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生物試劑分類2010/11/10: 生物試劑分類生物試劑（BR：Biologicalreagent）涉及到化學(xué)試劑分類。我國(guó)的試劑規(guī)格基本上按純度（雜質(zhì)含量的多少）劃分，共有高純、光譜純、基準(zhǔn)、分光純、優(yōu)級(jí)純、分析和化學(xué)純等7種。國(guó)家和主管部門頒布質(zhì)量指標(biāo)的主要優(yōu)級(jí)純、分級(jí)純和化學(xué)純3種。（1）優(yōu)級(jí)純（GR：Guaranteedreagent），又稱一級(jí)品或保證試劑，99.8%，這種試劑純度zui高，雜質(zhì)含量zui低，適合于重要精密的分析工作和科學(xué)研究工作，使用綠色瓶簽。（2）分析純（AR），又稱二級(jí)試劑，純度很高，99.7%，略

研究揭示著絲粒CENP-A蛋白結(jié)構(gòu)2010/10/25: 研究揭示著絲粒CENP-A蛋白結(jié)構(gòu)人體平均每天有1000億個(gè)細(xì)胞發(fā)生分裂，大部分時(shí)候機(jī)體的細(xì)胞分裂正常進(jìn)行。但有時(shí)細(xì)胞復(fù)制過(guò)程發(fā)生異常則會(huì)引起染色體畸形而導(dǎo)致多種病征例如癌癥、唐氏綜合征等。近日賓夕凡尼亞州大學(xué)醫(yī)學(xué)院的研究者們對(duì)CENP-A蛋白的分子結(jié)構(gòu)進(jìn)行了鑒定。CENP-A蛋白曾被證實(shí)在著絲粒的形成過(guò)程中起關(guān)鍵作用，CENP-A可將著絲粒變成一個(gè)DNA和蛋白的復(fù)合物，而且確保著絲粒在細(xì)胞分裂中完好無(wú)損。CENP-A的存在確保了人體有幾乎*相同的染色體組。CENP-A功能失常將導(dǎo)致細(xì)胞分裂過(guò)程

原代細(xì)胞DNA與RNA的吖啶橙熒光染色法2010/10/15: 原代細(xì)胞DNA與RNA的吖啶橙熒光染色法基本原理：吖啶橙（acridineorange，AO）是一種常用熒光染料，吖啶橙與原代細(xì)胞內(nèi)的DNA、RNA都有親和力，但有一定的特異性，即結(jié)合后發(fā)不同顏色的熒光，DNA呈亮綠色，而RNA呈橘紅色至火紅色。此法簡(jiǎn)便快捷，既可染活原代細(xì)胞又可染固定原代細(xì)胞。用于直接染色觀察活原代細(xì)胞或固定染色觀察原代細(xì)胞均可。吖啶橙對(duì)活原代細(xì)胞毒性小，配成1×10-4—2×10-4可用于直接染色活原代細(xì)胞和進(jìn)行熒光顯微鏡觀察，但不持久，用固定染色觀察法效果更好。材料：1.蓋

人胚胎干細(xì)胞有助神經(jīng)修復(fù) 2010/10/08: 人胚胎干細(xì)胞有助神經(jīng)修復(fù)美國(guó)威斯康星州大學(xué)科學(xué)家在《發(fā)育》雜志上撰文說(shuō)，他們已經(jīng)成功從人類胚胎干細(xì)胞中培育出了能產(chǎn)生髓磷脂的細(xì)胞，這一發(fā)現(xiàn)為基礎(chǔ)研究和臨床研究開辟了新的前景。研究人員培育出的這種細(xì)胞叫少突膠質(zhì)細(xì)胞，它負(fù)責(zé)在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中產(chǎn)生髓磷脂。髓磷脂在神經(jīng)纖維周圍形成絕緣層保護(hù)神經(jīng)，并加快神經(jīng)沖動(dòng)的傳遞。髓磷脂喪失或受到損壞會(huì)產(chǎn)生像多發(fā)性硬化這樣的嚴(yán)重后果，因?yàn)闆](méi)有髓磷脂神經(jīng)就會(huì)失去相互之間傳遞神經(jīng)沖動(dòng)的能力，其功能就得不到正常發(fā)揮。與人類干細(xì)胞不同，利用小鼠的胚胎干細(xì)胞形成少突膠質(zhì)細(xì)胞相對(duì)

