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什么是鱟試驗(yàn)法？2022/10/18: 你知道什么是鱟試驗(yàn)法嗎？要想知道這個(gè)方法是什么，首先就要了解內(nèi)毒素是什么。內(nèi)毒素是革蘭氏陰性細(xì)菌等細(xì)胞壁中的類(lèi)脂多糖(Lipopolysaccharide，LPS)成分?？雌饋?lái)這個(gè)內(nèi)毒素好像平平無(wú)奇對(duì)吧，但其實(shí)內(nèi)毒素對(duì)機(jī)體是有很大的毒害影響作用的，比如它有熱原反應(yīng)，會(huì)使機(jī)體出現(xiàn)白細(xì)胞增多或者減少的情況，以及骨髓壞死、彌漫性血管內(nèi)凝血(DIC)等等現(xiàn)象，如果在臨床上有膿毒癥或者革蘭氏陰性菌感染時(shí)，嚴(yán)重可致人死亡。更令人驚訝的是，只需要一點(diǎn)點(diǎn)的內(nèi)毒素就能讓機(jī)體產(chǎn)生極其廣泛的生物作用和病理作用，所以，

鱟試劑的作用是什么？其研究發(fā)展是怎么樣的？2022/10/17: 鱟試劑是什么呢？這還要從一種國(guó)家二級(jí)保護(hù)動(dòng)物“鱟”說(shuō)起。鱟生活在海中，是一種形似蟹狀的海生節(jié)肢動(dòng)物，而鱟試劑就是從鱟血液中提取的變形細(xì)胞溶解物，提取流程比較復(fù)雜，需要運(yùn)用現(xiàn)代的提取技術(shù)，再通過(guò)低溫冷凍干燥制作而成。因?yàn)轺c試劑含有一種特別的酶原，即凝固酶原，所以它主要用于(1,3)-β-D-葡聚糖檢測(cè)和細(xì)菌內(nèi)毒素檢測(cè)。由于鱟試驗(yàn)法快速、便捷、高效等特點(diǎn)，所以在鱟試驗(yàn)法中，使用鱟試劑就能非常快速地檢測(cè)到被檢樣品的細(xì)菌內(nèi)毒素含量。鱟試劑的用處是非常多的，它不僅能用在臨床應(yīng)用上，還可以用在制藥方面、食品

動(dòng)態(tài)顯色法鱟試劑符合細(xì)菌內(nèi)毒素檢測(cè)方法的規(guī)定2022/10/12: 動(dòng)態(tài)顯色法鱟試劑兼有動(dòng)態(tài)濁度法鱟試劑和終點(diǎn)法顯色基質(zhì)鱟試劑的優(yōu)點(diǎn)。它不需要將蛋白原凝結(jié)成凝膠，它能根據(jù)顏色反應(yīng)準(zhǔn)確地定量細(xì)菌內(nèi)毒素，具有很強(qiáng)的抗干擾能力。特別適用于生物樣品的檢測(cè)，如疫苗、抗體、蛋白質(zhì)、核酸、臨床樣品等的內(nèi)毒素分析。動(dòng)態(tài)顯色法鱟試劑采用動(dòng)態(tài)發(fā)色的微孔試劑，配以專(zhuān)門(mén)定制的96孔板/條進(jìn)行微量檢測(cè)。微量動(dòng)態(tài)致色性?xún)?nèi)毒素檢測(cè)是在試驗(yàn)的微生物檢測(cè)系統(tǒng)和其他常規(guī)內(nèi)毒素檢測(cè)設(shè)備上實(shí)現(xiàn)的，符合藥典中細(xì)菌內(nèi)毒素檢測(cè)方法的規(guī)定。每次檢測(cè)只需要25微升的檢測(cè)品和25微升的LAL試劑。檢測(cè)原理與傳統(tǒng)的

