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青霉素和鏈霉素作用機(jī)理有什么不同?2022/12/12
青霉素是β-內(nèi)酰胺類抗生素,XX西林基本都是青霉素的衍生產(chǎn)品,另外和青霉素同屬β-內(nèi)酰胺類的還有頭孢菌素、碳青霉烯類(亞胺培南、美羅培南等),藥理是可以干擾并阻止細(xì)菌細(xì)胞壁中肽聚糖成分的合成,使細(xì)菌無法正常生成細(xì)胞壁,在細(xì)菌分裂增殖時(shí)會(huì)因?yàn)槿鄙偌?xì)胞壁的保護(hù)而滲透壓失衡,從而導(dǎo)致細(xì)菌死亡。順帶一提,因?yàn)榍嗝顾剡@類β-內(nèi)酰胺抗生素是針對(duì)細(xì)胞壁,而包括人類在內(nèi)的動(dòng)物的細(xì)胞都沒有細(xì)胞壁,所以一般不會(huì)對(duì)人類有毒害作用,除非是過敏。鏈霉素是氨基糖苷類抗生素,可以干擾細(xì)菌核糖體的工作抑制細(xì)菌的蛋白質(zhì)合成,使細(xì)
胰蛋白酶的大用處2022/12/12
自實(shí)體組織分離是動(dòng)物細(xì)胞的主要來源,目前生物制藥領(lǐng)域應(yīng)用廣泛的細(xì)胞株如CHO細(xì)胞、293細(xì)胞、Vero細(xì)胞等最初均分離自不同動(dòng)物的組織器官。那如何最/有/效分離出想要的單細(xì)胞呢?無論是原代細(xì)胞獲取還是成熟細(xì)胞株的消化傳代,細(xì)胞消化都是關(guān)鍵的一環(huán),今天逐典給大家整理一篇細(xì)胞消化大全,方便您更好的選擇適合自己實(shí)驗(yàn)的產(chǎn)品。細(xì)胞消化在不同領(lǐng)域的應(yīng)用1.原代細(xì)胞直接從生物體獲取的組織更接近于生物體內(nèi)的生活狀態(tài),且生物性狀尚未發(fā)生很大改變,因此在藥物篩選、細(xì)胞移植、類器官培養(yǎng)、腫瘤研究等眾多領(lǐng)域備受歡迎。針
液體培養(yǎng)基的配置原則2022/12/09
根據(jù)培養(yǎng)目的需要選擇適宜的營養(yǎng)物質(zhì)由于微生物營養(yǎng)類型復(fù)雜,不同微生物有不同的營養(yǎng)要求。因此,要根據(jù)不同微生物的營養(yǎng)需求選擇適宜的營養(yǎng)物質(zhì),配制針對(duì)性強(qiáng)的培養(yǎng)基。自養(yǎng)微生物有較強(qiáng)的合成能力,能以簡(jiǎn)單的無機(jī)物如co2和無機(jī)鹽合成復(fù)雜的細(xì)胞物質(zhì)。因此,培養(yǎng)自養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基應(yīng)由簡(jiǎn)單的無機(jī)物組成。異養(yǎng)微生物的合成能力較弱,不能以CO2作為唯/一碳源或主要碳源,故應(yīng)在培養(yǎng)基中至少添加一種有機(jī)物。注意營養(yǎng)物質(zhì)的濃度與配比要合適微生物只有在營養(yǎng)物質(zhì)濃度及其比例合適時(shí)才能良好生長(zhǎng)。營養(yǎng)物質(zhì)濃度過低不能滿足現(xiàn)生長(zhǎng)
你真的懂PBS嗎2022/12/08
在我們平時(shí)的實(shí)驗(yàn)中,經(jīng)常要用到PB和PBS,那么,你真的了解什么是PBS嗎?PB是“phosphatebuffer”的縮寫,一般稱為“磷酸緩沖溶液”,依靠磷酸緩沖對(duì)(H2PO4-和HPO42-)起到維持溶液pH值的作用,陽離子則一般是Na+或K+。PBS是“phosphatebuffersaline”的縮寫,中文通常稱其為“磷酸緩沖鹽溶液”,但更準(zhǔn)確地譯名應(yīng)該是“磷酸緩沖生理鹽水”,是生物實(shí)驗(yàn)廣泛使用的一種緩沖溶液。通常是在PB的基礎(chǔ)上加入NaCl,擁有和人體體液類似的滲透壓和pH值。為了滿足其
