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Collagen,Type I，大有可為！2023/09/15: 膠原蛋白（Collagen）是結(jié)締組織和內(nèi)臟器官外基質(zhì)的主要成分，比如I型膠原在骨、跟腱、皮膚、血管壁中含量豐富；II型膠原在透明軟骨中含量豐富；III型膠原在皮膚、血管內(nèi)膜、腸道中含量豐富，彈性較好；IV型在晶狀體中含量豐富；V型主要分布在皮膚和血管壁中等。膠原蛋白在結(jié)構(gòu)和遺傳學(xué)上有不同類型，膠原蛋白由三個(gè)自身按左螺旋排列的多肽鏈構(gòu)成，三條相互獨(dú)立的膠原蛋白肽鏈依靠甘氨酸之間形成的氫鍵維系三股螺旋相互纏繞的結(jié)構(gòu)[1]。商業(yè)上有天然和人工合成兩種不同的生產(chǎn)路徑，在醫(yī)療、美容、醫(yī)學(xué)和科學(xué)研究領(lǐng)域有

復(fù)制型慢病毒（RCL）的不同檢測(cè)方案解析2023/09/15: 復(fù)制型病毒（RCR/RCL）復(fù)制型病毒/病毒載體回復(fù)突變（ReplicationCompetentVirus,RCV），可產(chǎn)生于病毒載體制造過(guò)程中的所有步驟當(dāng)中。并且，RCV感染宿主細(xì)胞后能隨宿主細(xì)胞在培養(yǎng)液中增殖、擴(kuò)增對(duì)人體健康具有嚴(yán)重的隱患，是免疫細(xì)胞治療類產(chǎn)品，如CAR-T產(chǎn)品的主要安全性風(fēng)險(xiǎn)之一。近年來(lái)，CAR-T細(xì)胞制備過(guò)程中，伴隨載體的不斷升級(jí)優(yōu)化，重組產(chǎn)生的復(fù)制型逆轉(zhuǎn)錄病毒/慢病毒(ReplicationCompetentRetrovirus/Lentivirus,RCR/RCL)

新品上市 | 通用型高靈敏一步RT-qPCR試劑，省時(shí)高效！2023/09/15: 一步法RT-qPCR是常用的RNA分析方法之一。在一步RT-qPCR中，反轉(zhuǎn)錄酶和DNA聚合酶預(yù)混于同一管內(nèi)，從而使得在單個(gè)反應(yīng)中就可同時(shí)進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄和DNA擴(kuò)增。相比于進(jìn)行完反轉(zhuǎn)錄，準(zhǔn)備試劑配制熒光定量反應(yīng)的兩步法而言，一步RT-qPCR更加簡(jiǎn)單快速，移液步驟更少，污染的風(fēng)險(xiǎn)大大降低，對(duì)于高通量實(shí)驗(yàn)應(yīng)用十分適宜。Hifair®AdvancedOneStepRT-qPCRSYBRGreenKit是一款基于SYBRGreenI染料進(jìn)行熒光定量的試劑盒。對(duì)于RNA樣本，試劑盒采用耐熱Hifair®VR

無(wú)毒、無(wú)臭、無(wú)需避光的預(yù)混RNA建庫(kù)試劑盒重磅推出！2023/09/15: 你在進(jìn)行RNA建庫(kù)時(shí)，是否遇到過(guò)這樣的困擾：RNA實(shí)驗(yàn)時(shí)，有些試劑打開(kāi)一股臭味襲來(lái)，尤其是樣本很多時(shí)，這酸爽簡(jiǎn)直能把人帶走，讓人不得不懷疑這試劑是不是有毒性；建庫(kù)試劑要求避光，總不能全程黑燈熄火操作吧？這個(gè)毒性以及需要避光的罪魁禍?zhǔn)拙褪欠啪€菌素D。那么，建庫(kù)試劑盒中為什么要加放線菌素D呢？相關(guān)資料顯示，放線菌素D(ActinomycinD)又稱更生霉素，分子中含有一個(gè)苯氧環(huán)結(jié)構(gòu)，通過(guò)它連接兩個(gè)等位的環(huán)狀肽鏈。此肽鏈可與DNA分子的脫氧鳥(niǎo)嘌呤發(fā)揮特異性相互作用，使放線菌素D嵌入DNA雙螺旋的小溝中

