產(chǎn)品編號：

RC200106-100ML

存儲條件：

2-8 ℃避光保存，有效期6個月；

-20 ℃避光保存，有效期12個月；

避免反復(fù)凍融。

產(chǎn)品簡介：

本產(chǎn)品專為人間充質(zhì)干細(xì)胞冷凍保存設(shè)計，是即用型細(xì)胞凍存液。成分明確，不含動物源成分，主要成分為可注射的藥物及輔料，在間充質(zhì)干細(xì)胞治療用研究中具有顯著優(yōu)勢。

適用于人間充質(zhì)干細(xì)胞hMSCs，包括人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞hBMSCs、人脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞hAMSC、人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞hAD-MSCs、人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞hUMSCs等。同樣適用于其他哺乳動物細(xì)胞冷凍保存，包括293、Hela、NIH3T3等，具體使用時請自行分析判斷對細(xì)胞類型的影響。

本產(chǎn)品含有DMSO。

適用實驗與操作過程：

1. 細(xì)胞凍存
   1. 按正常細(xì)胞培養(yǎng)方法收集細(xì)胞。確保待凍存的細(xì)胞狀態(tài)良好。
   2. 推薦冷凍保存細(xì)胞密度為5×10⁵-2×10⁶細(xì)胞/ml。
   3. 根據(jù)細(xì)胞量和凍存管規(guī)格計算、選擇冷凍保存液的體積。
   4. 將收集細(xì)胞沉淀，輕輕振蕩分散細(xì)胞，加入適當(dāng)體積冷凍保存液，重新均勻懸浮細(xì)胞。
   5. 使用程序降溫儀或程序降溫盒冷凍細(xì)胞。
   6. 冷凍的細(xì)胞轉(zhuǎn)移至液氮中長期保存。
2. 細(xì)胞復(fù)蘇
   1. 將細(xì)胞從液氮中取出，37℃水浴快速解凍。
   2.  
   2. 解凍的細(xì)胞懸液加入5-10倍體積的室溫預(yù)熱*細(xì)胞培養(yǎng)基，混合均勻，100-200 g離心收集細(xì)胞。
   3. 30分鐘。
   3. 復(fù)蘇的細(xì)胞可用于正常細(xì)胞培養(yǎng)或?qū)嶒灢僮鳌?/span>

注意事項與常見問題：

1. 適用的細(xì)胞類型？

本產(chǎn)品為hMSCs凍存設(shè)計，經(jīng)過驗證能很好保障hMSCs復(fù)蘇后的活性。經(jīng)過分析也適用于多種哺乳動物細(xì)胞的凍存保護(hù)。具體到實驗室的細(xì)胞需要自行試用、分析。分析內(nèi)容如細(xì)胞活性、細(xì)胞表型等。

2. 細(xì)胞收集離心力的選擇？

本產(chǎn)品細(xì)胞收集過程中的離心力應(yīng)保持與正常培養(yǎng)過程中的離心力相同。若因特殊情況導(dǎo)致的細(xì)胞無法沉降，請適當(dāng)增加離心力，但不宜超過200×g。注意離心時離心管內(nèi)液體盡量不要超過總?cè)莘e的2/3。

3. 凍存模式一定要用程序降溫嗎？

產(chǎn)品研發(fā)時進(jìn)行過直接將細(xì)胞放置-80℃冰箱進(jìn)行存儲，某些細(xì)胞類型復(fù)蘇后細(xì)胞活性稍有降低，所以該說明書給出的參考方式為程序降溫。若需要直接置于-80℃凍存，請根據(jù)所用細(xì)胞自行確定。

4. 復(fù)蘇后是否需要快速去除凍存液？

對常溫下細(xì)胞放置的毒性進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)常溫放置1-2小時對細(xì)胞活性和繼續(xù)培養(yǎng)的狀態(tài)無明顯影響。所以原則上不必立即去除凍存液。然而，hMSCs培養(yǎng)過程中應(yīng)盡可能避免過多因素，所以建議復(fù)蘇后盡快去除凍存液成分。此外，其他細(xì)胞類型對凍存液的敏感程度不同，所以請自行判斷，或直接盡快去除。