羅氏細(xì)胞凋亡試劑盒選擇 2010/09/26: 細(xì)胞凋亡試劑盒選擇羅氏系列細(xì)胞凋亡類檢測(cè)試劑，產(chǎn)品齊全，常備現(xiàn)貨。羅氏（roche）細(xì)胞凋亡試劑盒選擇TestKitsfortheDetectionofDNAFragmentation（通過(guò)檢測(cè)DNA斷裂來(lái)檢測(cè)凋亡）ApoptoticDNALadderKitCellularDNAFragmentationelisaCellDeathDetectionELISAPLUSInSituCellDeathDetectionKitsincluding:InSituCellDeathDetectionKit

攪拌器分類及磁力攪拌器的使用注意事項(xiàng)2010/09/17: 攪拌器分類及磁力攪拌器的使用注意事項(xiàng)攪拌器是有機(jī)化學(xué)實(shí)驗(yàn)*的儀器之一，它可使反應(yīng)混合物混合得更加均勻，反應(yīng)體系的溫度更加均勻，從而有利于化學(xué)反應(yīng)的進(jìn)行特別是非均相反應(yīng)。攪拌的方法有三種：人工攪拌、磁力攪拌、機(jī)械攪拌。人工攪拌一般借助于玻棒就可以進(jìn)行，磁力攪拌是利用磁力攪拌器，機(jī)械攪拌則是利用機(jī)械攪拌器。磁力攪拌器由于磁力攪拌器容易安裝，因此，它可以用來(lái)進(jìn)行連續(xù)攪拌尤其當(dāng)反應(yīng)量比較少或在反應(yīng)是在密閉條件下進(jìn)行，磁力攪拌器的使用更為方便。但缺點(diǎn)是對(duì)于一些粘稠液或是有大量固體參加或生成的反應(yīng)，磁力攪拌

RNA提取注意事項(xiàng)2010/09/09: RNA提取注意事項(xiàng)一般注意事項(xiàng)一些RNA提取方法，在進(jìn)行具體實(shí)驗(yàn)時(shí)，應(yīng)根據(jù)研究對(duì)象的性質(zhì)，提取核酸的用途而對(duì)上述方法在操作步驟和試劑使用量上作一定的修改。1、在核酸提取時(shí)，為了增加細(xì)胞的裂解度，增加核蛋白復(fù)合體破碎度，以釋放更多的游離核酸，在操作中常要用到溶菌酶和蛋白酶K，在確保沒(méi)有核酸水解酶存在的前提下，酶反應(yīng)時(shí)間越長(zhǎng)越好。2、有時(shí)在使用蛋白酶時(shí)，為了抑制核酸水解酶的降解作用，可在蛋白酶緩沖液中用終濃度5mM的EDTA代替NaCL，并且可將反應(yīng)溫度提高到50－60℃，并將反應(yīng)時(shí)間縮短到15－2

細(xì)胞計(jì)數(shù)及活力測(cè)定2010/09/06: 細(xì)胞計(jì)數(shù)及活力測(cè)定一、原理培養(yǎng)的細(xì)胞在一般條件下要求有一定的密度才能生長(zhǎng)良好，所以要進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。計(jì)數(shù)結(jié)果以每毫升細(xì)胞數(shù)表示。細(xì)胞計(jì)數(shù)的原理和方法與血細(xì)胞計(jì)數(shù)相同。在細(xì)胞群體中總有一些因各種原因而死亡的細(xì)胞，總細(xì)胞中活細(xì)胞所占的百分比叫做細(xì)胞活力，由組織中分離細(xì)胞一般也要檢查活力，以了解分離的過(guò)程對(duì)細(xì)胞是否有損傷作用。復(fù)蘇后的細(xì)胞也要檢查活力，了解凍存和復(fù)蘇的效果。用臺(tái)盼蘭染細(xì)胞，死細(xì)胞著色，活細(xì)胞不著色，從而可以區(qū)分死細(xì)胞與活細(xì)胞。利用細(xì)胞內(nèi)某些酶與特定的試劑發(fā)生顯色反應(yīng)，也可測(cè)定細(xì)胞相對(duì)數(shù)和

