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elisa試劑盒供應(yīng)商配對(duì)抗體的辦法2018/08/07: elisa試劑盒供應(yīng)商單克隆抗體制備時(shí)很多朋友會(huì)遇到這樣的問題，即咱們免疫用的蛋白為原核表達(dá)蛋白而意圖蛋白是真核蛋白或病毒等，由于沒有規(guī)范品咱們做出來的抗體沒有辦法用規(guī)范品來驗(yàn)證是否與其發(fā)作反響，終究導(dǎo)致咱們做出的是無用抗體。以下內(nèi)容為我公司試驗(yàn)室技能總結(jié)的幾種辦法供咱們參閱，期望對(duì)咱們有所協(xié)助。若要檢測(cè)的抗原為某種新的病毒ELISA試劑盒辦法：1、很多做出該病毒某個(gè)蛋白的單克隆抗體；2、很多收集該病毒疑似感染動(dòng)物或人血液，用PCR的辦法進(jìn)一步斷定每份血液是否真的有該病毒存在；3、將你做出的很多

腫瘤細(xì)胞具有更多分子和遺傳上的相似性2018/08/02: 腫瘤細(xì)胞研究結(jié)果表明相對(duì)于癌癥起源的組織類型，如乳房腎臟、膀胱等，相同癌癥起源的細(xì)胞類型具有更多分子和遺傳上的相似性。這一研究組發(fā)現(xiàn)在十個(gè)癌癥患者中至少有一個(gè)能通過這種新系統(tǒng)分類到不同的癌癥類型中，而且Benz認(rèn)為如果他們下一輪進(jìn)行更多的樣品，和腫瘤類型的分析，將會(huì)有更多的腫瘤需要重新分類，他預(yù)計(jì)下一輪將進(jìn)行超過20種不同腫瘤類型的分析?！翱紤]到這種多平臺(tái)類型基因組分析的潛力，我們還只是分析了冰山的一角。未來可能還有多達(dá)30%或50%的癌癥需要被重新歸類”。在這項(xiàng)研究中，引人注目的發(fā)現(xiàn)就是膀胱癌

原代細(xì)胞與真核細(xì)胞的細(xì)胞分裂過程不同2018/07/31: 原代細(xì)胞分裂是一個(gè)非常復(fù)雜的過程，包括顯微鏡下可見的細(xì)胞形態(tài)變化和不可見的分子水平變化。在細(xì)胞分裂開始之前，母細(xì)胞必須依次完成一系列生化、生理和形態(tài)學(xué)的變化過程。如：母細(xì)胞生長(zhǎng)到適當(dāng)大小，并完成所有重要細(xì)胞組分的復(fù)制，以便在細(xì)胞分裂對(duì)按照比例分配到子細(xì)胞中去。這些過程均在分裂間期完成。應(yīng)該再次強(qiáng)調(diào)的是：細(xì)胞分裂是一個(gè)連續(xù)的過程。迄今為止，在真核細(xì)胞中已發(fā)現(xiàn)了無絲分裂(amitosis)、有絲分裂(mitosis)和減數(shù)分裂(meiosis)等細(xì)胞分裂方式，其中，無絲分裂又稱為直接分裂(direc

原代細(xì)胞消化傳代的廣泛應(yīng)用2018/07/26: 作為各類種屬的原代細(xì)胞供應(yīng)商，一般客戶咨詢血清購(gòu)買時(shí)，我們都會(huì)推薦牛血清。而我公司zui為熱銷的血清產(chǎn)品中莫過于胎牛血清了，那么為何牛血清在細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中如此受寵呢？據(jù)技術(shù)員分析，主要原因有這五個(gè)方面：1.提供結(jié)合蛋白：作用是攜帶重要地低分子量物質(zhì)，在細(xì)胞代謝過程中起重要作用。2.提供促接觸和伸展因子使細(xì)胞貼壁免受機(jī)械損傷。3.提供基本營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)：氨基酸、維生等是細(xì)胞生長(zhǎng)必須的物質(zhì)。4.提供激素和各種生長(zhǎng)因子。5.對(duì)培養(yǎng)中的細(xì)胞起到某些保護(hù)作用。針對(duì)第五個(gè)原因，我們來重點(diǎn)談?wù)?。有一些?xì)胞，如內(nèi)皮細(xì)

