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免疫印跡（Western blot）檢測(cè)科研實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)介紹2024/09/24: 免疫印跡（Westernblot）檢測(cè)應(yīng)用簡(jiǎn)介蛋白質(zhì)免疫印跡法(WesternBlot)，簡(jiǎn)稱(chēng)WB，是指通過(guò)SDS-PAGE膠將不同分子量的蛋白質(zhì)分離開(kāi)，然后將目標(biāo)蛋白轉(zhuǎn)移到載體(PVDF)膜上，利用抗原抗體的特異性結(jié)合，用特異性的一抗結(jié)合目標(biāo)蛋白，用HRP標(biāo)記的二抗結(jié)合一抗，再加以ECL發(fā)光液顯色，檢測(cè)組織或者細(xì)胞內(nèi)某種或者某些特異性蛋白質(zhì)的表達(dá)。蛋白質(zhì)免疫印跡是做蛋白質(zhì)分析的一種常規(guī)技術(shù)，常用于鑒定某種蛋白，并能對(duì)蛋白進(jìn)行定性和半定量分析，還可以用于蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)、蛋白質(zhì)-DNA、蛋白質(zhì)-R

co-ip檢測(cè)科研實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)介紹2024/09/24: co-ip檢測(cè)應(yīng)用簡(jiǎn)介Co-IP主要用于檢測(cè)蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)之間相互作用，是IP實(shí)驗(yàn)的一種擴(kuò)展，基于IP反應(yīng)的潛力，在樣品溶液中捕獲和純化主要目標(biāo)（抗原等）及通過(guò)天然相互作用與靶標(biāo)結(jié)合的其他的大分子。此外，還可以利用Co-IP來(lái)確定在不同條件下的蛋白質(zhì)相互作用。技術(shù)原理免疫共沉淀是利用抗原和抗體的特異性結(jié)合以及細(xì)菌的ProteinG或A能特異性地結(jié)合到免疫球蛋白的Fc片段的方法。其基本原理是在細(xì)胞裂解液中加入感興趣蛋白的抗體，孵育后再加入與抗體特異結(jié)合的結(jié)合于磁珠的ProteinG或A，若細(xì)胞中存

CHIP 檢測(cè)科研實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)介紹2024/09/24: CHIP檢測(cè)應(yīng)用簡(jiǎn)介核酸和蛋白質(zhì)是組成生命的主要生物大分子，兩者的相互作用是構(gòu)成生命活動(dòng)的生長(zhǎng)、繁殖、運(yùn)動(dòng)、遺傳和代謝等生命活動(dòng)的基礎(chǔ)。研究蛋白質(zhì)和核酸間的相互作用是人們探索生命現(xiàn)象奧秘的關(guān)鍵，CHIP檢測(cè)實(shí)驗(yàn)是應(yīng)用于蛋白與核酸互作關(guān)系的重要參考。技術(shù)原理CHIP實(shí)驗(yàn)在活細(xì)胞狀態(tài)下固定蛋白質(zhì)－DNA復(fù)合物，并將其隨機(jī)切斷為一定長(zhǎng)度范圍內(nèi)的染色質(zhì)小片段，然后通過(guò)免疫學(xué)方法沉淀此復(fù)合體，特異性地富集目的蛋白結(jié)合的DNA片段，通過(guò)對(duì)目的片斷的純化與檢測(cè)，從而獲得蛋白質(zhì)與DNA相互作用的信息。實(shí)驗(yàn)方法技