精品推薦 | 無(wú)需RNA提取，從細(xì)胞板直接獲得基因表達(dá)分析結(jié)果2023/09/13: 精品推薦|無(wú)需RNA提取，從細(xì)胞板直接獲得基因表達(dá)分析結(jié)果如果你想要快速、簡(jiǎn)便的進(jìn)行細(xì)胞水平基因功能批量驗(yàn)證；如果你的細(xì)胞珍貴不易獲取，想一次性針對(duì)多目標(biāo)基因表達(dá)分析；如果你的起始細(xì)胞樣本稀少，希望樣本不被提取、避免損失；如果你的細(xì)胞目的基因表達(dá)水平低，希望多增加上樣量、提高成功率！Hieff®FastCellDirectProbeRT-qPCRKit針對(duì)細(xì)胞水平基因表達(dá)分析研究瓶頸設(shè)計(jì)，適用于對(duì)各種動(dòng)物細(xì)胞直接進(jìn)行RT-qPCR表達(dá)分析，用時(shí)短，操作簡(jiǎn)單，出錯(cuò)率低，最短只需1.5小時(shí)就可高效完

基因編輯在免疫細(xì)胞治療中的應(yīng)用2023/09/13: 基因編輯在免疫細(xì)胞治療中的應(yīng)用1.基因編輯是什么？基因編輯是通過(guò)人工核酸酶技術(shù)將靶基因或轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物進(jìn)行敲除，插入等精確修飾的基因工程技術(shù)。目前基因編輯已經(jīng)在多個(gè)領(lǐng)域中有著重要的應(yīng)用，在腫瘤治療中主要與免疫治療相結(jié)合，尤其在免疫細(xì)胞治療上有巨大的發(fā)展前景。2.基因編輯的分類？目前的基因編輯技術(shù)有可編程的核酸酶技術(shù)和BE（Baseeditors)及PE（Primeeditors）技術(shù)（圖1）。圖1.基因編輯技術(shù)分類[1]可編程核酸酶主要包括鋅指核酸酶(ZFNs)和轉(zhuǎn)錄激活因子樣效應(yīng)核酸酶(TALENs

漲知識(shí) | qPCR專場(chǎng)五：如何分析熒光定量數(shù)據(jù)？2023/09/13: 漲知識(shí)|qPCR專場(chǎng)五：如何分析熒光定量數(shù)據(jù)？熒光定量PCR是實(shí)驗(yàn)室中出鏡率非常高的一種檢測(cè)方法。該方法通過(guò)在PCR體系中添加熒光基團(tuán)來(lái)記錄DNA產(chǎn)物的累積情況，從而達(dá)到對(duì)PCR過(guò)程進(jìn)行實(shí)時(shí)監(jiān)控的目的，并且可以通過(guò)數(shù)據(jù)分析計(jì)算出起始模板量，這就是“熒光定量”中“定量”一詞的來(lái)源。熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)因?yàn)殪`敏度高所以經(jīng)常是差之毫厘謬以千里，所以在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，我們需要注意諸多細(xì)節(jié)，謹(jǐn)慎操作。小伙伴們看到這里就要著急了，我怎樣才能做好qPCR實(shí)驗(yàn)，拿到實(shí)驗(yàn)結(jié)果，發(fā)表高分文章，走上人生呢？熒光定量PCR可

蛋白酶抑制劑/磷酸酶抑制劑2023/09/13: 蛋白酶抑制劑/磷酸酶抑制劑為何清除蛋白中的蛋白酶及磷酸酶？在平衡狀態(tài)下內(nèi)源性蛋白質(zhì)產(chǎn)生并降解，因此其細(xì)胞水平是穩(wěn)定的。當(dāng)在體外從細(xì)胞和組織中提取蛋白質(zhì)時(shí)，與蛋白一起釋放出來(lái)的還有許多能夠降解提取物中的蛋白質(zhì)的內(nèi)源酶，例如磷酸酶和蛋白酶。此時(shí)由于蛋白質(zhì)產(chǎn)生被顯著抑制，降解繼續(xù)，因此這些酶可以快速降解提取物中的蛋白。為了防止蛋白純化過(guò)程中目的蛋白不受蛋白酶的破壞，需要加入蛋白酶抑制劑對(duì)其進(jìn)行活性抑制。另外，細(xì)胞中蛋白的磷酸化和去磷酸化是信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、細(xì)胞增殖、細(xì)胞分化和細(xì)胞凋亡等許多重要的生物學(xué)活動(dòng)的調(diào)

