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上海源葉生物科技有限公司
初級(jí)會(huì)員 | 第16年
肉毒梭菌中毒癥病原學(xué)與流行病學(xué)特征2011/01/12
肉毒梭菌中毒癥（botulism）是由肉毒毒素進(jìn)入機(jī)體后引起人和多種動(dòng)物的一種以運(yùn)動(dòng)神經(jīng)麻痹為特征的中毒性疾病。該病在*均有分布，動(dòng)物的發(fā)病多數(shù)是由于食入含有毒素的高蛋白腐敗性飼料所致。肉毒梭菌（Ctostridiumbotulinum）是兩端鈍圓的大桿菌，革蘭染色陽(yáng)性。無(wú)莢膜，可在自然界形成芽孢。它是嚴(yán)格厭氧菌，在厭氧肉肝湯中加入新鮮肝塊才能旺盛生長(zhǎng)。在血液瓊脂表面的菌落呈圓形或不規(guī)則形狀，半透明、灰白色，表面扁平或微凸，邊緣呈葉狀、扇貝狀或樹根狀，具有日型溶血。在繁殖過程中該菌可產(chǎn)生毒力*的
豬瘟病原學(xué)2011/01/12
豬瘟（hogcholera，HC）俗稱爛腸瘟，歐洲人稱為古典豬瘟（classicalswinefever，CSF）。豬瘟與非洲豬瘟具有相同的癥狀，但兩者的病原不同。該病是由豬瘟病毒（RNA病毒）引起的一種具有高度傳染性和致死性的傳染病。HCV感染在臨床上可表現(xiàn)為死亡率很高的急性型，或者死亡率變化不定的亞急性型、慢性型以及隱性型。其特征是急性型高熱稽留呈敗血性變化，小血管變性而引起各器官的廣泛性出血、梗死和壞死等表現(xiàn)。豬瘟的流行廣泛，發(fā)病率、死亡率高。豬瘟1810年首先發(fā)現(xiàn)于美國(guó)，在我國(guó)也已流行多
DNA為基礎(chǔ)的方法檢測(cè)飼料中的動(dòng)物源性2011/01/08
以檢測(cè)DNA為基礎(chǔ)的方法主要有核酸探針雜交、DNA指紋分析、PCR-RFLP分析、PCR特異擴(kuò)增（常規(guī)PCR方法和Real-timePCR方法）。其主要原理都是對(duì)各物種內(nèi)特異的核酸序列進(jìn)行提取、鑒定，從而判定飼料內(nèi)有無(wú)該物種的成分，只是結(jié)果判別的信號(hào)條件不同。核酸探針雜交方法的原理是堿基配對(duì)，即一條DNA鏈能與它的特異互補(bǔ)鏈配對(duì)形成雙鏈DNA。因此，用一個(gè)熒光物質(zhì)或放射性物質(zhì)標(biāo)記的單鏈核苷酸探針能夠很快地從許多其他DNA分子的混合物中檢測(cè)出它的互補(bǔ)單鏈。由于雜交探針需要用熒光物質(zhì)或放射性物質(zhì)進(jìn)行
近紅外光譜方法檢測(cè)飼料中的動(dòng)物源性成分02011/01/08
近紅外光譜測(cè)定（NIRS）是飼料界zui廣泛應(yīng)用的技術(shù)之一，可以將它用于飼料中動(dòng)物源性成分的檢測(cè)。NIRS的原理是飼料中的分子物質(zhì)可以吸收不同波長(zhǎng)的光線。其優(yōu)點(diǎn)是檢測(cè)快速，不使用有害的試劑，所需樣品量少，為非破壞性檢測(cè)，經(jīng)濟(jì)重復(fù)性好以及具有可以開發(fā)為商業(yè)化的儀器的潛力。主要缺點(diǎn)是這項(xiàng)技術(shù)是間接檢測(cè)，因此需要大量樣品的參考值來(lái)形成一個(gè)校正和參考模型。目前，世界上許多國(guó)家特別是歐盟國(guó)家，為了防止瘋牛病已制定了各種法律來(lái)確保飼料的生物安全，主要是控制動(dòng)物源性成分在飼料中的應(yīng)用，禁止在反芻動(dòng)物的飼料中添
