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2023
02-15

大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞細胞簡介
大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞細胞簡介：大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞分離自視網(wǎng)膜組織得到，視網(wǎng)膜居于眼球壁的內(nèi)層，是一層透明的薄膜。視網(wǎng)膜色素上皮層與脈絡膜緊密相連，由色素上皮細胞組成，它們具有支持和營養(yǎng)光感受器細胞、遮光、散熱以及再生和修復等作用。組織學上視網(wǎng)膜分為10層，由外向內(nèi)分別為:色素上皮層、視維、視桿細胞層、外界膜、外顆粒層、外叢狀層、內(nèi)顆粒層、內(nèi)從狀層、神經(jīng)節(jié)細胞層、神經(jīng)纖維層、內(nèi)界膜。視網(wǎng)膜上的感覺層是由三個神經(jīng)元組成。第一神經(jīng)元是視細胞層，專司感光，它包括錐細胞和桿細抱。視桿細胞主要在離中心凹較
2023
02-13

如何正確使用無血清凍存液凍存MG63細胞？
細胞基本信息細胞名稱：MG63(人骨肉瘤細胞)細胞別稱：M-G63；MG63細胞貨號：SNL-229生長特性：貼壁培養(yǎng)條件：DMEM+10%FBS+1%P/S培養(yǎng)環(huán)境：空氣，95%；二氧化碳(CO2)，5%細胞簡介：MG63細胞是從一名患有骨肉瘤的14歲白人男性患者的左股骨中分離出來成纖維細胞形態(tài)的細胞，表達TGF-βRI、TGF-βRII，使用聚肌苷-多肽酸、環(huán)己酰亞胺和放線菌素D可以誘導MG63細胞產(chǎn)生大量干擾素。MG63細胞可以用于3D細胞培養(yǎng)，也是一種合適的轉(zhuǎn)染宿主。MG63細胞正常生長
2023
02-07

TF-1細胞中為什么要加刺激因子GM-CSF？
細胞基本信息細胞名稱：TF-1(人紅白血病細胞)細胞別稱：TF1;MFD-1細胞貨號：SNL-222生長特性：懸浮培養(yǎng)條件：1640+10%FBS+2ng/mLGM-CSF+1%P/S培養(yǎng)環(huán)境：空氣，95%；二氧化碳(CO2)，5%細胞簡介：TF-1細胞是由Kitamura·T等人于1987年建立，源于一名35歲日本男性的肝素化骨髓抽取樣本，該患者具有嚴重的全血細胞減少癥。TF-1細胞生長依賴于IL-3或GM-CSF，對IL-5無反應。多種淋巴因子和細胞因子對TF-1細胞都有作用，如：IL-1、
2022
12-10

抗生素的幾大分類
抗生素是指由微生物(包括細菌、真菌、放線菌屬)或高等動植物在生活過程中所產(chǎn)生的具有抗病原體或其他活性的一類次級代謝產(chǎn)物，能干擾其他生活細胞發(fā)育功能的化學物質(zhì)。臨床常用的抗生素有微生物培養(yǎng)液中的提取物以及用化學方法合成或半合成的化合物。按照其化學結(jié)構(gòu)，抗生素可以分為：喹諾酮類抗生素、β-內(nèi)酰胺類抗生素、大環(huán)內(nèi)酯類、氨基糖苷類抗生素等。而按照其用途，抗生素可以分為抗細菌抗生素、抗真菌抗生素、抗腫瘤抗生素、抗病毒抗生素、畜用抗生素、農(nóng)用抗生素及其他微生物藥物(如麥角菌產(chǎn)生的具有藥理活性的麥角堿類，有收
2022
11-29

原代細胞的培養(yǎng)
原代細胞是接近和最能反映體內(nèi)生長特性，適宜用于藥物敏感性試驗、細胞分化等實驗研究。原代細胞的培養(yǎng)，也叫初代培養(yǎng)，是從供體取得組織細胞在體外進行的培養(yǎng)，是建立細胞系的第一步，是一項基本技術(shù)。原代細胞的培養(yǎng)是指直接從機體取下細胞、組織和器官后立即進行培養(yǎng)。因此，較為嚴格地說是指成功傳代之前的培養(yǎng)，此時的細胞保持原有細胞的基本性質(zhì)，如果是正常細胞，仍然保留二倍體數(shù)。但實際上，通常把第一代至第十代以內(nèi)的培養(yǎng)細胞統(tǒng)稱為原代細胞培養(yǎng)。常用的原代細胞的培養(yǎng)有組織塊培養(yǎng)和分散細胞培養(yǎng)。組織塊培養(yǎng)是將剪碎的組織塊
2022
10-28

