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在細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中血清熱滅活的作用和意義2023/03/30: 一、血清滅活的目的是什么？1、血清熱滅活目的主要是為了去除血清中補(bǔ)體等對(duì)熱敏感的物質(zhì)，但是在胎牛血清中對(duì)補(bǔ)體的滅活則明顯沒(méi)有必要。2、實(shí)驗(yàn)員曾對(duì)商業(yè)胎牛血清中的補(bǔ)體成分進(jìn)行測(cè)定，他們發(fā)現(xiàn)胎牛血清中含有的C1、C6僅達(dá)成年動(dòng)物血清的1-3%，而其它補(bǔ)體成分僅有成年動(dòng)物的5-50%，至于補(bǔ)體的主要成分C3在胎牛血清中則幾乎不能檢出。通過(guò)補(bǔ)體固定實(shí)驗(yàn)，也未發(fā)現(xiàn)有明顯的溶血現(xiàn)象。多數(shù)實(shí)驗(yàn)室在培養(yǎng)前將培養(yǎng)液進(jìn)行預(yù)熱的過(guò)程，也對(duì)熱敏的補(bǔ)體有滅活的作用。3、熱滅活另一個(gè)目的是為了使支原體失活。二、血清使用前是

酵母蛋白胨的優(yōu)勢(shì)及用途2023/03/28: 酵母蛋白胨的優(yōu)勢(shì)：動(dòng)植物源蛋白胨是市場(chǎng)中主要的蛋白胨，對(duì)于比較粗放的發(fā)酵，該類產(chǎn)品具有一定的優(yōu)勢(shì)。但隨著酵母要求逐漸精細(xì)化、標(biāo)準(zhǔn)化后，這類蛋白胨的弊端逐漸暴露出來(lái)。動(dòng)植物生長(zhǎng)的環(huán)境及一些外在因素，可能造成動(dòng)植物生長(zhǎng)狀態(tài)的波動(dòng)，進(jìn)而造成其體內(nèi)蛋白含量波動(dòng)，并且蛋白的儲(chǔ)存、提取和加工體系基本是開(kāi)放的，可能會(huì)造成原料品質(zhì)的變化（如變色等）和營(yíng)養(yǎng)成分的差異，最終導(dǎo)致蛋白胨產(chǎn)品質(zhì)量的不穩(wěn)定，以此為原料，勢(shì)必會(huì)影響發(fā)酵生產(chǎn)的穩(wěn)定性；動(dòng)物源蛋白凍可能存在致病性和風(fēng)俗禁忌問(wèn)題，植物性的蛋白胨主要存在過(guò)敏性和轉(zhuǎn)基

ECL化學(xué)化學(xué)發(fā)光底物（超敏）的操作步驟2023/03/17: ECL化學(xué)化學(xué)發(fā)光底物（超敏）可為使用辣根過(guò)氧化物酶（HRP）偶聯(lián)物的免疫印跡實(shí)驗(yàn)提供明亮的信號(hào)和低皮克級(jí)檢測(cè)靈敏度。該ECL底物能夠兼容各種膜、封閉液和寬范圍抗體稀釋液，以出色性能、通用性和高性價(jià)比，滿足用戶的免疫印跡應(yīng)用需求。操作步驟：1、執(zhí)行常規(guī)SDS-PAGE、轉(zhuǎn)模和WesternBlot步驟。注意用HRP標(biāo)記lgG或用一抗-鏈親和素-生物素-HRP夾法。2、WesternBlot最后一次洗模的同時(shí)配置發(fā)光工作液：分別取等體積的A液和B液，放入干凈容器中混合（注意吸取A液和B液的吸頭一定

紅細(xì)胞裂解液的作用原理2023/03/14: 紅細(xì)胞裂解液是一種去除紅細(xì)胞的方法，即用裂解液裂解紅細(xì)胞，它既不損傷有核細(xì)胞又能充分的去除紅細(xì)胞。裂解液裂解是一種比較溫和的紅細(xì)胞去除方法，主要用于經(jīng)酶消化分散的組織細(xì)胞的分離純化，淋巴細(xì)胞的分離純化以及組織細(xì)胞蛋白與核酸提取等實(shí)驗(yàn)中紅細(xì)胞的去除。經(jīng)紅細(xì)胞裂解液裂解得到的組織細(xì)胞中不含紅細(xì)胞，可進(jìn)一步用于原代培養(yǎng)、細(xì)胞融合、流式細(xì)胞分析、核酸與蛋白的分離和提取等。紅細(xì)胞裂解液的作用原理：細(xì)胞裂解液一般都使用含酶的，在血紅細(xì)胞表面上有紅細(xì)胞專屬的表面抗原，當(dāng)裂解液中可以攻擊特定紅細(xì)胞表面抗原的酶的

