取材
2021
04-07

原代細(xì)胞的復(fù)蘇步驟
細(xì)胞一般儲(chǔ)存在液氮中，溫度達(dá)-196℃，理論上儲(chǔ)存時(shí)間是無(wú)限的。細(xì)胞凍存及復(fù)蘇的基本原則是慢凍快融，實(shí)驗(yàn)證明這樣可以最大限度的保存細(xì)胞活力。細(xì)胞復(fù)蘇就是要把原本冷凍保存(凍存)著的細(xì)胞恢復(fù)到一般的生長(zhǎng)狀態(tài)，今天我們來(lái)看看原代細(xì)胞的復(fù)蘇步驟。一、檢查收到細(xì)胞株包裹時(shí)，請(qǐng)檢查細(xì)胞株冷凍管是否有解凍情形，若有請(qǐng)立即處理告訴寄方。細(xì)胞株請(qǐng)盡速開始培養(yǎng)，或立即冷凍保存(置于–70°C，隔夜后，移到liqN2)。二、冷凍細(xì)胞解凍1、依據(jù)細(xì)胞株說(shuō)明書規(guī)定的基礎(chǔ)培養(yǎng)基種類、血清種類和其它規(guī)定之成份和比例，制備培
2021
04-07

原代細(xì)胞傳代方法有哪幾種？
原代細(xì)胞是指從機(jī)體的組織（如人組織、小鼠組織、大鼠組織和兔組織等）經(jīng)蛋白酶或其它的方法獲得單個(gè)細(xì)胞并在體外進(jìn)行模擬機(jī)體培養(yǎng)的細(xì)胞，稱為原代細(xì)胞。一股認(rèn)為，培養(yǎng)的原代的第1代細(xì)胞和傳代到第10代以內(nèi)的細(xì)胞統(tǒng)稱為原代細(xì)抱培養(yǎng)。在人工條件下使其原代細(xì)胞生存、生長(zhǎng)、繁殖和傳代，進(jìn)行細(xì)胞生命過程、細(xì)胞瘍變、細(xì)胞工程等問題的研究。那么關(guān)于原代細(xì)胞的傳代培養(yǎng)，我們應(yīng)該怎么做呢?一股有以下兩種方法：一、貼壁細(xì)胞的消化法傳代1、吸除或倒掉瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液。2、加入1ml左右消化液（胰蛋白鱷或與EDTA混合液）輕輕接動(dòng)

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