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細(xì)菌內(nèi)毒素中脂多糖之類脂A化學(xué)結(jié)構(gòu)的簡(jiǎn)介2022/10/31: 類脂A(又稱脂質(zhì)A)，系脂多糖的毒性及生物學(xué)活性中心。為一種糖磷脂，現(xiàn)認(rèn)為細(xì)菌外膜的外層可能是類脂A。各屬細(xì)菌的類脂A結(jié)構(gòu)相似，無(wú)種屬特異性，故不同革蘭氏陰性細(xì)菌感染時(shí)，由內(nèi)毒素引起的毒性作用十分相似。給實(shí)驗(yàn)動(dòng)物注人類脂A時(shí)，可出現(xiàn)典型的內(nèi)毒素反應(yīng)，如發(fā)熱、血液動(dòng)力學(xué)改變、彌漫性血管內(nèi)凝血及內(nèi)毒素休克等。類脂A在革蘭氏陰性菌感染的機(jī)理中亦起著十分重要的作用，故而類脂A可認(rèn)為是細(xì)菌的一種致病因子。另外，類脂A參與細(xì)菌外膜的組成，在維持細(xì)胞壁的穩(wěn)定性、屏障功能以及在細(xì)菌的生理學(xué)上亦起著十分重要的作用

鱟試驗(yàn)法：最宜對(duì)藥物進(jìn)行細(xì)菌內(nèi)毒素檢測(cè)的方法2022/10/31: 藥物在被正式使用前，必須進(jìn)行細(xì)菌內(nèi)毒素檢測(cè)，而檢測(cè)細(xì)菌內(nèi)毒素的方法，又屬鱟試驗(yàn)法最為適宜。美國(guó)FDA已把鱟試驗(yàn)法定為檢測(cè)藥物細(xì)菌內(nèi)毒素檢測(cè)的法定方法。應(yīng)當(dāng)知道，在應(yīng)用鱟試劑對(duì)藥物進(jìn)行細(xì)菌內(nèi)毒素檢測(cè)時(shí)，該鱟試劑的靈敏度的值不應(yīng)低于0.2EU/mL，且同時(shí)應(yīng)當(dāng)知道藥物中細(xì)菌內(nèi)毒素的耐受度限-量值。若是檢測(cè)的藥物沒能通過(guò)鱟試驗(yàn)法卻通過(guò)了家兔法，這種藥物是不能被批準(zhǔn)使用的，但該家兔法由官-方進(jìn)行測(cè)試的除外。若已知該藥物對(duì)鱟試驗(yàn)法有抑制或者增強(qiáng)反應(yīng)，則應(yīng)當(dāng)對(duì)該藥物進(jìn)行抑制或者增強(qiáng)試驗(yàn)。檢測(cè)抗生素的細(xì)菌內(nèi)毒

關(guān)于鱟的免疫系統(tǒng)的簡(jiǎn)介2022/10/28: 與其他無(wú)脊椎動(dòng)物類似，鱟缺乏獲得性免疫系統(tǒng)，但它有多種先天免疫防御系統(tǒng)。這種防御系統(tǒng)一般分為細(xì)胞免疫和體液免疫，主要包括血淋巴凝血、酚氧化酶激活、細(xì)胞凝集、抗菌物質(zhì)釋放引起的抗菌反應(yīng)、活性氧的形成和吞噬作用，共同構(gòu)成鱟的先天免疫系統(tǒng)。該系統(tǒng)可以對(duì)潛在病原體表面的抗原產(chǎn)生免疫反應(yīng)。因此，需要對(duì)各種病原體上具有略微不同結(jié)構(gòu)的各種類型的表位具有足夠特異性識(shí)別能力的生物傳感器。同時(shí)，生物傳感器必須能夠區(qū)分“自身”和“外來(lái)”表位。在漫長(zhǎng)的生物進(jìn)化過(guò)程中，鱟變形細(xì)胞溶解物的血細(xì)胞形成了以絲氨酸蛋白酶C因子和