動物細胞培養(yǎng)4大常用合成培養(yǎng)基
體外培養(yǎng)動物細胞已經(jīng)有近百年的歷史，但該技術(shù)真正得以廣泛應用及各種類型組織細胞大量體外培養(yǎng)成功是由于適合細胞體外生長需要的合成培養(yǎng)基的問世。合成培養(yǎng)基是對細胞體內(nèi)生存環(huán)境中各種已知物質(zhì)在體外人工條件下的模擬。這種模擬不是被動的、不加選擇的，而是在體外反復實驗和篩選，進行強化和重新組合后形成的人工合成培養(yǎng)基。合成培養(yǎng)基種類很多，據(jù)報道已有數(shù)十種，每種合成培養(yǎng)基最初都是為培養(yǎng)某種細胞而設計的，但應用后發(fā)現(xiàn)其他細胞也可以生長或經(jīng)改良也適合其他細胞的生長。01199培養(yǎng)基199培養(yǎng)基是Morgan、Mo
2022
10-27

293細胞該如何進行復蘇？
293細胞的另一生長特性是貼壁所需時間長且貼壁不牢。細胞冷凍后復蘇時,都有不同程度的腫脹,若以50ml培養(yǎng)瓶待細胞長滿瓶底的70%～80%時消化凍存,復蘇時將其全部接種至2個50ml瓶中時較為合適。剛復蘇的293貼壁很慢，復蘇接種后24小時內(nèi),應盡量減少觀察細胞次數(shù)或不作觀察,以免因晃動而影響細胞貼壁。復蘇后48小時左右觀察貼壁情況并進行更換培養(yǎng)基比較合適,如果用一次性塑料培養(yǎng)瓶可增加細胞貼壁牢度。換液前宜將培養(yǎng)基預熱。293細胞傳代：倒去廢液，PBS洗一次(輕)，用0.02%EDTA與0.25
2022
10-25

你了解細胞基礎培養(yǎng)基嗎？
細胞基礎培養(yǎng)基其工作基礎是用合適的激索、營養(yǎng)物和促貼壁的物質(zhì)的組合置換培養(yǎng)基中的成分，專門用于神經(jīng)細胞培養(yǎng)，它的基礎培養(yǎng)基是1：1的DMEM與H12的混合液，添加了胰島素、轉(zhuǎn)鐵蛋白、黃體酗、腐胺和硒。胰島索和胰島索樣生長因子對于大多數(shù)類型細胞的存活和生長有巫要作用，硒是谷胱甘肽產(chǎn)生的合作因子，可能有助于過氧化物和超氧化物的水解，有報道說還能防止細胞的光照損傷。隨后的其他配方如N1N3則含有較低濃度的轉(zhuǎn)鐵蛋白。未料到的是上述配方構(gòu)成的培養(yǎng)基可以支持神經(jīng)母細胞瘤細胞系快速增殖，隨后又發(fā)展了能支持原代
2022
10-21

動物細胞分離培養(yǎng)移液器的標準使用步驟
尚恩生物動物細胞實驗室一般采用吸管吸取、移動液體或滴加樣品，取少量或微量液體則采用移液器（加樣器）。吸管主要分為刻度吸管、無刻度吸管?？潭任苤饕糜谖?、轉(zhuǎn)移液體，常用的有1mL、2mL、5mL、10mL等規(guī)格。無刻度吸管又有直頭吸管和彎頭吸管之分。彎頭吸管除可作吸取、轉(zhuǎn)移液體外，還常用于吹打、混勻及傳代細胞。移液器（加樣器），俗稱移液槍，用于吸取移動液體或滴加樣品，移液槍可根據(jù)需要調(diào)節(jié)量的大小，吸量準確、方便。特別是微量移液槍，可使實驗樣品或試劑取量準確，重復性好。當，有可高溫消毒、多通道的
2022
10-20

原代細胞復蘇操作
一、準備材料(1)儀器：凈化工作臺、離心機、恒溫水浴箱、倒置相差顯微鏡、培養(yǎng)箱、液氮冰箱(2)玻璃器皿：吸管(彎頭、直頭)、培養(yǎng)瓶、玻璃瓶(250ml、100ml)、廢液缸(3)塑料器皿：吸頭、槍頭、膠塞、移液管(10ml)、15ml離心管、凍存管(1～2ml)(4)其他物品：微量加樣槍、紅血球計數(shù)板、記號筆、醫(yī)用橡皮膏、移液槍(5)試劑：PBS、小牛血清、培養(yǎng)液、雙抗(青霉素、鏈霉素)、胰蛋白酶(0.08%)二、操作步驟(1)原代細胞從液氮容器中取出凍存管，直接浸入37℃溫水中，并不時搖動令其
2022
10-14