二甲基亞砜的合成方法2022/12/07
二甲基亞砜一般采用二甲硫醚氧化法制得,由于所用的氧化劑和氧化方式不同,因而有不同的生產(chǎn)工藝。1.甲醇二硫化碳法甲醇和二硫化碳為原料,以γ-Al2O3作催化劑,先合成二甲基硫醚,再與二氧化氮(或硝酸)氧化得二甲基亞砜。2.雙氧水法以丙酮作緩沖介質(zhì),使二甲硫醚與雙氧水反應(yīng)。用該法生產(chǎn)二甲基亞砜成本較高,不適于大規(guī)模生產(chǎn)。3.二氧化氮法以甲醇和硫化氫在γ-氧化鋁作用下生成二甲基硫醚;硫酸與亞硝酸鈉反應(yīng)生成二氧化氮;二甲基硫醚再與二氧化氮在60-80℃進(jìn)行氣液相氧化反應(yīng)生成粗二甲基亞砜,也有直接用氧氣進(jìn)
亞精胺的作用2022/12/06
基本用途:抑制神經(jīng)元NO合成酶(nNOS)。結(jié)合并沉淀DNA;也用于純化DNA結(jié)合蛋白。刺激T4聚核苷酸激酶活性。引發(fā)細(xì)胞吞噬天然物質(zhì)亞精胺(spermidine)或可阻止與年齡有關(guān)的記憶能力下降,這是德國和奧地利的科學(xué)家合作研究的結(jié)果。2013年9月1日,該成果發(fā)表在《自然·神經(jīng)科學(xué)》網(wǎng)絡(luò)版上。德國柏林自由大學(xué)的斯蒂芬·西格瑞斯特教授和奧地利卡爾·弗朗岑斯大學(xué)的弗蘭克·馬德歐教授合作團(tuán)隊(duì)研究的結(jié)果表明,亞精胺可以使老年果蠅大腦的性能回到年輕時(shí)的水平。在生物當(dāng)中,蒼蠅和老鼠的記憶過程與人類在分子
甲基異丁基甲酮能和磷酸三丁酯融合嗎?2022/12/05
磷酸三丁酯這一種化學(xué)物質(zhì)主要是用作溶劑,而磷酸三丁酯消泡劑用來消泡,下面為大家詳細(xì)介紹。磷酸三丁酯消泡劑:磷酸三丁酯消泡劑的主要成分是用磷酸三丁酯研制而成,不同于單純的磷酸三丁酯只能消滅大泡泡而小泡泡是很能消除的,且滅泡持久力不夠,但中聯(lián)邦研發(fā)的磷酸三丁酯消泡劑去其糟粕取其精華,磷酸三丁酯做為一種溶劑,化學(xué)性是非常穩(wěn)定而又有惰性,因此做為一種成分消泡劑是非常不錯(cuò)的,且還能耐高溫,耐強(qiáng)酸,加上中聯(lián)邦特殊研制手法,續(xù)航了滅泡時(shí)間,是款性價(jià)比不錯(cuò)的消泡劑。磷酸三丁酯:主要用作溶劑,還常作為硝基纖維素、
二苯基氯化膦的應(yīng)用2022/12/02
二苯基氯化膦(CDPP)是一種重要的中間體,廣泛用于制備抗UV劑、有機(jī)磷阻燃劑、抗氧劑、增塑劑和不對(duì)稱合成催化劑。1.制備一種二苯基膦枯酚酯。合成方法是在2,4-二枯基苯酚和溶劑混合物中通入保護(hù)氣,并滴加二苯基氯化膦與溶劑的混合液,加完后保溫反應(yīng);反應(yīng)結(jié)束后,停止通保護(hù)氣,降溫,常壓或減壓蒸除溶劑,得淺黃色粘稠液體;然后向粘稠液體中加入結(jié)晶劑,再加入適量活性炭,回流狀態(tài)下保溫30分鐘,趁熱過濾,濾液冷卻后析出白色固體,過濾,干燥后,得產(chǎn)品。本發(fā)明合成過程避免了常規(guī)合成亞磷酸酯化合物反應(yīng)中用縛酸劑
微生物所關(guān)于輪枝鏈霉菌中的博萊霉素研究獲進(jìn)展2022/12/01
