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細胞培養(yǎng)板的選擇-細胞分布不均及解決辦法2014/04/21

問：我的細胞接種培養(yǎng)板，細胞總是聚集在周邊部分，該如何處理啊？我看園子里有的戰(zhàn)友的細胞卻是聚集在中間，是不是板子的質(zhì)量問題?。看穑赫垎柲愕募毎侨绾位靹虻?？是滴管吹打還是振蕩培養(yǎng)板？如果是后者，而且是轉(zhuǎn)圈搖勻的話，很有可能由于離心力的作用使細胞甩到周邊部分，導(dǎo)致細胞中間少，四周多！自己可是試試！周邊一般是相對會多一點，但是中間的數(shù)量也不會很少啊~~鋪板的時候我也沒有特異去振蕩培養(yǎng)板。大概是板子的質(zhì)量問題吧或者是不是鋪板時候的細胞密度太低了？我用的corning的板。一個好辦法：在你培養(yǎng)種板之前，

細胞培養(yǎng)板的密閉和污染問題2014/03/27

細胞培養(yǎng)板的加樣和操作：細胞培養(yǎng)板在進行細胞操作時同樣遵循嚴格無菌的原則，各項操作要保證規(guī)范、科學(xué)，不對細胞的生長造成額外的影響。這其中zui常見的問題就是如何保證加樣后細胞的均勻和盡量減少換液對細胞生長狀態(tài)的影響。問：96，24孔培養(yǎng)板或培養(yǎng)皿的蓋子都很松，這樣是方便了透氣，但是細菌、霉菌等污染物會不會也隨著溜進去呢？答：1.蓋子很松，屬于半開放培養(yǎng)，這樣的目的是透氣（實際上是為了使培養(yǎng)皿外的co2能夠與培養(yǎng)皿充分交換，維持培養(yǎng)基的pH值）。2.凡事有利必有弊，這樣當(dāng)然增加了污染的可能性。此外

如何選購細胞培養(yǎng)板？2014/03/19

細胞培養(yǎng)板根據(jù)底部形狀的不同可分為平底和圓底（U型和V細胞培養(yǎng)板型），根據(jù)材質(zhì)的不同的不同有Terasaki板和普通細胞培養(yǎng)板。具體選擇時根據(jù)培養(yǎng)細胞的類型、所需培養(yǎng)體積及不同的實驗?zāi)康亩?。一下為大家介紹細胞培養(yǎng)板的選擇：（1）平底和圓底（U型和V型）培養(yǎng)板的區(qū)別和選擇不同形狀的培養(yǎng)板有不同用途。培養(yǎng)細胞，通常是選用平底的，這樣便于鏡下觀測、有明確的底面積、細胞培養(yǎng)液面高度相對一致。因此做MTT等實驗時，無論是貼壁和懸浮細胞，一般選用平底板。測吸光值一定要使用平底的培養(yǎng)板。要特別注意材質(zhì)，標(biāo)示

多孔培養(yǎng)板邊緣效應(yīng)的產(chǎn)生和解決方法的探討2014/02/28

在進行多孔板尤其是96和384孔板細胞培養(yǎng)時，你可能會發(fā)現(xiàn)細胞在孔板中的位置會影響細胞的生長狀態(tài)，特別是處在周邊以及四個角的孔中細胞通常會表現(xiàn)出分布不均等現(xiàn)象，也就是常說的邊緣效應(yīng)（edgeeffects）。這對我們的實驗造成了很多的不便，特別是對于藥物篩選相關(guān)研究更是無法回避。由于多孔板中四邊孔zui直接與外界環(huán)境接觸，受環(huán)境影響也就zui大。關(guān)于邊緣效應(yīng)的成因，現(xiàn)有的觀點主要有以下兩點：溫度效應(yīng)由于位置效應(yīng)，當(dāng)我們將鋪好的細胞由室溫轉(zhuǎn)移到37℃培養(yǎng)箱時，周邊孔中的細胞更傾向于聚集到相對溫暖的

培養(yǎng)板為什么需要顛倒著放置？2014/02/24

在細菌培養(yǎng)板的存儲以及細菌培養(yǎng)的過程中，培養(yǎng)板總是需要顛倒放置。“培養(yǎng)板為什么需要顛倒著放置”也是很多同學(xué)常問的問題，那么這培養(yǎng)板顛倒放置背后的原因是什么呢？以下為你闡釋：培養(yǎng)板存儲過程中倒置的原因未使用過的培養(yǎng)板在儲存時通常會顛倒著放置，這樣放置的目的是防止長期存儲過程中的蒸發(fā)作用。蒸發(fā)作用可影響培養(yǎng)板的濕度，從而影響細菌的生長效率，并可能導(dǎo)致其他非期望微生物如霉菌的滋生。培養(yǎng)板孵育過程中倒置的原因一旦培養(yǎng)板在經(jīng)菌液涂板過后，需要正置十分鐘左右，稍微蒸騰掉部分水分。但在此后的孵育過程中，培養(yǎng)板