酸堿因素對(duì)脂多糖有什么影響？2022/10/28: 脂多糖中性溶液在室溫可放置數(shù)月，其生物學(xué)活性不發(fā)生明顯的改變，如置入4℃或低溫冰箱，則其生物學(xué)活性可保持?jǐn)?shù)年至數(shù)十年不變。干燥的脂多糖中性粉劑，在室溫或冰箱條件下可放置幾十年或更長(zhǎng)時(shí)間而不失去其生物學(xué)活性。脂多糖在酸性溶液中置室溫，其分子發(fā)生部分降解，這一變化主要涉及到多糖與類脂A間糖苷鍵的裂解，及類脂A1-糖苷鍵的裂解，加熱可促進(jìn)這一反應(yīng)。強(qiáng)酸溶液在加熱條件下可使脂多糖被破壞。堿性因素對(duì)脂多糖分子的影響較大，主要表現(xiàn)在類脂A分子上。此時(shí)類脂A骨架上聯(lián)結(jié)的4-磷酸酯鍵及3與3位上脂肪酸酯鍵易遭到

物理性狀對(duì)脂多糖的生物學(xué)活性有什么影響？2022/10/28: 脂多糖的物理性狀主要表現(xiàn)為集聚程度，集聚度的大小對(duì)于生物學(xué)活性有著非常顯著的影響。對(duì)于某種特定的脂多糖其各種鹽類的生物學(xué)活性強(qiáng)弱可不一。實(shí)驗(yàn)表明隨著脂多糖鹽類集聚度的增加(表現(xiàn)為沉淀系數(shù)的增加)，則脂多糖的抗補(bǔ)體作用亦相應(yīng)地增加。高度集聚的脂多糖鈉鹽表達(dá)出很強(qiáng)的抗補(bǔ)體活性。其他低集聚度的脂多糖鹽，則表現(xiàn)為弱抗補(bǔ)體活性。脂多糖的三乙胺鹽(S=9.0)則會(huì)缺失抗體活性。除了抗補(bǔ)體活性外，其他生物學(xué)活性亦受到脂多糖物理性狀的影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:低集聚度的脂多糖分子能導(dǎo)致很強(qiáng)的家兔發(fā)熱反應(yīng)及小鼠致死毒性

內(nèi)毒素中兩類脂多糖有什么相同特征？2022/10/27: 根據(jù)О-特異性側(cè)鏈的存在與否可將脂多糖分為光滑型(smooth-formS-脂多糖)和粗糙型(rough-formR-脂多糖)兩大類，前者的組成成分只有類脂A、核心寡糖及O一特異性側(cè)鏈，而居者僅含有類脂A及完整或部分核心成分。雖然兩類脂多糖在某些物理特征上表現(xiàn)出顯著的差異性（主要為表現(xiàn)分子量及水溶性方面)，但在如下方面具有相同特征:1.內(nèi)毒素經(jīng)口服毒性較小，人血?jiǎng)t毒性很大。例如人口服150mg內(nèi)毒素?zé)o不良反應(yīng)，而靜注0.1~0.5ng/kg即可引起發(fā)熱、頭痛、嘔吐等臨床癥狀。兩者劑量相差百萬(wàn)倍以

革蘭氏陰性菌細(xì)胞壁的結(jié)構(gòu)與組成2022/10/27: 1．磷脂細(xì)菌外膜所含的磷脂成分與真核細(xì)胞膜的成分極為相似，有一點(diǎn)有意義的區(qū)別在于細(xì)菌(如大腸桿菌等)外膜含有多量的磷脂酰乙醇胺。其他的成分有磷脂酰甘油及心磷脂等。磷脂是組成外膜內(nèi)葉的主要分子，而外膜的外葉則是由內(nèi)毒素及磷脂分子共同組成的，亦即由磷脂一磷脂所形成的雙層膜結(jié)構(gòu)僅局限于外膜的局部區(qū)域。由于細(xì)菌內(nèi)毒素與磷脂分子在結(jié)構(gòu)上具有高度的相似性，故而這種由磷脂—磷脂，磷脂—內(nèi)毒素所組成的外膜結(jié)構(gòu)并不影響外膜的穩(wěn)定性。2.內(nèi)毒素內(nèi)毒素系革蘭氏陰性菌及某些陰性菌樣微生物外膜中的一種結(jié)構(gòu)成分，在文獻(xiàn)中更

