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上海源葉生物科技有限公司
初級(jí)會(huì)員 | 第16年
BOC-D-丙氨酸2012/10/13
英文名稱:BOC-D-Alanine其他名稱:N-叔丁氧羰基-D-丙氨酸CAS號(hào):7764-95-6C8H15NO4=189.21含量:≥99.0%比旋光度:+22~+24°熔點(diǎn):75~80℃性狀:白色或類白色結(jié)晶粉末用途:科研、實(shí)驗(yàn)保存:RT
聯(lián)合碳化透析袋技術(shù)參數(shù)及處理方法2012/09/22
技術(shù)參數(shù):△PH穩(wěn)定范圍:5-9△污染物水平:硫化物△化學(xué)兼容性:與很多鹽兼容,比如CaCl2,(NH4)2SO4;還可與分子生物學(xué)及酶學(xué)中常用的水溶劑、有機(jī)溶劑兼容,比如異丙醇、乙醇和丙酮?!鳒囟鹊挚剐裕嚎芍蠓?,可高壓滅菌?!鞯鞍孜剑好靠送肝龃降鞍琢啃∮?ng儲(chǔ)存條件:透析袋可存放于10-29度;每次使用后將余下的膜放回袋子并密封好,以防干裂。透析袋使用前處理方法:1.把透析袋剪成適當(dāng)長(zhǎng)度(10cm左右)的小段。2.取適量透析袋處理液(Fast-TreSolution)稀釋100倍,將透
美國(guó)光譜醫(yī)學(xué)透析袋說(shuō)明書(shū)2012/09/22
一、截留分子量(MWCO)說(shuō)明:由于透析膜由海綿狀橫向耦合的聚合物材料構(gòu)成,截留性能間接的由孔徑等級(jí)即截留分子量(MWCO)表示,截留率90%的溶質(zhì)分子大小可更的表示膜的MWCO。然而,溶質(zhì)的滲透性亦取決于分子形狀、水合度、離子電荷與極性,我們推薦選擇膜的MWCO為欲截留物質(zhì)分子量的一半,兩倍于透過(guò)物質(zhì)的分子大小。二、透析袋膜材質(zhì)說(shuō)明:1、生物技術(shù)纖維素酯(CE)膜生物學(xué)惰性和超純的生物技術(shù)CE膜提供廣泛的可選孔徑(9種)和尺寸,用于帶電荷分子的分離及大分子純化。3種尺寸中,生物技術(shù)CE膜對(duì)條件
BOC-L-丙氨酸2012/09/08
英文名稱:BOC-L-Alanine其他名稱:N-叔丁氧羰基-L-丙氨酸CAS號(hào):15761-38-3C8H15NO4=189.21含量:≥99.0%比旋光度:-25±2°熔點(diǎn):78~85℃性狀:白色結(jié)晶粉末用途:用于生化試劑、多肽合成.本產(chǎn)品僅供科研使用保存:RT
DL-丙氨酸|DL-α-丙氨酸2012/09/08
英文名稱:DL-Alanine其他名稱:DL-α-丙氨酸CAS號(hào):302-72-7CH3CH(NH2)COOH=89.09含量:≥98.0%PH:5.5~7.0干燥失重:≤0.20%性狀:白色結(jié)晶粉末用途:科研、實(shí)驗(yàn)保存:RT
Spectra/Por透析袋的膜參數(shù)Spectra/Por透析袋的膜參數(shù)2012/09/01
Spectra/Por生物技術(shù)等級(jí)膜:CE、RC、PVDF備注:PVDF膜透析袋現(xiàn)在廠家已經(jīng)停產(chǎn)了只有Spectrum公司提供生物技術(shù)等級(jí)透析膜,來(lái)滿足MWCO、膜純度高要求的關(guān)鍵應(yīng)用。由于這些膜的制作過(guò)程沒(méi)有重金屬污染及硫化物,所以他們都是超純的,無(wú)需清潔或預(yù)處理。只需用去離子水清洗,使用通用閉合夾,添加樣品即可!為滿足不同實(shí)驗(yàn)室透析需求,Spectrum公司開(kāi)發(fā)了3種不同生物技術(shù)等級(jí)膜材質(zhì):纖維素酯(CE)、再生纖維素(RC)和聚偏二氟乙烯(PVDF)。生物技術(shù)膜的優(yōu)勢(shì)1.超純(重要分離)2
小RNA調(diào)節(jié)多巴胺能神經(jīng)元分化2012/09/01
