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如何正確的使用胎牛血清2021/11/12: 胎牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)重要的培養(yǎng)基且不可替代，它是采自5-8個(gè)月胎齡牛胚胎中的胎血。此時(shí)胎牛各臟器正處生長分化階段，血中含有豐富的生長發(fā)育因子，非常適合各種細(xì)胞的培養(yǎng)。因此，如何在使用過程中保護(hù)這些因子的活性，達(dá)到最大的細(xì)胞培養(yǎng)效果，就需要正確地使用胎牛血清。正確地使用胎牛血清可分為以下四個(gè)方面：1.正確儲(chǔ)存，避免反復(fù)凍融1)血清在-20°C凍存。2)血清避免反復(fù)凍融，以免降低因子活性。如一次用不完，應(yīng)進(jìn)行分裝。3)血清和培養(yǎng)基應(yīng)盡可能“現(xiàn)用現(xiàn)配”，配好的培養(yǎng)液，應(yīng)于一周內(nèi)用完。4)血清避免在4°C

胎牛血清的這些指標(biāo)你都知道嗎？2021/11/11: 牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中用量最大的天然培養(yǎng)基，含有豐富的細(xì)胞生長必須的營養(yǎng)成份，常用于動(dòng)物細(xì)胞的體外培養(yǎng)，具有極為重要的功能。1.提供對(duì)維持細(xì)胞指數(shù)生長的激素，基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物，以及主要的低分子營養(yǎng)物。2.提供結(jié)合蛋白，能識(shí)別維生素、脂類、金屬和其他激素等，能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力。3.有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合，起到解毒作用。4.是細(xì)胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來源。5.起酸堿度緩沖液作用。6.提供蛋白酶抑制劑，使在細(xì)胞傳代時(shí)使剩余胰蛋白酶失活，保護(hù)

胎牛血清與新生牛血清的三大區(qū)別2021/11/10: 胎牛血清是實(shí)驗(yàn)室里細(xì)胞培養(yǎng)中用量最大的天然培養(yǎng)基，因?yàn)樘ヅ奈唇佑|過外界，而使得其血清中所含的抗體和補(bǔ)體幾乎沒有對(duì)細(xì)胞有害的成分。并且高質(zhì)量的胎牛血清含有的豐富營養(yǎng)成分可以滿足細(xì)胞生長需求，在應(yīng)用于動(dòng)物細(xì)胞的體外培養(yǎng)中發(fā)揮出重要作用。那么為什么人們一定要用胎牛血清而不用新生牛血清呢？想知道兩者之間都有哪些區(qū)別不妨看看以下歸納的幾點(diǎn)內(nèi)容：1、來源不同胎牛顧名思義就是指還在母牛身體里的小牛，所以胎牛血清的采集工作，便是先從懷孕中的母牛身體里取出胎牛。之后人們?cè)谖窗l(fā)育*的胎牛的心臟進(jìn)行穿刺取血，完成采

細(xì)胞培養(yǎng)中出現(xiàn)小黑點(diǎn)是什么原因？2021/11/09: 在細(xì)胞培養(yǎng)中常可見到細(xì)胞及培養(yǎng)液中有一些大小不等、形態(tài)不同的黑色未知顆粒，去網(wǎng)上搜和請(qǐng)教師哥師姐得到的答案也多種多樣。那么這些小黑點(diǎn)究竟是什么那？我們又該怎么去應(yīng)對(duì)這種情況那？小黑點(diǎn)都有哪些說法？非生物類細(xì)胞碎片類在細(xì)胞培養(yǎng)的時(shí)候，由于細(xì)胞代謝、物質(zhì)交換、周邊環(huán)境變化，尤其是在從37度培養(yǎng)箱中拿出來觀察的過程中，由于液體培養(yǎng)基的比熱較大，液內(nèi)溫度高于外界溫度，造成冷熱交換、小范圍內(nèi)形成液體流動(dòng)加劇，當(dāng)然這些小碎末就會(huì)被攪動(dòng)起來形成似乎“游動(dòng)”的感覺；隨著細(xì)胞培養(yǎng)的繼續(xù)，部分細(xì)胞開始衰亡，細(xì)胞膜結(jié)