蛋白免疫印跡技術(shù)大揭秘！近距離防踩坑~2023/09/12: 蛋白免疫印跡技術(shù)大揭秘！近距離防踩坑~蛋白免疫印跡技術(shù)是分子生物學(xué)中常用的三種印記技術(shù)之一，具有分析容量大、敏感度高、特異性強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)，是檢測(cè)蛋白質(zhì)特性、表達(dá)與分布的一種的方法，如組織抗原的定性定量檢測(cè)、多肽分子的質(zhì)量測(cè)定及病毒的抗體或抗原檢測(cè)等。被廣泛應(yīng)用于蛋白質(zhì)相互作用、疾病診斷和藥物研發(fā)等領(lǐng)域。為助力解決蛋白免疫印跡技術(shù)中出現(xiàn)的問(wèn)題，提高科研工作者的基礎(chǔ)技能水平，山東大學(xué)齊魯醫(yī)院（第一臨床學(xué)院）學(xué)生黨總支研究生第九黨支部聯(lián)合翌圣生物，于9月12日（本周二）舉辦“新學(xué)期，新征程——蛋白免疫印跡

新一代的凝膠過(guò)濾層析系列產(chǎn)品上線2023/09/12: 凝膠過(guò)濾層析(GelFiltrationChromatography)也稱為分子篩或體積排阻層析(SizeExclusionChromatography)，是根據(jù)分子大小和形狀的差異進(jìn)行分離的一種簡(jiǎn)單可靠的層析技術(shù)。凝膠過(guò)濾層析屬于非吸附類層析。分離原理凝膠過(guò)濾填料為三維立體網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，由于凝膠網(wǎng)孔大小的限制，大分子將不能進(jìn)入凝膠顆粒內(nèi)部（即被凝膠排阻在外），僅能在凝膠顆粒間隙移動(dòng)，并隨緩沖液一起從柱底先行洗脫。小分子可以自由進(jìn)入并擴(kuò)散到凝膠顆粒內(nèi)部，小分子歷經(jīng)的路徑更長(zhǎng)，將較晚從柱上洗脫。由于樣

干貨│從原理到應(yīng)用，帶你全方面了解T4 gene 32 protein2023/09/12: T4噬菌體基因32編碼蛋白(T4gene32protein，gp32)是一種單鏈DNA（ssDNA）結(jié)合蛋白，為T4噬菌體DNA復(fù)制和修復(fù)所必需。它被廣泛地用于穩(wěn)定和標(biāo)記ssDNA區(qū)域，以便用電子顯微鏡觀察細(xì)胞內(nèi)DNA的結(jié)構(gòu)、促進(jìn)限制性內(nèi)切酶的消化反應(yīng)、提高RT-PCR中反轉(zhuǎn)錄的效率、增強(qiáng)T4DNA聚合酶的活性和提高PCR的產(chǎn)量等。T4gene32protein的結(jié)構(gòu)T4gene32protein由301個(gè)氨基酸組成，大小為34kDa，包含三個(gè)不同的結(jié)構(gòu)域：核心結(jié)構(gòu)域、N端結(jié)構(gòu)域（NTD）和C端

干貨│酶切實(shí)驗(yàn)的這些坑，你肯定遇到過(guò)！2023/09/12: 分子克隆作為分子生物學(xué)的一項(xiàng)成熟技術(shù)，幾乎每個(gè)實(shí)驗(yàn)室都或多或少的會(huì)涉及。在分子克隆實(shí)驗(yàn)中，限制性內(nèi)切酶是克隆產(chǎn)品，但大家也常常因?yàn)橄拗菩詢?nèi)切酶的各種問(wèn)題而感到煩擾。比如小翌常被問(wèn)到的：1.限制性內(nèi)切酶種類這么多，不知道如何選擇；2.酶切不完或出現(xiàn)亂切、錯(cuò)切的情況；3.酶切速度慢，需要1h甚至過(guò)夜酶；4.多酶切還需要選擇多款酶切緩沖液?！槍?duì)第1個(gè)問(wèn)題，小翌會(huì)簡(jiǎn)單介紹一下什么是限制性內(nèi)切酶，不同內(nèi)切酶的分類如何，讓您對(duì)限制性內(nèi)切酶有一個(gè)更全面的認(rèn)識(shí)。針對(duì)第2~4個(gè)問(wèn)題，翌圣FuniCut®系列快

