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細(xì)胞遷移侵襲實(shí)驗(yàn)中基質(zhì)膠的應(yīng)用2022/07/20: 細(xì)胞遷移侵襲實(shí)驗(yàn)中基質(zhì)膠的應(yīng)用基質(zhì)膠是從富含胞外基質(zhì)蛋白EHS小鼠腫瘤中提取出的可溶性基底膜制備物，其主要成分由層粘連蛋白，Ⅳ型膠原，硫酸乙酰肝素蛋白聚糖（HSPG）和巢蛋白等組成，還包含生長(zhǎng)因子如TGF-beta、EGF、IGF、FGF、組織纖溶酶原激活物和EHS腫瘤自身含有的其他生長(zhǎng)因子。在1980年代中期由丹麥的J.Engelbreth-Holm和RichardSwarm二者分別發(fā)現(xiàn)并具體描述基質(zhì)膠【1】，其主要生產(chǎn)過(guò)程是用鹽水提取/洗滌腫瘤勻漿后可溶性蛋白質(zhì)，再用溶劑萃取產(chǎn)物中不溶性復(fù)合

翌圣T4 DNA ligase2022/06/13: FastT4DNALigase，讓片段連接更高效——快速高效的DNA連接酶產(chǎn)品原理DNA連接酶是一種能夠催化相鄰DNA的3’-OH和5’-磷酸基末段形成磷酸二酯鍵，并且把兩段DNA拼接起來(lái)的核酸酶。T4Ligase是目前應(yīng)用比較多的病毒基因組編碼的DNA連接酶，主要從缺失型嗜菌體中提取，噬菌體T4的30基因是該酶的合成基因。T4DNA連接酶在分子生物學(xué)中有廣泛的應(yīng)用。產(chǎn)品簡(jiǎn)介在普通T4DNA連接酶的基礎(chǔ)上，利用定向改造技術(shù)，將T4DNAligase的有效催化活性結(jié)構(gòu)域通過(guò)多輪突變篩選，得到一種連

造血幫手-集落刺激因子2022/06/05: 造血幫手-集落刺激因子集落刺激因子是一組在體內(nèi)外均可選擇性刺激造血祖細(xì)胞增殖，分化形成某一譜系細(xì)胞集落的細(xì)胞因子，命名為集落刺激因子（CSF）。廣義上，凡是刺激造血的細(xì)胞因子都可統(tǒng)稱(chēng)為CSF。一．集落刺激因子的分類(lèi)造血細(xì)胞集落刺激因子(CSF)的研究進(jìn)展迅速,已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了許多種CSF,它們都是糖蛋白,根據(jù)其對(duì)造血祖細(xì)胞克隆增殖的作用不同而命名。表1：集落刺激因子的分類(lèi)表分類(lèi)細(xì)胞因子受體產(chǎn)生細(xì)胞效應(yīng)多能集落刺激因子multi-CSF,IL-3IL-3R活化的T細(xì)胞刺激造血干細(xì)胞增殖，促進(jìn)肥大細(xì)胞，嗜

干貨 | 限制性?xún)?nèi)切酶知多少？2022/06/05: 何謂限制性?xún)?nèi)切酶？限制性?xún)?nèi)切酶是一種能夠識(shí)別雙鏈DNA分子中特定核苷酸序列，并在特定位置切割DNA鏈中的磷酸二酯鍵的一類(lèi)酶，簡(jiǎn)稱(chēng)限制酶。不同的限制性?xún)?nèi)切酶會(huì)識(shí)別不同的DNA序列，它可以在識(shí)別序列內(nèi)或距識(shí)別序列不遠(yuǎn)的位置處切割DNA，酶切之后會(huì)形成不同類(lèi)型的產(chǎn)物，如下圖中的BamHI形成5’粘性末端產(chǎn)物，KpnI形成3’粘性末端產(chǎn)物，EcoRV形成平末端產(chǎn)物?！鳥(niǎo)amHI、KpnI、EcoRV酶切示意圖限制性?xún)?nèi)切酶于分子克隆實(shí)驗(yàn)中。但除了克隆，它還可以應(yīng)用于疫苗研發(fā)生產(chǎn)、基因測(cè)序、SNP鑒定、dd