配制percoll細(xì)胞分離液2010/08/31: 配制percoll細(xì)胞分離液（一）原理Percoll是一種包有乙烯吡咯烷酮的硅膠顆粒。滲透壓很低（（二）操作方法及注意事項(xiàng)1.不同濃度（密度）Percoll溶液的制備:先用9份Percoll與1份8.5％NaCl或1.5MPBS混合達(dá)到生理性滲透壓，然后用生理溶液（0.85％NaCl或0.15MPBS）稀釋到所需濃度。Percoll濃度（％）706050403020比重g／ml1.0901.0771.0671.0561.0431.0312.不連續(xù)密度梯度Percoll層的制備:先將試管壁用牛血清

PCR實(shí)用技巧2010/08/24: PCR實(shí)用技巧增加PCR的特異性：1.primersdesign這是zui重要的一步。理想的，只同目的序列兩側(cè)的單一序列而非其它序列退火的primer要符合下面的一些條件1）足夠長(zhǎng),18-24bp,以保證特異性.當(dāng)然不是說(shuō)越長(zhǎng)越好,太長(zhǎng)的primer同樣會(huì)降低特異性,并且降低產(chǎn)量2）GC%40%~60%3）5'端和中間序列要多GC,以增加穩(wěn)定性4）避免3'端GCrich,zui后3個(gè)BASE不要有GC,或者zui后5個(gè)有3個(gè)不要是GC（有人說(shuō)：3'端是GC/CG/CC/GG。）5）避免3'端的互

細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)解答2010/08/20: 細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)解答一、細(xì)胞培養(yǎng)基礎(chǔ)問(wèn)答1.BHK細(xì)胞就是指BHK21嗎？答：BHK細(xì)胞是指幼年敘利亞地鼠腎細(xì)胞（BabyHamsterSyrianKidney），1961年建株。原始的細(xì)胞株是成纖維細(xì)胞，貼壁依賴性。1963年獲得單細(xì)胞克隆細(xì)胞。后經(jīng)無(wú)數(shù)次傳代后細(xì)胞可懸浮生長(zhǎng)，它廣泛用于增殖各種病毒，生產(chǎn)獸用疫苗。zui常用的是BHK21的一個(gè)亞克隆細(xì)胞，即克隆13或C13。2.二倍體細(xì)胞有什么特點(diǎn)？答：二倍體細(xì)胞的染色體組型是2n核型；貼壁依賴接觸抑制；一般可傳代50代；無(wú)致瘤性。如W1-38：

關(guān)于血清滅活的問(wèn)題2010/08/19: 關(guān)于血清滅活的問(wèn)題滅活的定義:血清通過(guò)加熱,滅活的是血清中的補(bǔ)體、支原體等，有人還說(shuō)包括病毒。有關(guān)血清滅活問(wèn)題1.滅活的定義:血清通過(guò)加熱,滅活的是血清中的補(bǔ)體、支原體等，有人還說(shuō)包括病毒。2.滅活在多數(shù)情況下會(huì)影響血清的品質(zhì)，造成生長(zhǎng)因子、氨基酸等寶貴的營(yíng)養(yǎng)成分被部分破壞。3.對(duì)不同的細(xì)胞，滅活對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)的影響是不同的，多數(shù)是不利于細(xì)胞生長(zhǎng)，有些沒(méi)有明顯影響，有極少數(shù)細(xì)胞在使用滅活的血清后，其生長(zhǎng)有輕微的改善。4.血清的生產(chǎn)一般要經(jīng)過(guò)100納米三層濾膜連續(xù)濾過(guò)，支原體的污染已非常少見(jiàn)，這也是血