內(nèi)毒素在細(xì)胞外膜功能中的作用2022/10/27: 想必大家都已越來(lái)越清楚外膜結(jié)構(gòu)對(duì)于革蘭氏陰性菌起著十分重要的生理作用。由于外膜的存在，使得細(xì)菌對(duì)機(jī)體的防御性體液因子，如溶菌酶、β-溶解素及許多白細(xì)胞毒性蛋白具有抵抗作用，而這類物質(zhì)一般講對(duì)于革蘭氏陽(yáng)性菌具有高度的毒性。存在于人或動(dòng)物腸道中的革蘭氏陰性腸桿菌其外膜得到了高度的發(fā)達(dá)，并成為一種有效的屏障結(jié)構(gòu)，這樣，這類細(xì)菌不易收到膽鹽的去垢作用及消化酶的降解作用。另外，腸道及其他的一些革蘭氏陰性菌的外膜，對(duì)于許多抗菌素如大內(nèi)環(huán)類抗生素﹑新菌素，利福平，林可霉素、柯林達(dá)霉素及梭鏈孢酸等具有屏障作用。

細(xì)菌細(xì)胞壁的結(jié)構(gòu)與內(nèi)毒素的關(guān)系2022/10/26: 所有細(xì)菌的表面均具有一層稱為細(xì)胞壁(cellwall)的結(jié)構(gòu)，位于細(xì)菌細(xì)胞最外層，包在細(xì)胞膜周圍，是一種膜狀結(jié)構(gòu)，組成成分較復(fù)雜，并隨不同細(xì)菌而異。但其主要組分是肽聚糖(peptidoglycan)(又稱粘肽、糖肽﹑胞壁質(zhì))，肽聚糖的存在提供了細(xì)菌細(xì)胞壁的強(qiáng)度，具有機(jī)械性保護(hù)意義。革蘭氏陰性菌和革蘭氏陽(yáng)性菌尚各有特殊成分。革蘭氏陽(yáng)性菌的肽聚糖由聚糖骨架、四肽側(cè)鏈和五肽交聯(lián)橋三部分組成(圖1)；革蘭氏陰性菌者僅由肽聚糖和四肽側(cè)鏈兩部分組成(圖2)。革蘭氏陽(yáng)性菌細(xì)胞壁的結(jié)構(gòu)與組成革蘭氏陽(yáng)性菌細(xì)胞壁較

內(nèi)毒素相關(guān)問(wèn)題的簡(jiǎn)介2022/10/26: 內(nèi)毒素誘導(dǎo)的內(nèi)源性細(xì)胞因子有哪些？機(jī)體受內(nèi)毒素（LPS)刺激后，可直接或間接地刺激免疫活性細(xì)胞產(chǎn)生多種內(nèi)源性調(diào)節(jié)因子，故在體內(nèi)形成一個(gè)細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)。這些細(xì)胞因子在LPS生物學(xué)活性表達(dá)過(guò)程中起著十分重要的作用。目前比較清楚的由LPS刺激產(chǎn)生的細(xì)胞因子主要有:腫瘤壞死因子類(tumornecrosisfactors，TNF)、干擾素類(interferons，IFNs)、白細(xì)胞介素類(interleukins，IL—s)集落刺激因子類(colony-stimulatingfactors，CSFs)等