*,中腦多巴胺能神經(jīng)元的退行性死亡是帕金森病的zui顯著特征,了解其發(fā)育的分子生物學(xué)機(jī)制對(duì)探索帕金森病的發(fā)病機(jī)理以及治療帕金森病都有著至關(guān)重要。然而,對(duì)于胚胎干細(xì)胞向多巴胺能神經(jīng)元的發(fā)育過(guò)程的機(jī)制至今還不清楚。中科院上海生命科學(xué)研究院健康所神經(jīng)基因組博士研究生楊德華等在樂(lè)衛(wèi)東研究員的指導(dǎo)下,通過(guò)對(duì)于胚胎干細(xì)胞向多巴胺能神經(jīng)元的發(fā)育過(guò)程中microRNA表達(dá)譜的變化分析,發(fā)現(xiàn)了一些新的microRNA,并且鑒定出其中一個(gè)miR-132在多巴胺能神經(jīng)元發(fā)育的過(guò)程中表達(dá)顯著變化。進(jìn)一步研究表明,miR
Science子刊:腦癱在出生后的治療2012/08/18
在動(dòng)物中進(jìn)行的一項(xiàng)新的研究報(bào)告說(shuō),一種以腦中難以接觸到的炎癥細(xì)胞為標(biāo)靶的新的基于納米技術(shù)的方法可能被用于治療出生后的腦癱。腦癱是由在子宮中或是在出生頭幾個(gè)月中對(duì)發(fā)育中的腦造成傷害所引起的一組疾病,它會(huì)對(duì)許多腦部功能及神經(jīng)系統(tǒng)的功能造成損傷,zui顯著的是對(duì)運(yùn)動(dòng)技能的損傷。在對(duì)損傷做出反應(yīng)時(shí),腦子會(huì)激活被稱作小膠質(zhì)細(xì)胞和星形膠質(zhì)細(xì)胞的細(xì)胞,這些細(xì)胞會(huì)對(duì)損傷進(jìn)行清理并清除細(xì)胞碎片。不幸的是,這些細(xì)胞會(huì)過(guò)度反應(yīng)并開(kāi)始破壞正常的周圍組織,導(dǎo)致神經(jīng)發(fā)炎。目前的消炎藥物必須在腦中繞過(guò)無(wú)數(shù)的屏障后才能到達(dá)小膠
抗感染免疫研究取得新進(jìn)展2012/08/18
真核生物的天然免疫是抵抗外界病原體入侵的*道防線。天然免疫主要是通過(guò)模式識(shí)別受體來(lái)識(shí)別病毒或細(xì)菌等外來(lái)病原體。Nod樣受體(NLR)是近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn)的識(shí)別胞內(nèi)菌的模式受體。NLRC5作為Nod樣受體家族中zui大的一個(gè)成員,其生理學(xué)功能一直不清楚。4月10號(hào),《細(xì)胞研究》(CellResearch)雜志在線發(fā)表中科院上海生命科學(xué)研究院/上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院健康科學(xué)研究所錢友存研究組關(guān)于NLRC5在抗胞內(nèi)菌感染過(guò)程中的作用研究(NLRC5regulatesMHCclassIantigenpresen
Mi-2抗體自身抗體2012/08/04
1976年在肌炎患者血清中發(fā)現(xiàn)該自身抗體,因而取名為Mi抗體。以牛胸腺提取物為抗原的免疫雙擴(kuò)散法檢測(cè)發(fā)現(xiàn),Mi抗體有兩型,Mi-1型抗體僅僅在低濃度抗原中檢測(cè)到,而Mi-2則僅僅在高濃度抗原中能檢測(cè)到。致病作用尚未有證據(jù)支持或排除Mi—2抗體有致病作用。動(dòng)物模型研究顯示,用重組的抗原片段免疫動(dòng)物,僅產(chǎn)生相應(yīng)片段的抗體,但未見(jiàn)動(dòng)物產(chǎn)生自身免疫病。
Mi-2抗體的檢測(cè)方法2012/08/04
*的檢測(cè)方法是放射免疫沉淀法。在以Hela細(xì)胞為抗原的IP法中能檢測(cè)多個(gè)陽(yáng)性條帶,包括240、150、65、63kD,但不能檢測(cè)75、50、34kD蛋白。如果以Hep-2細(xì)胞提取物為抗原,某些條帶檢測(cè)不到。以親和純化的抗原建立的ELISA也是常用檢測(cè)方法,但有可能出現(xiàn)假陰性結(jié)果。以天然的MF2作為抗原的蛋白質(zhì)印跡法結(jié)果不可靠,改用重組的Mi-2抗原多肽,將大大提高蛋白質(zhì)印跡法檢測(cè)的敏感性。此外,IIF也是常用的篩查方法。Mi-2抗體陽(yáng)性的熒光圖形是核漿斑點(diǎn)狀著染,有時(shí)易與U1—RNP抗體相混。