血細胞計數(shù)器的計數(shù)原理及操作流程2014/01/15

細胞培養(yǎng)技術(shù)中，細胞計數(shù)是一項基本功，對于標(biāo)準(zhǔn)化培養(yǎng)條件以及需要定量的實驗來說都非常關(guān)鍵。這里介紹使用血細胞計數(shù)器對細胞進行計數(shù)的經(jīng)典方法以及中間一些需要注意的細節(jié)。制備細胞懸液：對于貼壁生長的細胞，我們需要首先使用胰酶消化的方法使細胞從培養(yǎng)皿表面脫落根據(jù)需要加入合適體積的培養(yǎng)基，將細胞進行中和及稀釋，以得到均質(zhì)的細胞懸液。要求盡可能將細胞吹打散開，不要殘留任何細胞團準(zhǔn)備血細胞計數(shù)器：使用70%乙醇將蓋玻片和血細胞計數(shù)器清潔干凈將將蓋玻片潤濕（使用水或呼一口氣，目的是使蓋玻片與血細胞計數(shù)器接觸更

如何選擇離心管和離心瓶2013/12/27

離心管主要用玻璃、塑料和不銹鋼制成，塑料離心管常用材料有聚乙烯（PE），聚碳酸酯（PC），聚丙烯（PP）等，其中PP管性能較好。塑料離心管的優(yōu)點是透明（或半透明），硬度小，可用穿刺法取出梯度。缺點是易變形，抗有機溶劑腐蝕性差，使用壽命短。不銹鋼管強度大，不變形，能抗熱，抗凍，抗化學(xué)腐蝕。但用時也應(yīng)避免接觸強腐蝕性的化學(xué)藥品，如強酸、強堿等。塑料離心管都有管蓋，離心前管蓋必須蓋嚴，倒置不漏液。管蓋有三種作用：①防止樣品外泄。用于有放射性或強腐蝕性的樣品時，這點尤其重要。②防止樣品揮發(fā)。③支持離心管

粒度分析儀在色釉料中的應(yīng)用2013/12/16

粒度分析儀的推廣應(yīng)用對推動我國色釉料行業(yè)的技術(shù)進步顯然是有積極作用的。在推廣的過程中，也遇到一些問題。zui早用來測量粒度的設(shè)備是標(biāo)準(zhǔn)篩，但是它只能測量一個或幾個粒徑點上的篩余量，不能給出詳細的粒度分布;并且測試的勞動強度大、精度低。后來發(fā)展到用沉降式粒度儀測量，它雖然能夠測得詳細的粒度分布，但操作比較繁瑣、重復(fù)性較差、測量范圍窄。的方法是激光粒度分析儀。由于它具有測量范圍寬、重復(fù)性好、速度快、操作容易等顯著優(yōu)點，非常適合色釉料行業(yè)的使用。一、與傳統(tǒng)篩分法結(jié)果的對比色釉料行業(yè)傳統(tǒng)上用篩分法來檢測

細胞計數(shù)板的操作步驟與注意事項2013/11/30

細胞計數(shù)法是用來計數(shù)細胞懸液中細胞數(shù)量的一種方法。一般利用計數(shù)板（血球計數(shù)板）進行。即可用于分離（散）細胞培養(yǎng)接種前計數(shù)所制備的細胞懸液中的細胞數(shù)量，也可用于對培養(yǎng)物的細胞數(shù)量進行計數(shù)。不論計數(shù)的對象如何，均須制備分散的細胞懸液。一、細胞計數(shù)板的操作步驟1、制備細胞懸液：對于懸液培養(yǎng)的細胞，可直接進行下面的步驟2（計數(shù)與計算過程）。如果計數(shù)對象為貼壁生長的細胞，首先需將培養(yǎng)物按如下步驟制備成細胞懸液。1）、終止培養(yǎng)，將培養(yǎng)液吸出，用PBS洗培養(yǎng)物一次。2）、給培養(yǎng)瓶內(nèi)加入1ml0.25％胰蛋白酶

乾思生物特別推薦美國PSS粒度分析儀2013/11/25

粒度儀是用物理的方法測試固體顆粒的大小和分布的一種儀器。根據(jù)測試原理的不同分為沉降式粒度儀、沉降天平、激光粒度儀、光學(xué)顆粒計數(shù)器、電阻式顆粒計數(shù)器、顆粒圖像分析儀等。美國PSS公司擁有4個系列顆粒檢測分析產(chǎn)品。Nicomp380系列粒度儀采用動態(tài)光散射原理檢測分析亞微米顆粒的粒度和粒度分布，核心技術(shù)包括基于數(shù)字信號處理（DSP）的相關(guān)器及其擁有技術(shù)的更加準(zhǔn)確數(shù)學(xué)算法。強大的相關(guān)器和的算法使得NiComp380系列粒度儀的粒度分布解析度在同類產(chǎn)品中遙遙。NiComp380系列粒度儀采用模塊化設(shè)計，