應(yīng)用鱟試驗(yàn)法對(duì)靜脈注射液進(jìn)行內(nèi)毒素檢測(cè)的優(yōu)點(diǎn)2022/10/26: 臨床上，不同濃度的葡萄糖注射液、生理鹽水注射液、氯化鈉注射等常被用于靜脈注射使用。這些注射液在被臨床應(yīng)用前，都需要經(jīng)過(guò)內(nèi)毒素檢測(cè)，唯有內(nèi)毒素檢測(cè)合格的注射液，才能真正用于臨床使用。以前較為經(jīng)常使用檢測(cè)細(xì)菌內(nèi)毒素的方法多為家兔熱原法，直到近年來(lái)，國(guó)內(nèi)外許多研究這方面的專家應(yīng)用了鱟試驗(yàn)法和家兔熱原法進(jìn)行了大量的研究，他們發(fā)現(xiàn)，在用鱟試驗(yàn)法和家兔熱原法進(jìn)行內(nèi)毒素檢測(cè)時(shí)，兩種方法的試驗(yàn)結(jié)果基本一致，但是較為明顯一點(diǎn)的是：鱟試驗(yàn)法比家兔熱原法的靈敏度高達(dá)10~100倍。在1977年的時(shí)候，Travenol

內(nèi)毒素的特點(diǎn)是什么？感染內(nèi)毒素會(huì)發(fā)生什么？2022/10/25: 內(nèi)毒素在1892~1895年期間，就已經(jīng)被發(fā)現(xiàn)了?，F(xiàn)在，我們已經(jīng)非常清楚地知道：內(nèi)毒素（endotoxins）系存在于革蘭氏陰性菌細(xì)胞壁外膜中的脂多糖（lipopolysaccharides，LPS），即含有親水性的多糖部分和一個(gè)疏水的類脂A。多糖部分由О抗原側(cè)鏈和核心多糖組成，類脂A的基本結(jié)構(gòu)為脂酰化的二磷酸β1，b-D-氨基葡萄糖雙糖，是脂多糖發(fā)揮生物活性不-可-缺少的部分，脂多糖在結(jié)構(gòu)及功能上具有三個(gè)“兩性”特征，即屬于兩性（親水性、疏水性）分子，攜帶兩極（正、負(fù)）電荷，及發(fā)揮兩相（有益、

內(nèi)毒素是怎么被發(fā)現(xiàn)的？2022/10/25: 內(nèi)毒素到底是怎么被發(fā)現(xiàn)的呢？在1892~1895年期間，RichardPfeiffer首-次報(bào)道：革蘭氏陰性菌的細(xì)胞壁中含有有毒物質(zhì)。他在研究霍亂弧菌感染的發(fā)病機(jī)理時(shí)，發(fā)現(xiàn)該菌可產(chǎn)生兩種具有不同性質(zhì)的毒性物質(zhì)，一種為由活菌合成并釋放出來(lái)，對(duì)熱敏感的蛋白質(zhì)成分即外毒素（exotoxin）；另一種為對(duì)熱抵抗，并且只有當(dāng)細(xì)菌崩解后才能釋放出來(lái)的非蛋白質(zhì)成分，他將后一種毒性物質(zhì)稱為內(nèi)毒素（endotoxin）。緊接著，意大利的Centanni通過(guò)自溶的方法從各種革蘭氏陰性桿菌中提取到了類似的毒性物質(zhì)，他