ELISA 檢測(cè)科研實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)介紹2024/09/20: ELISA檢測(cè)應(yīng)用簡(jiǎn)介酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)即將已知的抗原或抗體吸附在固相載體表面，使酶標(biāo)記的抗原抗體反應(yīng)在固相表面進(jìn)行的技術(shù)。該技術(shù)可用于檢測(cè)大分子抗原和特異性抗體等，具有快速、靈敏、簡(jiǎn)便、載體易于標(biāo)準(zhǔn)化等優(yōu)點(diǎn)。技術(shù)原理采用抗原與抗體的特異反應(yīng)將待測(cè)物與酶連接，然后通過(guò)酶與底物產(chǎn)生顏色反應(yīng)，用于定量測(cè)定。測(cè)定的對(duì)象可以是抗體也可以是抗原。在這種測(cè)定方法中有3種必要的試劑：①固相的抗原或抗體（免疫吸附劑）②酶標(biāo)記的抗原或抗體（標(biāo)記物）③酶作用的底物（顯色劑）測(cè)量時(shí)，抗原（抗體）先結(jié)合在固

基因提取科研實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)介紹2024/09/20: 基因提取應(yīng)用簡(jiǎn)介DNA是遺傳信息的載體,是最重要的生物信息分子,是分子生物學(xué)研究的主要對(duì)象,因此DNA取方面的工作，那就根本談不上進(jìn)行分子生物學(xué)方面的實(shí)驗(yàn)。在DNA提取過(guò)程中應(yīng)做到：1、根據(jù)不同研究需要，保證結(jié)構(gòu)的相應(yīng)完整性；2、盡量排除其它大分子成分的污染(蛋白質(zhì)、多糖及RNA等)；3、保證提取樣品中不含對(duì)酶有抑制作用的有機(jī)溶劑及高濃度的金屬離子。下面結(jié)合不同的研究對(duì)象列出幾種相應(yīng)的DNA提取方法。技術(shù)原理原核生物的基因是連續(xù)不間隔的,直接用限制酶從DNA切取就可得到目的基因，再PCR擴(kuò)增后就

血管生成實(shí)驗(yàn)科研實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)介紹2024/09/20: 血管生成實(shí)驗(yàn)應(yīng)用簡(jiǎn)介血管生長(zhǎng)是腫瘤發(fā)生的關(guān)鍵步驟。無(wú)論原發(fā)性腫瘤還是繼發(fā)性腫瘤，一旦生長(zhǎng)直徑超過(guò)1~2mm，都會(huì)有血管生成，這是由于腫瘤細(xì)胞自身可分泌多種生長(zhǎng)因子，誘導(dǎo)血管生成。多數(shù)惡性腫瘤的血管生成密集且生長(zhǎng)迅速，因此，血管生成在腫瘤的發(fā)展轉(zhuǎn)移過(guò)程中起到重要作用，抑制這一過(guò)程將能明顯阻止腫瘤組織的發(fā)展和擴(kuò)散轉(zhuǎn)移。體外的血管生成實(shí)驗(yàn)?zāi)芎芎玫哪M腫瘤的血管發(fā)生過(guò)程，并且適合研究藥物對(duì)這一過(guò)程的影響。技術(shù)原理應(yīng)用Matrigel模擬機(jī)體環(huán)境，上面接種腫瘤細(xì)胞，觀察血管生成情況。實(shí)驗(yàn)方法技術(shù)總結(jié)1、實(shí)

細(xì)胞克隆實(shí)驗(yàn)科研實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)介紹2024/09/20: 細(xì)胞克隆實(shí)驗(yàn)應(yīng)用簡(jiǎn)介克隆形成及細(xì)胞克隆接種存活率，通過(guò)觀察單細(xì)胞集落形成情況，來(lái)計(jì)算克隆形成率，了解其增殖能力。技術(shù)原理單個(gè)細(xì)胞在體外持續(xù)增殖6代以上時(shí)細(xì)胞數(shù)量已達(dá)60個(gè)左右，此細(xì)胞群體成為克隆或集落，大小在1.0-2.0mm之間。集落形成率表示細(xì)胞的獨(dú)立生存能力，各種理化因素可能導(dǎo)致細(xì)胞的克隆形成能力發(fā)生改變，通過(guò)計(jì)數(shù)克隆形成率，可對(duì)單個(gè)細(xì)胞的增殖潛力做定量分析，了解細(xì)胞的增殖率和對(duì)生存環(huán)境的適應(yīng)性。軟瓊脂培養(yǎng)或平板克隆是zui常用的方法。實(shí)驗(yàn)方法技術(shù)總結(jié)1、試驗(yàn)成功的關(guān)鍵是細(xì)胞懸液的制備和接