用elisa試劑盒檢測(cè)樣本的原理和步驟 2010/08/16: 用elisa試劑盒檢測(cè)樣本的原理和步驟ELISA法定量檢測(cè)人細(xì)胞液、體液以及組織勻漿中8羥基脫氧鳥苷的含量。試劑組成包被平底微孔板,酶結(jié)合物,生物素,標(biāo)準(zhǔn)品,顯色劑A,顯色劑B,終止液,濃縮洗滌液（100倍稀釋）,使用說(shuō)明書名稱規(guī)格數(shù)量保存包被平底微孔板96孔1可拆卸板2-8℃密封冷藏酶結(jié)合物10毫升1瓶2-8℃冷藏生物素1ml1瓶2-8℃冷藏標(biāo)準(zhǔn)品1毫升6瓶2-8℃冷藏顯色劑A6毫升1瓶2-8℃冷藏顯色劑B6毫升1瓶2-8℃避光冷藏終止液6毫升1瓶2-8℃冷藏濃縮洗滌液（100倍稀釋）10毫升

PCR實(shí)驗(yàn)技術(shù)2010/08/13: PCR實(shí)驗(yàn)技術(shù)PCR（聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）【原理】PCR（polymerasechainreaction）用于在體外將微量的目標(biāo)DNA大量擴(kuò)增，以便進(jìn)行分析。反應(yīng)體系：①樣品DNA；②引物（primer），是人工合成的一對(duì)寡核苷酸鏈（約15-20個(gè)核苷酸），用于擴(kuò)增夾在雙引物與模板DNA互補(bǔ)區(qū)之間的區(qū)域；③4種dNTP；④TagDNA聚合酶，是從一種嗜熱水生菌（Thermusaquaticus）中分離出來(lái)的。此酶zui適作用溫度為75～80℃，但短時(shí)間在95℃下不失活。⑤適宜的緩沖體系和適量的Mg2

ELISA實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)處理方法2010/08/11: ELISA實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)處理方法方法：1、擬和曲線：輸入*行：濃度值，如01050100400輸入第二行：該濃度下的調(diào)整后的od值，如00.5861.3971.9973.42選擇這些輸入的數(shù)據(jù)，用插入里的圖表按鈕，進(jìn)入圖表向?qū)?，在“?biāo)準(zhǔn)類型”中選擇“xy散點(diǎn)圖”；在“子圖表類型”中選擇“折線散點(diǎn)圖”，按“下一步”；選擇“系列產(chǎn)生在行”，按“下一步”；數(shù)據(jù)標(biāo)志，可以填寫：如數(shù)據(jù)y軸，OD值；數(shù)據(jù)x軸，濃度；按下一步，點(diǎn)擊完成?？傻们€圖。單擊曲線，按右鍵，選擇“添加趨勢(shì)線”，在類型中，選擇多項(xiàng)式；在選項(xiàng)

腫瘤標(biāo)志物分類、檢測(cè)原理和檢測(cè)方法2010/08/11: 腫瘤標(biāo)志物分類、檢測(cè)原理和檢測(cè)方法根據(jù)WHO資料，范圍內(nèi)惡性腫瘤是人類僅次于心腦血管病的第二大死亡原因，占總死亡人數(shù)的22%，并逐年增加。10種常見(jiàn)腫瘤：胃癌、肝癌、食管癌、結(jié)直腸肛門癌、白血病、子宮頸癌、鼻咽癌、乳腺癌和膀胱癌。腫瘤的早期發(fā)現(xiàn)、早期診斷、早期治療是患者獲得長(zhǎng)期生存的zui主要途徑。以肝癌為例，腫瘤直徑＜2cm，5年生存率幾乎100%；直徑每增加1cm，5年生存率下降20%。腫瘤診斷三大支柱是圖像診斷（包括B超、CT、核磁共振）、化學(xué)診斷（血清學(xué)和免疫學(xué)）及細(xì)胞學(xué)和組織學(xué)診斷，而

