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細(xì)胞轉(zhuǎn)染實驗失敗了，怎么解救？2022/12/14: 細(xì)胞轉(zhuǎn)染實驗失敗了，怎么解救？細(xì)胞轉(zhuǎn)染在細(xì)胞生物學(xué)和分子生物學(xué)中占據(jù)重要地位，廣泛用于基因與蛋白功能研究，成為實驗室工作中的常規(guī)技術(shù)手段之一。常見的異常結(jié)果是細(xì)胞大量死亡、轉(zhuǎn)染效率不高、重復(fù)實驗不穩(wěn)定。如何找到癥結(jié)所在，讓實驗順利進(jìn)行，就顯得比較重要。01細(xì)胞大量死亡02轉(zhuǎn)染效率不高03重復(fù)實驗不穩(wěn)定可以把細(xì)胞轉(zhuǎn)染從開始設(shè)計到最終的檢測，大致可以由6個步驟組成：核酸準(zhǔn)備、試劑選擇、細(xì)胞鋪板、轉(zhuǎn)染操作、細(xì)胞培養(yǎng)、效果檢測。每一步都會影響最終的結(jié)果。當(dāng)出現(xiàn)異常結(jié)果時，就需要具體分析原因，才能避免進(jìn)一

mRNA轉(zhuǎn)染技術(shù)——解決DNA難轉(zhuǎn)問題2022/12/13: 20世紀(jì)60年代諾貝爾獎得主FrancoisJacob發(fā)現(xiàn)mRNA，并闡明了其作為不穩(wěn)定中間體的作用，將信息從基因傳遞到核糖體以進(jìn)行蛋白質(zhì)合成。六十年來，mRNA技術(shù)的發(fā)展十分迅速，近年mRNA疫苗的橫空出世更具有劃時代的意義?！搬t(yī)學(xué)的未來是mRNA，基本上你可以使用mRNA治愈一切”。隨著研發(fā)與技術(shù)的發(fā)展，mRNA技術(shù)會發(fā)揮越來越巨大的作用。mRNA的轉(zhuǎn)染歷史，可以追溯到20世紀(jì)的80年代，運用不同的化學(xué)試劑進(jìn)行mRNA的細(xì)胞轉(zhuǎn)染。外源基因的細(xì)胞轉(zhuǎn)染，mRNA比DNA具有更快速、安全的優(yōu)勢，體

探討 rRNA去除的方法與必要性2022/11/12: 遺傳中心法則表明，DNA是生物體內(nèi)遺傳信息的載體。遺傳信息在精密的調(diào)控下從DNA轉(zhuǎn)錄成RNA，再傳遞到蛋白質(zhì)。因此RNA被認(rèn)為是DNA與蛋白質(zhì)之間生物信息傳遞的“橋梁”，在研究轉(zhuǎn)錄組信息中占有著重大的作用。背景介紹轉(zhuǎn)錄組（transcriptome）是指在某一特定的生理條件下，細(xì)胞、組織或者生物體內(nèi)所有的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物的集合，即轉(zhuǎn)錄出來的所有RNA總和，包括編碼RNA（即mRNA）和ncRNA（tRNA、rRNA、miRNA、lncRNA、circRNA）等不同類型的RNA分子。在這之中核糖體RNA(

國產(chǎn)GMP級轉(zhuǎn)染試劑助力細(xì)胞基因治療的持續(xù)快速發(fā)展2022/11/11: 國產(chǎn)GMP級轉(zhuǎn)染試劑助力細(xì)胞基因治療的持續(xù)快速發(fā)展細(xì)胞基因治療（CellａndGeneTherapy,CGT）作為生命科學(xué)研究的應(yīng)用技術(shù)領(lǐng)域，分為細(xì)胞治療和基因治療兩大部分。與常規(guī)的藥物與治療方案相比，基因治療能從源頭上解決疾病的發(fā)生，通過改變細(xì)胞內(nèi)的遺傳信息，進(jìn)而改變基因表達(dá)及相應(yīng)細(xì)胞性狀，終達(dá)到治愈疾病的目的，故而在一些目前無法治療或療效不佳的疾病上有明顯優(yōu)勢?；蛑委熃暝谀[瘤、感染性疾病、神經(jīng)系統(tǒng)疾病等多種疾病領(lǐng)域顯示出巨大的應(yīng)用潛力，正迅速發(fā)展。來源：頭豹研究院從2016年到2020年