5種磺胺類藥物殘留的液相色譜2011/01/08
（1）試劑和材料除特別注明外，所用試劑均為分析純；水為超純水。①磺胺類藥物對(duì)照晶（SMM、SDM、SMz、SMZ和SQ）②甲醇色譜純③乙腈色譜純④正己烷⑤正丙醇⑥無(wú)水硫酸鈉⑦堿性氧化鋁SPE柱每根柱填料量為28⑧磺胺類藥物貯備液（1mg／mi）分別取上述磺胺類藥物對(duì)照晶各約50mg，精密稱定，置同一50ml量瓶，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得。置一20~C以下冰箱中保存，有效期3個(gè)月。⑨磺胺類藥物工作液（5Ps／mi）精密量取磺胺類藥物貯備液o．5ml，置100ml量瓶，用甲醇稀釋至刻度，搖
恩諾沙星和環(huán)丙沙星殘留檢驗(yàn)的液相色譜法2011/01/08
（1）試劑和材料以下所用的試劑，除特別注明外均為分析純?cè)噭?，水為符合GB／T6682規(guī)定的二級(jí)水。①環(huán)丙沙星含環(huán)丙沙星不得少于99．0％②恩諾沙星含環(huán)丙沙星不得少于99．0％③乙腈：色譜純④三乙胺⑤氫氧化鈉⑥磷酸二氫鉀⑦磷酸⑧5．0mot兒氫氧化鈉溶液：取氫氧化鈉飽和溶液14ml，加水稀釋到100ml；⑨0．03mot／L氫氧化鈉溶液：取5．0mol／L氫氧化鈉溶液o．6ml，加水稀釋到100ml。⑩0．05mol／L磷酸／三乙胺溶液（pH2．4）：取85％的磷酸3．4ml，加水稀釋到1000m
氣相色譜法測(cè)定氯霉素CAP殘留32011/01/08
（1）試劑和材料除另有規(guī)定外所有試劑均為分析純，水為蒸餾水或相當(dāng)?shù)娜ルx子水。①乙酸乙酯：重蒸餾②甲醇：重蒸餾③正己烷：重蒸餾④丙酮：重蒸餾⑤硅烷化試劑：3ml六甲基⑥氯化鈉水溶液：1mol／L⑦氯霉素標(biāo)準(zhǔn)品：含量≥99．5％⑧氯霉素標(biāo)準(zhǔn)溶液：準(zhǔn)確稱取適量的氯霉素標(biāo)準(zhǔn)晶，用丙酮配成o．10rug／mi的貯備液，根據(jù)需要稀釋成適當(dāng)濃度的標(biāo)準(zhǔn)工作液。（2）儀器和設(shè)備①氣相色譜儀：配有電子俘獲檢測(cè)器②均質(zhì)器③離心機(jī)：3000r／mtn④多功能微量化學(xué)樣品處理儀或其他相當(dāng)?shù)膬x器⑤具塞離心管：5ml⑥離心管
酶聯(lián)免疫吸附法（EIASA）測(cè)定克倫特羅殘留22011/01/08
（1）試劑和材料以下所有試劑，除特別注明外，均為分析純?cè)噭?；水為符合GB／T6682規(guī)定的二級(jí)水。①鹽酸克倫特羅對(duì)照品：含鹽酸克倫特羅不得少于98．5％②鹽酸③無(wú)水甲醇④氫氧化鈉⑤磷酸二氫鉀⑥磷酸⑦鹽酸溶液取鹽酸4．2ml，加水至1000ml，即得。⑧o．5mol／L磷酸二氫鉀溶液取磷酸二氫鉀68g，加水800ml溶解并用磷酸調(diào)pH值至3．O，用水稀釋至1000ml，即得。⑨0．05mol幾磷酸二氫鉀溶液取磷酸二氫鉀6．88，加水800ml溶解并用磷酸調(diào)pH值至3．0，用水稀釋至1000mi，即
酶聯(lián)免疫吸附法（EIASA）測(cè)定克倫特羅殘留02011/01/08