細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)科研實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)介紹2024/09/20: 細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)應(yīng)用簡(jiǎn)介細(xì)胞劃痕是一種簡(jiǎn)單易行的檢測(cè)細(xì)胞運(yùn)動(dòng)的方法，實(shí)驗(yàn)成本低，可以用來(lái)檢測(cè)貼壁生長(zhǎng)腫瘤細(xì)胞的侵襲轉(zhuǎn)移能力。技術(shù)原理創(chuàng)傷愈合實(shí)驗(yàn)是一種簡(jiǎn)單、廉價(jià)的方法，也是最早發(fā)展起來(lái)的研究定向細(xì)胞在體外遷移的方法之一。該方法模擬了細(xì)胞在體內(nèi)愈合過(guò)程中的遷移過(guò)程?；静襟E包括在細(xì)胞單層中創(chuàng)建一個(gè)“傷口”，在細(xì)胞遷移過(guò)程中在開(kāi)始和定期捕獲圖像以關(guān)閉傷口，以及比較圖像以確定細(xì)胞遷移速率。實(shí)驗(yàn)方法注意事項(xiàng)1、一般做劃痕實(shí)驗(yàn)，都是在無(wú)血清或者底血清狀態(tài)下培養(yǎng)的，否則細(xì)胞增殖就不能忽略。2、按照6孔板背后畫(huà)線(xiàn)

細(xì)胞遷移研實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)介紹2024/09/19: 細(xì)胞遷移應(yīng)用簡(jiǎn)介遷移是腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移過(guò)程中bi不可少的環(huán)節(jié)之一。腫瘤細(xì)胞與母體瘤分離，穿越血管壁，侵襲周邊正常組織時(shí)，需要一定的運(yùn)動(dòng)能力。高轉(zhuǎn)移的腫瘤細(xì)胞通常具奮較強(qiáng)的運(yùn)動(dòng)性。多種物質(zhì)可剌激腫瘤細(xì)胞的遷移，如腫瘤細(xì)胞分泌因子、生長(zhǎng)因子、細(xì)胞外基質(zhì)成分(FN、LN)以及一些癌轉(zhuǎn)移靶器官的代謝產(chǎn)物或分泌產(chǎn)物等生長(zhǎng)因子對(duì)腫瘤細(xì)胞有趨化作用，可使其發(fā)生定向運(yùn)動(dòng)。測(cè)定方法以細(xì)胞劃痕法和Transwell小室法。技術(shù)原理細(xì)胞劃痕法是簡(jiǎn)捷測(cè)定細(xì)胞遷移運(yùn)動(dòng)與修復(fù)能力的方法，類(lèi)似體外傷口愈合模型，在體外培養(yǎng)皿或平板

慢腺病毒細(xì)胞株構(gòu)建研實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)介紹2024/09/19: 慢腺病毒細(xì)胞株構(gòu)建技術(shù)原理慢病毒包裝：使用3質(zhì)粒慢病毒包裝系統(tǒng)，慢病毒系統(tǒng)使用pLKO.1-EGFP、psPAX2、pMD2.G，過(guò)表達(dá)慢病毒系統(tǒng)使用pLVX-AcGFP、psPAX2、pMD2.G三質(zhì)粒系統(tǒng)，將質(zhì)粒混勻后使用磷酸鈣轉(zhuǎn)染方法轉(zhuǎn)染至HEK293T細(xì)胞中，培養(yǎng)48h后，收集上清。純化后留取部分檢測(cè)病毒滴度，其余病毒凍存于-80℃冰箱中。滴度檢測(cè)：將病毒顆粒使用梯度稀釋?zhuān)謩e感染293T細(xì)胞，感染72h后，在熒光顯微鏡下觀察細(xì)胞熒光表達(dá)情況。根據(jù)細(xì)胞熒光量計(jì)算病毒滴度。細(xì)胞感染：在病毒