PBS磷酸鹽緩沖液的配置方法及作用2023/03/07: PBS緩沖液，是生物化學(xué)研究中使用最為廣泛的一種緩沖液，主要成分為Na2HPO4、KH2PO4、NaC和KCI，一般作為溶劑，起溶解保護(hù)試劑的作用。由于Na2HPO和KH2PO4有二級(jí)解離，緩沖的PH值范圍很廣，而NaCI和KCI主要作用為增加鹽離子濃度。如有需要PBS還可以補(bǔ)加1mmoI/LCaCI2和0.5mmoI/LMgCI2，以提供二價(jià)陽(yáng)離子。配置方法：稱取8.0gNaCI、0.2gKCI、1.44gNa2HPO4、0.24gKH2PO4溶于800ml蒸餾水中，用HCI調(diào)節(jié)溶液至7.4，

細(xì)胞培養(yǎng)可以分為哪幾種？2023/02/28: 細(xì)胞培養(yǎng)（cellculture）是指在體外模擬體內(nèi)環(huán)境（無(wú)菌、適宜溫度、酸堿度和一定營(yíng)養(yǎng)條件等），使之生存、生長(zhǎng)、繁殖并維持主要結(jié)構(gòu)和功能的一種方法。細(xì)胞培養(yǎng)也叫細(xì)胞克隆技術(shù)，在生物學(xué)中的正規(guī)名詞為細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)。不論對(duì)于整個(gè)生物工程技術(shù)，還是其中之一的生物克隆技術(shù)來(lái)說(shuō)，細(xì)胞培養(yǎng)都是一個(gè)過(guò)程，細(xì)胞培養(yǎng)本身就是細(xì)胞的大規(guī)?？寺?。細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)可以由一個(gè)細(xì)胞經(jīng)過(guò)大量培養(yǎng)成為簡(jiǎn)單的單細(xì)胞或極少分化的多細(xì)胞，這是克隆技術(shù)的環(huán)節(jié)，而且細(xì)胞培養(yǎng)本身就是細(xì)胞的克隆。細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是細(xì)胞生物學(xué)研究方法中重要和常用技

酪蛋白的作用2023/02/22: 酪蛋白是一種含磷鈣的結(jié)合蛋白，對(duì)酸敏感，pH較低時(shí)會(huì)沉淀。酪蛋白是哺乳動(dòng)物包括母牛，羊和人奶中的主要蛋白質(zhì)，又稱：干酪素、酪朊、乳酪素。α-酪蛋白是哺乳動(dòng)物的主要蛋白，人乳中沒(méi)有α-酪蛋白，以β-酪蛋白為主要酪蛋白形式。酪蛋白對(duì)幼兒既是氨基酸的來(lái)源，也是鈣和磷的來(lái)源，酪蛋白在胃中形成凝乳以便消化。作用：酸酪蛋白主要用作涂料的基料，木、紙和布的粘合劑，食品用添加劑等。作為涂料的基料約占總消費(fèi)的一半，具有優(yōu)良的耐水性，在顏料中能很好地分散，提高涂料的均勻性。此外，因流動(dòng)性好，易于涂裝施工，粗制凝乳酶

影響細(xì)胞培養(yǎng)的有哪些因素？2023/02/20: 環(huán)境因素1．無(wú)菌環(huán)境無(wú)毒和無(wú)菌是體外培養(yǎng)細(xì)胞的首要條件。細(xì)胞在活體內(nèi)，解毒系統(tǒng)和免疫系統(tǒng)可抵抗微生物或其他有害物質(zhì)的入侵，但細(xì)胞在體外培養(yǎng)的過(guò)程中，缺乏機(jī)體免疫系統(tǒng)的保護(hù)而喪失對(duì)微生物的防御能力和對(duì)有害物質(zhì)的解毒能力。為保證細(xì)胞能在體外環(huán)境中生長(zhǎng)繁殖，必須要確保無(wú)菌工作區(qū)域、良好的個(gè)人衛(wèi)生、無(wú)菌試劑和培養(yǎng)基以及無(wú)菌操作。常見(jiàn)的微生物污染有支原體、細(xì)菌、真菌。支原體無(wú)致死毒性，可與細(xì)胞長(zhǎng)期共存，對(duì)細(xì)胞有潛在影響，但體積小，不易鑒別，可借助于地衣紅或Hoechst33342染色來(lái)進(jìn)行檢測(cè)。細(xì)菌增殖快