支原體檢測(cè)，快人一步2022/06/02: 支原體檢測(cè)，快人一步支原體（Mycoplasma）又稱(chēng)霉形體，是目前發(fā)現(xiàn)小、簡(jiǎn)單的原核生物，在實(shí)驗(yàn)室和生物制品工廠在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中易受到支原體污染，據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道：支原體污染在儲(chǔ)存細(xì)胞系中發(fā)生率約為15%-35%，在生物制藥行業(yè)中約為0.44%-6.70%[1]。支原體污染后能導(dǎo)致細(xì)胞產(chǎn)生多種變化（見(jiàn)圖1），因此如何快速的檢測(cè)支原體的存在不僅大大降低污染的風(fēng)險(xiǎn)，也能為開(kāi)發(fā)和生產(chǎn)降本增效。圖1：受支原體污染后細(xì)胞出現(xiàn)的相關(guān)狀態(tài)的改變支原體檢測(cè)應(yīng)用場(chǎng)景隨著分子生物學(xué)技術(shù)的迅速發(fā)展，基于核酸檢測(cè)的方法廣泛

關(guān)于高保真聚合酶，你想知道的都在這里2022/06/02: 關(guān)于高保真聚合酶，你想知道的都在這里DNA聚合酶是PCR反應(yīng)中*的組成部分，是參與DNA復(fù)制中的重要酶，被用在生物及醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域的各個(gè)研究方向上。PCR技術(shù)發(fā)明至今40多年的時(shí)間里，從早期被發(fā)現(xiàn)的TaqDNA聚合酶到現(xiàn)在，酶越來(lái)越多樣化。隨著新酶的發(fā)現(xiàn)和對(duì)舊酶的改造，DNA聚合酶的保真性、特異性、靈敏度等都獲得了明顯的改進(jìn)。而高保真DNA聚合酶的出現(xiàn)正是順應(yīng)了市場(chǎng)需求，下面小編將圍繞高保真DNA聚合酶的作用原理和應(yīng)用方向等進(jìn)行介紹。圖1.PCR擴(kuò)增的整個(gè)檢測(cè)過(guò)程[1]什么是高保真酶高保真DNA聚合

蛋白質(zhì)修飾之——泛素化修飾2022/06/02: 蛋白質(zhì)修飾之——泛素化修飾蛋白質(zhì)的修飾有多種類(lèi)型，除了常見(jiàn)的無(wú)機(jī)和有機(jī)小分子修飾，如磷酸化、糖基化、脂?；?，還有一類(lèi)用小肽進(jìn)行修飾的，例如泛素化（ubiquitination），類(lèi)泛素化NEDD化（neddylation）、ISGylation蘇木化（SUMOylation）等。而泛素-蛋白酶體系統(tǒng)則負(fù)責(zé)特異性地降解大多數(shù)細(xì)胞內(nèi)蛋白（約占80%以上），是一種高效蛋白降解途徑。泛素化修飾還可以直接影響蛋白質(zhì)的活性和定位，調(diào)控包括細(xì)胞周期、細(xì)胞凋亡、轉(zhuǎn)錄調(diào)控、DNA損傷修復(fù)以及免疫應(yīng)答等在內(nèi)的多種

如何選擇合適的二抗二抗是什么？2022/06/02: 如何選擇合適的二抗二抗是什么？二抗是能和一抗結(jié)合的抗體，即抗體的抗體。主要用于檢測(cè)一抗的存在。一抗特異性結(jié)合抗原的，二抗是特異性結(jié)合一抗。即一抗的Fc段或Fab片段可以充當(dāng)抗原刺激機(jī)體產(chǎn)生抗體。也就是說(shuō)，一抗主要是IgG類(lèi)免疫球蛋白，因此二抗就是抗IgG抗體。一抗二抗都是一種可以特異結(jié)合別的物質(zhì)的基團(tuán)，而且一抗可以至少結(jié)合兩種其他基團(tuán)（底物和二抗），如下圖是直標(biāo)一抗。二抗的作用一抗是特異性的結(jié)合目標(biāo)蛋白，一抗需要發(fā)光物質(zhì)或者顯色基團(tuán)標(biāo)記才能被檢測(cè)出來(lái)，否者一抗和蛋白的結(jié)合與否用肉眼是看不出來(lái)的。