鱟試劑靈敏度測(cè)定結(jié)果的影響因素是什么？2022/09/30: 其實(shí)鱟試劑的靈敏度是很重要的，因?yàn)樗P(guān)系到能否準(zhǔn)確測(cè)出鱟試驗(yàn)的試驗(yàn)結(jié)果。所以在使用鱟試劑的時(shí)候，要深刻了解到鱟試劑靈敏度的重要意義。那有什么因素會(huì)影響鱟試劑靈敏度的測(cè)試結(jié)果呢？今天就針對(duì)這個(gè)問(wèn)題和大家進(jìn)行探討。1、鱟試劑的質(zhì)量問(wèn)題要知道鱟試劑質(zhì)量有沒(méi)問(wèn)題首先要看鱟試劑的靈敏度。靈敏度會(huì)出現(xiàn)問(wèn)題一般和鱟試劑的存放問(wèn)題、試驗(yàn)條件等原因息息相關(guān)。靈敏度有問(wèn)題的鱟試劑會(huì)讓檢測(cè)樣品中的內(nèi)毒素允許限值有所改變，靈敏度過(guò)低會(huì)出現(xiàn)“假陰性”，靈敏度過(guò)高就會(huì)出現(xiàn)“假陽(yáng)性”。其次要看鱟試劑的自凝時(shí)間，在進(jìn)行鱟試驗(yàn)時(shí)

鱟試劑可以應(yīng)用在哪些方面呢？2022/09/29: 其實(shí)鱟試劑的應(yīng)用范圍算是很廣泛的，因?yàn)轺c試劑對(duì)細(xì)菌內(nèi)毒素會(huì)產(chǎn)生特異性的反應(yīng)，所以它不僅可以用來(lái)檢查注射液、化學(xué)藥品的等熱原，在實(shí)驗(yàn)室的診斷方面還有衛(wèi)生保健方面都是可以應(yīng)用的，還有科研領(lǐng)域、臨床，特別在檢測(cè)腦膜炎上，是非常準(zhǔn)確有效的。一、在臨床上的應(yīng)用采用鱟試劑進(jìn)行的鱟試驗(yàn)法在早期就能對(duì)有發(fā)熱癥狀的內(nèi)毒素血癥患者的癥狀進(jìn)行預(yù)測(cè)，從而達(dá)到早期干預(yù)的效果，進(jìn)行快速治愈。大量的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)證明了，患者之所以患有革蘭氏陰性細(xì)菌敗血癥的很多癥狀都是因?yàn)閮?nèi)毒素血癥的原因。但是常規(guī)檢測(cè)內(nèi)毒素血癥的的診斷手段，往往需

特異鱟試劑在臨床上的應(yīng)用2022/09/28: 內(nèi)毒素是藥品污染熱原的主要原因，在GMP條件下生產(chǎn)藥品的熱原控制，無(wú)內(nèi)毒素即無(wú)熱原[1]，這是藥典普遍采用《細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法》代替《熱原檢查法》的依據(jù)。但是，某些藥品特別是血制品，由于其生產(chǎn)工藝中，一般需經(jīng)過(guò)纖維素膜過(guò)濾，使污染Glucan樣物質(zhì)的機(jī)會(huì)增加。藤原博等[2]以普通鱟試劑和特異鱟試劑檢測(cè)商品血制劑（白蛋白、球蛋白）內(nèi)毒素含量，并與熱原檢查結(jié)果比較。實(shí)驗(yàn)表明，使用普通鱟試劑陽(yáng)性檢出率高于特異鱟試劑，而后者的陽(yáng)性檢出率與熱原檢查相符。同時(shí)作者向血制劑中添加內(nèi)毒素后，再用兩種鱟試劑測(cè)定內(nèi)毒