熒光測(cè)定法檢測(cè)細(xì)菌內(nèi)毒素含量的方法介紹2022/10/25: 鱟試驗(yàn)法中，有不少方法可以檢測(cè)細(xì)菌內(nèi)毒素含量，其中一種就是熒光測(cè)定法。那熒光測(cè)定法在試驗(yàn)中是怎么進(jìn)行操作的呢？首先需要將熒光母素和鱟試劑充分混勻，這樣蛋白分子在進(jìn)行凝膠反應(yīng)的同時(shí)，熒光素就可以將其標(biāo)記上。在凝膠逐漸形成的過(guò)程中，蛋白分子的聚合結(jié)構(gòu)也會(huì)慢慢發(fā)生變化，與此同時(shí)，與熒光素結(jié)合的蛋白因子也會(huì)跟隨水分子的運(yùn)動(dòng)從而進(jìn)行同步旋轉(zhuǎn)，使得熒光的偏光度會(huì)發(fā)生變化。這時(shí)，我們將熒光的偏光度設(shè)為P，垂直的熒光強(qiáng)度設(shè)為I1，水平的熒光強(qiáng)度設(shè)為I2,,然后可以看得出，P值會(huì)因?yàn)槟z的凝固程度而發(fā)生變化，這個(gè)

內(nèi)毒素毒性效應(yīng)的治療措施有哪些？2022/10/24: 內(nèi)毒素（Endotoxin）的存在可能會(huì)引起廣泛的病理變化，如發(fā)熱、Shwartzman反應(yīng)、彌漫性血管內(nèi)凝血（DIC）、炎癥細(xì)胞因子的釋放等，嚴(yán)重者可導(dǎo)致內(nèi)毒素血癥及致死性的內(nèi)毒素休克，后者的死亡率可高達(dá)40%~60%，且其發(fā)生率有逐年上升的趨勢(shì)。針對(duì)內(nèi)毒素及其毒性效應(yīng)而設(shè)計(jì)的抗內(nèi)毒素治療已成為國(guó)際上學(xué)術(shù)界研究的熱點(diǎn)之一。這些治療措施主要包括:內(nèi)毒素及類脂A抗體（中和作用），無(wú)毒/低毒類脂A類似物（拮抗作用），化學(xué)藥品（如多糖菌素B及其衍生物，化學(xué)吸附作用），抗細(xì)胞因子抗體（中和內(nèi)毒素誘生的炎

對(duì)內(nèi)毒素的研究應(yīng)用還需做出什么努力？2022/10/24: 近百年來(lái)，人類對(duì)內(nèi)毒素本質(zhì)、化學(xué)結(jié)構(gòu)、醫(yī)學(xué)生物學(xué)性質(zhì)的研究，均有賴于從細(xì)菌中分離或人工合成純品。特別是1968年美國(guó)學(xué)者JackLiven創(chuàng)建鱟試驗(yàn)（Liniulustest），使內(nèi)毒素的定性、定量測(cè)定成為一種十分簡(jiǎn)便的方法后，在醫(yī)藥衛(wèi)生領(lǐng)域，吸引了更多學(xué)者對(duì)內(nèi)毒素研究的興趣。鑒于內(nèi)毒素的首要生物學(xué)活性是引起哺乳動(dòng)物發(fā)熱，各國(guó)藥典紛紛收載《細(xì)菌內(nèi)毒素試驗(yàn)》，作為《熱原試驗(yàn)》的補(bǔ)充，為了統(tǒng)一國(guó)際間內(nèi)毒素量值，使試驗(yàn)結(jié)果具有可比性，世界衛(wèi)生組織（WHO）于1986、1994年兩次組織國(guó)際協(xié)作標(biāo)定，建

凝膠法中毛細(xì)吸管法的使用介紹2022/10/24: 1980年，瑞典學(xué)者Gardi最先發(fā)明了毛細(xì)吸管法。那凝膠法中毛細(xì)吸管法到底是怎么應(yīng)用的？首先，需要分別使用10μl的供試品和10μl的鱟試劑將它們滴在載玻片上，這個(gè)載玻片必須是無(wú)菌無(wú)熱原的。接著需要將它們充分混勻，然后使用毛細(xì)吸管吸進(jìn)去，吸進(jìn)去的高度為毛細(xì)吸管的三分之二即可，再將它們?cè)?7℃的環(huán)境中靜置45至60分鐘。最后，將毛細(xì)吸管取出來(lái)，把它浸入溴酚染料中，只需浸入2至3秒即可，再次取出就能判斷出試驗(yàn)結(jié)果了。觀察時(shí)，若發(fā)現(xiàn)染料進(jìn)入了毛細(xì)吸管里面，就可以知道供試品中是沒有內(nèi)毒素的，或者可以說(shuō)