博萊霉素(Bleomycin)是由輪枝鏈霉菌產(chǎn)生的一種PKS/NRPS雜合的廣譜抗腫瘤抗生素,用于臨床惡性腫瘤治療。博萊霉素在其原始產(chǎn)生菌中產(chǎn)量低,生產(chǎn)水平亟待提高。然而,輪枝鏈霉菌遺傳操作困難,當(dāng)前鮮有關(guān)于運(yùn)用理性手段來大幅度提高博萊霉素產(chǎn)量的報(bào)道。近日,中國科學(xué)院微生物研究所劉鋼課題組在ScienceChinaLifeSciences上,發(fā)表了題為Remarkableenhancementofbleomycinproductionthroughpreciseamplificationofit
瓊脂糖凝膠配置2022/11/30
一、原理DNA在堿性的溶液中帶有負(fù)電荷,因此,在電場(chǎng)作用下朝正極移動(dòng)。在瓊脂糖凝膠中電泳時(shí),由于瓊脂糖凝膠具有一定孔徑,長(zhǎng)度不同的DNA分子由于所受凝膠的阻遏作用大小不一,遷移的速度不同,從而可以按照分子量大小得到有效分離。溴化乙錠可插入到DNA分子的雙鏈中。在紫外光的照射下,插入溴化乙錠的DNA呈橙紅色熒光,所以溴化乙錠可以作熒光指示劑指示DNA含量和位置。二、材料、儀器設(shè)備及試劑(一)材料:分子量不同的DNA片段。(二)儀器設(shè)備:1.電泳儀;2.紫外檢測(cè)儀;3.水平電泳槽;4.移液器;5.一
Worthington解離酶:中性蛋白酶(分散酶)詳情解析2022/11/29
艾美捷Worthington中性蛋白酶(分散酶):中性蛋白酶(分散酶)是由多粘芽孢桿菌產(chǎn)生的一種細(xì)菌酶,可水解非J性氨基酸殘基的N端肽鍵,被歸類為氨基內(nèi)肽酶。其溫和的蛋白水解作用使該酶特別適用于分離初級(jí)和次級(jí)(繼代培養(yǎng))細(xì)胞,因?yàn)樗梢员3旨?xì)胞膜的完整性。在許多原代細(xì)胞分離和組織解離應(yīng)用中,中性蛋白酶(分散酶)也經(jīng)常與膠原酶和/或其他蛋白酶一起用作輔助酶。中性蛋白酶(Dispase)比上皮樣細(xì)胞更有效地解離成纖維細(xì)胞樣細(xì)胞,因此它也被用于差異分離和培養(yǎng)應(yīng)用。其他優(yōu)點(diǎn)是它的非哺乳動(dòng)物(細(xì)菌)來源和
DMEM高糖,含谷氨酰胺和丙酮酸鈉的特點(diǎn)2022/11/28
背景及概述培養(yǎng)基是為適合生物生長(zhǎng)所需要的人工配制的混合物質(zhì)養(yǎng)料。常指培養(yǎng)微生物或生物細(xì)胞組織的養(yǎng)料,主要用于微生物的分離、培養(yǎng)、鑒定、保藏和釀造、發(fā)酵等方面。具體成分根據(jù)生物營養(yǎng)需要而不同。一般含有水、碳水化合物、含氨物質(zhì)和礦質(zhì)鹽類等。按所用原料不同可分為兩類:應(yīng)用化學(xué)藥品配成并標(biāo)明成分的,稱為合成培養(yǎng)基或綜合培養(yǎng)基,應(yīng)用肉湯、馬鈴薯汁等天然成分配成,稱為天然培養(yǎng)基。又因加入或不加入賦形劑可分為固體培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基。特點(diǎn)DMEM(Dulbecco'sModifiedEagleMe
細(xì)胞培養(yǎng)瓶的正確使用方法2022/11/25