特異鱟試劑制備的方法2022/09/27: 自從1981年日本學(xué)者KakinumaA等報(bào)道“一種抗癌物質(zhì)(1-3)-β-D-葡聚糖[(1-3)-β-D-Glucan可使鱟試劑凝聚”以來(lái)，由于其涉及細(xì)菌內(nèi)毒素檢查的特異性，引起各國(guó)學(xué)者的注意。一、（1-3）-β-D-葡聚糖的本質(zhì)與來(lái)源KakinumaA等在作抗癌物質(zhì)葡聚糖熱原試驗(yàn)時(shí)，不含發(fā)熱物質(zhì)的葡聚糖能引起鱟試驗(yàn)呈陽(yáng)性反應(yīng)。LorettaA和PearsenFC也報(bào)道，血液透析器上存在鱟試驗(yàn)反應(yīng)物質(zhì)（LAL-ReactiveMaterial，LAL-RM），以后有報(bào)道凡經(jīng)過(guò)銅銨人造絲透析膜的

細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法國(guó)內(nèi)外發(fā)展簡(jiǎn)況2022/09/26: 熱原系指一切可以引起人體及動(dòng)物發(fā)熱反應(yīng)的物質(zhì)。細(xì)菌內(nèi)毒素是一種與革蘭陰性菌細(xì)胞壁相關(guān)的熱原物質(zhì)，是至今發(fā)現(xiàn)在水溶液中普遍的熱原。藥品注射劑中的熱原檢查是藥品安全性的重要檢驗(yàn)項(xiàng)目之一，自1942年美國(guó)首先將家兔法作為藥品的熱原檢查之后，這項(xiàng)檢查對(duì)保障藥品的安全性方面發(fā)揮了重要作用。隨著制藥工業(yè)迅速發(fā)展、新藥品種的不斷增加，家兔法的的局限性日益突出（如放射性藥品、抗腫瘤藥物等藥物本身藥理作用干擾家兔升溫試驗(yàn)）。20世紀(jì)60年代創(chuàng)建了微量細(xì)菌內(nèi)毒素的鱟血細(xì)胞溶解物檢測(cè)法（簡(jiǎn)稱(chēng)鱟試驗(yàn)法），并應(yīng)用于藥品和

鱟試驗(yàn)法檢查大輸液中細(xì)菌內(nèi)毒素假陽(yáng)性結(jié)果判定2022/09/23: 自1988年10月衛(wèi)生部部頒標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定[1]，應(yīng)用鱟試驗(yàn)法在5種大輸液中檢查細(xì)菌內(nèi)毒素取代熱原檢查法。由于鱟試驗(yàn)法具有靈敏度高，特異性強(qiáng)及簡(jiǎn)便快速等優(yōu)點(diǎn)。本文采用國(guó)產(chǎn)鱟試劑對(duì)100批大輸液進(jìn)行熱原測(cè)定，并與家兔法對(duì)照，結(jié)果證明鱟試驗(yàn)法（靈敏度為0.5EU/ml）檢查陽(yáng)性率較家兔法高，我們通過(guò)降低鱟試劑的靈敏度，使假陽(yáng)性結(jié)果出現(xiàn)率降低。一、實(shí)驗(yàn)方法和結(jié)果部頒標(biāo)準(zhǔn)細(xì)菌內(nèi)毒素檢查僅規(guī)定5種注射劑的內(nèi)毒素限值（），根據(jù)5種注射劑的細(xì)菌內(nèi)毒素限-量計(jì)算，熱原檢查家兔法劑量為10ml/kg（M）和我國(guó)內(nèi)毒素標(biāo)

臨床輸液預(yù)防熱原反應(yīng)的措施2022/09/22: 輸液是臨床上最常使用的一種治療措施，有著十分重要的地位及作用。但熱原反應(yīng)時(shí)有發(fā)生，尤其是在氣溫較高季節(jié)多見(jiàn)，給病人帶來(lái)痛苦，個(gè)別甚至造成生命危險(xiǎn)。所以，預(yù)防熱原反應(yīng)的發(fā)生就顯得極其重要，一起來(lái)看看臨床輸液預(yù)防熱原的反應(yīng)措施吧！1.在生產(chǎn)過(guò)程中要嚴(yán)格執(zhí)行操作規(guī)程：①回收輸液瓶要嚴(yán)格檢查，剔除破損瓶子，無(wú)鋁帽蓋者要另行處理，并要剔除已長(zhǎng)霉菌的瓶子以及有回血的瓶子。②滌綸膜襯墊必須均勻，不使漏氣，鋁帽蓋軋口必須緊密。③嚴(yán)格把好燈檢關(guān)，不使漏檢，在急診室配發(fā)窗口應(yīng)安裝日光檢查燈，在臨用發(fā)出前再作澄明度檢