養(yǎng)細(xì)胞需要注意的細(xì)節(jié)有哪些？2021/11/08: 養(yǎng)細(xì)胞可謂是個(gè)精細(xì)活，從事養(yǎng)細(xì)胞的人都知道養(yǎng)細(xì)胞的時(shí)候一旦不注意，就很容易造成細(xì)胞污染，所以想要養(yǎng)好細(xì)胞除了小心謹(jǐn)慎以外，還要提前做好準(zhǔn)備：細(xì)胞培養(yǎng)前的準(zhǔn)備1）在帶上手套開始細(xì)胞培養(yǎng)之前,先檢查一下移液管和瓶子的數(shù)量是否充足,以免在開始實(shí)驗(yàn)后再次出入操作臺(tái)，這樣可以降低細(xì)胞污染的風(fēng)險(xiǎn)。2）細(xì)胞培養(yǎng)基也應(yīng)先預(yù)熱,選擇只預(yù)熱部分培養(yǎng)基而非整瓶加熱,不但可以節(jié)約實(shí)驗(yàn)時(shí)間,而且可以避免因反復(fù)加熱培養(yǎng)基而造成的蛋白質(zhì)降解。3）結(jié)束操作后,別忘了培養(yǎng)基對(duì)光敏感,應(yīng)盡可能避光保存。細(xì)胞培養(yǎng)的定期檢查1）定期檢

細(xì)胞培養(yǎng)小常識(shí)2021/11/05: 切記，細(xì)胞培養(yǎng)基的儲(chǔ)存條件是2-8℃。如果細(xì)胞培養(yǎng)基不小心被凍，您應(yīng)該融化培養(yǎng)基并觀察是否有沉淀產(chǎn)生。如果沒有沉淀產(chǎn)生，培養(yǎng)基可以正常使用，如果出現(xiàn)沉淀，只能丟棄這些培養(yǎng)基。2.貯存在冰箱中的瓶口已開的培養(yǎng)基，可能在放置幾天后顏色變紫。這主要是由于在暴露到周圍的CO2水平時(shí)，碳酸氫鈉導(dǎo)致了pH值的上升。您可以在使用前松開瓶口，在CO2培養(yǎng)箱孵育培養(yǎng)基10-15min，來校正溶液的pH值(確定松開瓶口以保證氣體交換)。3.當(dāng)在無血清培養(yǎng)基中添加抗生素時(shí)，降低至少在有血清培養(yǎng)基中所使用濃度的50%。

原代細(xì)胞如何培養(yǎng)？2021/11/04: 原代細(xì)胞培養(yǎng)的應(yīng)用1、為研究生物體細(xì)胞的生長、代謝、繁殖提供有力的手段;2、為傳代培養(yǎng)創(chuàng)造條件;3、服務(wù)于臨床實(shí)踐，用于藥物篩選等。原代細(xì)胞培養(yǎng)之取材取材作為原代細(xì)胞培養(yǎng)過程中的第一部至關(guān)重要，以下幾種取材技術(shù)，你都用過哪些方法呢？各類組織取材，操作及注意事項(xiàng)：1.皮膚和粘膜主要取皮片，面積一般2~4平方厘米。2.內(nèi)臟和實(shí)體瘤1）無菌環(huán)境；2）熟悉所需組織的類型和部位；3）要避開破潰、壞死液化部分，以防污染，盡量去除混雜的結(jié)締組織。3.血液細(xì)胞一般多抽取靜脈外周血，或從淋巴組織中(如脾、扁桃體、

【干貨】胎牛血清的使用方法，你都了解嗎？2021/11/03: 血清是細(xì)胞培養(yǎng)中外源添加的成分不確定的物質(zhì)，血清的質(zhì)量對(duì)實(shí)驗(yàn)成敗起著關(guān)鍵性作用，但血清使用不當(dāng)也可能會(huì)導(dǎo)致血清質(zhì)量下降，造成細(xì)胞培養(yǎng)效果不理想。今天來給大家聊聊血清使用中的一些疑惑，幫助大家理清頭緒，實(shí)驗(yàn)開展順順利利。怎樣確定血清使用濃度？這個(gè)只能通過測試了。原則上血清添加量不要太多，通常分為5%、10%、20%幾檔。部分細(xì)胞原代提取時(shí)會(huì)使用20%血清，大部分細(xì)胞正常培養(yǎng)時(shí)會(huì)使用5%～10%的血清濃度。至于某一株細(xì)胞適應(yīng)什么樣的血清濃度，還需要根據(jù)細(xì)胞特性、實(shí)驗(yàn)?zāi)康淖鰷y試和調(diào)校。血清使用前需要離