解析：細胞生長緩慢的原因
就一個實驗室而言無論運作的多么好，總會因為革新技術(shù)或拓展方向二影響原來的流程，從而產(chǎn)生各種各樣的問題。有些地方錯誤的操作有可能帶來嚴重的后果，那么今天主要列舉細胞生長緩慢的兩大原因。01培養(yǎng)體系出現(xiàn)問題01檢查你所培養(yǎng)的細胞是否存在污染。（1）如果培養(yǎng)細胞未添加抗生素，細胞污染則是不可避免的。①用肉眼和顯微鏡進行檢查。②如果細胞被污染則要棄掉。（2）由于支原體污染不容易覺察到，因此必須定期檢測。（3）檢測可能污染的途徑和原因。02檢查你用于培養(yǎng)細胞的培養(yǎng)基和血清（例如：是否批次不同或廠商不同）。
2022
09-27

vero細胞易于培養(yǎng)，適合大規(guī)模生產(chǎn)
vero細胞是非洲綠猴腎細胞，該細胞易于培養(yǎng)，適合大規(guī)模生產(chǎn)。這種細胞(作為人用疫苗的細胞基質(zhì)是安全可靠的)已經(jīng)被世界衛(wèi)生組織推薦為生產(chǎn)人用疫苗的理想細胞基質(zhì)。疫苗在全國范圍推廣使用后，對降低發(fā)病，保護免疫者不發(fā)病，起了非常明顯的作用，但是由于疫苗沒有經(jīng)過濃縮和提純，二針免疫后，僅有60%的保護，而且疫苗注射后時有過敏反應發(fā)生。新的Vero細胞乙腦疫苗抗體的有效率達90%以上。目前，國際上生產(chǎn)和使用的乙腦疫苗有兩種，一種是用小白鼠腦組織培養(yǎng)乙腦病毒，另一種是用地鼠腎細胞培養(yǎng)乙腦病毒。但這兩種疫苗
2022
09-19

胎牛血清正確的保存方法
血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復雜的混合物，其組成成份雖大部分已知，但還有一部分尚不清楚，且血清組成及含量常隨供血動物的性別、年齡、生理條件和營養(yǎng)條件不同而異。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、激素、無機物等，這些物質(zhì)對促進細胞生長或抑制生長活性是達到生理平衡的。胎牛血清采用健康母牛懷孕的八月齡胎牛血液為原料，經(jīng)無菌采集、分離、微孔過濾后而成。所以胎牛血清是品質(zhì)也高，因為胎牛還未接觸外界，血清中所含的抗體、補體等對細胞有害的成分少。胎牛血清保存方法：1、需要長期保
2022
09-16

6步教你動物細胞如何培養(yǎng)？
細胞培養(yǎng)技術(shù)已經(jīng)成為當今生命科學各領域的基礎技術(shù)和基本技能，它也是細胞工程、基因工程和生物醫(yī)學工程的重要研究手段。那我們在實際的動物細胞培養(yǎng)實驗中需要注意哪些基本要求呢？1實驗前準備實驗前必須分門別類地制訂操作卡片，如清洗卡、消毒卡、細胞常用液（細胞培養(yǎng)液、BSS液、消化液）配制卡、牛血清檢測分裝卡、細胞原代和傳代操作卡等。各卡片上注明實驗所需器材的名稱、規(guī)格、數(shù)量、操作要領和實驗注意事項等。實驗前應按卡片收集、清點所需用品，一并放入超凈臺內(nèi)，這樣可避免操作時因物品不全而往返拿取所浩成的污染。同
2022
09-13

抗生素的作用及如何正確使用抗生素！
抗生素的作用：抗生素不僅能殺滅細菌，而且對霉菌、支原體、衣原體等其它致病微生物也有良好的抑制和殺滅作用?？股乜梢允悄承┪⑸锷L繁殖過程中產(chǎn)生的一種物質(zhì)，用于治病的抗生素除由此直接提取外，還有*用人工合成或部分人工合成的。通俗地講，抗生素就是用于治療各種細菌感染或其以致病微生物感染的藥物。怎樣正確使用抗生素：1、病毒性疾病不宜用抗生素治療。上呼吸道感染以及咽痛、咽峽炎，大部分是病毒感染所致，因此這類疾病無需抗生素而應使用病毒靈、病毒脞等抗病*藥物以及中草藥治療。2、新生兒、老年人和肝腎功能不全
2022
08-26