細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法中凝膠法在藥品中造成異常結(jié)果的原因和解決方法2022/09/22: 凝膠法實(shí)驗(yàn)過(guò)程時(shí)間短，消耗樣品量少，且具有使用設(shè)備簡(jiǎn)單，費(fèi)用低等優(yōu)點(diǎn)，作為《中國(guó)藥典》“仲裁”檢查方法，廣泛用于注射劑藥品細(xì)菌內(nèi)毒素檢查。1.干擾試驗(yàn)的必要性鱟試劑凝集反應(yīng)是一種二價(jià)陽(yáng)離子酶反應(yīng)體系，有許多干擾反應(yīng)的物質(zhì)會(huì)干擾凝膠的形成。在新樣品測(cè)定中，必須首先進(jìn)行細(xì)菌內(nèi)毒素干擾試驗(yàn)，確定是否存在干擾樣品出現(xiàn)縮合反應(yīng)的因素。為了保證所選處理方案能夠在不滅活內(nèi)毒素情況下有效消除干擾，采用預(yù)先添加的標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)毒素再處理液進(jìn)行干擾試驗(yàn)。2.可能會(huì)出現(xiàn)的異常結(jié)果及其原因和解決方法2.1造成呈假陰性的可能原因

臨床輸液發(fā)生染菌、熱原反應(yīng)的原因2022/09/20: 輸液在臨床應(yīng)用日趨增多，一般手術(shù)禁食患者每日均需輸注葡萄糖液等2000~3000ml，其他如腹瀉、燒傷、休克、高熱患者的用量也較大。據(jù)歷年報(bào)道，每到春秋季節(jié)，室溫較高，常有散發(fā)性、個(gè)別病人發(fā)生輸液熱原反應(yīng)，甚至將長(zhǎng)有霉菌菌落的輸液注入患者，非常危險(xiǎn)。輸液是在嚴(yán)格條件下配制，并經(jīng)質(zhì)量鑒定、無(wú)菌、熱原等試驗(yàn)合格后才由藥房供應(yīng)臨床。但為什么會(huì)經(jīng)常發(fā)生熱原反應(yīng)呢？1.屬于生產(chǎn)過(guò)程中留下的隱患①輸液瓶等包裝材料微細(xì)裂紋：由于輸液生產(chǎn)工藝及貯存運(yùn)輸流程較長(zhǎng)，包裝材料大多是玻璃瓶及塑料袋，產(chǎn)品雖經(jīng)滅菌消毒，但

細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法中凝膠法在藥品中的正確使用方法2022/09/16: 細(xì)菌內(nèi)毒素作為外源性致熱原的內(nèi)毒素能激活中性粒細(xì)胞等，是革蘭陰性菌細(xì)胞壁個(gè)層上的*結(jié)構(gòu)，會(huì)使中性粒細(xì)胞釋放一種叫內(nèi)源性熱原質(zhì)的物質(zhì)，其在體溫調(diào)節(jié)的中樞會(huì)引起發(fā)熱反應(yīng)。當(dāng)內(nèi)毒素經(jīng)消化道進(jìn)入人體不會(huì)產(chǎn)生危害，但內(nèi)毒素經(jīng)注射液等方式進(jìn)入血液時(shí)則引起癥狀不同的疾病。因此，藥品安全性檢驗(yàn)一個(gè)重要項(xiàng)目就是藥品注射劑中細(xì)菌內(nèi)毒素檢查。美國(guó)科學(xué)家Levin和Bang1968年建立鱟試驗(yàn)法來(lái)檢查細(xì)菌內(nèi)毒素，美國(guó)FDA于1973年制定的規(guī)則指出“鱟試劑是一種檢測(cè)細(xì)菌內(nèi)毒素的靈敏指示劑?！?.鱟試劑的特性及與內(nèi)毒素產(chǎn)