原代細(xì)胞取用方法2018/07/24: 原代細(xì)胞試劑一般裝在帶膠木塞的廣口瓶中，液體試劑則盛在細(xì)口瓶中（或滴瓶中），見光易分解的試劑（如硝酸銀）應(yīng)裝在棕色瓶中，每一種試劑都貼有標(biāo)簽以表明試劑的名稱、濃度、純度。（實(shí)驗(yàn)室分裝時(shí)，固體只標(biāo)明試劑名稱，液體還須注名明濃度）。取用試劑規(guī)則為了達(dá)到準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，取用試劑時(shí)應(yīng)遵守以下規(guī)則，以保證試劑不受污染和不變質(zhì)：（1）試劑不能與手接觸。（2）要用潔凈的藥勺，量筒或滴管取用試劑，不準(zhǔn)用同一種工具同時(shí)連續(xù)取用多種試劑。取完一種試劑后，應(yīng)將工具洗凈（藥勺要擦干）后，方可取用另一種試劑。（3）試劑取

原代細(xì)胞培養(yǎng)目的與用途2018/07/19: 原代細(xì)胞培養(yǎng)是指從體內(nèi)組織取出細(xì)胞在體外模擬體內(nèi)環(huán)境下，使其生長(zhǎng)繁殖，并維持其結(jié)構(gòu)和功能的一種培養(yǎng)技術(shù)。細(xì)胞培養(yǎng)的培養(yǎng)物可以是單個(gè)細(xì)胞，也可以是細(xì)胞群。細(xì)胞培養(yǎng)目的與用途藥物研究與開發(fā)（1）新藥篩選：如化學(xué)合成藥物藥效研究、中藥有效成分篩選與鑒定等。（2）疫苗研究與開發(fā)：如病毒性疫苗的研究與開發(fā)（肝炎病毒疫苗、艾滋病疫苗等）、腫瘤疫苗（多肽疫苗）等。（3）基因工程藥物研究與開發(fā)：如干擾素研究與開發(fā)，細(xì)胞生長(zhǎng)因子研究與開發(fā)等。（4）細(xì)胞工程藥物研究與開發(fā)：生物活性多肽研究與開發(fā)，人參皂甙、紫杉醇等

如何誘導(dǎo)原代細(xì)胞往正確的方向分化問題？2018/07/12: 將oct4、Sox2、Klf4、c-myc四個(gè)基因插入到成體原代細(xì)胞DNA中重編程細(xì)胞恢復(fù)到胚胎干細(xì)胞狀態(tài)，由此建立了iPS細(xì)胞。這些細(xì)胞可以向胚胎干細(xì)胞一樣，轉(zhuǎn)變?yōu)閹缀跛械慕M織類型。為此,山中伸彌在2011年獲得諾貝爾獎(jiǎng)。雖然iPS細(xì)胞有潛力發(fā)育為任何組織器官，但如何誘導(dǎo)它們往正確的方向分化問題尚未解決。由中科院上海生命科學(xué)院/上海交大醫(yī)學(xué)院健康科學(xué)研究所金穎教授帶隊(duì)的關(guān)于“基于誘導(dǎo)多能干細(xì)胞技術(shù)的若干重大疾病模型與機(jī)理研究”的“973”科技部重大科學(xué)研究項(xiàng)目，就是希望能找到誘導(dǎo)iPS細(xì)胞的

細(xì)胞系在復(fù)制之前需要“理個(gè)發(fā)”2018/07/05: 我們的許多細(xì)胞系都裝備了一條毛茸茸的“天線”，將外部環(huán)境相關(guān)的信息傳遞給細(xì)胞，科學(xué)家們已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，這些所謂的原纖毛的出現(xiàn)和消失，都是與細(xì)胞復(fù)制過程（稱為有絲分裂）同步的?，F(xiàn)在，約翰霍普金斯大學(xué)的細(xì)胞生物學(xué)家報(bào)道稱，他們進(jìn)一步闡釋了“這種‘脫發(fā)’和細(xì)胞復(fù)制，是如何通過戲劇性的纖毛削剪（科學(xué)們稱之為斬首）而相互關(guān)聯(lián)的”。研究人員說，這一新信息是更好地理解“細(xì)胞如何決定進(jìn)行有絲分裂”的關(guān)鍵，這一過程對(duì)于生物體的發(fā)育、組織的維持和癌癥的形成，是*的。他們也希望，這項(xiàng)工作能揭示纖毛相關(guān)疾病，如多囊*病，以及