內(nèi)參抗體你選對(duì)了嗎?2022/06/01: 內(nèi)參抗體你選對(duì)了嗎?各位小伙伴，您是否在蛋白免疫印記時(shí)，面對(duì)各種內(nèi)參抗體而不知所措呢，內(nèi)參蛋白是生物體內(nèi)管家基因編碼的，在多組織中穩(wěn)定表達(dá)，用于驗(yàn)證免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)中是否正常進(jìn)行和一種半定量檢測(cè)蛋白表達(dá)的標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照，那么如何正確的選擇內(nèi)參抗體呢！可以從以下幾點(diǎn)去參考。一、樣本種屬來(lái)源1.哺乳動(dòng)物組織或著細(xì)胞來(lái)源的樣本，一般選擇β-actin、α-tubulin、GAPDH、Lamin-B、HistoneH3、Na+/K+-ATPase。2.植物來(lái)源樣本，一般選擇plantactin、Rubisco等。3

外泌體是什么？外泌體(Exosome)研究正確打開(kāi)方式2022/06/01: 外泌體是什么？外泌體(Exosome)研究正確打開(kāi)方式外泌體曾經(jīng)被認(rèn)為是細(xì)胞卸載廢物的一種方式，在過(guò)去的十年中，我們對(duì)外泌體的看法發(fā)生了巨大變化。我們已經(jīng)開(kāi)始認(rèn)識(shí)到，外泌體是從細(xì)胞中釋放出來(lái)的，通過(guò)其RNA，蛋白質(zhì)，脂質(zhì)和DNA的載體充當(dāng)信號(hào)載體和組織重塑者。參與癌癥，炎癥，免疫，中樞神經(jīng)系統(tǒng)功能，心臟細(xì)胞功能。外泌體在這些基本生物過(guò)程中的作用，它們作為生物標(biāo)志物，也可作為靶向遞送生物分子藥物載體（如治療）的工具研究。獲取和研究外泌體所需的一切，從分離和鑒定分析以及染色等?；趒PCR的外泌體m

B-27無(wú)血清添加劑神經(jīng)干細(xì)胞培養(yǎng)手冊(cè)2022/06/01: B-27無(wú)血清添加劑（B-27supplement,serumfree）神經(jīng)干細(xì)胞培養(yǎng)手冊(cè)概述神經(jīng)干細(xì)胞(neuralstemcell)是指存在于神經(jīng)系統(tǒng)中，具有分化為神經(jīng)神經(jīng)元、星形膠質(zhì)細(xì)胞和少突膠質(zhì)細(xì)胞的潛能，從而能夠產(chǎn)生大量腦細(xì)胞組織，并能進(jìn)行自我更新，并足以提供大量腦組織細(xì)胞的細(xì)胞群。在神經(jīng)干細(xì)胞培養(yǎng)中B-27與N-2添加劑的使用十分廣泛，B-27是一種最常被引用的神經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)添加劑，是一種優(yōu)化的無(wú)血清添加劑，用于支持胚胎、出生后和成年海馬神經(jīng)元和其他中樞神經(jīng)系統(tǒng)（CNS）神經(jīng)元的生長(zhǎng)和

N-2無(wú)血清添加劑神經(jīng)干細(xì)胞培養(yǎng)手冊(cè)2022/06/01: N-2無(wú)血清添加劑（N-2supplement,serumfree）神經(jīng)干細(xì)胞培養(yǎng)手冊(cè)概述神經(jīng)干細(xì)胞(neuralstemcell)是指存在于神經(jīng)系統(tǒng)中，具有分化為神經(jīng)神經(jīng)元、星形膠質(zhì)細(xì)胞和少突膠質(zhì)細(xì)胞的潛能，從而能夠產(chǎn)生大量腦細(xì)胞組織，并能進(jìn)行自我更新，并足以提供大量腦組織細(xì)胞的細(xì)胞群。在神經(jīng)干細(xì)胞培養(yǎng)中B-27與N-2添加劑的使用十分廣泛，N-2添加劑主要被用于神經(jīng)母細(xì)胞瘤以及周?chē)窠?jīng)系統(tǒng)（PNS）與中樞神經(jīng)系統(tǒng)（CNS）來(lái)源的有絲分裂后期的神經(jīng)元的生長(zhǎng)和表達(dá)。圖1.神經(jīng)干細(xì)胞的發(fā)展神經(jīng)系統(tǒng)