影響輸液劑熱原含量因素的探討2022/09/15: 輸液劑在現(xiàn)代醫(yī)學(xué)中是搶救病人和戰(zhàn)備不可-缺少的常用制劑?，F(xiàn)在多數(shù)醫(yī)院都是自制輸液劑，由于條件不同，在配制過(guò)程中容易帶入熱原，使臨床應(yīng)用時(shí)出現(xiàn)熱原反應(yīng)，給患者帶來(lái)痛苦。近年來(lái)由于凈化和空調(diào)技術(shù)在醫(yī)藥方面的應(yīng)用，輸液劑中的熱原反應(yīng)有了一定程度的控制。但輸液劑帶入熱原的因素復(fù)雜，而且在配制過(guò)程中不易檢出。本文以預(yù)防為主的精神，從葡萄糖輸液劑的配制到滅菌前的室溫、時(shí)間限度和輸液劑pH對(duì)熱原含量的影響進(jìn)行探索，以便找到在配制輸液中可以防止帶入熱原的可行辦法。配制輸液劑的室溫、時(shí)間對(duì)熱原量的影響，我們以葡萄

葡聚糖檢測(cè)試劑盒操作步驟如下2022/09/14: β-葡聚糖是開(kāi)發(fā)的一種新的產(chǎn)品，其來(lái)源于新鮮的食品啤酒酵母。它是一種多糖，主要化學(xué)結(jié)構(gòu)B-1,3葡聚糖和B-1,6葡聚糖，其中前者具有抗腫瘤性質(zhì)，而且能夠提高人體自然免疫力。β-葡聚糖常用于健康食品營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充，功能飲料、口服液等，醫(yī)藥及化妝品配料,其他抗衰老、抗輻射等功能性食品。葡聚糖檢測(cè)試劑盒適用于β-葡聚糖(混合連接)的測(cè)量和分析?？捎糜跍y(cè)量谷物，研磨級(jí)分，麥芽汁,啤酒和其他食品中1,3:1,4-B-D-葡聚糖。葡聚糖檢測(cè)試劑盒操作步驟：1、標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣：在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔，

醫(yī)院輸液制劑配制工藝中的熱原控制2022/09/14: 影響醫(yī)院輸液制劑批量生產(chǎn)的最大因素之一是輸液制劑的熱原控制。熱原是微生物的代謝產(chǎn)物，是微生物的一種內(nèi)毒素。它是由蛋白質(zhì)﹑磷脂、脂多糖所組成的復(fù)合物，其中脂多糖是內(nèi)毒素的主要成分，具有很強(qiáng)的熱原活性。大多數(shù)細(xì)菌都能產(chǎn)生熱原，致熱能力最-強(qiáng)的是革蘭陰性桿菌所產(chǎn)生的熱原。霉菌甚至病毒也能產(chǎn)生熱原。通常1ng內(nèi)毒素足以引起健康成人產(chǎn)生發(fā)熱反應(yīng)[1]。含有熱原的輸液制劑輸入人體，大約30min以后，會(huì)使人體發(fā)冷、寒戰(zhàn)、體溫升高、惡-心嘔吐等不良反應(yīng)，有時(shí)體溫可升高至40℃，嚴(yán)重的可出現(xiàn)昏迷、虛脫，甚至有生