細(xì)胞株凍存技術(shù)2018/07/03: 細(xì)胞株實(shí)驗(yàn)室低溫保存設(shè)備包括：液氮保存箱、液氮罐、-140℃/-150℃深冷低溫保存箱、-86℃超低溫冰箱、程控降溫儀、低溫冰箱（-20℃、-30℃、-40℃）、藥品保存箱、疫苗保存箱、血庫冰箱、層析柜、防爆冰箱、防火冰箱等。檢驗(yàn)冰箱可靠性和制冷能力的方法：1、常規(guī)冰箱放置溫度計(jì)；2、超低溫冰箱放置加熱器、大量樣品或反復(fù)開門很多化合物都可以作為凍存保護(hù)劑，它們既可以單獨(dú)使用也可以聯(lián)合使用，例如糖、血清和去污劑。雖然凍存沒有準(zhǔn)則，但是大家普遍認(rèn)為二甲基亞砜（DMSO）和甘油是保護(hù)活細(xì)胞和組織使用z

細(xì)胞株究竟如何通過“握手”區(qū)分?jǐn)澄?/a>2018/06/28: 細(xì)胞株是免疫系統(tǒng)中的重要安全守衛(wèi)，zui近一項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)它們能夠使用一種類似"握手"的方式區(qū)分它們遇到的細(xì)胞究竟是朋友還是敵人。這項(xiàng)發(fā)表在學(xué)術(shù)期刊PNAS上的研究由埃默里大學(xué)的物理生化學(xué)家KhalidSalaita領(lǐng)導(dǎo)，他主要從事細(xì)胞活動(dòng)中的機(jī)械力研究。一直以來人們已經(jīng)熟知了T細(xì)胞對(duì)抗原遞呈細(xì)胞遞呈的抗原肽的識(shí)別過程，但是T細(xì)胞究竟如何區(qū)分抗原配體上的微小修飾以及T細(xì)胞如何決定是否做出應(yīng)答一直沒有得到*了解。由于T細(xì)胞具有很高的機(jī)動(dòng)性，并且抗原識(shí)別過程發(fā)生在T細(xì)胞與抗原遞呈細(xì)胞產(chǎn)生物理接觸的膜連接

原代細(xì)胞培養(yǎng)中不要使用抗生素的原因2018/06/26: 原代細(xì)胞由于過濾技術(shù)的提高和超凈臺(tái)質(zhì)量的改進(jìn)，在規(guī)范的細(xì)胞培養(yǎng)操作過程中引進(jìn)污染的機(jī)會(huì)已經(jīng)被大大降低了。所以比較合理的建議是，在常規(guī)的細(xì)胞培養(yǎng)中不要使用抗生素。只有在培養(yǎng)污染源很多（比如組織培養(yǎng)），或者培養(yǎng)非常珍貴的細(xì)胞株時(shí)才使用抗生素。抗生素雖然減少了可以觀察到的細(xì)菌、酵母等微生物的污染機(jī)會(huì)，卻會(huì)增加支原體、病毒等隱性污染的機(jī)會(huì)。因?yàn)榧?xì)胞培養(yǎng)中污染主要來源于空氣中的微粒和汽霧，而這些微粒和汽霧可以同時(shí)攜帶支原體、病毒和其他微生物。當(dāng)抗生素使用時(shí)，可見污染被抑制而隱性污染又沒被注意到，這樣支原體

原代細(xì)胞培養(yǎng)的起源2018/06/21: 原代細(xì)胞是在標(biāo)準(zhǔn)條件下用有限或連續(xù)細(xì)胞系開展工作的.所以,考慮培養(yǎng)物中的細(xì)胞成分非常重要.如細(xì)胞在誘導(dǎo)條件下表現(xiàn)分化特征,要么意味著培養(yǎng)的細(xì)胞是成熟的,保持其持續(xù)合成特殊蛋白質(zhì)的能力就夠了;要么意味著培養(yǎng)細(xì)胞由前體細(xì)胞或干細(xì)胞組成,這些細(xì)胞有增殖能力,美工維持未分化狀態(tài),當(dāng)有了合適的誘導(dǎo)條件,其中的一些或全部細(xì)胞會(huì)成熟并分化.有指導(dǎo)意義的考慮是,把培養(yǎng)物看成是由多能干細(xì)胞,未分化的定向前體細(xì)胞和成熟細(xì)胞組成的平衡狀態(tài),并且,這種平衡可隨環(huán)境條件變化而改變.在細(xì)胞密度較低的情況下,連續(xù)傳代可促進(jìn)細(xì)