放射受體測(cè)定法測(cè)定轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子TGFβ2012/07/28
1.培養(yǎng)上清中TGF-β的激活測(cè)定前必須使無(wú)血清培養(yǎng)上清中TGF-β激活。激活有熱激活和酸激活兩種方法,熱激活法是通過(guò)將標(biāo)本加熱至80℃5min而激活。酸激活法的步驟如下:①在200uL無(wú)血清培養(yǎng)上清中加6mol/LHCl1.5ul,使pH≤3.0,22℃孵育30rain;②用30ul中緩沖液中和,調(diào)至pH7.0~7.4。若pH值不在此范圍,可加少量1:10稀釋的6mol/LHCl或中和緩沖液調(diào)整(中和緩沖液為6mol/LNaOH和1mol/LHEPES等量混合而成);③用于胸腺細(xì)胞增殖法測(cè)定前
集落刺激因子(CSF)的測(cè)定2012/07/28
(一)生物活性檢測(cè)法1.骨髓細(xì)胞集落形成法(1)用含有10%FCS的RPMI-1640培養(yǎng)液制備0.3%~0.4%的軟瓊脂。(2)用淋巴細(xì)胞分層液分離得到骨髓單個(gè)核細(xì)胞,以3×104—5×104細(xì)胞/mL接種于軟瓊脂中,鋪在無(wú)菌平皿內(nèi);37~C,5%C02溫箱中培養(yǎng)14d。(3)顯微鏡下計(jì)數(shù)大于或等于40個(gè)細(xì)胞的集落形成數(shù),計(jì)算出集落刺激活力(colonystimulatingactivity,CSA),計(jì)算公式如下:CSA=集落形成數(shù)/105骨髓單個(gè)核細(xì)胞2.依賴株3H-TdR摻人法GM-CS
膜腫瘤壞死因子(TNF) 生物學(xué)活性檢測(cè)2012/07/07
多聚甲醛固定后的效應(yīng)細(xì)胞或直接用效應(yīng)細(xì)胞的胞膜(其膜表面有跨膜型TNF-a),按一定比例加入靶細(xì)胞,如L929,以觀察跨膜型TNF-a對(duì)靶細(xì)胞的細(xì)胞毒活性。1.材料①L929細(xì)胞株;②1%多聚甲醛溶于RPMI-1640培養(yǎng)液中;③PBS,pH7.2;④0.5%MFIT。2.多聚甲醛固定法(1)以105/孔效應(yīng)細(xì)胞置96孔培養(yǎng)板培養(yǎng),可加用刺激物,如LPS(100ns/mL)刺激一定時(shí)間后,棄上清。(2)PBS洗一次后,用1%多聚甲醛RPMI—1640室溫下固定15—20min,用PBS洗數(shù)次以去
FACS分析檢測(cè)跨膜型腫瘤壞死因子(TNF)2012/07/07
以下簡(jiǎn)單介紹用FACS分析檢測(cè)跨膜型TNF。1.材料①含2%人血清,0.1%疊氮鈉的PBS;②FITC標(biāo)記的TNF單克隆抗體;③羊或兔抗TNF多克隆抗體及F1TC標(biāo)記的羊抗兔IzC。2.操作步驟(1)單核細(xì)胞加或不加激活劑,37℃培養(yǎng)一定時(shí)間。(2)2000rpm離心10min,棄上清。(3)用含2%人血清/0.1%疊氮鈉的PBS懸浮細(xì)胞。(4)將105細(xì)胞廳L0口人圓底96孔培養(yǎng)板,并加FITC標(biāo)記的TNF單抗冰上放置20min。如無(wú)FITC標(biāo)記的TNF單抗,可按(5)~(7)步驟操作。(5)
細(xì)胞因子mRNA表達(dá)的檢測(cè)2012/06/30
常用的方法有Northern印跡雜交,斑點(diǎn)印跡雜交,RT-PCR,原位雜交與原位PCR,RNA半壽期的檢測(cè),進(jìn)行中的轉(zhuǎn)錄分析(run。nassay)等。(一)Northern印跡雜交將RNA變性及電泳分離后,將其轉(zhuǎn)移到固相支持物(如尼龍膜)上,再用某一細(xì)胞因子的標(biāo)記核酸探針雜交,以檢測(cè)相應(yīng)細(xì)胞因子mRNA的分子量及其在細(xì)胞內(nèi)的積累量。細(xì)胞因子大都是在某種刺激因素的影響下,使其mRNA轉(zhuǎn)錄活性增強(qiáng),從而導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)mRNA積累增加。但用細(xì)胞總RNA作Northern印跡雜交,其結(jié)果不能*反映mRNA
