Erlotinib HCl (OSI-744)生物活性
| 產(chǎn)品描述 | Erlotinib HCl (OSI-744)是一種EGFR抑制劑，IC50為2 nM，對(duì)EGFR的選擇性比c-Src或v-Abl高1000倍以上。 | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| 靶點(diǎn) | HER1/EGFR | |||||
| IC50 | 2 nM [1] | |||||
| 體外研究 | Erlotinib作用于HNS人頭部和頸部腫瘤細(xì)胞，有效抑制EGFR自磷酸化，HNS人頭部和頸部腫瘤細(xì)胞是表達(dá)高水平EGFR的細(xì)胞系。[1] Erlotinib對(duì)SBC-5細(xì)胞增殖沒有作用效果。相反, Erlotinib 顯著抑制PC-9細(xì)胞增殖,這種作用存在劑量依賴性，PC-9細(xì)胞在EGFR基因第19外顯子含缺失突變。Erlotinib處理也不會(huì)影響SBC-5細(xì)胞遷移。[2]Erlotinib 抑制HPAC細(xì)胞和Capan-1細(xì)胞生長(zhǎng)， IC50 分別為1.1和3µM。10 uM Erlotinib 抑制EGFR在 Y845 (Src依賴性磷酸化) 和和Y1068(自磷酸化)位點(diǎn)磷酸化。[3] Erlotinib 只有作用于zui敏感的細(xì)胞株時(shí)，抑制細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶, Akt, 和S6。[4] | |||||
| 體內(nèi)研究 | Erlotinib單獨(dú)作用于H460a腫瘤模型，抑制腫瘤生長(zhǎng)，這種作用存在劑量依賴性，與藥物的循環(huán)水平相關(guān)。 | |||||
| 特征 | ||||||
*的實(shí)驗(yàn)操作(此*來自于公開的文獻(xiàn)所以Selleck并不保證其有效性)
激酶實(shí)驗(yàn): [1]
| 激酶實(shí)驗(yàn) | 每孔使用100 μL 溶于PBS的0.25 mg/mL PGT對(duì)96孔板包被，然后在37oC溫育。吸取移除過量PGT，使用沖洗 buffer (0.1% Tween-20，溶于PBS)清洗實(shí)驗(yàn)板3次。在 50 μL 50 mM HEPES (pH 7.3), 含125 mM NaCl, 24 mM MgCl2, 0.1 mM 原釩酸鈉, 20 μM ATP, 1.6 μg/mL EGF, 以及從A431細(xì)胞膜上親和純化的15 ng EGFR的混合物中進(jìn)行激酶反應(yīng)。加入溶于 DMSO的 Erlotinib，DMSO 終濃度為2.5%。加入ATP，開始磷酸化，在室溫下進(jìn)行8分鐘，且持續(xù)震蕩。加入吸取的反應(yīng)混合物，激酶反應(yīng)終止，使用沖洗 buffer沖洗4次。磷酸化的PGT與50 μL每孔 HRP聯(lián)合的PY54 抗磷酸抗體[在封閉液(3% BSA 和0.05% Tween-20，溶于 PBS)中稀釋到0.2 μg/mL]溫育25分鐘后，測(cè)量磷酸化的PGT。吸取移除抗體，使用沖洗buffer沖洗實(shí)驗(yàn)板4次。加入 TMB 微孔過氧化物酶底物，每孔50μL，進(jìn)行比色分析，然后加入0.09 M 硫酸，每孔50 μL，終止反應(yīng)。在450 nm處測(cè)定吸光值而測(cè)定磷酸化。 |
|---|
細(xì)胞試驗(yàn): [3]
| 細(xì)胞系 | HPAC細(xì)胞系和Capan-1細(xì)胞 |
|---|---|
| 濃度 | 0.01 μM-10 μM |
| 處理時(shí)間 | 4天或6天 |
| 方法 | 為了測(cè)評(píng)對(duì)細(xì)胞增殖的抑制作用，進(jìn)行MTT實(shí)驗(yàn)。細(xì)胞在96孔板上在37oC下預(yù)溫育，單獨(dú)加入Erlotinib 和Gemcitabine，或者聯(lián)合加入。在37oC下處理4天(HPAC細(xì)胞)或6天(Capan-1 細(xì)胞)后，每孔加入10 mL MTT，然后在37oC下溫育2-5小時(shí)。使用Benchmark Plus 酶標(biāo)儀在450和600 nm處測(cè)定每孔的光密度。每組每種藥物實(shí)驗(yàn)獨(dú)立重復(fù)進(jìn)行2次或3次。按如下計(jì)算細(xì)胞增殖抑制百分?jǐn)?shù): [(藥物處理孔中的平均吸光值-無細(xì)胞孔中平均吸光值)/(對(duì)照組孔中平均吸光值-無細(xì)胞孔中平均吸光值)] × 100。 |
動(dòng)物實(shí)驗(yàn): [3]
| 動(dòng)物模型 | 攜帶HPAC細(xì)胞的雄性5周大的BALB-nu/nu小鼠 | ||
|---|---|---|---|
| 配制 | 6% Captisol | ||
| 劑量 | 50 mg/kg | ||
| 給藥處理 | 口服處理 | ||
| 溶解度 | 15% Captisol 20 mg/mL | ||
| * 溶解度檢測(cè)是由Selleck技術(shù)部門檢測(cè)的，可能會(huì)和文獻(xiàn)中提供的溶解度有所差異，這是由于生產(chǎn)工藝和批次不同產(chǎn)生的正?，F(xiàn)象。 | |||
不同實(shí)驗(yàn)動(dòng)物依據(jù)體表面積的等效劑量轉(zhuǎn)換表（數(shù)據(jù)來源于FDA指南）