細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒的原理、使用方法及注意事項(xiàng)2023/02/14: 細(xì)胞凋亡與細(xì)胞壞死不同，細(xì)胞凋亡是為維持環(huán)境穩(wěn)定，為更好的適應(yīng)勝春環(huán)境而主動(dòng)爭(zhēng)取的一種死亡過(guò)程，它涉及一系列基因的激活、表達(dá)以及調(diào)控等作用，是一種字體損傷的現(xiàn)象。zui常用的目前就是細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒。細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒原理：細(xì)胞凋亡是細(xì)胞的基本特征之一，在機(jī)體的胚胎發(fā)育、組織修復(fù)、內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定等方面都起到十分重要的作用。AnnexinV是一種分子量為35.8KD的Ca2+依賴性磷脂結(jié)合蛋白，能與細(xì)胞凋亡過(guò)程中翻轉(zhuǎn)到膜外的磷脂酰絲氨酸（Phosphatidylserine,PS）高親和力特異結(jié)合

保存血清時(shí)遇突發(fā)問(wèn)題如何隨機(jī)應(yīng)變？2023/02/07: 產(chǎn)品的保存方法與質(zhì)量有著莫大的關(guān)系，有不少老師反映出在保存血清的時(shí)候會(huì)遇見(jiàn)“什么溫度zui合適”“怎樣避免沉淀物出現(xiàn)”等等問(wèn)題。1.保存血清的方法是怎樣的呢？我們建議血清應(yīng)保存在-5℃至-2O℃。然而，若存放于4℃時(shí)，請(qǐng)勿超過(guò)一個(gè)月。若您一次無(wú)法用完一瓶，建議您無(wú)菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi)，再放回冷凍。2.如何解凍血清才不會(huì)使產(chǎn)品品質(zhì)受損？我們建議您將血清從冷凍箱取出后，先置于2～8℃冰箱使之融解，然后在室溫下使之全融。但必須注意的是，融解過(guò)程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。3.血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀

教您如何用酶標(biāo)記抗體法染色2023/02/06: 很多實(shí)驗(yàn)新手剛剛做酶聯(lián)免疫試驗(yàn)，都會(huì)有很多不了解的方面。今天，小編在這里要和大家分享下如何運(yùn)用酶標(biāo)記抗體法染色。酶標(biāo)記抗體法的實(shí)驗(yàn)原理總體來(lái)說(shuō)和熒光素標(biāo)記抗體法的原理類似，分為直接法和間接法，其原理基本相同，但敏感性不同。一、直接法直接法是將酶（如HRP）標(biāo)記在特異性抗體（*抗體）上，然后用酶標(biāo)記抗體直接與相應(yīng)原特異性結(jié)合，形成抗原—抗體—HRP復(fù)合物，zui后用酶底物DAB-H202顯色。該法的優(yōu)點(diǎn)是簡(jiǎn)單、步驟少，省時(shí)、特異性高、非特異性染色輕：缺點(diǎn)是敏感性差，因?yàn)橐粋€(gè)抗原決定簇只結(jié)合一個(gè)HR

落酸的原理及配制方法2023/02/03: 脫落酸是植物體內(nèi)產(chǎn)生的一種抑制植物生長(zhǎng)發(fā)育的倍半萜類的植物激素。脫落酸有調(diào)節(jié)蒸騰的作用。此外，脫落酸還有抑制營(yíng)養(yǎng)器官的生長(zhǎng)，促進(jìn)葉片等器官的衰老和棉花幼果的脫落等作用。脫落酸在植物界廣泛分布，它抑制種子的萌發(fā)，調(diào)節(jié)芽的休眠，促進(jìn)離層形成與器官的衰老、脫落。脫落酸的原理：脫落酸分子式是C15H20O4，分子量是264.31，PKa4.5，難溶于水或苯，易溶于甲醇、丙酮、乙醇、乙酸乙酯或堿性水溶液。它含有一個(gè)不對(duì)稱的碳原子(C-1′)，形成兩種光學(xué)異構(gòu)體。天然ABA呈現(xiàn)右旋旋光性，標(biāo)志為(+)-AB

Elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)的技巧及注意事項(xiàng)2023/02/02: 在操作elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)前，不少老師會(huì)找尋很多的相關(guān)實(shí)驗(yàn)資料，網(wǎng)上的資料一大堆，然而真正所能夠需要用到的技巧和注意也就那幾條，熟練的了解并掌握之后再應(yīng)用到實(shí)驗(yàn)中就會(huì)簡(jiǎn)單的多。一、加樣的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)加樣或加試劑時(shí)，請(qǐng)注意在吸取標(biāo)本/標(biāo)準(zhǔn)品，酶結(jié)合物或底物時(shí)，個(gè)孔與一個(gè)孔加樣之間的時(shí)間間隔如果太大，將會(huì)導(dǎo)致不同的“預(yù)孵育”時(shí)間，從而明顯地影響到測(cè)量值的準(zhǔn)確性及重復(fù)性。一次加樣時(shí)間控制在10分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用多道移液器加樣。二、孵育的三條必知1.為防止樣品蒸發(fā)，試驗(yàn)時(shí)將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密

重組蛋白可分為哪幾種？2023/02/01: 重組蛋白的產(chǎn)生是應(yīng)用了重組DNA或重組RNA的技術(shù)從而獲得的蛋白質(zhì)。體外重組蛋白的生產(chǎn)主要包括四大系統(tǒng)：原核蛋白表達(dá)，哺乳動(dòng)物細(xì)胞蛋白表達(dá)，酵母蛋白表達(dá)及昆蟲細(xì)胞蛋白表達(dá)。生產(chǎn)的蛋白在活性和應(yīng)用方法方面均有所不同。根據(jù)自身的下游運(yùn)用選擇合適的蛋白表達(dá)系統(tǒng)，提高表達(dá)成功率。按功能分，可分為以下幾種：1.白細(xì)胞介素（Interleukin，IL）由多種細(xì)胞產(chǎn)生并作用于多種細(xì)胞的一類細(xì)胞因子。由于最初是由白細(xì)胞產(chǎn)生且又在白細(xì)胞間發(fā)揮作用，所以得名，現(xiàn)仍沿用此名。2.干擾素（interferon，IFN

紅細(xì)胞裂解液操作步驟2023/01/31: 操作步驟：（一）貼壁培養(yǎng)細(xì)胞1、取NP-40裂解液置于室溫融解混勻，加入PMSF，使PMSF終濃度為1mM。2、去除貼壁細(xì)胞的培養(yǎng)液，用PBS、生理鹽水或無(wú)血清培養(yǎng)液清洗1次，低速離心，棄上清，留取沉淀。3、按照6孔板每孔加入150～250μl含有PMSF的NP-40裂解液，移液器輕輕吹打，使裂解液和細(xì)胞充分接觸。置于冰上或4℃裂解，通常裂解液作用于細(xì)胞1～3s內(nèi)，細(xì)胞就會(huì)被裂解。4、10000～12000g，4℃離心5～10min（如無(wú)低溫離心機(jī)，室溫下離心亦可），取上清。5、后續(xù)的SDS-P

如何選擇合適的細(xì)胞培養(yǎng)板？2023/01/30: 1、孔的數(shù)量根據(jù)不同的實(shí)驗(yàn)背景以及篩選通量去確認(rèn)培養(yǎng)板的孔數(shù)，例如WB、流式檢測(cè)相關(guān)，需要較多的細(xì)胞樣本量，最終的檢測(cè)通量較低，一般會(huì)選擇6孔板、24孔板；而實(shí)驗(yàn)通量較高，最終的檢測(cè)手段可以實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化，多數(shù)可以選擇96孔板或者384孔板，例如：CTG實(shí)驗(yàn)、CCK8實(shí)驗(yàn)等。2、孔的形狀一般貼壁細(xì)胞的培養(yǎng)，進(jìn)行成像或分光光度的測(cè)定shouxuan平底的培養(yǎng)板；而懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)，為防止細(xì)胞的附著，需要使用U底的培養(yǎng)板。3、孔板顏色發(fā)光檢測(cè)—白色微孔板；以便最大限度提高信號(hào)的反射率。熒光檢測(cè)—黑色微孔板