蛋白酶體抑制劑--MG132蛋白酶抑制劑2022/11/08: 蛋白酶體抑制劑--MG132蛋白酶體(Proteasomes)是蛋白質(zhì)合成過程中錯誤折疊的蛋白和其他蛋白被proteolyzed的主要降解途徑。它存在于所有的真核細(xì)胞、古細(xì)菌和一些細(xì)菌中，是一種具有多重催化活性的蛋白酶，由多個催化和調(diào)節(jié)蛋白組成。它具有三種或四種不同的肽酶活性，包括胰蛋白酶樣、糜蛋白酶樣和肽基谷氨酰肽水解活性。大多數(shù)蛋白質(zhì)在被蛋白酶體降解之前被泛素化，通過泛素-蛋白酶體機(jī)制降解的蛋白質(zhì)首先與泛素結(jié)合，泛素是一種76個氨基酸的高度保守殘基。泛素化的蛋白被26S蛋白酶體識別，它水解和

如何定量低豐度目的基因的表達(dá)（含詳細(xì)解決方法）2022/10/09: 有時候，qPCR實驗會成為阻礙你課題順利開展的強(qiáng)勢攔路虎！看似簡單的基因表達(dá)量差異驗證，當(dāng)遇到低豐富表達(dá)的基因時，也許就舉步維艱。模板獲取困難導(dǎo)致的RNA提取量少或RNA質(zhì)量不佳，即使選用蕞佳的試劑、篩選出良好的引物，也有可能qPCR定量得到的內(nèi)參基因CT值在18-20個cycle，而目的基因在31-35個循環(huán)。遇到這種情況，你是怎么解決的呢？qPCR在低豐度表達(dá)基因定量中的局限性基因的豐度是指基因在基因組中的拷貝數(shù)?？煞譃楦哓S度，中等豐度和低豐度。低豐度是指目的基因在基因組中的拷貝數(shù)低,可簡單

DSS潰瘍性結(jié)腸炎模型的構(gòu)建2022/09/26: DextranSulfateSodiumSalt（DSS）潰瘍性結(jié)腸炎模型的建立DSS造模發(fā)展歷程目前有多種動物模型被廣泛用于研究炎癥性腸炎（inflammatoryboweldisease，IBD）的病因、發(fā)病機(jī)制及測試新開發(fā)藥物藥效等，尤其以葡聚糖硫酸鈉鹽（DextranSulfateSodiumSalt，DSSMW:36000~50000）結(jié)腸炎（ulcerativecolitis，UC）模型應(yīng)用廣。圖1.DSS潰瘍病結(jié)腸炎模型發(fā)展歷程DSS建構(gòu)的UC模型特點通過給予動物自由飲用不同濃度的

逆全球化背景下，基質(zhì)膠缺貨是否會成為常態(tài)2022/09/22: 逆全球化背景下，基質(zhì)膠缺貨是否會成為常態(tài)隨著疫情的持續(xù)影響，多國都開啟了保護(hù)主義模式，全球化進(jìn)程戛然而止，作為21世紀(jì)具前景的生命科學(xué)也受到了相關(guān)沖擊。在今年4~6月份，基質(zhì)膠在全國大面積缺貨，導(dǎo)致很多企業(yè)無法按時完成產(chǎn)品和服務(wù)交付、科研工作者科研成果不能及時發(fā)表以及即將畢業(yè)的莘莘學(xué)子們的畢業(yè)論文無法按時完成實驗導(dǎo)致畢業(yè)進(jìn)程受到很大的影響。在中美脫鉤的影響下，如果出現(xiàn)關(guān)鍵性生物原料出現(xiàn)如芯片一樣的卡脖子問題，將會對中國的生命科學(xué)產(chǎn)業(yè)和研究造成嚴(yán)重沖擊，這是我們不想看到的，因此加速國產(chǎn)替代是個必然