| 狒狒 | 狗 | 猴 | 兔 | 豚鼠 | 大鼠 | 倉(cāng)鼠 | 小鼠 | |
| 重量 (kg) | 12 | 10 | 3 | 1.8 | 0.4 | 0.15 | 0.08 | 0.02 |
| 體表面積 (m2) | 0.6 | 0.5 | 0.24 | 0.15 | 0.05 | 0.025 | 0.02 | 0.007 |
| Km 系數(shù) | 20 | 20 | 12 | 12 | 8 | 6 | 5 | 3 |
| 動(dòng)物A (mg/kg) = 動(dòng)物B (mg/kg) × | 動(dòng)物B的Km系數(shù) |
| 動(dòng)物A的Km系數(shù) |
例如，依據(jù)體表面積折算法，將白藜蘆醇用于小鼠的劑量22.4 mg/kg 換算成大鼠的劑量，需要將22.4 mg/kg 乘以小鼠的Km系數(shù)（3），再除以大鼠的Km系數(shù)（6），得到白藜蘆醇用于大鼠的等效劑量為11.2 mg/kg。
| 大鼠劑量 (mg/kg) = 小鼠劑量 (22.4 mg/kg) × | 小鼠的Km系數(shù)(3) | = 11.2 mg/kg |
| 大鼠的Km系數(shù)(6) |
1
參考文獻(xiàn)
[1] Moyer JD, et al. Cancer Res. 1997, 57(21), 4838-4848.
[2] Li T, et al. Clin Cancer Res, 2007, 13(11), 3413-3422.
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Clinical Trial Information( data from http://clinicaltrials.gov)
| NCT Number | Recruitment | Conditions | Sponsor /Collaborators | Start Date | Phases |
|---|---|---|---|---|---|
| NCT02277457 | Not yet recruiting | Non-Small Cell Lung Cancer | University of Michigan Cancer Center|Georgia Regents Univ ...more | January 2015 | Phase 0 |
| NCT02273362 | Not yet recruiting | Adult Primary Liver Cancer | National Cancer Institute (NCI)|Massachusetts General Hos ...more | January 2015 | -- |
| NCT02169284 | Not yet recruiting | Recurrent Bladder Cancer|Stage I Bladder Cancer|Stage II Bladder Cancer|Stage III Bladder Cancer | National Cancer Institute (NCI) | October 2014 | Phase 2 |
| NCT02233049 | Not yet recruiting | Diffuse Intrinsic Pontine Glioma | Gustave Roussy, Cancer Campus, Grand Paris|Innovative The ...more | October 2014 | Phase 2 |
| NCT02152631 | Recruiting | Non Small Cell Lung Cancer | Eli Lilly and Company | October 2014 | Phase 3 |
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化學(xué)數(shù)據(jù)
點(diǎn)擊下載Erlotinib HCl (OSI-744) (SDF格式文件)
| 分子量 | 429.90 |
|---|---|
| 化學(xué)式 | C22H23N3O4.HCl |
| CAS號(hào) | 183319-69-9 |
| 穩(wěn)定性 | 3年 -20℃粉狀 |
|---|---|
| 6月-80℃溶于DMSO | |
| 別名 | (CP358774, NSC 718781) HCl |
| 溶解性 (25°C) * | 體外 | DMSO | 3 mg/mL (6 mM) |
|---|---|---|---|
| 水 | <1 mg/mL (<1 mM) | ||
| 乙醇 | <1 mg/mL (<1 mM) | ||
| 體內(nèi) | 15% Captisol | 20 mg/mL | |
| * <1 mg/ml 指產(chǎn)品微溶或不溶 * 溶解度檢測(cè)是由Selleck技術(shù)部門檢測(cè)的，可能會(huì)和文獻(xiàn)中提供的溶解度有所差異，這是由于生產(chǎn)工藝和批次不同產(chǎn)生的正?，F(xiàn)象。 | |||
| Chemical Name | N-(3-ethynylphenyl)-6,7-bis(2-methoxyethoxy)quinazolin-4-amine hydrochloride |
|---|
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