木瓜蛋白酶的生產(chǎn)方法2023/01/29: 由木瓜的未成熟果實(shí)，經(jīng)提取乳液、凝固、沉降、干燥而成粗制品。一般工業(yè)上以粗制品的應(yīng)用為主。木瓜蛋白酶韻生產(chǎn)方法有三種，分別是直接熱風(fēng)烘干法、噴霧干燥法及膜分離凍干法。直接烘干生產(chǎn)方法較簡(jiǎn)單、快速，但生產(chǎn)出來(lái)的成品只是粗酶，雜質(zhì)多、色澤差且微生物超標(biāo)，酶活力也較低，只有60萬(wàn)～80萬(wàn)單位/g。多為個(gè)體工廠采用，已不能滿足國(guó)內(nèi)食品質(zhì)量衛(wèi)生安全等。噴霧干燥此法是先通過(guò)離心去除部分雜質(zhì)后再進(jìn)行噴霧干燥，所生產(chǎn)出的成品酶活力相對(duì)高，達(dá)到100萬(wàn)單位/g左右，雜質(zhì)相對(duì)也較少，色澤相對(duì)也較白。但產(chǎn)品噴霧時(shí)容易

十二烷基硫酸鈉的制備方法2023/01/28: （0.053mol）ClHSO?，混合均勻。在5min中慢慢地將8g（0.043mol）以液體形式或極細(xì)固體粉末形式的十二烷醇加入到冷的醋酸及ClHSO?中，攪拌30min直至全部的醇都溶解并參與反應(yīng)。若醇未全部溶解，則將反應(yīng)瓶從冰浴上取出，在室溫下攪拌10min。把反應(yīng)物料倒在盛有30g碎冰的燒杯中,將30mLC?H10O加至上述混合物中，攪拌3min。攪拌下慢慢加入3mL飽和碳酸鈉水溶液,溶液對(duì)石蕊試紙呈堿性。當(dāng)反應(yīng)呈堿性后，加入10g固體無(wú)水碳酸鈉，靜置。將上層C?H10O溶液從水層表面傾

科研用試劑聚乙二醇2023/01/13: 聚乙二醇在科研領(lǐng)域運(yùn)用廣泛，作為高分子聚合物，聚乙二醇具有良好的水溶性，并與許多有機(jī)組分有良好的相容性。具有優(yōu)良的潤(rùn)滑性、分散性、粘黏性，在制藥、化妝品、金屬加工等方面都有廣泛的應(yīng)用。聚乙二醇衍生產(chǎn)品種類繁多，同官能團(tuán)和異官能團(tuán)的聚乙二醇；甲氧基聚乙二醇；磷脂聚乙二醇；膽固醇聚乙二醇；硬脂酸聚乙二醇等等。每個(gè)品類都可以和不同基團(tuán)連接，常見(jiàn)的基團(tuán)有氨基；羧基；巰基；羥基；醛基；馬來(lái)酰亞胺；琥珀酰亞胺酯；不同基團(tuán)之間可以自由組合連接在聚乙二醇兩端。

硝酸纖維素膜（NC膜）吸附蛋白的重要性、影響因素常問(wèn)題處理2023/01/12: 硝酸纖維素膜(nitrocellulosefiltermembrane，簡(jiǎn)稱NC膜)，在膠體金試紙中用做C/T線的承載體，同時(shí)也是免疫反應(yīng)的發(fā)生處。蛋白質(zhì)吸附的重要性在免疫層析檢測(cè)中，蛋白質(zhì)固著于NC膜作為待測(cè)樣本的捕獲試劑。由于檢測(cè)結(jié)果取決于捕獲試劑在膜上達(dá)到良好的吸附效果，因此蛋白質(zhì)在膜上均一、良好的吸附對(duì)檢測(cè)結(jié)果非常重要。自從NC膜第一次應(yīng)用于蛋白質(zhì)吸附以來(lái)，已有相當(dāng)多的關(guān)于蛋白質(zhì)吸附于NC膜的研究，但蛋白質(zhì)吸附于NC膜的確切作用機(jī)理仍然不能確定。雖然多種作用力在結(jié)合中起到作用，尤其比如疏

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