細(xì)胞培養(yǎng)瓶使用方法:1.擰開蓋子,用傾斜或者泵打的方式將培養(yǎng)基注入細(xì)胞工廠內(nèi),細(xì)胞懸液緩慢流入細(xì)胞工廠各層中。蓋上蓋子,靜止。2.緩慢將細(xì)胞工廠測(cè)立,有加液口的一側(cè)背向自己,靜置使細(xì)胞懸液緩慢均勻流入各層中。3.側(cè)向旋轉(zhuǎn)90度,保持進(jìn)液口朝上,靜置使細(xì)胞懸液緩慢均勻流入各層中。4.雙手握住進(jìn)液口的一面,緩慢放平,避免液體大幅度晃動(dòng)。5.移致合適的細(xì)胞培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。6.培養(yǎng)結(jié)束后,將培養(yǎng)基倒入收集容器。細(xì)胞培養(yǎng)瓶的性能特點(diǎn):省時(shí)省空間,1個(gè)10層細(xì)胞培養(yǎng)瓶培養(yǎng)面積相當(dāng)于36個(gè)T-175細(xì)胞培養(yǎng)
0.5%牛血清白蛋白儲(chǔ)備液的制備步驟2022/11/24
操作步驟1.標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制(1)配置標(biāo)準(zhǔn)牛血清白蛋白溶液:在分析天平上精確稱取0.025g結(jié)晶牛血清白蛋白,倒至小燒杯內(nèi),加入小量蒸餾水溶解后轉(zhuǎn)入100m1容量瓶中,燒杯內(nèi)的殘液用少量蒸餾水沖洗數(shù)次,沖洗液一并倒入容量瓶?jī)?nèi),最后用蒸餾水定容至刻度,配制成標(biāo)準(zhǔn)蛋自質(zhì)溶液,其中牛血清白蛋白的濃度為250ug/ml(2)系列標(biāo)準(zhǔn)牛血清白蛋白溶液的配制:取具塞試管6支,按下表加入牛血清白蛋白標(biāo)準(zhǔn)溶液及蒸餾水。然后各管加入試劑甲5ml,混合后在室溫下放置10min,再加0.5ml試劑乙,立即混合均勻(這一
酶的活性調(diào)節(jié)與數(shù)量調(diào)節(jié)2022/11/23
酶的直接生物功能是催化反應(yīng)。但對(duì)于生物體來說,酶的作用并不是簡(jiǎn)單的加速反應(yīng),而是協(xié)調(diào)控制每一個(gè)代謝反應(yīng)的速度,從而決定各個(gè)代謝途徑的相對(duì)流量,最終使整體代謝狀況與生理需求相一致。例如,在運(yùn)動(dòng)時(shí),骨骼肌中糖原分解相關(guān)的酶活性升高,糖原合成相關(guān)的酶活性降低,總體表現(xiàn)為糖原分解;運(yùn)動(dòng)后休息恢復(fù)時(shí)則相反,總體表現(xiàn)為糖原合成。所以人體中各種酶的活性和數(shù)量都是不斷變化的,通常也是相互協(xié)調(diào)的。酶的調(diào)節(jié)機(jī)制有兩類,一類是對(duì)酶數(shù)量的調(diào)節(jié),另一類是對(duì)酶活性的調(diào)節(jié)。前者通過控制酶的合成與降解速度來控制酶量,作用緩慢而
Eppendorf移液槍使用說明2022/11/22
操作步驟:1.移液槍的選擇:根據(jù)實(shí)驗(yàn)的需要,選擇合試量程的槍。以滿足既能吸取所需的體積為準(zhǔn),減少多次操作所造成的誤差。在能滿足要求的情況下,盡量選擇量程較小的槍。2.量程的調(diào)節(jié):將移液器橫置,水平放至自己的眼前,通過調(diào)節(jié)輪慢慢地將容量值調(diào)至預(yù)想值,從而避免視覺誤差所造成的影響。在容量設(shè)定時(shí),還有一個(gè)需要特別注意的地方。當(dāng)我們從大值調(diào)整到小值時(shí),剛好就行;但從小值調(diào)整到大值時(shí),就需要調(diào)超三分之一圈后再返回。3.槍頭(吸液嘴)的裝配:將移液槍(器)垂直插入槍頭中,稍微用力左右微微轉(zhuǎn)動(dòng)即可使其緊密結(jié)合
Gibeo和Hyclcne不同等級(jí)胎牛血清分析比較2022/11/21