大/小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的分離方法（二）2021/11/02: 目前用于分離BMSCs的方法主要有五種，分別是貼壁篩選法、骨組織消化法、密度梯度離心法、免疫磁珠分選法和流式細(xì)胞儀分離法。上篇我們介紹了貼壁篩選法、骨組織消化法的原理和特點(diǎn)，這篇就和大家介紹其他三種分離方法：密度梯度離心法、免疫磁珠分選法和流式細(xì)胞儀分離法，一起為您的實(shí)驗(yàn)挑選合適的分離方法吧！01密度梯度離心法密度梯度離心法是針對(duì)骨髓中不同細(xì)胞的大小和密度差異進(jìn)行分選，骨髓細(xì)胞懸液加入到密度梯度離心液上面，通過離心使得不同類型細(xì)胞沉降至其等密度點(diǎn)，然后吸取特定位置富集的細(xì)胞。常見的梯度離心液有F

大/小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的分離方法（一）2021/11/01: 二十世紀(jì)七十年代，F(xiàn)riedenstein從骨髓中分離出一種多能基質(zhì)細(xì)胞，呈梭形，可以進(jìn)行體外克隆和多向分化，被稱為CFU－Fs(colony－formingunitfibro-blasts)。隨后，這種骨髓來源的基質(zhì)細(xì)胞被進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)是間葉組織細(xì)胞譜系的共同前體細(xì)胞，因其具有干細(xì)胞的部分特性，而被命名為骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)。BMSCs來源方便，易于分離、培養(yǎng)、擴(kuò)增和純化，多次傳代擴(kuò)增后仍具有干細(xì)胞特性，免疫原性低。但是不同的分離培養(yǎng)方法使得BMSCs在體外擴(kuò)增時(shí)的純度、活性、表型和分化

還怕細(xì)胞量不夠嗎？細(xì)胞傳代操作無保留傳授！2021/10/29: 細(xì)胞傳代培養(yǎng)是細(xì)胞培養(yǎng)常規(guī)保種方法之一，也是幾乎所有細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)。當(dāng)細(xì)胞隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長和細(xì)胞不斷分裂，細(xì)胞之間相互接觸而發(fā)生接觸性抑制，生長速度減慢甚至停止，且也會(huì)因營養(yǎng)物不足和代謝物積累而不利于細(xì)胞生長或發(fā)生中毒。因此，細(xì)胞在培養(yǎng)瓶中長滿后就需要將其稀釋，分種成多瓶，細(xì)胞才能繼續(xù)生長。這一過程就叫傳代。細(xì)胞傳代作為一種常規(guī)的實(shí)驗(yàn)操作，不但可以擴(kuò)大細(xì)胞培養(yǎng)的數(shù)量，同時(shí)也可以避免細(xì)胞因進(jìn)入平臺(tái)期乃至衰亡期而大量死亡的窘境。所以為了讓細(xì)胞保持在對(duì)數(shù)生長期，維持細(xì)胞旺盛的分裂能力，這時(shí)候就

ELISA試劑盒技術(shù)指南2021/10/28: 1、ELISA試驗(yàn)的穩(wěn)定性問題?做ELISA實(shí)驗(yàn)時(shí)，結(jié)果老是重復(fù)性不上，相同的材料和相同的操作方法做出的結(jié)果就截然不同，上午做時(shí)其OD在1.5，下午做時(shí)就是0.9了，所以都沒有辦法下結(jié)論，為什么會(huì)差異這么大呀？?（1）多設(shè)平行空孔，?請(qǐng)別人代勞，以判斷究竟是否操作問題?（2）對(duì)于活性非常高的包被物和酶標(biāo)記物，如果第一次選擇的范圍恰好在其平臺(tái)位置邊緣，那么在重復(fù)的時(shí)候，每次取樣帶來的微量誤差就很容易導(dǎo)致大的偏差了，特別是線性比較好的原料試劑，這個(gè)就很正常了。建議每次取樣的時(shí)候只使槍尖一點(diǎn)點(diǎn)位于液面