基質(zhì)膠——3D類器官培養(yǎng)成功的關(guān)鍵2022/09/22: 基質(zhì)膠——3D類器官培養(yǎng)成功的關(guān)鍵隨著疫情的持續(xù)影響，多國都開啟了保護(hù)主義模式，全球化進(jìn)程戛然而止，作為21世紀(jì)前景的生命科學(xué)也受到了相關(guān)沖擊。在今年4~6月份，基質(zhì)膠在全國大面積缺貨，導(dǎo)致很多企業(yè)無法按時完成產(chǎn)品和服務(wù)交付、科研工作者科研成果不能及時發(fā)表以及即將畢業(yè)的莘莘學(xué)子們的畢業(yè)論文無法按時完成實驗導(dǎo)致畢業(yè)進(jìn)程受到很大的影響。在中美脫鉤的影響下，如果出現(xiàn)關(guān)鍵性生物原料出現(xiàn)如芯片一樣的卡脖子問題，將會對中國的生命科學(xué)產(chǎn)業(yè)和研究造成嚴(yán)重沖擊，這是我們不想看到的，因此加速國產(chǎn)替代是個必然趨勢和過

經(jīng)典信號通路——JAK-STAT信號通路2022/09/22: 經(jīng)典信號通路——JAK-STAT信號通路通路簡介JAK-STAT通路是一條由細(xì)胞因子刺激的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，參與細(xì)胞的生長、分化、凋亡以及免疫調(diào)節(jié)等許多重要的生物學(xué)過程。此通路主要由三個類別組成：酪氨酸激酶相關(guān)受體、酪氨酸激酶JAK和產(chǎn)生效應(yīng)的轉(zhuǎn)錄因子STAT?；拘再|(zhì)酪氨酸激酶受體本身不具有激酶活性，但是細(xì)胞內(nèi)有酪氨酸激酶JAK的結(jié)合位點，受體與配體結(jié)合后，活化與之結(jié)合的JAK，磷酸化靶蛋白的酪氨酸殘基，將信號從細(xì)胞外傳遞到細(xì)胞內(nèi)。因此，JAK是一類非跨膜型的酪氨酸激酶，既能磷酸化細(xì)胞因子受體又能

高活性CAR-T靶點蛋白助力細(xì)胞治療研發(fā)2022/08/16: 高活性CAR-T靶點蛋白助力細(xì)胞治療研發(fā)嵌合抗原受體T（CAR-T）細(xì)胞療法是一種基于體外改造T細(xì)胞，使其表面表達(dá)特異性識別腫瘤表面抗原的受體的腫瘤免疫療法，改造后的T細(xì)胞輸入患者體內(nèi)，不需要抗原遞呈細(xì)胞的幫助，直接靶向體內(nèi)癌細(xì)胞并發(fā)揮免疫殺傷作用。如CD19，一種細(xì)胞表面蛋白，在惡性B細(xì)胞上均勻而強(qiáng)烈地表達(dá)。圖1.CAR結(jié)構(gòu)圖（圖片來源于華安證券研究所:CAR-T行業(yè)深度報告)全球CAR-T產(chǎn)品現(xiàn)狀目前全球已有8款上市的CAR-T療法，其中2款是國內(nèi)的，分別是藥明巨諾的瑞基奧侖賽注射液與復(fù)星凱

小眾抗氧化劑的“扛把子”--抗氧化劑NAC2022/08/16: 小眾抗氧化劑的“扛把子”--抗氧化劑NAC自1960年代以來，NAC作為一種藥物使用，并被列入世界衛(wèi)生組織基本藥物標(biāo)準(zhǔn)清單。NAC是一種強(qiáng)大的抗氧化劑，也是一種解毒劑。除了做為化痰劑與臨床治療對乙酰氨基酚(acetaminophen)中毒外，它還在臨床上被應(yīng)用于治療多種疾病，如慢性支氣管炎、多囊卵巢綜合征、心臟病等。圖1NAC分子結(jié)構(gòu)式（CAS.NO616-91-1）那NAC究竟是什么了？NAC即N-acetyl-L-cysteine，也稱LNAC，中文名為N-乙酰半胱氨酸，是半胱氨酸的乙?；?