原代細(xì)胞新打印技術(shù)存活率高2018/06/19: 研究人員開發(fā)出一種可將原代細(xì)胞打印到任何表面和幾乎任何形狀上的技術(shù)，且整個(gè)過程中幾乎所有的細(xì)胞仍能存活。新技術(shù)猶如中國(guó)古代木刻版印刷術(shù)和現(xiàn)在兒童橡皮印章玩具，與噴墨打印方法有所不同。這種方法在短短半個(gè)小時(shí)內(nèi)可產(chǎn)生2D細(xì)胞陣列，打印出的細(xì)胞緊密到接近5微米（大多數(shù)動(dòng)物細(xì)胞在10到30微米寬），并允許使用許多不同類型的細(xì)胞。研究人員將這種技術(shù)命名為批量細(xì)胞打?。˙loC打印）。噴墨打印方法打印二維和三維細(xì)胞已基本成功，但有時(shí)只有一半細(xì)胞在打印過程中存活。秦立冬說：“基于噴墨的細(xì)胞打印會(huì)使許多細(xì)胞受損

原代細(xì)胞分析之全攻略2018/06/14: 原代細(xì)胞轉(zhuǎn)錄組學(xué)和蛋白質(zhì)組學(xué)NanoStringTechnologies的科學(xué)家發(fā)現(xiàn)，細(xì)胞群體的RNA平均表達(dá)水平不一定與群體中單個(gè)細(xì)胞的RNA表達(dá)相同。例如，有些基因持續(xù)在低水平表達(dá)，而另一些則在短時(shí)間內(nèi)大量表達(dá)。對(duì)宏觀測(cè)定而言，這樣的表達(dá)模式被平均化。該公司*的數(shù)字表達(dá)譜分析系統(tǒng)能直接對(duì)單個(gè)RNA分析進(jìn)行計(jì)數(shù)，zui多可分析單細(xì)胞中的800個(gè)不同分子。這是利用nCounterSingleCellGeneExpressionAssay中的分子條形碼來實(shí)現(xiàn)的，它識(shí)別特定的RNA分子。單細(xì)胞樣品在

避免污染的原代細(xì)胞培養(yǎng)方法2018/06/12: 培養(yǎng)原代細(xì)胞常規(guī)方法需用二氧化碳溫箱，且為保持箱內(nèi)二氧化碳?xì)?%～10%的濃度，需持續(xù)輸入二氧化碳?xì)怏w。為此，箱內(nèi)的培養(yǎng)瓶蓋不能擰緊以便二氧化碳?xì)怏w自由進(jìn)出。*步，配制1L培養(yǎng)液。培養(yǎng)基中含有酚紅指示劑，偏堿時(shí)液體為深紅或紫色，偏酸時(shí)則呈黃色。取配1L培養(yǎng)液的粉劑培養(yǎng)基，加入750ml三蒸水或去離子水，搖勻(一般培養(yǎng)液呈橘紅色)；再加入碳酸氫鈉1～1．1g，至*溶解(呈深紅色)；zui后再加三蒸水或去離子水至1L止。第二步，插吸管于配好的培養(yǎng)液內(nèi)，通入二氧化碳?xì)怏w。隨著二氧化碳?xì)獾娜谌?，液體逐漸

原代細(xì)胞被支原體污染的危害2018/06/07: 為什么有些原代細(xì)胞實(shí)驗(yàn)無法重復(fù)？為什么有的細(xì)胞在相當(dāng)長(zhǎng)的時(shí)間里，都養(yǎng)不到好的狀態(tài)？為什么實(shí)驗(yàn)室中，超過一株以上的細(xì)胞都時(shí)好時(shí)壞？細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢、細(xì)胞變形、碎片增加、懸浮細(xì)胞容易成團(tuán)、培養(yǎng)基提前變色、鏡下發(fā)現(xiàn)有小黑點(diǎn)……如果排除了其他試劑選擇不當(dāng)、細(xì)胞株老化、細(xì)菌污染等原因，而仍有上述一種或幾種情況，則高度提示——你的細(xì)胞可能被支原體污染了！支原體污染普遍存在據(jù)美國(guó)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)，細(xì)胞發(fā)生支原體污染的幾率在70%以上。同時(shí)，由于支原體直徑很小，僅在180nm~350nm之間，只有通過電鏡才能看到，不易被實(shí)