干貨 | 病毒滴度檢測(cè)，除了空斑試驗(yàn)還有更好的選擇2023/09/12: 什么是病毒滴度呢？就像重組蛋白合成以后需要檢測(cè)純度一樣，病毒包裝后的效力如何，如何定量，也是必須要檢測(cè)的，專業(yè)術(shù)語(yǔ)稱為：病毒滴度的測(cè)定。病毒滴度是指單位體積液體中具有生物活性的病毒顆粒數(shù)，是衡量病毒數(shù)量和毒力的一個(gè)重要指標(biāo)。病毒滴度測(cè)定是指確定給定樣品中病毒顆粒的濃度的過(guò)程。它是評(píng)估病毒產(chǎn)品，如疫苗、基因治療載體或診斷試劑的質(zhì)量和效力的一個(gè)重要參數(shù)。病毒滴度檢測(cè)方法比較病毒滴度的測(cè)定方法有多種，主要分為物理方法和生物方法兩大類。物理方法是通過(guò)測(cè)定病毒顆粒的大小、形態(tài)、數(shù)量、電荷、光學(xué)性質(zhì)等，來(lái)推

CUT&Tag優(yōu)于ChIP-Seq的關(guān)鍵竟是它？2023/08/31: CUT&Tag優(yōu)于ChIP-Seq的關(guān)鍵竟是它？前面幾期，小翌介紹過(guò)“翌圣轉(zhuǎn)座酶系列產(chǎn)品助力NGS文庫(kù)構(gòu)建”（戳鏈接了解詳情）。本期，小翌重點(diǎn)聊聊pG-Tn5。什么是pG-Tn5pG-Tn5(pG-Tn5Transposase)是將ProteinG(pG)與經(jīng)過(guò)改造的Tn5轉(zhuǎn)座酶進(jìn)行融合，形成的同時(shí)具備轉(zhuǎn)座酶與ProteinG活性的新型融合酶。ProteinG能特異性與抗體結(jié)合，從而使得pG-Tn5具備更高的靶向性。Tn5是一種細(xì)菌轉(zhuǎn)座子,經(jīng)改造的Tn5能夠高效地切割DNA,同時(shí)連接上特定的接頭

巨噬細(xì)胞清除操作及文獻(xiàn)實(shí)例分析2023/08/30: 01巨噬細(xì)胞清除簡(jiǎn)介巨噬細(xì)胞是體內(nèi)每個(gè)器官中都存在的細(xì)胞，存在于表皮、角膜和沒(méi)有血管的關(guān)節(jié)內(nèi)部，其體內(nèi)生物學(xué)研究的重要方法之一是巨噬細(xì)胞耗竭。清除巨噬細(xì)胞，可以全面了解巨噬細(xì)胞在病理?xiàng)l件下的功能。目前，巨噬細(xì)胞清除的主要方法包括構(gòu)建巨噬細(xì)胞缺失動(dòng)物模型和使用藥物（氯膦酸鹽脂質(zhì)體）去除法，但是，構(gòu)建巨噬細(xì)胞缺失動(dòng)物模型價(jià)格昂貴，周期長(zhǎng)，因此，氯膦酸鹽脂質(zhì)體（ClodronateLiposomes）是目前最為成熟、方便、經(jīng)濟(jì)的一種巨噬細(xì)胞清除工具，可以有效的清除動(dòng)物體內(nèi)包括肝臟，脾臟，肺部，血液等多

精彩回顧 | 四企聯(lián)動(dòng)，共話病原快檢——高通量測(cè)序技術(shù)助力病原快檢與防控2023/08/29: 精彩回顧|四企聯(lián)動(dòng)，共話病原快檢——高通量測(cè)序技術(shù)助力病原快檢與防控8月24日下午，由華大智造、吉因加、金匙醫(yī)學(xué)和翌圣生物聯(lián)合主辦的“四企聯(lián)動(dòng)，共話病原快檢——高通量測(cè)序技術(shù)助力病原快檢與防控”的云聽(tīng)會(huì)落幕，這場(chǎng)齊聚設(shè)備商、服務(wù)商和原料商的研討會(huì)，從不同的視覺(jué)角度，為賦能病原領(lǐng)域的診斷和監(jiān)測(cè)等角度提供不同的病原快檢與防控見(jiàn)解，思想的碰撞為大家?guī)?lái)了病原快檢前沿的新設(shè)備、新興技術(shù)和優(yōu)質(zhì)試劑。四企聯(lián)動(dòng)賦能病原快檢與防控華大智造DNBSEQ測(cè)序平臺(tái)加速病原檢測(cè)。華大智造帶來(lái)了全球同等通量測(cè)序儀中速度最