（1）試劑和材料以下所有試劑，除特別注明外，均為分析純?cè)噭?；水為符合GB／T6682規(guī)定的二級(jí)水。①鹽酸克倫特羅對(duì)照品：含鹽酸克倫特羅不得少于98．5％②鹽酸③無(wú)水甲醇④氫氧化鈉⑤磷酸二氫鉀⑥磷酸⑦鹽酸溶液取鹽酸4．2ml，加水至1000ml，即得。⑧o．5mol／L磷酸二氫鉀溶液取磷酸二氫鉀68g，加水800ml溶解并用磷酸調(diào)pH值至3．O，用水稀釋至1000ml，即得。⑨0．05mol幾磷酸二氫鉀溶液取磷酸二氫鉀6．88，加水800ml溶解并用磷酸調(diào)pH值至3．0，用水稀釋至1000mi，即
間接凝集反應(yīng)2011/01/08
將可溶性抗原（或抗體）先吸附于適當(dāng)大小的顆粒性載體的表面，然后與相應(yīng)抗體（或抗原）作用，在適宜的電解質(zhì)存在的條件下，出現(xiàn)特異性凝集現(xiàn)象，稱間接凝集反應(yīng)（indirectagglutination）或被動(dòng)凝集反應(yīng)（passiveagglutination）。由于這種反應(yīng)適用于各種抗體和可溶性抗原的檢測(cè)，其敏感度高于沉淀反應(yīng)，因此被廣泛應(yīng)用于臨床檢驗(yàn)。根據(jù)致敏載體用的是抗原或抗體以及凝載體顆粒集反應(yīng)的方式，間接凝集反應(yīng)可分為以下4類1．正向間接凝集反應(yīng)用抗原致敏載體以檢測(cè)標(biāo)本中的相應(yīng)抗體。2．反向用
免疫濁度技術(shù)基本原理2011/01/08
免疫濁度技術(shù)是利用可溶性抗原、抗體在液相中特異結(jié)合，形成一定大小的抗原抗體復(fù)合物，使反應(yīng)液出現(xiàn)濁度。當(dāng)反應(yīng)液中保持抗體過剩時(shí)，形成的復(fù)合物隨抗原量增加而增加，反應(yīng)液的濁度亦隨之增加，與一系列的標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)照，即可計(jì)算出樣品的含量。免疫濁度分析的光學(xué)基礎(chǔ)是反應(yīng)液中分散粒子對(duì)光的反射、折射、散射（衍射）和吸收等。粒子被光照射后而發(fā)光，這一現(xiàn)象主要取決于粒子的大小、入射光波長(zhǎng)及粒徑與波長(zhǎng)的比例關(guān)系等等。當(dāng)入射光作用于粒子后向各個(gè)方向發(fā)射光，甚至可繞過粒子發(fā)射光線，稱散射或衍射光。但光照射到膠體溶液后，粒子
免疫濁度技術(shù)與應(yīng)用2011/01/08
自1897年Kraus發(fā)現(xiàn)沉淀反應(yīng)以來(lái)，直到1946年才由Budin等完善了凝膠內(nèi)定量測(cè)定方法（即單向擴(kuò)散技術(shù)）。但由于其操作繁瑣、敏感度低、費(fèi)時(shí)及不能自動(dòng)化而趨于淘汰。免疫濁度測(cè)定是沉淀反應(yīng)的一種形式，它是在液相中的沉淀反應(yīng)。這類技術(shù)不僅提高了靈敏度和易操作性，而且簡(jiǎn)便快速，易于自動(dòng)化。目前國(guó)內(nèi)外已研制開發(fā)出多種免疫濁度測(cè)定的自動(dòng)化分析儀器并已廣泛用于臨床各種體液蛋白質(zhì)、激素和藥物濃度等測(cè)定。免疫濁度技術(shù)的應(yīng)用免疫濁度技術(shù)早期主要用于血清、尿和腦脊液中蛋白質(zhì)含量的測(cè)定。近10年來(lái)，隨著現(xiàn)代科學(xué)
鹽析法分離與純化蛋白質(zhì)注意2011/01/06