凝膠法中玻片法的創(chuàng)立及改進(jìn)過(guò)程2022/10/21: 在凝膠法中，由于試管法的使用會(huì)消耗大量的鱟試劑，以及在試驗(yàn)時(shí)使用的時(shí)間較長(zhǎng)、對(duì)試驗(yàn)結(jié)果判定難以標(biāo)準(zhǔn)化的問(wèn)題。在1974年的時(shí)候，有個(gè)叫Frauch的科學(xué)家首先創(chuàng)立了玻片法。那玻片法的使用方法到底是怎么樣的呢？在Frauch的介紹中說(shuō)到，首先需要取出10μl的鱟試劑和在試驗(yàn)前就已經(jīng)處理過(guò)的供試品10μl，均滴在無(wú)菌無(wú)熱原的玻片上，接著將這兩者充分混勻，再在37℃的環(huán)境中靜置30分鐘，最后取出觀察試驗(yàn)結(jié)果。若發(fā)現(xiàn)被檢樣品中含有內(nèi)毒素，混合物就會(huì)形成凝膠，且把載玻片倒置時(shí)混合物不會(huì)流動(dòng)并且摸起來(lái)很牢固

凝膠法常用方法之試管法2022/10/20: 在凝膠法中，經(jīng)常使用的方法就包括試管法。那在凝膠法中，試管法的使用方法是怎么樣的呢？首先需要把供試品和鱟試劑等量加入試管中，輕搖晃使其充分混勻，再將該試管置于水浴中靜置，取出后再觀察該試管的凝膠是否形成。試驗(yàn)時(shí)，需要作試驗(yàn)管、陽(yáng)性對(duì)照管、陰性對(duì)照管及陰性抑制對(duì)照管共4種，來(lái)作對(duì)照試驗(yàn)。1.試驗(yàn)管需要取出0.1ml的樣本和0.1ml的鱟試劑。水、注射液等一般樣本在試驗(yàn)前是不需要進(jìn)行處理的，但是如果血液、腹腔滲出液等其他液體就必須在試驗(yàn)前就進(jìn)行處理，因?yàn)檫@些樣本可能存在鱟試驗(yàn)法反應(yīng)的抑制物。所用的鱟

鱟試驗(yàn)法在檢測(cè)前時(shí)應(yīng)做什么？2022/10/19: 鱟試驗(yàn)法（鱟變形細(xì)胞溶解物試驗(yàn)）是第一個(gè)被美國(guó)作為檢測(cè)細(xì)菌內(nèi)毒素的法定方法的，美國(guó)還將此法納入了美國(guó)藥典第20版（1980）中，并對(duì)該法進(jìn)行了非常詳盡的介紹。慢慢地，也有許多國(guó)家也將鱟試驗(yàn)法作為檢測(cè)細(xì)菌內(nèi)毒素的法定方法?，F(xiàn)在就以美國(guó)為例子，來(lái)詳細(xì)闡明鱟試驗(yàn)法。美國(guó)食品藥品管理局（FDA）有這樣一條準(zhǔn)則，即只要是給人類使用的藥品、生物制劑、醫(yī)療器械等產(chǎn)品最后一定要使用鱟試驗(yàn)法進(jìn)行細(xì)菌內(nèi)毒素檢測(cè)，只有檢測(cè)過(guò)關(guān)的產(chǎn)品才能得到美國(guó)食品藥品管理局的承認(rèn)。那鱟試驗(yàn)法作為檢測(cè)細(xì)菌內(nèi)毒素的法定方法，在進(jìn)行試驗(yàn)檢

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