新品 | 翌圣GMP級(jí)別RNA合成酶原料：BsaI2023/08/25: mRNA合成的關(guān)鍵步驟之一是將質(zhì)粒DNA進(jìn)行線性化，這一步需要使用限制性內(nèi)切酶，IIs型內(nèi)切酶是質(zhì)粒線性化的內(nèi)切酶，因?yàn)樗鼈冊(cè)谧R(shí)別位點(diǎn)下游切割DNA，可確保所設(shè)計(jì)的poly(A)尾的完整性，線性化后的DNA模板上不會(huì)留下“疤痕”，IVT過(guò)程中也不會(huì)添加不需要的核苷酸。BsaI是常見(jiàn)的IIs型內(nèi)切酶之一，在mRNA合作中起著重要作用。圖1.BsaI識(shí)別位點(diǎn)及切割序列翌圣GMP級(jí)別BsaI翌圣的BsaI由大腸桿菌重組表達(dá)，GMP標(biāo)準(zhǔn)生產(chǎn)，酶切效率高、星號(hào)活性低、末端完整性良好，可用于mRNA疫苗生產(chǎn)

新品 | 無(wú)氯仿的總RNA抽提試劑來(lái)了！2023/08/25: 說(shuō)到RNA提取，總是避不開(kāi)Trizol（此處指總RNA抽提試劑，下同），作為總RNA提取的方法，裂解能力強(qiáng)，適用范圍廣，適用動(dòng)植物組織還有小量樣本及難提取的組織，例如皮膚，結(jié)締組織，還可以用于細(xì)菌真菌等微生物的總RNA提取，優(yōu)點(diǎn)顯而易見(jiàn)，缺點(diǎn)也是不容忽視，Trizol它離不開(kāi)氯仿?。÷确略缭?017年就被世衛(wèi)癌癥研究機(jī)構(gòu)列入2B類致癌清單了，吸入，食入，皮膚吸收，主要作用于中樞神經(jīng)，有麻醉作用，對(duì)心、肝、腎有損害，還有提取伴侶β-巰基乙醇也是危險(xiǎn)品，刺激眼睛、呼吸道粘膜，引起慢性咽炎，經(jīng)皮膚、吞

常用報(bào)告基因有哪些種類？一文讀懂！2023/08/25: 常用報(bào)告基因有哪些種類？一文讀懂！什么是報(bào)告基因？報(bào)告基因(reportergene)是一種編碼在內(nèi)源蛋白背景下易被檢測(cè)出來(lái)的蛋白質(zhì)或酶的基因。報(bào)告基因與目的基因或調(diào)控序列相連，通過(guò)間接或直接檢測(cè)報(bào)告基因編碼產(chǎn)物的信號(hào)，比如報(bào)告蛋白、mRNA、酶等，直觀反映細(xì)胞內(nèi)基因的轉(zhuǎn)錄活性或表達(dá)水平。一般報(bào)告基因的特點(diǎn)是無(wú)毒、無(wú)免疫原性、易于檢測(cè)、具有一定的特異性。報(bào)告基因編碼產(chǎn)物的半衰期是比較關(guān)注的一個(gè)關(guān)鍵點(diǎn)。編碼產(chǎn)物半衰期和報(bào)告基因的應(yīng)用領(lǐng)域息息相關(guān)。[1]那么報(bào)告基因該如何選擇呢？在選擇報(bào)告基因時(shí)一般

漲知識(shí)|qPCR專場(chǎng)四：?jiǎn)栴}圖表分析及實(shí)驗(yàn)案例2023/08/25: 漲知識(shí)|qPCR專場(chǎng)四：?jiǎn)栴}圖表分析及實(shí)驗(yàn)案例熒光定量PCR是實(shí)驗(yàn)室中出鏡率非常高的一種檢測(cè)方法。該方法通過(guò)在PCR體系中添加熒光基團(tuán)來(lái)記錄DNA產(chǎn)物的累積情況，從而達(dá)到對(duì)PCR過(guò)程進(jìn)行實(shí)時(shí)監(jiān)控的目的，并且可以通過(guò)數(shù)據(jù)分析計(jì)算出起始模板量，這就是“熒光定量”中“定量”一詞的來(lái)源。熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)因?yàn)殪`敏度高所以經(jīng)常是差之毫厘謬以千里，所以在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，我們需要注意諸多細(xì)節(jié)，謹(jǐn)慎操作。小伙伴們看到這里就要著急了，我怎樣才能做好qPCR實(shí)驗(yàn)，拿到實(shí)驗(yàn)結(jié)果，發(fā)表高分文章呢？在熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)中，難

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