1）鹽的飽和度：鹽的飽和度是影響蛋白質(zhì)鹽析的重要因素，不同蛋白質(zhì)的鹽析要求鹽的飽和度不同。分離幾個(gè)混合組分的蛋白質(zhì)時(shí)，鹽的飽和度常由稀到濃漸次增加，每出現(xiàn)一種蛋白質(zhì)沉淀進(jìn)行離心或過濾分離后，再繼續(xù)增加鹽的飽和度，使第二種蛋白質(zhì)沉淀。例如用硫酸銨鹽析分離血漿中的蛋白質(zhì)，飽和度達(dá)20%時(shí)，纖維蛋白原首先析出；飽和度增至28%～33%時(shí)，優(yōu)球蛋白析出；飽和度再增至33%～50%時(shí)，擬球蛋白析出；飽和度大于50%以上時(shí)，白蛋白析出。用硫酸銨不同飽和度分段鹽析法，從牛胰中酸性提取分離可得到九種以上蛋白質(zhì)及
鹽析法分離與純化蛋白質(zhì)注意的幾個(gè)問題2011/01/06
）鹽的飽和度：鹽的飽和度是影響蛋白質(zhì)鹽析的重要因素，不同蛋白質(zhì)的鹽析要求鹽的飽和度不同。分離幾個(gè)混合組分的蛋白質(zhì)時(shí)，鹽的飽和度常由稀到濃漸次增加，每出現(xiàn)一種蛋白質(zhì)沉淀進(jìn)行離心或過濾分離后，再繼續(xù)增加鹽的飽和度，使第二種蛋白質(zhì)沉淀。例如用硫酸銨鹽析分離血漿中的蛋白質(zhì)，飽和度達(dá)20%時(shí)，纖維蛋白原首先析出；飽和度增至28%～33%時(shí)，優(yōu)球蛋白析出；飽和度再增至33%～50%時(shí)，擬球蛋白析出；飽和度大于50%以上時(shí)，白蛋白析出。用硫酸銨不同飽和度分段鹽析法，從牛胰中酸性提取分離可得到九種以上蛋白質(zhì)及酶
《科學(xué)》年度進(jìn)展被疑造假遭撤銷2011/01/06
一篇在2005年被認(rèn)為是“重要研究突破”（見下）的Science文章5位作者中的4位提出要撤銷此文，原因是其中的數(shù)據(jù)不可重復(fù)，但他們也否認(rèn)有任何不端行為。植物研究豐收:幾個(gè)有關(guān)植物開花和其它神秘或驚人特征的關(guān)鍵的分子線索在2005年被揭示。比如，植物分子生物學(xué)家找到了啟動(dòng)植物季節(jié)性發(fā)育的信號(hào)。另一項(xiàng)研究的重點(diǎn)是涉及刺激開花的基因，還有一項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)了令人驚異的隱藏的RNA。這篇主要針對(duì)植物啟動(dòng)開花時(shí)mRNA的遷移的研究，是來(lái)自瑞典農(nóng)業(yè)科學(xué)大學(xué)植物科學(xué)中心實(shí)驗(yàn)室（Ume?PlantScienceCe
補(bǔ)硒能讓艾茲病病毒“行動(dòng)緩慢”2011/01/06
zui近美國(guó)免疫學(xué)家發(fā)現(xiàn)了一種治療艾滋病的新方法，他們利用含硒藥物降低了艾滋病患者血液中艾滋病毒的數(shù)量。在邁阿密大學(xué)主導(dǎo)的對(duì)比買驗(yàn)中，每天服用含有濃縮硒酵母膠囊的艾滋病患者在9個(gè)月后，血液中硒的濃度增加；30%，體內(nèi)艾滋病毒的數(shù)量也減少了，免疫細(xì)胞積極增加。表明；含硒制劑能夠放慢吏滋病毒的繁殖速度。目前科學(xué)家們還不能解釋發(fā)生這種變化的原因，而且這種藥物并不是對(duì)所有病人都有效，也無(wú)法*讓人免受艾滋病毒的侵害。
英國(guó)研究顯示常喝碳酸飲料細(xì)胞可能受損2011/01/06