LightCycler應(yīng)用--甲基化分析2010/08/09: LightCycler應(yīng)用--甲基化分析主要應(yīng)用:應(yīng)用實(shí)時(shí)熒光PCR技術(shù)進(jìn)行快速準(zhǔn)確的DNA甲基化分析DNA甲基化是表觀遺傳學(xué)的重要研究?jī)?nèi)容之一，它可以在轉(zhuǎn)錄水平抑制基因的表達(dá)。具體的過(guò)程是在胞嘧啶－鳥嘧啶（CpG二核苷酸）的5位碳原子上添加了一個(gè)額外的甲基團(tuán)，形成5－甲基胞嘧啶。CpG二核苷酸密度較高的區(qū)域在人體基因組中呈非隨機(jī)分布于，優(yōu)先分布于基因的啟動(dòng)子區(qū)，并被稱為CpG島[1]。對(duì)于癌癥，其基因組的甲基化分布發(fā)生變化[2]。正常狀態(tài)下應(yīng)甲基化的區(qū)域未甲基化，而癥狀狀態(tài)下非甲基化區(qū)域出現(xiàn)甲

R&D Systems試劑Q&A常見(jiàn)問(wèn)題解答2010/08/03: R&DSystems試劑Q&A常見(jiàn)問(wèn)題解答問(wèn)：R&DSystems有分裝試劑嗎？答：沒(méi)有分裝試劑。R&DSystems公司不會(huì)分裝，也沒(méi)有授權(quán)任何公司進(jìn)行分裝。目前市場(chǎng)上所謂的“RD分裝試劑”是沒(méi)有*的3無(wú)產(chǎn)品，R&DSystems公司不承擔(dān)任何“RD分裝試劑”的售后服務(wù)。在此，建議廣大客戶和經(jīng)銷商從R&DSystems中文上公布的正規(guī)經(jīng)銷商處訂購(gòu)?？贵w問(wèn)：目錄中抗體的名稱有AB,AF,BAF,MAB之分，它們有何不同？答：帶有AB的抗體是用G蛋白純化的，帶有IgG成分；帶有AF的抗體經(jīng)G蛋白純

如何選擇Z佳的全血DNA、RNA提取方法？2010/08/03: 如何選擇*的全血DNA、RNA提取方法？從全血中提取DNA和RNA應(yīng)該說(shuō)是zui基本的工作了，提取的DNA和RNA質(zhì)量的好壞直接影響了下游的實(shí)驗(yàn)和分析，可供選擇的方法非常多，亂花漸欲迷人眼，如何選擇的方法，成了很多人實(shí)驗(yàn)開始前zui難以抉擇的事情。我們從兩個(gè)方面，層層剝繭，分析*的實(shí)驗(yàn)方法。1、全血的采集保存和DNA的提取I.用含抗凝劑的采血管進(jìn)行采血，抗凝劑一般有EDTA和肝素，EDTA更好一些，不會(huì)影響下游的反應(yīng)，如果沒(méi)有采血管，也可以自己添加抗凝劑EDTA，提前準(zhǔn)備0.04M的EDTA溶液

移液器的檢測(cè)和校準(zhǔn)指南2010/07/30: 移液器的檢測(cè)和校準(zhǔn)指南一、實(shí)驗(yàn)室簡(jiǎn)單檢測(cè)（一）氣密性檢測(cè)移液器吸滿液體后，手持垂直放置15s，檢查吸嘴的尖頭有無(wú)液滴，如有，則說(shuō)明漏氣。（二）準(zhǔn)確性檢測(cè)1）量程小于1μl，建議使用分光光度法檢測(cè)。將移液器調(diào)至目標(biāo)體積，然后移取染料溶液，加入一定體積的蒸餾水中，測(cè)定溶液的稀釋度（334nm或340nm），重復(fù)幾次移液操作，計(jì)算移液器的度。2）量程大于1μl，可以用稱重法檢測(cè)。通過(guò)對(duì)水的稱重，轉(zhuǎn)換成體積（體積=質(zhì)量/密度），鑒別移液器的準(zhǔn)確性。由于水的密度是隨著溫度變化而變化，且稱量天平本身度不符合

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