干細(xì)胞領(lǐng)域：Nature重磅發(fā)文，實現(xiàn)化學(xué)小分子誘導(dǎo)多潛能干細(xì)胞2022/08/16: 干細(xì)胞領(lǐng)域：Nature重磅發(fā)文，實現(xiàn)化學(xué)小分子誘導(dǎo)多潛能干細(xì)胞1.研究背景多潛能干細(xì)胞具有無限增殖的特性和分化成生物體所有功能細(xì)胞類型的能力，使其在細(xì)胞治療、藥物篩選和疾病模型等領(lǐng)域具有廣泛的應(yīng)用價值，尤其在再生醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中發(fā)揮著關(guān)鍵的作用。如何使高度分化的成體細(xì)胞重獲類似胚胎發(fā)育早期的多潛能狀態(tài)，一直是干細(xì)胞與再生醫(yī)學(xué)領(lǐng)域研究的重點內(nèi)容之一。2.Nature重磅發(fā)文2022年4月13日，北京大學(xué)鄧宏魁教授及其團(tuán)隊在頂級期刊Nature上發(fā)表題為“Chemicalreprogrammingofh

干細(xì)胞培養(yǎng)常用小分子大全2022/08/01: 干細(xì)胞培養(yǎng)常用小分子大全一.干細(xì)胞的背景干細(xì)胞(StemCell)是一種未高度分化的細(xì)胞，具有自我更新和分化為特定細(xì)胞、各種再生組織和器官的能力，醫(yī)學(xué)界稱為"萬用細(xì)胞"。在一定條件下，干細(xì)胞可以分化成多種功能細(xì)胞，在體外疾病模型、組織工程學(xué)、再生醫(yī)學(xué)、細(xì)胞治療、藥物發(fā)現(xiàn)和開發(fā)等方面有巨大的應(yīng)用前景，也有助于我們研究和闡明生物體基本的生化和發(fā)育過程。干細(xì)胞的治療潛能越來越受到重視，如何誘導(dǎo)干細(xì)胞定向分化是當(dāng)前研究的熱點。研究發(fā)現(xiàn)，小分子化合物在干細(xì)胞調(diào)控中發(fā)揮著越來越重要的作用：1.*或部分取代原

類器官培養(yǎng)指南大全2022/08/01: 類器官培養(yǎng)指南大全——一文帶您深度了解類器官類器官簡介類器官(Organoid)是在體外，經(jīng)過3D培養(yǎng)，能夠在體外模擬正常（或疾?。顟B(tài)下體內(nèi)器官（或組織）的三維結(jié)構(gòu)和生理功能。通俗點講，類器官是三維細(xì)胞培養(yǎng)物，將干細(xì)胞培養(yǎng)于基質(zhì)膠中，在化學(xué)小分子抑制劑/激活劑、細(xì)胞因子、培養(yǎng)基添加劑等物質(zhì)作用下經(jīng)過培養(yǎng)得到的相應(yīng)器官類似的組織結(jié)構(gòu)。類器官的特點類器官擁有自我更新能力，能維持來源組織的生理結(jié)構(gòu)和功能，享有“培養(yǎng)皿中的微器官”之稱。利用干細(xì)胞的自我更新、分化能力以及自我組織能力，類器官可冷凍保存用

基質(zhì)膠實驗應(yīng)用——3D培養(yǎng)2022/08/01: 傳統(tǒng)細(xì)胞培養(yǎng)是在單層中生長，細(xì)胞是扁平并可以在水平面上自由粘附和擴(kuò)散，但不支持在垂直方向上擴(kuò)散，2D表面上培養(yǎng)的細(xì)胞具有強(qiáng)烈的頂端-基底極性，這種極性與某些細(xì)胞類型相關(guān)，例如上皮細(xì)胞；3D細(xì)胞培養(yǎng)即三維細(xì)胞培養(yǎng)，是指將具有三維結(jié)構(gòu)的不同材料載體與各種細(xì)胞在體外共培養(yǎng)，使細(xì)胞在載體的三維立體空間結(jié)構(gòu)中遷移、生長，形成三維的細(xì)胞-載體復(fù)合體，主要用于細(xì)胞球、類器官等培養(yǎng)。圖1.在ECM涂層玻璃或塑料表面(2D)與典型的3DECM之間區(qū)別[1]作為疾病驗證模型，相比于傳統(tǒng)2D疾病模型，以3D為基礎(chǔ)培養(yǎng)