白介素家族信號(hào)通路及功能概述2022/06/01: 白介素家族信號(hào)通路及功能概述白細(xì)胞介素（interleukin，IL）簡(jiǎn)稱(chēng)白介素，是由多種細(xì)胞產(chǎn)生并作用于多種細(xì)胞的一類(lèi)細(xì)胞因子，在免疫調(diào)節(jié)和穩(wěn)態(tài)中起著重要作用。目前發(fā)現(xiàn)了38種白細(xì)胞介素，分別命名為IL-1—IL-38，其受體可分為I型、II型和其他型。其中II型白細(xì)胞介素受體包括白細(xì)胞介素-10、20、22、28受體，其他型包括白介素-1、8受體，其余為I型白細(xì)胞介素受體。1.白細(xì)胞介素及其受體、來(lái)源和功能表1.白介素家族、受體和功能細(xì)胞因子受體來(lái)源功能IL-1α；IL-1βIL1RI和IL

趨化因子超家族-疾病新靶點(diǎn)2022/05/22: 趨化因子超家族-疾病新靶點(diǎn)人體在防御和清除入侵病原體等異物時(shí)，有一種使免疫細(xì)胞定向趨化的功能，此類(lèi)引起這種功能的物質(zhì)稱(chēng)之為趨化劑或趨化因子，具有重要的生理意義和病理作用，是當(dāng)前熱門(mén)研究的疾病新靶點(diǎn)。一、趨化因子與受體趨化因子是一類(lèi)由細(xì)胞分泌的小細(xì)胞因子或信號(hào)蛋白，誘導(dǎo)臨近反應(yīng)細(xì)胞定向趨化的能力，命名為趨化細(xì)胞因子。在炎癥、淋巴器官發(fā)育、細(xì)胞運(yùn)輸、淋巴組織內(nèi)的濾泡形式、血管生成和傷口愈合中起重要作用?，F(xiàn)有50多種趨化因子，之間有2個(gè)共同特征，首先分子量在8-10kDa之間，另外具有四個(gè)位置保守的半

腫瘤壞死因子-TNF超家族2022/05/22: 腫瘤壞死因子-TNF超家族一、TNF超家族1975年Carswell等人發(fā)現(xiàn)在接種BCG的小鼠中注射LPS后，血清中得到一種可以直接殺傷腫瘤細(xì)胞，但對(duì)正常細(xì)胞沒(méi)有明顯的細(xì)胞毒性的細(xì)胞因子，稱(chēng)之為腫瘤壞死因子（tumornecrosisfactor,TNF）。十年后Shalaby把巨噬細(xì)胞產(chǎn)生的TNF稱(chēng)為T(mén)NF-a，又名惡質(zhì)素，另T淋巴細(xì)胞產(chǎn)生的淋巴毒素（LT）稱(chēng)為T(mén)NF-β。目前發(fā)現(xiàn)的TNF超家族蛋白（TNFSF）配體19種和受體29種。主要由免疫細(xì)胞表達(dá)，包括TNF、CD40L、TNFSF13

ADCC檢測(cè)用效應(yīng)細(xì)胞株，助力藥物開(kāi)發(fā)2022/05/22: ADCC檢測(cè)用效應(yīng)細(xì)胞株，助力藥物開(kāi)發(fā)單克隆抗體(Monoclonalantibodies，mAb)是由B細(xì)胞產(chǎn)生并特異性靶向抗原的物質(zhì)。1975年K?hler和Milstein利用雜交瘤技術(shù)使得大量獲取純mAb成為可能，這項(xiàng)技術(shù)極大地增強(qiáng)了抗體的基礎(chǔ)研究和臨床應(yīng)用潛力，也極大地促進(jìn)mAb向臨床應(yīng)用的進(jìn)展[1]。因這項(xiàng)創(chuàng)舉性工作，二人與英裔丹麥籍免疫學(xué)研究者NielsKajJerne共同獲得了1984年的諾貝爾生理學(xué)/醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)。圖1.生理學(xué)/醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)圖自諾貝爾獎(jiǎng)應(yīng)用于臨床的抗體藥物（嵌合單抗、人