耐藥細(xì)胞株構(gòu)建科研實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)介紹2024/09/19: 耐藥細(xì)胞株構(gòu)建應(yīng)用簡(jiǎn)介腫瘤細(xì)胞/癌細(xì)胞的耐藥性是腫瘤/癌癥難以gen治的重要原因。體外構(gòu)建的耐藥細(xì)胞株，能模擬腫瘤細(xì)胞/癌細(xì)胞對(duì)特異藥物耐藥性的形成過(guò)程，有助于人們理解腫瘤細(xì)胞/癌細(xì)胞獲得耐藥性的機(jī)制，篩選獲得抗耐藥性的特異藥物，并對(duì)相關(guān)疾病進(jìn)行有針對(duì)性地臨床治療。原理介紹一種藥物作用于某類(lèi)細(xì)胞后，會(huì)殺死其中沒(méi)有抗性的細(xì)胞，而這類(lèi)細(xì)胞中具有抗性的細(xì)胞不會(huì)被殺死，即進(jìn)行了選擇。具有抗性的細(xì)胞大量繁殖產(chǎn)生很多抗性后代，再用這種藥物時(shí)表現(xiàn)出的藥效大大下降的現(xiàn)象就是細(xì)胞的耐藥性。采用體外低濃度梯度遞增聯(lián)

細(xì)胞侵襲科研實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)介紹2024/09/19: 細(xì)胞侵襲應(yīng)用簡(jiǎn)介腫瘤細(xì)胞通過(guò)膜表面特定受體與基質(zhì)或基底膜的層粘連蛋白、纖維連接蛋白和IV型膠原等相粘連，然后腫瘤細(xì)胞可釋放蛋白水解酶或激活基質(zhì)中已存在的酶原，使基質(zhì)成分降解，最后腫瘤細(xì)胞運(yùn)動(dòng)而充填到被水解了的基質(zhì)的空隙處，如此三個(gè)過(guò)程不斷重復(fù)腫瘤細(xì)胞不斷向深層侵襲。技術(shù)原理本實(shí)驗(yàn)采用的Matrigel是從小鼠EHS肉瘤中提取的基質(zhì)成分，含有LN、IV型膠原等。將Matrigel鋪在Transwell侵襲小室的多孔濾膜上，能形成與天然基底膜極為相似的基底膜結(jié)構(gòu)。具有侵襲能力的細(xì)胞在趨化劑誘導(dǎo)下可穿

原代細(xì)胞分離與培養(yǎng)科研實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)介紹2024/09/19: 原代細(xì)胞分離與培養(yǎng)應(yīng)用簡(jiǎn)介凡是來(lái)源于胚胎、組織器官及外周血，經(jīng)特殊分離方法制備而來(lái)的原初培養(yǎng)的細(xì)胞稱(chēng)之為原代細(xì)胞。通過(guò)原代分離獲得的細(xì)胞具有與體內(nèi)細(xì)胞相似的生物學(xué)特征，是研究生物體相關(guān)生命活動(dòng)的理想材料。原理介紹原代細(xì)胞的分離是將人/小鼠等特異模式動(dòng)物的細(xì)胞從機(jī)體中取出，經(jīng)胰酶、螯合劑（常用EDTA）處理，分散成單細(xì)胞，置合適的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，使細(xì)胞得以生存、生長(zhǎng)和繁殖的過(guò)程。原代培養(yǎng)是指直接從機(jī)體取下細(xì)胞、組織和器官后立即進(jìn)行培養(yǎng)。因此，較為嚴(yán)格地說(shuō)是指成功傳代之前的培養(yǎng)，此時(shí)的細(xì)胞保持原有細(xì)胞