細(xì)菌內(nèi)毒素（脂多糖）的的純化2022/09/13: 脂多糖（Lipopolysaccharide，LPS）是革蘭氏陰性細(xì)菌細(xì)胞壁中的一種成分，脂多糖對(duì)宿主是有毒性的。脂多糖只有當(dāng)細(xì)菌死亡溶解或用人工方法破壞菌細(xì)胞后才釋放出來(lái)，所以叫做內(nèi)毒素。三氯醋酸法（TrichloroaceticAcid，TCA）、酚水法、苯酚╱氯仿╱石油醚法（PCP）、DMSO法、高壓超聲處理法所提取的LPS或多或少受到蛋白質(zhì)、核酸及多糖的污染，故需作一定的純化。LPS的純化方法目前最-常用的為超速離心（4萬(wàn)轉(zhuǎn)×4小時(shí)，共三次），在這一條件下，LPS可沉淀下去，而蛋白質(zhì)、核

細(xì)菌內(nèi)毒素（脂多糖）的提取之PCP法、高壓超聲處理法及DMSO法的介紹2022/09/09: 一、苯酚╱氯仿╱石油醚法（PCP）LPS分子鑲嵌于胞壁的外膜中，用某些化學(xué)試劑將胞壁裂解（如酚）后，LPS分子從破潰的胞壁中游離出來(lái)。由于LPS是一種兩性分子，故它們?cè)诓煌軇┲械娜芙舛龋?取決于該分子上的親水/疏水性基團(tuán)的多少。S-LPS有完整的親水性О特異性側(cè)鏈，所以S型LPS屬親水性分子。而R型LPS，缺乏O特異性側(cè)鏈，含有完整或不完整的核心多糖和完整的類(lèi)脂A，親水度不大，而易溶于有機(jī)溶劑中，故而R-LPS用酚水法提取時(shí)所得的產(chǎn)量極低。PCP法是以90%苯酚、氯仿及石油醚（40～60℃）以

細(xì)菌內(nèi)毒素（脂多糖）提取法之三氯醋酸法及酚水法的介紹2022/09/08: 內(nèi)毒素系革蘭氏陰性菌細(xì)胞壁外膜中的脂多糖（Lipopolysaccharide，LPS）成分。在維持外膜的結(jié)構(gòu)、通透性以及臨床陰性菌感染中均起著重要的作用。以化學(xué)方法提取的LPS注射動(dòng)物能重復(fù)革蘭氏陰性菌感染期間所出現(xiàn)的多種病理反應(yīng)，故實(shí)驗(yàn)動(dòng)物應(yīng)用提取的LPS可更好地了解LPS的致病作用并尋找可能的防治對(duì)策。一、三氯醋酸法（TrichloroaceticAcid，TCA）TCA法是Boivin等（1933）首先應(yīng)用的，借助0.25NTCA，在4℃可將LPS從濕菌或經(jīng)丙酮干燥的細(xì)菌中提取出來(lái)，加入

鱟血淋巴參與的免疫應(yīng)答2022/09/07: 與其它無(wú)脊椎動(dòng)物相類(lèi)似，鱟也缺乏獲得性免疫系統(tǒng)，但具有多種屬于先天性免疫的防御系統(tǒng)。該防御系統(tǒng)一般也分為細(xì)胞免疫和體液免疫，主要包括血淋巴凝聚﹑酚氧化酶原激活、細(xì)胞凝集﹑釋放抗菌物質(zhì)產(chǎn)生抗菌反應(yīng)、活性氧形成以及吞噬反應(yīng)，共同構(gòu)成鱟的先天性免疫系統(tǒng)。該系統(tǒng)可對(duì)潛在病原表面的抗原作出免疫應(yīng)答。因此需要有對(duì)各種病原上結(jié)構(gòu)稍有不同的多種類(lèi)型的抗原表位具有足夠特異性識(shí)別能力的生物傳感器，同時(shí)該傳感器也必須能夠區(qū)別“自己”和“異己”的抗原表位。在長(zhǎng)期的生物演化歷程中，鱟血細(xì)胞發(fā)展出了以絲氨酸蛋白酶原c因子和

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