乾思為您介紹移液管的使用方法2013/10/31

移液管有各種形狀，zui普通的是中部吹成圓柱形，圓柱形以上及以下為較細的管頸，下部的管頸拉尖，上部的管頸刻有一環(huán)狀刻度。移液管為精密轉(zhuǎn)移一定體積溶液時用的。1.使用時，應(yīng)先將移液管洗凈，自然瀝干，并用待量取的溶液少許蕩洗3次。2.然后以右手拇指及中指捏住管頸標(biāo)線以上的地方，將移液管插入供試品溶液液面下約1cm，不應(yīng)伸入太多，以免管尖外壁粘有溶液過多，也不應(yīng)伸入太少，以免液面下降后而吸空。這時，左手拿橡皮吸球（一般用60ml洗耳球）輕輕將溶液吸上，眼睛注意正在上升的液面位置，移液管應(yīng)隨容器內(nèi)液面下

實驗室設(shè)備電動磁力攪拌器使用的正確方式2013/10/16

磁力攪拌器混合機顧名思義是上升到攪拌匯總功能,磁力,當(dāng)然是使用電和磁攪拌努力工作作為驅(qū)動力,但有一個電磁攪拌、電磁攪拌的zui小尺寸像膠囊藥丸,大的像一個筷子。磁攪拌功率越大,孩子越大,需要必須配備大功率磁力攪拌器,但是有些客戶想邊加熱,攪拌,然后磁加熱攪拌器、大功率磁力加熱攪拌器,數(shù)字顯示大功率磁力加熱攪拌器,多工位數(shù)顯大功率磁力加熱攪拌器等,遠遠超過數(shù)以百計的擴展產(chǎn)品。電磁力攪拌器適用于液體粘度不是很大,或固液混合物的工作原理,利用磁場和渦流,具有低工作電壓、功率大、噪音低、運轉(zhuǎn)平穩(wěn)、安全、

3種材質(zhì)離心管各有特點2013/09/26

離心管按照材料一般可以分為:塑料離心管，玻璃離心管，鋼制離心管1、塑料離心管塑料離心管的優(yōu)點是透明或者是半透明的，它的硬度小，可用穿刺法取出梯度。缺點是易變形，抗有機溶劑腐蝕性差，使用壽命短。塑料離心管都有管蓋，它的作用是防止樣品外泄，尤其是用于有放射性或強腐蝕性的樣品時防止樣品外泄是很重要的一點；管蓋還有一個作用是防止樣品揮發(fā)以及支持離心管，防止離心管變形。在挑選這一點的時候還要注意檢查管蓋是否嚴密，在試驗時能否蓋嚴，以到達倒置不漏液；我們都知道在塑料離心管中，常用材料有聚乙烯（PE），聚碳酸

離心管與離心技術(shù)2013/09/16

一、離心管英文名稱：centrifugaltube定義：管狀試樣容器，可帶密封蓋或壓蓋。所屬學(xué)科：機械工程（一級學(xué)科）；實驗室儀器和裝置（二級學(xué)科）；實驗室離心機-實驗室離心機零部件及附件（三級學(xué)科）二、離心管的種類：按體積大小一般分為：大量離心管（500mL、250mL）普通離心管（50mL、15mL）微量離心管（2mL、1.5mL、0.65mL、0.2mL）按照材料一般可以分為塑料離心管，玻璃離心管，鋼制離心管1.塑料離心管塑料離心管主要常用材料有聚乙烯（PE）、聚碳酸酯（PC）、聚丙烯（P

細胞凍存的原理及步驟2013/08/09

細胞凍存0、概要細胞培養(yǎng)的傳代及日常維持過程中，在培養(yǎng)器具、培養(yǎng)液及各種準(zhǔn)備工作方面都需大量的耗費，而且細胞一旦離開活體開始原代培養(yǎng)，它的各種生物特性都將逐漸發(fā)生變化并隨著傳代次數(shù)的增加和體外環(huán)境條件的變化而不斷有新的變化。因此及時進行細胞凍存十分必要。細胞冷凍儲存在-70℃冰箱中可以保存一年之久；細胞儲存在液氮中，溫度達-196℃，理論上儲存時間是無限的。一、細胞凍存原理細胞凍存及復(fù)蘇的基本原則是慢凍快融，實驗證明這樣可以zui大限度的保存細胞活力。目前細胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜作保護劑，