英國(guó)2007年5月26日公布的一項(xiàng)研究結(jié)果顯示，部分碳酸飲料可能會(huì)導(dǎo)致人體細(xì)胞嚴(yán)重受損。據(jù)悉，喝碳酸飲料造成的這種人體損傷一般都與衰老以及濫用酒精相關(guān)，zui終會(huì)導(dǎo)致肝硬化和帕金森病等疾病。此次研究的焦點(diǎn)在于苯甲酸鈉的安全性。苯甲酸鈉是苯甲酸的衍生物，天然存在于各種漿果之中，目前被大量用作許多碳酸飲料的防腐劑。破壞人體細(xì)胞的“能量工廠”，英國(guó)謝菲爾德大學(xué)的分子生物學(xué)和生物工藝學(xué)教授彼得·派珀是研究人體衰老的專家。他的試驗(yàn)結(jié)果證明，苯甲酸納可以破壞細(xì)胞的“能量工廠”——線粒體。他說(shuō)：“這種化學(xué)物質(zhì)
免疫標(biāo)記技術(shù)及其應(yīng)用2011/01/04
近二十幾年來(lái)，免疫學(xué)檢測(cè)的方法發(fā)展很快，特別是在使用標(biāo)記了的抗原和抗體的分析技術(shù)以后，使檢測(cè)的敏感性和特異性都大大提高。繼20世紀(jì)50年代的免疫熒光（1FA）和60年代的放射免疫（RIA）分析技術(shù)之后，在70年代初期又建立了用酶來(lái)標(biāo)記抗原或抗體的分析技術(shù)。標(biāo)記免疫技術(shù)是將某種可微量測(cè)定或超微量測(cè)定的物質(zhì)（如放射性核素、熒光素、酶、化學(xué)發(fā)光劑等）標(biāo)記于抗原（抗體）上制成標(biāo)記物，加入到抗原-抗體的反應(yīng)體系中與相應(yīng)的抗體（抗原）反應(yīng)，以檢測(cè)標(biāo)記物的有無(wú)及含量來(lái)間接反映樣品中待檢抗原或抗體的存在與多少。
基因芯片技術(shù)和DNA測(cè)序2011/01/04
基因芯片技術(shù)是綜合利用一系列微電子技術(shù)，在有限的空間內(nèi)將核酸探針點(diǎn)到固相載體上，或者直接進(jìn)行探針固相原位合成，將一系列可尋址識(shí)別的核酸探針有序集成起來(lái)，用于同時(shí)進(jìn)行眾多的顯微核酸雜交反應(yīng)，可以同時(shí)檢測(cè)很多種核酸片段?；蛐酒雌渲谱髟砜梢苑譃楹芏囝?，但目前真正成熟的，得以廣泛應(yīng)用的仍只有使用點(diǎn)樣或原位合成技術(shù)的微陣列（microarray）技術(shù)?；蛐酒瑱z測(cè)的生物學(xué)原理和前面所述的核酸探針*相似，所以可以說(shuō)基因芯片就是高密度的斑點(diǎn)雜交技術(shù)。但正因?yàn)槠涓呙芏?，?dǎo)致了一個(gè)量變到質(zhì)變的過程，成為炙手
瘋牛病夾心酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定方法2011/01/04
本方法（PLAIAELISA）是一種快速、準(zhǔn)確性高的瘋牛病篩選方法之一，1999年通過歐盟認(rèn)證。該方法具有反應(yīng)時(shí)間短、成本低、反應(yīng)步驟少的特點(diǎn)。瘋牛病夾心ELISA是法國(guó)原子能委員會(huì)（FrenchAtomicEnergyCommission）研制出來(lái)的一種診斷瘋牛病的快速方法，現(xiàn)被美國(guó)Bio-Rad公司收購(gòu)。該方法又稱PLAIA~BSE試驗(yàn)，它由兩種試劑盒組成，即BSE純化試劑盒和BSE檢測(cè)試劑盒。本方法的原理是用BSE純化試劑盒中的試劑和蛋白酶K對(duì)牛腦腦干部的朊毒體進(jìn)行消化、純化、濃縮和溶解。
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