如何使用潮霉素B篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株-----潮霉素B的應(yīng)用2022/05/22: 如何使用潮霉素B篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株-----潮霉素B的應(yīng)用潮霉素B的作用原理潮霉素B（HygromycinB）是一種氨基糖苷類(lèi)抗生素，由吸水鏈霉菌（Streptomyceshygroscopicus）代謝產(chǎn)生，通過(guò)破壞易位和促進(jìn)80S核糖體的錯(cuò)讀而抑制蛋白合成，從而殺死原核（如細(xì)菌）、真核（如酵母菌，真菌）和高等哺乳動(dòng)物真核細(xì)胞。目前常用于篩選和維持培養(yǎng)含潮霉素抗性基因的原核或真核細(xì)胞。潮霉素B的應(yīng)用●篩選和維持培養(yǎng)穩(wěn)定轉(zhuǎn)染Hph+載體的原核或真核細(xì)胞（植物細(xì)胞和哺乳動(dòng)物細(xì)胞）大腸桿菌(Escheric

鏈脲佐菌素鏈(Streptozocin, STZ)誘導(dǎo)的糖尿病動(dòng)物模型2022/05/20: 鏈脲佐菌素鏈(Streptozocin,STZ)誘導(dǎo)的糖尿病動(dòng)物模型糖尿病(diabetesmellitus,DM)是由多種疾病因素復(fù)合導(dǎo)致的以慢性血糖水平增高為特征的全身慢性代謝性疾病，與家族遺傳、環(huán)境因素以及自身免疫相關(guān)，已成為嚴(yán)重危害人類(lèi)健康的公共衛(wèi)生問(wèn)題，其并發(fā)癥不僅嚴(yán)重影響糖尿病患者的生活質(zhì)量，同時(shí)也是致殘、致死的重要原因，但其具體的發(fā)病機(jī)制目前尚未*闡明。因此，建立合適的糖尿病動(dòng)物模型，闡明DM及其并發(fā)癥的發(fā)病機(jī)制就顯得尤為重要。目前，DM動(dòng)物模型制備方法主要有：手術(shù)切除胰腺、化學(xué)藥

Aureobasidin A (AbA) 金擔(dān)子素A2022/05/20: AureobasidinA(AbA)金擔(dān)子素A－酵母單/雙雜交研究的篩選標(biāo)記什么是金擔(dān)子素A金擔(dān)子素A(AureobasidinA，AbA)是從絲狀真菌AureobasidiumpullulansNo.R106中分離出來(lái)的環(huán)酯肽類(lèi)抗生素，具有很強(qiáng)的抗真菌能力，在較低的濃度下(0.1-0.5μg/mL)即可對(duì)酵母產(chǎn)生毒性。AbA作用機(jī)制是通過(guò)抑制酵母中AUR1基因編碼的肌醇磷酰胺合成酶(inositolphosphorylceramidesynthase,IPCsynthase)的活性，阻礙神經(jīng)酰

細(xì)胞骨架的染色神器-鬼筆環(huán)肽2022/05/20: 細(xì)胞骨架的染色神器-鬼筆環(huán)肽細(xì)胞骨架是網(wǎng)狀纖維結(jié)構(gòu)，是高度動(dòng)態(tài)的，不同時(shí)期有不同的形態(tài)。它主要是由微絲，微管和中間絲所組成的。微絲主要是肌動(dòng)蛋白組成的，肌動(dòng)蛋白分成肌動(dòng)蛋白單體（G-actin）和纖維狀蛋白單體（F-actin）。游離的肌動(dòng)蛋白還會(huì)有ATP和Mg+。微絲的組裝就是G-actin變成F-actin的過(guò)程。鬼筆環(huán)肽是一種雙環(huán)七肽，最早發(fā)現(xiàn)的環(huán)狀肽之一，是從鬼筆鵝膏（Amanitaphalloides）中分離出來(lái)的。通過(guò)結(jié)合和穩(wěn)定纖維狀肌動(dòng)蛋白（F-actin）發(fā)揮功能，并有效防止肌動(dòng)

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