基質(zhì)膠實驗應(yīng)用——血管生成2022/08/01: 血管生成（angiogenesis）會與傷口愈合、炎癥、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、糖尿病視網(wǎng)膜病變、黃斑變性和腫瘤生長等存在著密切的關(guān)聯(lián)。在生物體生長過程中，血管生成是新組織生長的重要組成部分。在成年期，除在特殊器官中受到嚴(yán)格調(diào)節(jié)的周期性事件外，由于促血管生成和抗血管生成內(nèi)源性因素之間的平衡，幾乎每個正常組織都缺乏大量的生理性血管生成。當(dāng)促血管生成方向的平衡被打亂時，微血管內(nèi)皮細(xì)胞(EC)會轉(zhuǎn)變?yōu)檠苌杀硇?，從而開始血管生成反應(yīng)，該反應(yīng)可以被消除或加速。在研究過程中所涉及到血管生成實驗，傳統(tǒng)的體內(nèi)血管生

凍干原料怎么選？翌圣生物更多、更穩(wěn)、更優(yōu)2022/08/01: 凍干原料怎么選？翌圣生物更多、更穩(wěn)、更優(yōu)凍干原料怎么選—翌圣生物更多、更穩(wěn)、更優(yōu)疫情仍然在全球范圍內(nèi)起伏跌宕，為了進(jìn)一步提高我國感染“早發(fā)現(xiàn)”和“快速發(fā)現(xiàn)”的能力，并為未來疫情防控提供技術(shù)儲備，科技部面向社會征集靈敏度高、檢測時間短、成本低、通量靈活、產(chǎn)業(yè)轉(zhuǎn)化成功率高的快速檢測產(chǎn)品。為了達(dá)到即時檢測快速出報告的目的，需要盡可能地簡化檢測的每個流程，其中就包括簡化運輸過程采用凍干試劑。凍干試劑無需冷鏈運輸，極大地提高了便利性并大幅度降低了運輸?shù)某杀荆c此同時也對凍干原料提出了更高的要求。凍干原料—

干燥試劑如何選擇：風(fēng)干與凍干的區(qū)別2022/07/21: 干燥試劑如何選擇：風(fēng)干與凍干的區(qū)別干燥試劑的優(yōu)勢隨著人們對健康問題越來越重視，體外診斷（IVD）領(lǐng)域呈快速發(fā)展的趨勢，尤其是的出現(xiàn)，更加促進(jìn)了IVD市場的飛速發(fā)展。目前RT-qPCR已被廣泛用于IVD診斷試劑產(chǎn)品開發(fā)，但是RT-qPCR液體診斷試劑運輸成本高，性能不穩(wěn)定，保質(zhì)期短。干燥試劑無需冷鏈運輸，可常溫運輸，避免了試劑反復(fù)凍融影響試劑的性能和保質(zhì)期，大幅度降低了運輸?shù)某杀?。不僅方便用戶使用，也降低了對操作人員的要求。圖1.干燥形式的優(yōu)勢常溫運輸及保存是促使干燥試劑引發(fā)分子診斷行業(yè)重點關(guān)注的

翌圣工業(yè)級高純度脫氧核糖核苷酸（dNTP）2022/07/20: 翌圣工業(yè)級高純度脫氧核糖核苷酸（dNTP）隨著技術(shù)的不斷發(fā)展，DNA合成應(yīng)用的復(fù)雜程度也不斷提升，即使體系中只有一種質(zhì)量較差的試劑，也會對最終成品性能產(chǎn)生負(fù)面影響。翌圣dNTP系列產(chǎn)品在嚴(yán)格的純度和功能標(biāo)準(zhǔn)下經(jīng)過質(zhì)量評估和驗證，dNTP純度≥99%，不含DNase、RNase、磷酸酶和切割活性，同時無細(xì)菌和人源基因組殘留干擾，產(chǎn)品批次間穩(wěn)定，適用于各類高靈敏度和高重復(fù)性的DNA合成應(yīng)用。翌圣dNTP系列產(chǎn)品秉承方便、靈活、高效的理念而設(shè)計，擁有預(yù)混合(Mix)、單管套組(Set)與單管三種產(chǎn)品形

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