ELISA的原理及基本類型2021/10/27: Elisa生物試驗(yàn)是一種敏感性高，特異性強(qiáng)，重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)診斷方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存，操作簡便，結(jié)果判斷較客觀等因素，已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢驗(yàn)的各領(lǐng)域中。ELISA檢測試劑盒適用于體外定性檢測人血清或血漿中的抗人類戊型肝炎（HEV）病毒IgM抗體ELISA檢測。本文將通過一下幾點(diǎn)詳細(xì)的闡述Elisa試劑盒：1.Elisa的原理2.Elisa的類型Elisa的原理：ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性，酶標(biāo)記的抗原或抗體既保

外泌體研究常見問題匯總2021/10/26: 外泌體（Exosome）發(fā)現(xiàn)于1986年，是一種直徑約30~100nm的雙層膜囊泡狀結(jié)構(gòu)小體，可由機(jī)體內(nèi)多種細(xì)胞如免疫細(xì)胞、干細(xì)胞、心血管細(xì)胞、網(wǎng)織紅細(xì)胞、血小板、神經(jīng)細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞等主動(dòng)分泌產(chǎn)生，廣泛分布于外周血、尿液、唾液、乳汁、腹水、羊水等體液中。外泌體攜帶大量特異性的蛋白質(zhì)（如細(xì)胞因子、生長因子）以及功能性的mRNAs、miRNAs等生物活性物質(zhì)，在體內(nèi)參與細(xì)胞通訊、細(xì)胞遷移、促血管新生和抗腫瘤免疫等生理過程，與多種疾病的發(fā)生和進(jìn)程密切相關(guān)。由于外泌體的特殊結(jié)構(gòu)和功能，使得它具有潛在的應(yīng)

細(xì)胞長不好的原因與解答！2021/10/25: 培養(yǎng)細(xì)胞不貼壁可能原因1.胰蛋白酶消化過度；2.支原體污染；3.培養(yǎng)基pH值過堿（NaHCO3分解）；4.細(xì)胞老化；5.接種細(xì)胞起始濃度太低或太高。解決方法1.縮短胰蛋白酶消化時(shí)間或降低胰蛋白酶濃度；2.分離培養(yǎng)物，檢測支原體。清潔支架或培養(yǎng)箱。如發(fā)現(xiàn)支原體污染，丟棄培養(yǎng)物；3.使用無菌醋酸溶液調(diào)整pH值或充入無菌CO2；4.啟用新的保種細(xì)胞；5.調(diào)節(jié)最佳接種細(xì)胞濃度。懸浮細(xì)胞成簇可能原因1.培養(yǎng)液中含鈣,鎂離子；2.支原體污染；3.蛋白酶過度消化使得細(xì)胞裂解；4.DNA污染。解決方法1.用無鈣

細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞凍存注意事項(xiàng)2021/10/22: 一、怎樣凍存動(dòng)物細(xì)胞?一個(gè)實(shí)驗(yàn)室得到一個(gè)新的細(xì)胞株后，首先要把該細(xì)胞株培養(yǎng)擴(kuò)增后凍存起來。細(xì)胞凍存首先可以在由于污染等情況丟失細(xì)胞時(shí)有備份可用，另外幾乎所有細(xì)胞在培養(yǎng)傳代的過程中發(fā)生一定程度的變異，為了保持實(shí)驗(yàn)結(jié)果的一致，一般細(xì)胞在培養(yǎng)幾十代以后就不能再使用了，需要將凍存的，傳代較少的細(xì)胞化凍培養(yǎng)再使用。細(xì)胞冷凍過程有四個(gè)要點(diǎn)：細(xì)胞的收獲、保護(hù)劑的使用、冷凍速率和儲(chǔ)存環(huán)境。(1)細(xì)胞的收獲用來凍存的細(xì)胞一般選擇在細(xì)胞約鋪滿90%的時(shí)候，這時(shí)細(xì)胞生長狀態(tài)好，細(xì)胞數(shù)量也多，并且在收獲細(xì)胞前24小時(shí)換