第一類,最/高/級(jí)別的是專門用于細(xì)胞的胎牛血清1、Hyclone的特級(jí)胎牛血清目前,性能最/好的血清,還是要說說H,dlone的特/級(jí)胎牛血清,貨號(hào)是SH30070.03,它是Hyclone的“招/牌菜”。Hyclorne特/級(jí)胎牛血清(DefinedFBS),貨號(hào)SH30070,是世界上唯/一經(jīng)過40納米過濾的頂/級(jí)胎牛血清,極/佳的促細(xì)胞生長(zhǎng)作用及產(chǎn)品穩(wěn)定性。內(nèi)毒素含量≤10EU/ml,血紅蛋白含量≤10mg/dl.此血清可以廣泛用于各種細(xì)胞培養(yǎng),包含任何干細(xì)胞系的培養(yǎng)2、Gibco的特級(jí)胎
鹽酸胍在蛋白質(zhì)變性和復(fù)性中起到的作用2022/11/18
1、鹽酸胍能使蛋白變性蛋白質(zhì)較易受外界因素(溫度、變性劑等)影響而發(fā)生構(gòu)象變化,導(dǎo)致活性喪失、物理化學(xué)性質(zhì)的異常變化,這一過程稱為蛋白質(zhì)變性。鹽酸胍是一種重要的變性劑,可以產(chǎn)生較強(qiáng)的變性效應(yīng),其包括兩種變性機(jī)制。一種是鹽酸胍對(duì)疏水氨基酸殘基的增溶作用。鹽酸胍可使蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)中的氫鍵發(fā)生斷裂,這增加了非極性分子包括氨基酸側(cè)鏈的溶解度,減少了疏水相互作用;另一種機(jī)制是變性蛋白質(zhì)能與鹽酸胍優(yōu)先結(jié)合,形成變性蛋白質(zhì)-變性劑復(fù)合物,當(dāng)復(fù)合物被除去,反應(yīng)平衡向右移動(dòng),天然狀態(tài)的蛋白質(zhì)不斷轉(zhuǎn)變?yōu)閺?fù)合物,最終導(dǎo)致
PeproTech細(xì)胞因子溶解稀釋方法2022/11/17
一、溶解1.離心收到的管子內(nèi)為凍干粉,開蓋前要快速離心10000-12000rpmx30s。2.溶解選擇合適的溶解液,溶解到后邊的濃度范圍內(nèi)。如此可以確保蛋白充分溶解復(fù)性,保證產(chǎn)品質(zhì)量,請(qǐng)不要使用非建議溶液溶解。目的是使細(xì)胞因子從無活性的凍干粉狀態(tài)充分溶解復(fù)性成為有活性的蛋白溶液。注意:不要用渦旋振蕩儀劇烈渦旋,可以用槍頭輕輕吹打幾次助溶。有的細(xì)胞因子溶解比較慢,需要在室溫靜置或者搖床低速搖一段時(shí)間使充分溶解。3.短期儲(chǔ)存溶解后的蛋白溶液可以在2-8度儲(chǔ)存1周。4.長(zhǎng)期儲(chǔ)存如果您的實(shí)驗(yàn),一周內(nèi)不
圓孔方孔透明96孔深孔板是什么2022/11/16
96孔板的主要特點(diǎn)是:1.在設(shè)計(jì)上比較省力和輕巧,客戶能夠十分容易對(duì)這種裝置進(jìn)行安裝和拆卸2.擁有快速泄壓設(shè)計(jì),能夠使得96孔板在進(jìn)行更換的時(shí)候更加方便3.它的插管方法能夠了解真空管和離心管,并且在拿起和放入之中不要造成玻璃管的斷裂4.特殊的處理方法使得在拿起和放置上的時(shí)間大幅度減少,在醫(yī)院等一些場(chǎng)合中能夠有效的提高工作效率5.迷你方形機(jī)身,易于存放6.在處理和純化步驟中,該設(shè)備可減少多達(dá)24個(gè)微量離心管、8個(gè)微量離心管或少量微量離心管,甚至96孔過濾微孔板的樣品處理時(shí)間(約25分鐘)。與傳統(tǒng)的
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