再生式序列復(fù)制反應(yīng)直接擴(kuò)增RNA靶序列2012/06/30
再生式序列復(fù)制反應(yīng)(self-sustainedsequencereplicationreaction,3SR)是一項(xiàng)與PCR類似的新技術(shù)。它利用3種酶(AMV逆轉(zhuǎn)錄酶、RNA酶H及T7RNA聚合酶)的活性,進(jìn)行體外mRNA的擴(kuò)增。所用的引物A與待檢的RNA3’端互補(bǔ),并在引物的5’端含一個(gè)T7RNA聚合酶的識(shí)別結(jié)合位點(diǎn);引物B則與引物A引導(dǎo)合成的cDNA的3’端互補(bǔ)。3SR的基本原理是,在AMV逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下,以靶mRNA為模板,在引物A的引導(dǎo)下合成cDNA*鏈,形成RNA/DNA雜交體。而
ELISA的操作要點(diǎn)2012/06/16
的試劑,良好的儀器和正確的操作是保證ELISA檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確可靠的必要條件。1標(biāo)本的采取和保存可用作ELISA測(cè)定的標(biāo)本十分廣泛,體液、分泌物和排泄物)等均可作標(biāo)本以測(cè)定其中某種抗體或抗原成份。有些標(biāo)本可直接進(jìn)行測(cè)定(如血清、尿液),有些則需經(jīng)預(yù)處理(如糞便和某些分泌物)。大部分ELISA檢測(cè)均以血清為標(biāo)本。血漿中除尚含有纖維蛋白原和抗凝劑外,其他成份均同等于血清。制備血漿標(biāo)本需借助于抗凝劑,而血清標(biāo)本只要待血清自然凝固、血塊收縮后即可取得。除特殊情況外,在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中均以血清作為檢測(cè)標(biāo)本。在ELI
ELISA的概念、原理、操作步驟2012/06/16
ELISA的概念、原理、操作步驟ELISA是酶聯(lián)接免疫吸附劑測(cè)定(Enzyme-LinkedImmunosorbnentAssay)的簡(jiǎn)稱。它是繼免疫熒光和放射免疫技術(shù)之后發(fā)展起來(lái)的一種免疫酶技術(shù)。此項(xiàng)技術(shù)自70年代初問(wèn)世以來(lái),發(fā)展十分迅速,目前已被廣泛用于生物學(xué)和醫(yī)學(xué)科學(xué)的許多領(lǐng)域。(一)原理ELISA是以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ),將抗原、牽9體的特異性反應(yīng)與酶對(duì)底物的催化作用相結(jié)合起來(lái)的一種敏感性很高的試驗(yàn)技術(shù)。由于抗原、抗體的反應(yīng)在一種固相載體──聚苯乙烯微量滴定板的孔中進(jìn)行,每加入一種試劑孵育后
亞適劑量抗IsM抗體刺激B細(xì)胞增殖法檢測(cè)IL-42012/06/09
亞適劑量抗IgM抗體對(duì)B淋巴細(xì)胞的刺激較弱,當(dāng)加人IL-4時(shí),B淋巴細(xì)胞對(duì)亞適劑量抗IgM抗體刺激表現(xiàn)出明顯的DNA合成增加,3H-TdR摻人量與IL-4含量相關(guān)。(1)小鼠脾臟B細(xì)胞懸液的制備1)取BALB/c或C57BL/6小鼠,常規(guī)方法分離脾臟淋巴細(xì)胞。用Hanks液洗2次;再用10%NBS-IMDM培養(yǎng)液調(diào)整細(xì)胞濃度為1X107~2X107/mL。2)去除粘附細(xì)胞:將上述脾細(xì)胞懸液置24孔培養(yǎng)板,每孔1~1.5mL,置37cC,5%C02溫箱中培養(yǎng)1h;將細(xì)胞懸液移至另外培養(yǎng)孔內(nèi),繼續(xù)培
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