大鼠關(guān)節(jié)軟骨損傷模型科研實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)介紹2024/08/23: 大鼠關(guān)節(jié)軟骨損傷模型人體機(jī)能水平隨年齡增加呈拋物線(xiàn)樣改變，由于運(yùn)動(dòng)、勞累、負(fù)重以及關(guān)節(jié)長(zhǎng)期過(guò)度體位負(fù)荷等因素，關(guān)節(jié)軟骨不可避免損傷退變。常見(jiàn)軟骨損傷不外乎慢性勞損退變及急性應(yīng)力損傷兩類(lèi)。關(guān)節(jié)軟骨慢性勞損退變過(guò)程漫長(zhǎng)。因素復(fù)雜，運(yùn)動(dòng)研究困難，因此臨床常研究急性應(yīng)力導(dǎo)致的軟骨損傷。建立軟骨損傷動(dòng)物模型涉及動(dòng)物的選擇、損傷方法、關(guān)節(jié)部位、軟骨損傷分析等各個(gè)方面。關(guān)節(jié)軟骨損傷(ACI)大鼠模型RatModelforArticularCartilageInjury(ACI)動(dòng)物品系：SPF級(jí)Wistar大

小鼠創(chuàng)傷后應(yīng)激障礙模型科研實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)介紹2024/08/23: 小鼠創(chuàng)傷后應(yīng)激障礙模型創(chuàng)傷后應(yīng)激障礙是指?jìng)€(gè)體由于經(jīng)歷對(duì)生命具有威脅的事件或者嚴(yán)重的創(chuàng)傷，導(dǎo)致癥狀長(zhǎng)期持續(xù)的精神障礙。研究創(chuàng)傷后應(yīng)激障礙的主要?jiǎng)游锬Ｐ蜑闂l件恐懼和應(yīng)激敏感化模型。創(chuàng)傷后應(yīng)激障礙小鼠模型MouseModelforPosttraumaticStressDisorder(PTSD)動(dòng)物品系：SPF級(jí)Balb/C小鼠，健康，雄性，4~6W，體重為18g~20g。實(shí)驗(yàn)分六組：正常對(duì)照組、模型組、陽(yáng)性藥組、受試藥組低、中、高劑量組。實(shí)驗(yàn)周期：4-6weeks建模方法：大鼠經(jīng)腹腔注射戊吧比妥鈉(

大鼠創(chuàng)傷后應(yīng)激障礙模型科研實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)介紹2024/08/23: 大鼠創(chuàng)傷后應(yīng)激障礙模型創(chuàng)傷后應(yīng)激障礙是指?jìng)€(gè)體由于經(jīng)歷對(duì)生命具有威脅的事件或者嚴(yán)重的創(chuàng)傷，導(dǎo)致癥狀長(zhǎng)期持續(xù)的精神障礙。研究創(chuàng)傷后應(yīng)激障礙的主要?jiǎng)游锬Ｐ蜑闂l件恐懼和應(yīng)激敏感化模型。創(chuàng)傷后應(yīng)激障礙大鼠模型RatModelforPosttraumaticStressDisorder(PTSD)動(dòng)物品系：SPF級(jí)Balb/C小鼠，健康，雄性，4~6W，體重為18g~20g實(shí)驗(yàn)分六組：正常對(duì)照組、模型組、陽(yáng)性藥組、受試藥組低、中，高劑量組實(shí)驗(yàn)周期：4-6weeks建模方法：大鼠經(jīng)腹腔注射戊吧比妥鈉(按50～