優(yōu)秀的胎牛血清讓你的細(xì)胞更有活力2021/10/21: 血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復(fù)雜的混合物，其組成成份雖大部分已知，但還有一部分尚不清楚，且血清組成及含量常隨供血?jiǎng)游锏男詣e、年齡、生理?xiàng)l件和營養(yǎng)條件不同而異。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、激素、無機(jī)物等，這些物質(zhì)對(duì)促進(jìn)細(xì)胞生長或抑制生長活性是達(dá)到生理平衡的。牛血清提供基本營養(yǎng)物質(zhì)：氨基酸、維生素、無機(jī)物、脂類物質(zhì)、核酸衍生物等，是細(xì)胞生長必須的物質(zhì)。提供激素和各種生長因子：胰島素、腎上腺皮質(zhì)激素（地塞米松）、類固醇激素（雌二醇、睪酮、孕酮）等。生長因子如成纖

常用培養(yǎng)基的介紹2021/10/20: 1、RPMI-1640MediumRPMI-1640廣泛應(yīng)用于哺乳動(dòng)物、特殊造血細(xì)胞、正?；驉盒栽錾陌准?xì)胞，雜交瘤細(xì)胞的培養(yǎng)，是目前應(yīng)用十分廣泛的培養(yǎng)基。主要用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)。其它像K-562、HL-60、Jurkat、Daudi、IM-9等成淋巴細(xì)胞、T細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞以及HCT-15上皮細(xì)胞等均可參考使用。2、MinimumEssentialMedium（MEM）也稱低必需培養(yǎng)基，它僅含有12種必需氨基酸、谷氨酰胺和8種維生素。成分簡單，可廣泛適應(yīng)各種已建成細(xì)胞系和不同地方的哺乳動(dòng)物細(xì)胞類型

【干貨】細(xì)胞培養(yǎng)基的常見問題匯總2021/10/18: 培養(yǎng)基是細(xì)胞培養(yǎng)中*的營養(yǎng)成分，但是最基礎(chǔ)的培養(yǎng)基卻給實(shí)驗(yàn)者帶來了一系列的問題。別小看細(xì)胞培養(yǎng)，這里可蘊(yùn)含著大學(xué)問。1.怎樣查到一個(gè)特定細(xì)胞株的相關(guān)知識(shí)和培養(yǎng)條件？ATCC（AmericanTypeCultureCollection）收集了絕大多數(shù)細(xì)胞的詳細(xì)資料。打開ATCC網(wǎng)頁的Cellsａndhybridomas鏈接，輸入細(xì)胞名稱就可以搜索ATCC的細(xì)胞數(shù)據(jù)庫。數(shù)據(jù)庫中有每一種細(xì)胞的詳細(xì)描述，包括細(xì)胞的來源，培養(yǎng)和凍存條件，以及相關(guān)文獻(xiàn)等資料。2.如何選用特殊細(xì)胞系培養(yǎng)基？培養(yǎng)某類型細(xì)胞沒有

這些細(xì)胞培養(yǎng)的常識(shí)，你掌握了嗎？2021/10/15: 1.如何選擇培養(yǎng)基？培養(yǎng)某一類型細(xì)胞沒有固定的培養(yǎng)條件。在MEM中培養(yǎng)的細(xì)胞，很可能在DMEM或M199中同樣很容易生長?？傊?，MEM做粘附細(xì)胞培養(yǎng)、RPMI-1640做懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，各種目的無血清培養(yǎng)的是AIMV培養(yǎng)基（SFM）。2.為什么要熱滅活血清？加熱可以滅活補(bǔ)體系統(tǒng)。激活的補(bǔ)體參與溶解細(xì)胞事件，刺激平滑肌收縮，細(xì)胞和血小板釋放組胺，激活淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞。在進(jìn)行免疫學(xué)研究、培養(yǎng)ES細(xì)胞、昆蟲細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞時(shí)，推薦使用熱滅活血清。3.L-谷氨酰胺在細(xì)胞培養(yǎng)中重要嗎？它在溶液中不穩(wěn)定嗎？

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