磷酸鹽緩沖液是無機化學及分析化學中的重要概念
什么是緩沖溶液？緩沖液(Buffersolution)通常是由「弱酸及其共軛堿」或「弱堿及其共軛酸」緩沖對所組成的溶液，能夠在加入一定量其他物質(zhì)時減緩pH的改變。以生物實驗中常用的一種緩沖液PBS為例，是由Na2HPO4、KH2PO4組成的緩沖對，在PH5.8-8.0范圍內(nèi)有較強的緩沖能力。磷酸鹽緩沖液是無機化學及分析化學中的重要概念，分析測試中，在絡合滴定和分光光度法等許多反應里都要求溶液的pH值保持在一個范圍內(nèi)，以保證指示劑的變色和顯色劑的顯色等，這些條件都是通過加入一定量的緩沖溶液達到的，
2022
08-19

一文帶您詳細了解大鼠原代細胞
大鼠原代細胞培養(yǎng)應選用體重200g的SD大鼠，用胰酶代替膠原酶進行肝臟灌注，分離得到的肝細胞存活率大于90%，且純度很高。其中，胰酶的濃度很重要，濃度過低肝細胞消化不*，導致雜細胞和結(jié)締組織很多；過高則對肝細胞產(chǎn)生毒性作用，影響存活率。經(jīng)反復試驗得出胰酶的濃度為0.18%，且灌流時維持溫度37℃。另外，接種密度也是影響肝細胞存活率的一個重要因素，該試驗采用細胞密度為6×105個/mL。細胞生長狀態(tài)好，既能保證細胞活率，又能滿足下一步試驗要求。肝細胞接種4h后，需用滴管輕吹換液，去除雜細胞及未貼壁
2022
08-19

動物細胞分離培養(yǎng)準備工作
動物細胞分離培養(yǎng)是用無菌操作的方法將動物體內(nèi)的組織（或器官）取出，模擬動物體內(nèi)的生理條件，在體外進行培養(yǎng)，人們借以觀察細胞的生長、增殖和細胞分化以及細胞凋亡或死亡的過程。因為分離的細胞沒有免疫防御系統(tǒng)，所以動物細胞分離操作需要比外科手術(shù)更加嚴格的無菌操作，無菌操作的原則就是保證細胞分離過程中的操作環(huán)境，使用的器械、耗材以及試劑無菌。硬/件/準/備01儀器：超凈工作臺、離心機、倒置顯微鏡、培養(yǎng)箱、冰箱、高壓蒸汽消毒裝置、移液器。02器械：止血鉗、手術(shù)刀、眼科剪、手術(shù)剪、鑷子、細胞過濾篩等。所有器械
2022
08-12

人非小細胞肺癌細胞通過去泛素化和穩(wěn)定ＫＬＦ４抑制非小細胞肺癌
今天我們來看看一篇關(guān)于非小細胞肺癌的文獻，首先還是了解下背景。肺癌是世界上普遍認為的死亡率最高的癌癥，沒有之一。肺癌中約有８５％是非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）。據(jù)報道，早期肺癌患者５年存活率為７０％，晚期患者５年存活率不高于２０％。在如此高死亡率的情況下，找到新的靶標分子對探索ＮＳＣＬＣ治療有非凡意義。之前的研究發(fā)現(xiàn)，泛素化涉及包括癌癥在內(nèi)的多種疾病，被認為是潛在的治療靶點。ＯＴＵＤ１作為泛素酶的一員，是由４８１個氨基酸組成的，與影響諸多分子的各種生理功能有關(guān)。在乳腺癌、胰管腺癌、甲狀腺癌等均有相
2022
07-26

293細胞正確的培養(yǎng)步驟
293細胞被用于腺病毒載體的繁殖。利用病毒進化目標基因并將其轉(zhuǎn)移到細胞中是一種有效的方法。然而，由于病毒作為病原體的特性，它們也會帶來風險。因此，為了繁殖這種病毒載體，需要一種能夠表達缺失基因的細胞系。不僅具有生成人糖基化譜和建立調(diào)控記錄的能力，而且具有多種優(yōu)勢，是一種特別有吸引力的重組蛋白表達系統(tǒng)。293細胞培養(yǎng)步驟：一、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加4-6mL*培養(yǎng)基后吹勻。然后將

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