小鼠酒精性肝病模型科研實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)介紹2024/08/20: 小鼠酒精性肝病模型酒精性肝病(AlcoholicHepatitis)是由于長(zhǎng)期大量飲酒導(dǎo)致的肝臟疾病。初期通常表現(xiàn)為脂肪肝，進(jìn)而可發(fā)展成酒精性肝炎、肝纖維化和肝硬化。其主要臨床特征是e心、嘔吐、黃疸、可有肝臟腫大和壓痛。并可并發(fā)肝功能衰竭和上消化道出血等。酒精性肝病小鼠模型動(dòng)物品系：SPF級(jí)昆明（KM）小鼠，健康，雄性，體重為18g~22g/SPF級(jí)Balb/C小鼠，雄性，周齡為8w-10w，體重為30g-35g實(shí)驗(yàn)分組：正常對(duì)照組、模型組、陽(yáng)性藥組、受試藥組低、中、高三個(gè)劑量組實(shí)驗(yàn)周期：15d

小鼠心肌梗死模型科研實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)介紹2024/08/20: 小鼠心肌梗死模型心肌梗死是一種嚴(yán)重的心血管疾病，由于冠狀動(dòng)脈血供急劇減少或中斷，使心肌持續(xù)性缺血缺氧以致壞死，損害心功能且可能導(dǎo)致心律失常、休克以及心力衰竭等嚴(yán)重后果，已成為威脅人類(lèi)生命健康的重大疾病之一。近幾十年來(lái)，隨著醫(yī)療技術(shù)的進(jìn)步，再灌注心肌治療可顯著改善心?；颊叩纳媛?，但由于心梗發(fā)生發(fā)展及轉(zhuǎn)歸過(guò)程極其復(fù)雜，使其在臨床治療中仍然面臨許多挑戰(zhàn)，因此構(gòu)建合適的動(dòng)物模型對(duì)探究人心肌梗死的發(fā)病機(jī)制和病理過(guò)程、評(píng)價(jià)藥物療效以及探索新的治療方法至關(guān)重要。通過(guò)結(jié)扎冠狀動(dòng)脈模擬心肌缺血過(guò)程來(lái)建立心肌梗死

大鼠佐劑誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎模型科研實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)介紹2024/08/20: 大鼠佐劑誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎模型關(guān)節(jié)炎是社會(huì)生活中常見(jiàn)的一種自身免疫性疾病，其發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，病程長(zhǎng)久且難治愈，是各大科研機(jī)構(gòu)和藥企研究的熱門(mén)，在研究過(guò)程中常常需要符合臨床的動(dòng)物模型，今天就跟大家分享幾種常用于評(píng)價(jià)治療關(guān)節(jié)炎的動(dòng)物模型。佐劑誘導(dǎo)的大鼠關(guān)節(jié)炎模型（AIA）動(dòng)物品系：SD大鼠、Wistar大鼠實(shí)驗(yàn)分組：正常對(duì)照組、模型組、陽(yáng)性藥組、受試藥組低、中、高三個(gè)劑量組實(shí)驗(yàn)周期：12weeks建模方法：一人抓取大鼠，一人于大鼠后足或尾根部皮內(nèi)注射0.1mLCFA即可建立佐劑誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎模型。特點(diǎn)：SD大

大鼠膠原誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎模型科研實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)介紹2024/08/14: 大鼠膠原誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎模型關(guān)節(jié)炎是社會(huì)生活中常見(jiàn)的一種自身免疫性疾病，其發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，病程長(zhǎng)久且難治愈，是各大科研機(jī)構(gòu)和藥企研究的熱門(mén)，在研究過(guò)程中常常需要符合臨床的動(dòng)物模型，今天就跟大家分享幾種常用于評(píng)價(jià)治療關(guān)節(jié)炎的動(dòng)物模型。膠原誘導(dǎo)的大鼠關(guān)節(jié)炎模型（CIA）動(dòng)物品系：SD大鼠、Wistar大鼠、Lewis大鼠實(shí)驗(yàn)分組：正常對(duì)照組、模型組、陽(yáng)性藥組、受試藥組低、中、高三個(gè)劑量組實(shí)驗(yàn)周期：12weeks建模方法：膠原與不萬(wàn)全弗氏佐劑（IFA）高速混勻乳化，大鼠麻醉后尾根部皮內(nèi)注射0.4mL混勻的乳

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