細(xì)胞株污染的清除2018/06/05: 培養(yǎng)細(xì)胞株一經(jīng)污染，多數(shù)較難處理。如果污染細(xì)胞價(jià)值不大，宜棄之;在尋找原因后*消毒操作室，復(fù)蘇或重新購(gòu)置細(xì)胞，再培養(yǎng)。若污染細(xì)胞價(jià)值較大，又難于重新得到，可采取以下辦法清除。一、細(xì)菌和真菌的清除1、使用抗生素抗生素對(duì)殺滅細(xì)菌較有效。聯(lián)合用藥比單獨(dú)用藥效果好。預(yù)防用藥比污染后再用藥效果好。預(yù)防用藥一般用雙抗生素，污染后清除用藥需采用大于常用量5～10倍的沖洗法，于加藥后作用24～48小時(shí)，再換常規(guī)培養(yǎng)液。此法在污染早期有效。二、支原體的清除1、用MRA處理用MRA(MycoplasmaRemova

細(xì)胞株增殖實(shí)驗(yàn)服務(wù)2018/05/31: 細(xì)胞株增殖是生物體生長(zhǎng)、發(fā)育、繁殖、遺傳的基礎(chǔ)，是細(xì)胞zui基本的生理活動(dòng)。生長(zhǎng)因子、激素及癌基因產(chǎn)物等均可誘導(dǎo)細(xì)胞的增殖或抑制細(xì)胞的增殖，通過影響細(xì)胞周期、誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡而實(shí)現(xiàn)。MTT檢測(cè)細(xì)胞增殖MTT全稱為3-(4,5)-dimethylthiahiazo(-z-y1)-3,5-di-phenytetrazoliumromide。MTT比色法是常用的檢測(cè)細(xì)胞存活和生長(zhǎng)的方法之一，其檢測(cè)原理為活細(xì)胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性MTT還原為水不溶性的藍(lán)紫色結(jié)晶甲瓚并沉積在細(xì)胞中，而死細(xì)胞無此功

細(xì)胞株?duì)顟B(tài)不好的解決方法2018/05/29: 細(xì)胞株是生物體形態(tài)結(jié)構(gòu)和生命活動(dòng)的基本單位。通常認(rèn)為細(xì)胞是人體的zui小單位，它是由許多更小的具有自身功能的結(jié)構(gòu)組成。盡管人類細(xì)胞大小不等，但所有的細(xì)胞均很小。即使是zui大的細(xì)胞如受精卵，也是肉眼所不能見到的。細(xì)胞狀態(tài)不好，可能是血清中有黑膠蟲。解決方法如下：1.換好一點(diǎn)的血清。2.用無菌的PBS洗幾次，可一定程度上緩解。注意好實(shí)驗(yàn)環(huán)境要，保持細(xì)胞間整個(gè)環(huán)境的潔凈度。3.換用進(jìn)口的一次性塑料培養(yǎng)瓶。4.建議清理無菌室所有物品，重新滅菌，用KMnO4熏蒸，按使用無菌室做，細(xì)胞重新復(fù)蘇。5.在換液

原代細(xì)胞試探性的開端2018/05/24: 研究人員成功培養(yǎng)出來自小鼠胚胎的原代細(xì)胞。他們很快意識(shí)到這項(xiàng)發(fā)現(xiàn)的巨大潛力，因?yàn)檫@些細(xì)胞既能自我復(fù)制，又可被推動(dòng)變成身體200余種細(xì)胞類型中的任何一種。不過，此項(xiàng)技術(shù)并不容易在靈長(zhǎng)類動(dòng)物身上實(shí)現(xiàn)。威斯康辛大學(xué)麥迪遜分校生物學(xué)家JamesThomson花了14年時(shí)間，才將該技術(shù)成功用于猴子。3年后，Thomson利用生育治療中未使用的捐贈(zèng)胚胎，創(chuàng)建了人類ES細(xì)胞系。此項(xiàng)發(fā)現(xiàn)激起了一場(chǎng)道德風(fēng)暴。批評(píng)者——大多數(shù)來自宗教界——認(rèn)為胚胎構(gòu)成了人類的一部分，并且想阻止任何涉及破壞胚胎的研究。2001年，美

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