血球計數(shù)板的誤差來源2013/07/29

計算規(guī)則血細胞計數(shù)的誤差分別來源于技術(shù)誤差和固有誤差。其中由于操作人員采血不順利，器材處理、使用不當(dāng)，稀釋不準(zhǔn)確，細胞識別錯誤等因素所造成的誤差屬技術(shù)誤差；而由于儀器（計數(shù)板、蓋片、吸管等）不夠準(zhǔn)確與精密帶來的誤差稱儀器誤差，由于細胞分布不均勻等因素帶來的細胞計數(shù)誤差屬于分布誤差或計數(shù)域誤差（filederror）。儀器誤差和分布誤差統(tǒng)稱為固有誤差或系統(tǒng)誤差。技術(shù)誤差和儀器誤差可通過規(guī)范操作、提高熟練程度和校正儀器而避免或糾正，但細胞分布誤差卻難于*消除。因此，搞好紅細胞計數(shù)的質(zhì)量控制一般需采用

血球計數(shù)板的使用方法2013/07/12

血球計數(shù)板被用以對人體內(nèi)紅、白血球進行顯微計數(shù)之用，也常用于計算一些細菌、真菌、酵母等微生物的數(shù)量，是一種常見的生物學(xué)工具。如何使用血球計數(shù)板。以下做了7點說明：1．視待測菌懸液濃度，加無菌水適當(dāng)稀釋（斜面一般稀釋100倍），以每小格的菌數(shù)可數(shù)為度。2．取潔凈的血球計數(shù)板一塊，在計數(shù)區(qū)上蓋上一塊蓋玻片。3．將菌懸液搖勻，用滴管吸取少許，從計數(shù)板中間平臺兩側(cè)的溝槽內(nèi)沿蓋玻片的下邊緣摘入一小滴（不宜過多），讓菌懸液利用液體的表面張力充滿計數(shù)區(qū)，勿使氣泡產(chǎn)生，并用吸水紙吸去溝槽中流出的多余菌懸液。也可

移液器的滅菌和消毒2013/06/25

分子生物技術(shù)的基礎(chǔ)工具移液器的使用中，消毒與滅菌的概念常常是被混用的。兩者差別在于：消毒只要求使移液器上的活菌控制在一定范圍內(nèi)，達到無害化水平，而滅菌則要求消滅所有活菌。滅菌的處理要求高于消毒。1．化學(xué)消毒。簡單說來，就是用酒精等擦拭移液器的外表面，然后晾干即可。這對于所有移液器品牌而言都應(yīng)該是可以做到的，否則其外殼的材質(zhì)也太差了！2．紫外線消毒。用紫外線照射移液器的表面，通過破壞細胞的DNA結(jié)構(gòu)來達到消毒的目的。紫外線消毒的時間取決于輻射強度和細菌對紫外線的抵抗力的強弱。多數(shù)品牌的移液器是可以

移液器的使用小技巧2013/06/13

移液器的的操作是有一些竅門的，如何選擇量程和控制吸液方面的操作是困擾操作新手的幾個常見問題，下面是重點注意事項：1.安裝吸頭：在移液器的套柄zui下端進入吸頭后，如果在吸頭盒內(nèi)操作，在輕輕向下壓的同時左右晃動移液器或稍稍轉(zhuǎn)動移液器（僅單道移液器可旋轉(zhuǎn)）1-2秒即可;如果是用散裝吸頭，在用手把吸頭往移液器方向輕輕施壓的同時稍稍轉(zhuǎn)動吸頭1-2秒即可。如果這種操作不能達到理想的密封性，就需要檢查吸頭和移液器了。2.選擇量程：總體來看，移液器的可用量程范圍是移液器zui大量程的10-100%。根據(jù)操作經(jīng)

酶標(biāo)儀的常見故障分析與解決2013/05/16

一、常見故障1、打印機不工作v酶標(biāo)儀后部DIL開關(guān)設(shè)置不正確。v酶標(biāo)儀內(nèi)置打印機開關(guān)處于開的位置。在總參數(shù)中設(shè)置內(nèi)置打印機為關(guān)。v打印機無紙或紙未裝好，請裝好打印紙。v打印機未聯(lián)機，請確認打印機上的聯(lián)機鍵已聯(lián)機v打印機接口接錯（接在了計算機接口上了）。應(yīng)將打印機接在DIL開關(guān)正下方的打印機接口上，RS-232接口為計算機接口。v打印機聯(lián)線有問題：有些配備的新打印機聯(lián)線仍有問題，請確保打印機聯(lián)線無問題。v打印機有開機順序，需先開打印機，后開儀器；有的需先開儀器，后開打印機。2、調(diào)不出所編輯程序如在