產品編號：

RC200106-100ML

存儲條件：

2-8 ℃避光保存，有效期6個月；

-20 ℃避光保存，有效期12個月；

避免反復凍融。

產品簡介：

本產品專為人間充質干細胞冷凍保存設計，是即用型細胞凍存液。成分明確，不含動物源成分，主要成分為可注射的藥物及輔料，在間充質干細胞治療用研究中具有顯著優(yōu)勢。

適用于人間充質干細胞hMSCs，包括人骨髓間充質干細胞hBMSCs、人脂肪間充質干細胞hAMSC、人羊膜間充質干細胞hAD-MSCs、人臍帶間充質干細胞hUMSCs等。同樣適用于其他哺乳動物細胞冷凍保存，包括293、Hela、NIH3T3等，具體使用時請自行分析判斷對細胞類型的影響。

本產品含有DMSO。

適用實驗與操作過程：

1. 細胞凍存
   1. 按正常細胞培養(yǎng)方法收集細胞。確保待凍存的細胞狀態(tài)良好。
   2. 推薦冷凍保存細胞密度為5×10⁵-2×10⁶細胞/ml。
   3. 根據細胞量和凍存管規(guī)格計算、選擇冷凍保存液的體積。
   4. 將收集細胞沉淀，輕輕振蕩分散細胞，加入適當體積冷凍保存液，重新均勻懸浮細胞。
   5. 使用程序降溫儀或程序降溫盒冷凍細胞。
   6. 冷凍的細胞轉移至液氮中長期保存。
2. 細胞復蘇
   1. 將細胞從液氮中取出，37℃水浴快速解凍。
   2.  
   2. 解凍的細胞懸液加入5-10倍體積的室溫預熱*細胞培養(yǎng)基，混合均勻，100-200 g離心收集細胞。
   3. 30分鐘。
   3. 復蘇的細胞可用于正常細胞培養(yǎng)或實驗操作。

注意事項與常見問題：

1. 適用的細胞類型？

本產品為hMSCs凍存設計，經過驗證能很好保障hMSCs復蘇后的活性。經過分析也適用于多種哺乳動物細胞的凍存保護。具體到實驗室的細胞需要自行試用、分析。分析內容如細胞活性、細胞表型等。

2. 細胞收集離心力的選擇？

本產品細胞收集過程中的離心力應保持與正常培養(yǎng)過程中的離心力相同。若因特殊情況導致的細胞無法沉降，請適當增加離心力，但不宜超過200×g。注意離心時離心管內液體盡量不要超過總容積的2/3。

3. 凍存模式一定要用程序降溫嗎？

產品研發(fā)時進行過直接將細胞放置-80℃冰箱進行存儲，某些細胞類型復蘇后細胞活性稍有降低，所以該說明書給出的參考方式為程序降溫。若需要直接置于-80℃凍存，請根據所用細胞自行確定。

4. 復蘇后是否需要快速去除凍存液？

對常溫下細胞放置的毒性進行分析，發(fā)現常溫放置1-2小時對細胞活性和繼續(xù)培養(yǎng)的狀態(tài)無明顯影響。所以原則上不必立即去除凍存液。然而，hMSCs培養(yǎng)過程中應盡可能避免過多因素，所以建議復蘇后盡快去除凍存液成分。此外，其他細胞類型對凍存液的敏感程度不同，所以請自行判斷，或直接盡快去除。